專利名稱：楊樹誘變育種新方法
技術領域：
本發明楊樹誘變育種新方法涉及一種對楊樹胚性細胞的輻射誘導突變法，尤其是經γ射線誘導突變從而經培育得到大量變異植株的新方法。

背景技術：
樹木育種研究發展表明，傳統的方法存在年限長，育種進展慢等缺點，應用高新技術結合常規育種方式是當前樹木育種的主要方向。
利用理化因子誘變，選育優良突變體，培育成品種，在品種改良上被廣泛利用。其中最主要是用X-射線、γ-射線輻射種子或其他繁殖器官，但經輻照后的突變頻率極低(10-8-10-5)，因此要求被處理的個體(種子、芽塊或莖等)的數量必須大。就楊樹而言，如果用它的種子、枝條、單芽作為處理材料要達到一定的數量是難以實現的。
而胚性細胞是具有全能性表達的能力一種細胞，且因其數量龐大，以其作為單位進行誘變處理，則可獲得數量多，種類多的突變植株。


發明內容
本發明楊樹誘變育種新方法的目的在于提供一種可獲得大量楊樹突變植株的新方法。
為達上述目的，本發明提供一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對象的選擇，輻射時機的選擇和輻射處理，其中，所述的誘變對象為楊樹愈傷組織胚性細胞，所述的輻射時機為楊樹胚性細胞大量發生時間段，所述的輻射處理總劑量為20～50Gy，劑量率為70～370Gy/H。
獲得楊樹胚性細胞大量發生時期的步驟為 第一步選取楊樹組培苗莖段切成1～2mm作為外植體； 第二步將莖段接種在脫分化培養基MS+2，4-D 0-1.0mg/ml+KT0-0.5mg/ml+NAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上脫分化72～120小時； 第三步第二步所得愈傷組織轉接至再分化培養基MS+6-BA0-1.0mg/ml+KT 0-0.5mg/ml+IAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上再分化72～96小時，達到楊樹胚性細胞大量發生時間段。
利用楊樹誘變育種新方法的用途，獲得優良的楊樹變異植株。
本發明的優點是 利用對胚性細胞大量發生時期的輻射誘變處理，克服了楊樹誘變育種基數少，篩選生活周期長的劣勢，經篩選、培育可獲得優良變異植株。

具體實施例方式 實施例1 一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對象的選擇，輻射時機的選擇和輻射處理，所述的誘變對象為楊樹愈傷組織胚性細胞，所述的輻射時機為楊樹胚性細胞大量發生時期。
獲得楊樹胚性細胞大量發生時期的步驟為 第一步選擇組培日齡40天，苗高4～5cm的歐美楊(黑楊派)組培苗，將其莖段切成1mm作為外植體； 第二步將莖段接種在脫分化培養基MS+2，4D 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂4g/L上脫分化120小時； 第三步第二步所得愈傷組織轉接至再分化培養基MS+6-BA0.2mg/L+KT 0.2mg/L+IAA 0.05+蔗糖30g/L+瓊脂4g/L上再分化72小時，此時即為胚性細胞發生最多的時期。
將獲得的大量歐美楊(黑楊派)胚性細胞置于總劑量為50Gy，劑量率為300Gy/H的γ射線下輻射，之后在溫度25℃±2℃，光照時間為每天14h的條件下無菌培養得到單株，經過觀察、篩選得到優良突變體。
實施例2 一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對象的選擇，輻射時機的選擇和輻射處理，所述的誘變對象為楊樹愈傷組織胚性細胞，所述的輻射時機為楊樹胚性細胞大量發生時期。
獲得楊樹胚性細胞大量發生時期的步驟為 第一步選取白楊派組培苗莖段切成1～2mm作為外植體； 第二步將莖段接種在脫分化培養基MS+2，4-D 0-1.0mg/ml+KT0-0.5mg/ml+NAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上脫分化72～120小時； 第三步第二步所得愈傷組織轉接至再分化培養基MS+6-BA0-1.0mg/ml+KT 0-0.5mg/ml+IAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上再分化72～96小時，達到楊樹胚性細胞大量發生時間段。
將獲得的大量白楊派胚性細胞置于總劑量為30Gy，劑量率為145Gy/H的γ射線下輻射，之后在溫度25℃±2℃，光照時間為每天14h的條件下無菌培養得到單株，經過觀察、篩選得到優良突變體。
權利要求
1、一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對象的選擇，輻射時機的選擇和輻射處理，其特征在于所述的誘變對象為楊樹愈傷組織胚性細胞，所述的輻射時機為楊樹胚性細胞大量發生時間段，所述的輻射處理總劑量為20～50Gy，劑量率為70～370Gy/H。
2、根據權利要求1所述的楊樹誘變育種新方法，其特征在于獲得楊樹胚性細胞大量發生時期的步驟為
第一步選取楊樹組培苗莖段切成1～2mm作為外植體；
第二步將莖段接種在脫分化培養基MS+2，4-D 0-1.0mg/ml+KT0-0.5mg/ml+NAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上脫分化72～120小時；
第三步第二步所得愈傷組織轉接至再分化培養基MS+6-BA0-1.0mg/ml+KT 0-0.5mg/ml+IAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上再分化72～96小時，達到楊樹胚性細胞大量發生時間段。
3、利用權利要求1或2所述的楊樹誘變育種新方法的用途，獲得優良的楊樹變異植株。
全文摘要
一種楊樹誘變育種新方法，為一種經γ射線誘導突變從而經培育得到大量變異植株的新方法。包括誘變對象的選擇，輻射時機的選擇和輻射處理，其中，所述的誘變對象為楊樹愈傷組織胚性細胞，所述的輻射時機為楊樹胚性細胞大量發生時間段，所述的輻射處理總劑量為20～50Gy，劑量率為70～370Gy/H。
文檔編號A01H3/00GK1957678SQ20061011868
公開日2007年5月9日 申請日期2006年11月23日 優先權日2006年11月23日
發明者蘇敏, 宋學孟, 董舉文, 張艷, 龐瑞華, 許雄山, 章振華, 王凌健, 張承妹 申請人:上海光兆植物速生技術有限公司