專利名稱：一種苜蓿雜交方法
技術領域：
本發明涉及一種雜交方法。
背景技術：
苜蓿是一種理 想的飼用植物，同時也是一種良好的綠肥作物。苜蓿以“牧草之王”著稱，不僅產量高，而且草質優良，各種畜禽均喜食。因此，培育優良的苜蓿新品種對增產優質飼草發展畜牧業和提高土壤肥力均具有重要的意義。有關培育牧草新品種的方法很多，但有性雜交仍然是培育苜蓿新品種的有效方法之一，而了解苜蓿開花的生物學習性，正確掌握雜交技術，則又是雜交能否獲得成功的關鍵。苜蓿花器小、結構特殊，人工雜交很困難，獲得的結實率低，去雄方法和授粉時間，都影響著苜蓿雜交的結實率。現有技術為去雄后即套袋隔離，再過一天或二天后揭開套袋進行授粉，最后再套袋隔離任其雜交受精結實，但是反復套袋可能對柱頭造成損傷，苜蓿雜交的結實率在30%左右。因此確定最佳授粉時間是提高苜蓿雜交的結實率的關鍵。

發明內容
本發明是要解決現有苜蓿雜交方法獲得的苜蓿結實率低的問題，提供了一種苜蓿雜交方法。本發明的一種苜蓿雜交方法，是按以下步驟進行的一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當天對步驟一處理后的母本植株進行授粉；五、授粉后套袋并掛上標簽做好記錄。本發明在去雄當天進行授粉，減少了反復套袋對柱頭造成的損傷，并確定了授粉的最佳時間段，由此提高了苜蓿雜交的結實率，結實率最高為74. 07%，平均結實率為45. 98%。


圖I是首猜花期不意圖；圖2是試驗I中對照組人工去雄示意圖；圖3是試驗I中對照組的授粉示意圖；圖4是試驗I中對照組的套袋示意圖。
具體實施例方式具體實施方式
一本實施方式中的一種苜蓿雜交方法，是按以下步驟進行的一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當天對步驟一處理后的母本植株進行授粉；五、授粉后套袋并掛上標簽做好記錄。本實施方式在去雄當天進行授粉，減少了反復套袋對柱頭造成的損傷，并確定了授粉的最佳時間段，由此提高了苜蓿雜交的結實率，結實率最高為74. 07%，平均結實率為45. 98%。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟四中在去雄當天的上午十點到十二點進行授粉。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一或二不同的是步驟四中在去雄當天的下午兩點到三點進行授粉。通過以下試驗驗證本發明的有益效果試驗I :試驗分為試驗組和對照組。 花期的選擇按苜蓿花蕾的發育狀態將苜蓿花分為六個時期(見圖1)，其中，I期為整個花序聚在一起，各小花尚未分離時；11期為各小花分離，花瓣為花萼所包裹；ΙΠ期為花瓣已在花萼裂片間出現，但花瓣長度尚未超過萼片2mm ； IV期為花瓣長度已超過花萼2mm，但龍骨瓣仍被旗瓣所包裹…期為龍骨瓣已經旗瓣腹面出現，旗瓣尚未向上翻轉；VI期為小花開放，旗瓣向上翻轉，龍骨瓣已由翼瓣之間露出。利用離體萌發法對苜蓿不同花期花粉生活力進行測定，結果表明苜蓿I期到III期花，花粉均沒有生活力；從IV期開始，花粉粒具有生活力。IV期 VI期花粉粒的平均生活力為21%、32.期花粉粒開始逐漸成熟，VI期則完全成熟。因此苜蓿雜交育種中，應選擇III期即花瓣長度不超過花萼2mm的小花進行處理，此時花粉生活力為0，可避免在去雄過程中由于花粉粘到柱頭，發生自交現象，保證了雜交結實的真實性。去雄方法的選擇去雄方法分為人工去雄、溫湯去雄和化學去雄三種方法。溫湯處理0s、lmin、2min時，苜蓿花粉均有生活力，分別為46. 6%,47. 1%,45. 7% ;處理3min以上生活力為O。完全晾干后，花粉恢復一部分生活力，為34.9%。化學去雄時，苜蓿花粉在75%乙醇處理30s下，花粉即已失去生活力；且花干后，生活力并不恢復。因此，溫湯去雄的時間應為3min以上，化學去雄的時間為30s即可。分別運用三種方法去雄，人工輔助授粉后套袋，雜交結實率分別為39.33 %、5. 33%、11. 33%，人工去雄所得的結實率明顯高于溫湯去雄和化學去雄兩種方法；去雄后不授粉直接套袋，雜交結實率分別為0、3. 67%、0，說明人工去雄法和化學去雄法能有效干凈的去處母本的花粉生活力，在不授粉的情況下沒有種子產生，證明運用這兩種方法去雄后雜交所得的種子為真雜交種；用溫湯去雄后不授粉，直接套袋，發現仍有3. 67%的雜交結實率。這可能與水分全部蒸發后，一部分的花粉生活力恢復有關。操作時，恢復生活力的花粉沾到柱頭上，造成自交結實，證明運用溫湯去雄法去雄后雜交所得的種子可能為自交種，也可能為雜交種，此法不適合。因此在苜蓿雜交育種中，人工去雄和化學去雄兩種去雄方法均可保證得到真實的雜交種子。化學去雄法簡易方便，但雜交結實率比人工去雄法要低，這可能是化學藥劑對雌蕊柱頭生活力產生了一定的影響。因此，最適合的去雄方法為人工去雄法。試驗組的苜蓿雜交方法，是按以下步驟進行的一、確定肇東苜蓿為母本，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄用尖頭鑷子去除步驟一中留下的小花的花粉(見圖2);四、選取父本WL323HQ苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當天8:00 17:00每I小時對步驟一處理后的母本植株的一個花絮進行授粉(每I小時處理不同花絮)(見圖3);五、授粉后套袋并掛上標簽做好記錄(見圖4)。對照組I的苜蓿雜交方法，是按以下步驟進行的一、確定肇東苜蓿為母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄用尖頭鑷子去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本WL323HQ苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當天8:00 17:00每I小時對步驟一處理后的母本植株的一個花絮進行授粉(每I小時處理不同花絮)；五、授粉后套袋并掛上標簽做好記錄。對照組2的苜蓿雜交方法，是按以下步驟進行的一、確定肇東苜蓿為母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄用尖頭鑷子去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本WL323HQ苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當天8:00 17:00每I小時對步驟一處理后的母本植株的一個花絮
進行授粉(每I小時處理不同花絮)；五、授粉后套袋并掛上標簽做好記錄。對試驗組、對照組I和對照組2的結實率進行測定，結果如表I所示，由表I可知，試驗組的平均結實率要高于對照組I和對照組2，其中試驗組在10:00 12:00和14:00 15:00這兩個時間段進行授粉后結實率最高。表I結實率對照表
權利要求
1.ー種苜蓿雜交方法，其特征在于苜蓿雜交方法是按以下步驟進行的一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；ニ、人工去雄去除步驟一中留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當天對步驟一處理后的母本植株進行授粉；五、授粉后套袋并掛上標簽做好記錄。
2.根據權利要求I所述的ー種苜蓿雜交方法，其特征在于步驟四中在去雄當天的上午十點到十二點進行授粉。
3.根據權利要求I所述的ー種苜蓿雜交方法，其特征在于步驟四中在去雄當天的下午兩點到三點進行授粉。
全文摘要
一種苜蓿雜交方法，它涉及一種雜交方法。本發明是要解決現有苜蓿雜交方法獲得的苜蓿結實率低的問題。雜交方法為一、確定母本植株，選取健康的花絮，留下花瓣長度不超過花萼2mm的小花，去掉其他的小花；二、人工去雄去除留下的小花的花粉；四、選取父本苜蓿龍骨瓣未打開的小花，取出花粉，在去雄當天對母本進行授粉；五、授粉后套袋并掛上標簽做好記錄。本方法提高了苜蓿雜交的結實率，結實率最高為74.07％，平均結實率為45.98％。本發明應用于苜蓿領域。
文檔編號A01H1/02GK102835307SQ201210369200
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月28日 優先權日2012年9月28日
發明者韓貴清, 劉鳳歧, 張月學, 唐鳳蘭, 劉杰淋, 韓微波, 朱瑞芬 申請人:黑龍江省農業科學院草業研究所