專利名稱：哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法
技術領域：
本發明涉及兩種不同屬鮭科魚類的雜交方法。
技術背景哲羅魚與細鱗魚雖然都屬于我國東北地區土著冷水鮭科魚類，但是親緣性較遠。哲羅魚是淡水魚，它屬大型肉食性冷水性魚，適于22'C以下的水中生 活，并且生長速度快，生長期較長，肉質較細鱗魚差，產卵期在3 4月份(黑 龍江)，卵產在水流湍急清澈砂礫河底。而細鱗魚屬于中小型冷性魚，雜食性， 生長較哲羅魚稍慢，生長周期較短，肉質細嫩鮮美，蛋白質含量高、脂肪含量 低。產卵期為5 6月份(黑龍江)，卵產在水質清晰、水流較緩的砂礫底。兩 種魚的分類地位、親緣關系、生活習性及產卵期都不同，所以本領域技術人員 都認為哲羅魚與細鱗魚是不能進行雜交的。 發明內容本發明的目的是為了解決哲羅魚和細鱗魚由于親緣關系遠，繁殖習性有差 異而無法雜交的問題；而提供一種哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法。本發明哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法是采用以下步驟進行的 一、將性成 熟的哲羅魚雌魚放養于水溫為2 2(TC的模擬哲羅魚自然產卵環境的培育池 中進行培育；同時將性成熟的細鱗魚雄魚放養于水溫為2 2(TC的模擬細鱗魚 自然產卵環境的培育池中進行培育；二、模擬哲羅魚自然產卵環境的培育池水 溫為3 5。C，哲羅魚雌魚腹部飽滿柔軟，用塑膠軟管經由生殖孔檢查卵徑超過 3毫米以上，向哲羅魚雌魚注射催熟藥物；三、向哲羅魚雌魚注射催熟藥物48 小時后，向哲羅魚雌魚注射催產藥物，然后放回哲羅魚模擬自然產卵環境的培 育池；與此同時向細鱗魚雄魚注射催產藥物，然后放回細鱗魚模擬自然產卵環 境的培育池；四、再注射催產藥物后8~10天，哲羅魚雌魚開始排卵，分別擠 出卵子和精液，將精液用胎牛血清稀釋得到稀釋精液，卵子用生理鹽水清洗后 加入稀釋精液，用柔軟、干凈的羽毛快速均勻攪拌1分鐘，加入清水再放置5 分鐘，洗去多余的精液和破損的卵皮，得到受精卵；五、將受精卵在清水中靜止40 60分鐘，待卵充分吸水膨脹，使卵膜硬化并富有彈性，然后計數裝入鮭 魚專用孵化桶中進行孵化，在孵化過程中將死亡的卵挾出，每隔兩天用 500 1000ppm的甲醛溶液消毒(防止滋生真菌)，消毒時間為45分鐘；仔魚出 膜后，即得到了哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交的仔魚。
本發明步驟一中哲羅魚雌魚的培育水深為80 120cm。步驟一中細鱗魚雄 魚的培育水深為50 100cm。步驟二中對哲羅魚注射的催熟藥物由人絨毛膜促 性腺激素(HCG)、促性腺激素釋放激素類似物(S-GnRH-A)和馬來酸地歐 酮(DOM)組成；每千克體重哲羅魚注射的雌性激素藥中含有200IU人絨毛 膜促性腺激素、2pg促性腺激素釋放激素類似物和0.4mg馬來酸地歐酮。步驟 三中對哲羅魚注射的催產藥物由人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素類 似物和馬來酸地歐酮組成；每千克哲羅魚注射的雌性激素藥中含有800IU人絨 毛膜促性腺激素、8pg促性腺激素釋放激素類似物和1.6mg馬來酸地歐酮。步 驟三中對細鱗魚注射的催產藥物由人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素 類似物和馬來酸地歐酮組成；每千克哲羅魚注射的雌性激素藥中含有500IU人 絨毛膜促性腺激素、5pg促性腺激素釋放激素類似物和0.8mg馬來酸地歐酮。
本發明的方法使生活和繁殖習性、分類地位、親緣關系及產卵期都不同的 兩種魚能夠同期成熟，排精排卵，獲得雜交種，并且受精率在85%以上，孵化 率在80%以上。本發明的方法得到的雜交種繼承了細鱗魚和哲羅魚的特點，易 馴化、肉味好、生長速度快、抗病能力強。比同批細鱗魚自群繁育幼魚生長快 75%，比哲羅魚自群繁育幼魚生長快35%。另外，由于獲得的雜交種具有不育 的特性，可在最大程度內保護這兩種魚原種在我國的種質資源特有性，可以避 免物種的流失。
具體實施例方式
具體實施方式
一本實施方式哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法是采用以下步 驟進行的 一、將性成熟的哲羅魚雌魚放養于水溫為2 20'C的模擬哲羅魚自 然產卵環境的培育池中進行培育；同時將性成熟的細鱗魚雄魚放養于水溫為 2 2(TC的模擬細鱗魚自然產卵環境的培育池中進行培育；二、模擬哲羅魚自 然產卵環境的培育池水溫為3~5"，哲羅魚雌魚腹部飽滿柔軟，用塑膠軟管經 由生殖孔檢査卵徑超過3毫米以上，向哲羅魚雌魚注射催熟藥物；三、向哲羅魚雌魚注射催熟藥物48小時后，向哲羅魚雌魚注射催產藥物，然后放回哲羅 魚模擬自然產卵環境的培育池；與此同時向細鱗魚雄魚注射催產藥物，然后放 回細鱗魚模擬自然產卵環境的培育池；四、再注射催產藥物后8 10天，哲羅 魚雌魚開始排卵，分別擠出卵子和精液，將精液用胎牛血清稀釋得到稀釋精液， 卵子用生理鹽水清洗后加入稀釋精液，用柔軟、干凈的羽毛快速均勻攪拌1 分鐘，加入清水再放置5分鐘，洗去多余的精液和破損的卵皮，得到受精卵； 五、將受精卵在清水中靜止40 60分鐘，待卵充分吸水膨脹，使卵膜硬化并富 有彈性，然后計數裝入鮭魚專用孵化桶中進行孵化，在孵化過程中將死亡的卵 挾出，每隔兩天用500 1000ppm的甲醛溶液消毒(防止滋生真菌)，消毒時間 為45分鐘；仔魚出膜后，即得到了哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交的仔魚。
本實施方式步驟五中受精卵的孵化條件與哲羅魚受精卵相同。本實施方式 中哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交獲得的雜交種可能不育，受精率在85%以上，孵化 率在80%以上。雜交種繼承了細鱗魚和哲羅魚的特點，易馴化、肉味好、生長 速度快、抗病能力強。比同批細鱗魚自群繁育幼魚生長快75%，比哲羅魚自群 繁育幼魚生長快35%。
具體實施方式
二本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中哲羅魚 雌魚的培育水深為80 120cm。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中哲羅魚 雌魚的培育水深為90 110cm。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中哲羅魚 雌魚的培育水深為100cm。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中細鱗魚
雄魚的培育水深為50 100cm。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中細鱗魚
雄魚的培育水深為60 80cm。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
七本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中細鱗魚
雄魚的培育水深為70cm。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
八本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中哲羅魚雌魚的體重在10kg以上，其魚齡在10齡以上。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
九本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中細鱗魚 雄魚的體重在3kg以上，其魚齡在5齡以上。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
十本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟二中哲羅魚
催熟藥物由人絨毛膜促性腺激素(HCG)、促性腺激素釋放激素類似物 (S-GnRH-A)和馬來酸地歐酮(DOM)組成；每千克體重哲羅魚注射的催熟 藥物中含有200IU人絨毛膜促性腺激素、2嗎促性腺激素釋放激素類似物和 0.4mg馬來酸地歐酮。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
十一本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟三中哲羅 魚催產藥物由人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素類似物和馬來酸地歐 酮組成；每千克體重哲羅魚注射的催產藥物中含有800IU人絨毛膜促性腺激 素、8嗎促性腺激素釋放激素類似物和1.6mg馬來酸地歐酮。其它與具體實施 方式一相同。
具體實施方式
十二本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟三中細鱗 魚催產藥物由人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素類似物和馬來酸地歐 酮組成；每千克體重細鱗魚注射的雌性激素藥中含有500IU人絨毛膜促性腺激 素、5pg促性腺激素釋放激素類似物和0.8mg馬來酸地歐酮。其它與具體實施 方式一相同。
具體實施方式
十三本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟四中精液 與胎牛血清體積比為l: 2~4。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
十四本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟四中精液 與胎牛血清體積比為l: 3。其它與具體實施方式
一相同。
具體實施方式
十五本實施方式與具體實施方式
十三或十四不同的是步驟
四中將用1毫升稀釋精液給0.15><105 0.5><105的卵子受精個卵子中。其它與具
體實施方式十三或十四相同。
具體實施方式
十六本實施方式與具體實施方式
十三或十四不同的是步驟 四中將用1毫升稀釋精液給0.2><105~0.4><105~的卵子受精個卵子中。其它與具 體實施方式十三或十四相同。
權利要求
1、哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法是采用以下步驟進行的一、將性成熟的哲羅魚雌魚放養于水溫為2～20℃的模擬哲羅魚自然產卵環境的培育池中進行培育；同時將性成熟的細鱗魚雄魚放養于水溫為2～20℃的模擬細鱗魚自然產卵環境的培育池中進行培育；二、模擬哲羅魚自然產卵環境的培育池水溫為3～5℃，哲羅魚雌魚腹部飽滿柔軟，用塑膠軟管經由生殖孔檢查卵徑超過3毫米以上，向哲羅魚雌魚注射催熟藥物；三、向哲羅魚雌魚注射催熟藥物48小時后，向哲羅魚雌魚注射催產藥物，然后放回哲羅魚模擬自然產卵環境的培育池；與此同時向細鱗魚雄魚注射催產藥物，然后放回細鱗魚模擬自然產卵環境的培育池；四、再注射催產藥物后8～10天，哲羅魚雌魚開始排卵，分別擠出卵子和精液，將精液用胎牛血清稀釋得到稀釋精液，卵子用生理鹽水清洗后加入稀釋精液，用柔軟、干凈的羽毛快速均勻攪拌1分鐘，加入清水再放置5分鐘，洗去多余的精液和破損的卵皮，得到受精卵；五、將受精卵在清水中靜止40～60分鐘，待卵充分吸水膨脹，使卵膜硬化并富有彈性，然后計數裝入鮭魚專用孵化桶中進行孵化，在孵化過程中將死亡的卵挾出，每隔兩天用500～1000ppm的甲醛溶液消毒，消毒時間為45分鐘；仔魚出膜后，即得到了哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交的仔魚。
2、 根據權利要求1所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于步 驟一中哲羅魚雌魚的培育水深為80 120cm。
3、 根據權利要求1所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于步 驟一中細鱗魚雄魚的培育水深為50~100cm。
4、 根據權利要求1所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于步 驟二中哲羅魚催熟藥物由人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素類似物和 馬來酸地歐酮組成；每千克體重哲羅魚注射的催熟藥物中含有200IU人絨毛膜 促性腺激素、2嗎促性腺激素釋放激素類似物和0.4mg馬來酸地歐酮。
5、 根據權利要求1所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于步 驟三中哲羅魚催產藥物由人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素類似物和 馬來酸地歐酮組成；每千克體重哲羅魚注射的催產藥物中含有800IU人絨毛膜 促性腺激素、8嗎促性腺激素釋放激素類似物和1.6mg馬來酸地歐酮。
6、 根據權利要求1所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于步 驟三中細鱗魚催產藥物由人絨毛膜促性腺激素、促性腺激素釋放激素類似物和 馬來酸地歐酮組成；每千克體重細鱗魚注射的雌性激素藥中含有400IU人絨毛 膜促性腺激素、4嗎促性腺激素釋放激素類似物和0.8mg馬來酸地歐酮。
7、 根據權利要求1所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于步 驟四中精液與胎牛血清體積比為1: 2 4。
8、 根據權利要求1所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在于步 驟四中精液與胎牛血清體積比為1: 3。
9、 根據權利要求7或8所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在 于步驟四中，用每1毫升稀釋精液給0.15><105 0.50><105個卵子受精。
10、 根據權利要求7或8所述的哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，其特征在 于步驟四中，用每1毫升稀釋精液給0.2><105 0.4><105個卵子受精。
全文摘要
哲羅魚與細鱗魚遠緣雜交方法，它涉及兩種不同屬鮭科魚類的雜交方法。本發明解決了哲羅魚和細鱗魚由于親緣關系遠，繁殖習性有差異而無法雜交的問題。本發明方法如下一、培育；二、對哲羅魚雌魚進行催熟；三、分別對哲羅魚雌魚、細鱗魚雄魚進行催產；四、得到受精卵；五、孵化。本發明的方法使生活和繁殖習性、分類地位、親緣關系及產卵期都不同的兩種魚能夠同期成熟，排精排卵，獲得雜交種，并且受精率在85％以上，孵化率在80％以上。本發明的方法得到的雜交種繼承了細鱗魚和哲羅魚的特點，易馴化、肉味好、生長速度快、抗病能力強。
文檔編號A61D19/00GK101317558SQ20081006474
公開日2008年12月10日 申請日期2008年6月16日 優先權日2008年6月16日
發明者徐革鋒, 李永發, 佳 杜, 牟振波 申請人:中國水產科學研究院黑龍江水產研究所