專利名稱：野生紅土雞樅菌人工馴化母種的制備方法
技術領域：
本發明公開ー種野生菌通過人工馴化獲得母種的方法，具體地是野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法。
背景技術：
麗(Xhidemansiella radicata var. alba )是我國云南省紅土高原特有的野生菌種，子實體中等至大型，只生長在我國云南省海抜1800米以上的高原地區。夏秋季常常生長在呈弱酸性的紅色土壌潮濕林地上，故名紅土雞揪，屬中低溫型菌類，野生產量極低，十分珍貴。其外觀怡人，味道鮮美，營養價值極高。紅土雞揪菌菇體大、菌柄粗長、菌蓋表面淺褐色、菌柄白色、菇蓋厚實、品質優良。目前，國內外沒有任何馴化栽培野生紅土雞揪菌子實體的先例。載止本專利申請前，在我國專利申請中涉及雞揪菌種植的不上10項，并且均沒有·獲得授權，主要問題是菌種證明力度弱，沒有獲得保藏認可，其提出的雞揪菌難以確認。因紅土雞揪菌特殊的營養、味道和保健作用，野生菌產品價格一直很高，單純采摘野生紅土雞揪菌已經難以滿足市場的巨大需求。為此，非常有必要進行人工馴化栽培技術開發。本發明使野生紅土雞揪菌人工馴化栽培邁出了第一歩，進行了野生紅土雞揪菌人エ馴化母種的技術開發，并得以實現，為云南省珍貴野生菌資源的可持續利用奠定了產業技術基礎。

發明內容
本發明的目的就是提供ー種對野生紅土雞揪菌進行人エ馴化，首先獲得原始母種的制備方法。實現本發明的技術方案及過程是這樣的采用的技術包含單孢子雜交技術，子實體組織分離技術。制備方法過程為
⑴采集自然野外生長在云南省海抜1800米以上紅土高原地區的紅土雞揪菌子實體獲得孢子；
⑵通過單孢子雜交技術篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株；
⑶再通過子實體組織分離進行系統選育，經過2 6年的系統培育，人工馴化，得到穩定性強，可用于繁殖生產的紅土雞揪菌母種。這ー方法人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法具體過程細化為
⑴制備紅土雞揪菌母種培養基原料，該原料所使用的各種物質和重量組份為、香蕉30 100克、馬鈴薯50 150克、玉米粉20 50克、胡蘿卜20 50克、水1000 2000克、瓊脂10 30克；
⑵先將香蕉、馬鈴薯、玉米粉、胡羅卜等粉碎混合成泥狀物備用；再將水燒開加入所需的瓊脂，待瓊脂溶化后，加入備用的泥狀物，充分攪拌均勻后用檸檬酸調pH值5. O 6. 5，乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養基;
⑶接入人工馴化的紅土雞揪母種進行培養，培養溫度為15 26°C，培養7 15天菌絲長滿培養基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成；
⑷在I 4°C條件下保存備用，或者即可用于繁殖原種。其中，制備紅土雞揪菌母種培養基原料，該原料所使用的各種物質和重量組份還可為、葡萄糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸ニ氫鉀I 10克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸亞鐵O. 5 5克、磷酸ニ氫銨O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、煙酸50 150毫克、核黃素10 50毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調PH值； 或者蔗糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸氫ニ鉀O. 5 5克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸銨O. 5 5克、牛肉浸膏2 10克、氯化鐵30 300毫克、硫胺素20 100毫克、煙酸50 150毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調pH值；
或者小麥粒10 30克、玉米粉5 15克、馬鈴薯30 100克、香菇50 150克、葡萄糖10 20克、磷酸ニ氫鉀I 5克、硫酸鎂O. 5 3克、蛋白胨I 5克、酵母浸膏I
3克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調pH值。本發明的有益效果在于首次將野生紅土雞揪菌人工馴化成可繁殖的原始母種，為人工栽培紅土雞揪菌邁出了第一歩；所獲得的母種菌絲健壯、扭結力強、顏色潔白、生長迅速和易出菇、品質好、效率高。其開創性的研發工作，為云南省珍貴野生菌資源的可持續利用奠定了產業技術基礎。


本發明主要內容是制備方法，故無具體的附圖提供。本發明涉及的紅土雞揪菌(ifcofefflmsieWa radicata var. alba )已申報生物活性材料保存，自定義編名為FBM-001，以于2012年4月13日，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，簡稱CGMCC進行了保藏，保藏編號為CGMCC5970，并證明存活。
具體實施例方式下面對本發明的制備方法，給出ー些更加具體的實施方式說明。實施例I :野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法 采用的技術包含單孢子雜交技木，子實體組織分離技木。制備方法過程為
⑴采集自然野外生長在云南省海抜1800米以上紅土高原地區的紅土雞揪菌子實體獲得孢子；
⑵通過單孢子雜交技術篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株；
⑶再通過子實體組織分離進行系統選育，經過2 6年的系統培育，人工馴化，得到穩定性強，可用于繁殖生產的紅土雞揪菌母種。這ー方法人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法具體過程細化為⑴制備紅土雞揪菌母種培養基原料，該原料所使用的各種物質和重量組份為、香蕉30 100克、馬鈴薯50 150克、玉米粉20 50克、胡蘿卜20 50克、水1000 2000克、瓊脂10 30克；
⑵先將香蕉、馬鈴薯、玉米粉、胡羅卜等粉碎混合成泥狀物備用；再將水燒開加入所需的瓊脂，待瓊脂溶化后，加入備用的泥狀物，充分攪拌均勻后用檸檬酸調pH值5. O 6. 5，乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養基;
⑶接入人工馴化的紅土雞揪母種進行培養，培養溫度為15 26°C，培養7 15天菌絲長滿培養基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成；
⑷在I 4°C條件下保存備用，或者即可用于繁殖原種。上述所使用的物質均是現存天然的物質，可在市場中采購使用。實施例2 :野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法 采用的技術包含單孢子雜交技木，子實體組織分離技木。制備方法過程為
⑴采集自然野外生長在云南省海拔1800米以上紅土高原地區的紅土雞揪菌子實 體獲得孢子；
⑵通過單孢子雜交技術篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株；
⑶再通過子實體組織分離進行系統選育，經過2 6年的系統培育，人工馴化，得到穩定性強，可用于繁殖生產的紅土雞揪菌母種。這ー方法人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法具體過程細化為
制備紅土雞揪菌母種培養基原料，該原料所使用的各種物質和重量組份為葡萄糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸ニ氫鉀I 10克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸亞鐵O. 5 5克、磷酸ニ氫銨O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、煙酸50 150毫克、核黃素10 50毫克，將它們粉碎混合均勻成泥狀物，煮開水1000 2000克、溶入瓊脂10 30克，再放入上述泥狀物調均，用檸檬酸調pH值5. O 6. 5 ;乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養基。接入人工馴化的紅土雞揪母種進行培養，培養溫度為15 26°C，培養7 15天菌絲長滿培養基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成；
在I 4°C條件下保存備用，或者即可用于繁殖原種。上述所使用的物質，均是市場中所能夠獲得的正規商品，其規格、含量、成份均是國家標準或行業標準產品。
權利要求
1.野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法，采用的技術包含單孢子雜交技術，子實體組織分離技術，其特征是制備方法過程為、 ⑴采集自然野外生長在云南省海拔1800米以上紅土高原地區的紅土雞揪菌子實體獲得孢子； ⑵通過單孢子雜交技術篩選獲得紅土雞揪菌出菇菌株； ⑶再通過子實體組織分離進行系統選育，經過2 6年的系統培育，人工馴化，得到穩定性強，可用于繁殖生產的紅土雞揪菌母種。
2.根據權利要求I所述的野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法，其特征是人工馴化的紅土雞揪菌母種繁育方法過程為、 ⑴制備紅土雞揪菌母種培養基原料，該原料所使用的各種物質和重量組份為、香蕉 30 100克、馬鈴薯50 150克、玉米粉20 50克、胡蘿卜20 50克、水1000 2000克、瓊脂10 30克； ⑵先將香蕉、馬鈴薯、玉米粉、胡羅卜等粉碎混合成泥狀物備用；再將水燒開加入所需的瓊脂，待瓊脂溶化后，加入備用的泥狀物，充分攪拌均勻后用檸檬酸調pH值5. O 6. 5，乘熱分裝在試管或其他玻璃容器中；在110 126°C下滅菌20 45分鐘，冷卻后制成培養基; ⑶接入人工馴化的紅土雞揪母種進行培養，培養溫度為15 26°C，培養7 15天菌絲長滿培養基表面成為成熟母種，紅土雞揪母種即制作完成； ⑷在I 4°C條件下保存備用，或者即可用于繁殖原種。
3.根據權利要求I或2所述的野生紅土雞揪菌人工馴化母種的制備方法，其特征是制備紅土雞揪菌母種培養基原料，該原料所使用的各種物質和重量組份還可為、葡萄糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸二氫鉀I 10克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸亞鐵O. 5 5克、磷酸二氫銨O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、煙酸50 150毫克、核黃素10 50毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調PH值; 或者蔗糖2 30克、麥芽糖2 30克、磷酸氫二鉀O. 5 5克、硫酸鎂O. 5 3克、硫酸鋅O. 5 5克、硫酸銨O. 5 5克、牛肉浸膏2 10克、氯化鐵30 300毫克、硫胺素20 100毫克、煙酸50 150毫克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調pH值； 或者小麥粒10 30克、玉米粉5 15克、馬鈴薯30 100克、香菇50 150克、葡萄糖10 20克、磷酸二氫鉀I 5克、硫酸鎂O. 5 3克、蛋白胨I 5克、酵母浸膏I 3克、水1000 2000克、瓊脂10 30克，用檸檬酸調pH值。
全文摘要
本發明公開一種野生紅土雞樅菌人工馴化母種的制備方法，是一種人工馴化生物技術的具體應用。解決野生菌人工栽培的技術難題。技術方法為⑴采集自然野外生長在云南省海拔1800米以上紅土高原地區的紅土雞樅菌子實體獲得孢子；⑵通過單孢子雜交技術篩選獲得紅土雞樅菌出菇菌株；⑶再通過子實體組織分離進行系統選育，經過2～6年的系統培育，人工馴化，得到穩定性強，可用于繁殖生產的紅土雞樅菌母種。本發明的紅土雞樅菌母種可用于人工種植生產紅土雞樅菌。
文檔編號A01G1/04GK102726211SQ20121014590
公開日2012年10月17日 申請日期2012年5月13日 優先權日2012年5月13日
發明者李先, 李本春, 田果廷, 肖燕, 趙榆新, 錢赟 申請人:云南福保農業科技開發有限公司