用于寵物食品中的具有增強的適口性的動物消化物的制作方法
用于寵物食品中的具有增強的適口性的動物消化物的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括：a）提供動物內臟；b）使所述動物內臟與適當量的至少一種堿性肽鏈內切酶接觸；c）使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟達合適的時間段；d）熱處理由此獲得的消化產物，以使所述堿性肽鏈內切酶失活；和e）獲得具有適當的水解度并顯示出增強適口性的所述動物消化物。本發明也涉及可通過這種方法獲得的具有增強適口性的動物消化物，以及其用于制備具有增強適口性的寵物食品的用途。
【專利說明】用于寵物食品中的具有增強的適口性的動物消化物
【技術領域】
[0001]本發明涉及寵物食品領域。更具體地，本發明涉及用于寵物食品中的適口性增強的動物消化物。
【背景技術】
[0002]蛋白水解物為寵物食品的標準組分，其通常將適口性賦予寵物食品。
[0003]蛋白水解通常可通過物理(加熱或剪切)或化學(酸或酶)方式實現。然而，酶水解為在食品工業中用于水解蛋白質的最廣泛的方法，特別是因為酶能夠獲得用于營養和/或感官目的的感興趣的水解物(或消化物)。
[0004]蛋白水解酶為蛋白酶或肽酶，蛋白酶或肽酶可被辨別:
[0005]-基于在酶的活性位點機理中涉及的關鍵氨基酸:絲氨酸、羧基、氫硫基或金屬，和/或
[0006]-通過它們處于活性的相對pH范圍:酸性、中性或堿性；和/或
[0007]-基于它們的水解能力:內切蛋白酶或肽鏈內切酶在蛋白質或肽的內部的氨基酸之間切斷，而外切蛋白酶或肽鏈端解酶在蛋白質或肽的端部分裂氨基酸。
[0008]作為常見內切蛋白酶的例子，可提及:作為高特異性內切蛋白酶的凝乳酶；具有相對較寬的特異性，但優選分裂涉及Phe、Met、Leu和Tryp殘基的鍵的胃蛋白酶；中性蛋白酶，如作為分裂Arg或Lys殘基與隨后的氨基酸之間的鍵的高特異性內切蛋白酶的胰蛋白酶；作為非特異性的氫硫基肽鏈內切酶的木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶；堿性蛋白酶，如完全非特異性的枯草桿菌蛋白酶等。
[0009]在食品工業中，公知的是蛋白水解影響生物、物理和化學性質以及食品加工，且這可能是有利的或不利的。在一方面，由于低分子量分布，水解通常改進溶解度以及耐熱性和耐PH性。在另一方面，水解通常增加摩爾滲透壓濃度并降低化學穩定性。此外，取決于酶、蛋白質源和/或反應條件，可能由于例如產生苦的肽而降低適口性。因此有必要適當確定酶、蛋白質源和反應條件(例如酶濃度和反應時間)，以獲得所得消化物的特定技術效果。
[0010]寵物食品制造者通常使用家畜的肝臟或內臟和動物副產物作為寵物食品生產中的蛋白質源。在內臟中，一些(例如腸)有利地富含蛋白水解酶，使得它們需要極少(如果有的話)的另外的蛋白酶以用于水解蛋白質。當使用動物器官作為蛋白質源時，也有可能利用內生蛋白水解酶。然而，在這些酶中，夕卜切蛋白酶通常過高表示(highly represented)而不能制得適當的消化物。因此，肉類來源通常被研磨，并用適當選擇的酶進行處理以提供高產率的調味肽。另外，由于寵物種類之間的口味偏好不同，因此寵物食品制造者需要選擇能夠獲得高產率的具有所需適口性性質的消化物的酶、蛋白質源和水解條件。除了優化適口性之外，所選的蛋白酶應該適于“友好的”加工條件，如分別有助于限制制造成本并防止細菌生長的適中的酶濃度以及溫度范圍。
[0011 ] 在寵物食品工業中，適口性增強劑(PE)對于動物消耗而言是非常有用的(如果不是必要的話)。許多寵物，特別是貓，可能甚至拒絕食用未經PE處理的擠壓的寵物食品。寵物食品通常含有調味組合物以增加其適口性，并使其吸引寵物。
[0012]PE為可單獨使用或組合使用的液體或干燥組合物。一些PE施用至寵物食品的外表面(涂層)，而其他PE摻入寵物食品材料中(內含物)。
[0013]調味蛋白水解物被廣泛用作PE。例如，以N0.W02011/043828公布的國際專利申請公開了增強可用作PE的動物消化物的適口性的方法。這些方法包括將抗膠凝劑添加至動物消化物，同時將PH調節至用于水解內臟蛋白質的蛋白酶的最佳值。而且，以N0.W02009/095417公布的國際專利申請描述了通過使用PE而增強寵物食品的適口性的方法，所述PE通過使用蛋白酶和脂酶的水解的連續步驟制得。
[0014]然而，持續努力開發改進寵物食品的適口性并同時保持其營養價值的加工和配方。
【發明內容】
[0015]本發明涉及一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括:
[0016]a)提供動物內臟；
[0017]b)使所述動物內臟與適當量的至少一種堿性肽鏈內切酶接觸；
[0018]c)使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟達到合適的時間段；
[0019]d)熱處理由此 獲得的消化產物以使所述堿性肽鏈內切酶失活；以及
[0020]e)獲得具有適當的水解度并顯示增強的適口性的所述動物消化物。
[0021]本發明也涉及可通過這種方法獲得的具有增強適口性的動物消化物，以及其用于制備具有增強適口性的寵物食品的用途。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0022]參照如下【專利附圖】
【附圖說明】本發明:
[0023]圖1:表示根據本發明的方法的各個實施方案的流程圖。必要步驟a)、b)、C)、d)和e)以實線表示；任選的步驟al)、cl)、dl)、d2)、d3)、d4)、d5)和d6)以虛線表示。
[0024]圖2:隨堿性肽鏈內切酶的量(E)和水解反應的時間(T)而變化的水解度(DH)的圖形表示。
[0025]?圖 2A:等式(I):
[0026]DH=25.5072+0.2104χΕ+16.5265χΤ_2.3666χΤ2-15.6816χΕ2+9.1270χΕχΤ
[0027]?圖 2Β:等式(2):
[0028]DH=22.9718+43.58χΕ+7.6128χΤ_0.6199χΤ2_21.2226χΕ2+2.3467χΕχΤ。
【具體實施方式】
[0029]定義
[0030]除非另外具體指出，否則百分比在本文以在本發明的方法的熱處理步驟d)之后獲得的液體消化產物的重量表示。該液體消化產物得自所述步驟d)。或者，如果步驟d)之后為過濾步驟dl)，則百分比以獲自所述步驟dl)的液體消化產物的重量表示。又或者，如果步驟d)或dl)之后為冷卻步驟d2)，則百分比以獲自所述步驟d2)的液體消化產物的重量表示(參見圖1)。[0031]在本公開中，范圍以簡寫描述，以避免不得不冗長陳述和描述范圍內的每一個值。當適當時，可選擇范圍內的任何適當的值作為范圍的上限值、下限值或端值。例如，0.1-1.0的范圍表示0.1和1.0的端值，以及0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9的中間值，和涵蓋于0.1-1.0內的所有中間范圍，如0.2-0.5,0.2-0.8,0.7-1.0等。
[0032]如在全文所用，詞語的單數形式包括復數，反之亦然，除非上下文明確相反表示。因此，引述“一種”和“所述”通常包括各自術語的復數。例如，引述“一種方法”或“一種食品”包括多個這種“方法”或“食品”。類似地，應當包含地解釋詞語“包含(comprise、comprises和comprising)”。同樣地,術語“包括(include、including)”和“或(or)”應當解釋為包含的。然而，所有這些術語必須考慮為涵蓋排他的實施方案，所述排他的實施方案也可使用諸如“由……組成”的詞語提及。
[0033]本文示例的方法和組合物和其他實施方案不局限于本文描述的特定的方法學、方案和試劑，因為如本領域技術人員將了解，它們可變化。
[0034]除非另外定義，否則本文所用的所有技術和科學術語、技術術語和縮略詞具有本發明的領域或術語所用的領域的技術人員所通常理解的含義。盡管類似于或等同于本文描述的那些的任何組合物、方法、制品或其他方式或材料可用于實施本發明，但是本文描述優選的組合物、方法、制品或其他方式或材料。[0035]當提及可測量的值(如含量、時距等)時如本文所用的術語“約”意在涵蓋指定值的土 10%，更優選±5%，甚至更優選±3%的變化，因為這種變化適于重現所公開的方法和產
品O
[0036]術語“適口性”意指相對于另一種食品組合物，動物對一種食品組合物的相對偏好。適口性指動物食用某種食品的總體意愿。有利地但并非必要地，適口性還指所食用的食品滿足動物的能力。每當動物例如對兩種或更多種食品中的一種顯示出偏好時，偏愛的食品更“可口”，并具有“增強的適口性”。相比于一種或多種其他食品，一種食品的相對適口性可以例如通過食品的相對消耗或表示適口性的偏好的其他適當量度，例如在并排、自由選擇比較中確定。其可有利地通過標準測試方案(如稱為“雙碗測試(two-bowl test)”或“對抗測試(versus test)”的測試(參見如下))確定，在所述標準測試方案中，動物具有接近兩種組合物的相等機會。這種偏好可源自動物感覺中的任意者，但通常特別地與味道、香味、風味、質地、氣味和/或口感相關。
[0037]本文表示為具有“增強適口性”的寵物食品為相對于對照組合物，寵物顯示出偏好的一種寵物食品。有利地，具有增強適口性的寵物食品不僅對寵物，還對寵物所有者是有吸引力或合意的。
[0038]術語“適口性增強劑(PE)”、“增味劑(palatant)”、“調味劑”、“適口性試劑”、“開胃因素”、“調味組合物”、“適口性增強組合物”、“風味增強劑”和任何其他類似的術語意指增強食品組合物對于動物的適口性的任何材料。PE可為單個材料或材料的共混物，其可為天然的、加工的或未加工的、合成的，或部分天然和部分合成的材料。通常，用于動物食品的PE為提供對于目標動物有吸引力或合意的香味、味道、回味、氣味、口感、質地和/或感官感覺的可食用組合物。
[0039]例如，PE可通過其氣味而貢獻初始食品吸引力，和/或不僅通過其氣味，還通過其味道和/或其回味和/或其口感和/或其質地而貢獻連續消耗。“初始吸引力”為誘導動物最初品嘗或嘗試食品的適口性的一方面，其可通過標準“第一選擇”或“第一消耗食品”而估量。“持續消耗”為誘導動物持續消耗最初僅品嘗或嘗試的食品的適口性的一方面。
[0040]術語“動物”在一般意義上使用，并意指基于可食用組合物的適口性可以選擇可食用組合物的人類或其他動物，包括鳥類、牛類、犬類、馬類、貓類、狼類、鼠類、羊類和豬類動物，因此涵蓋寵物。
[0041]本發明優選涉及寵物。
[0042]術語“寵物”和“同伴動物”為同義的，并意指包括但不限于貓、狗、兔、豚鼠、雪貂、
倉鼠、老鼠、沙鼠、鳥、馬、牛、山羊、綿羊、驢、豬等的任何家養動物。
[0043]在本發明的上下文中，優選諸如狗和貓的寵物。然而，盡管本公開集中于狗和貓，但本發明可適用于其他類別的同伴動物。如果需要，可測試本發明，以評價其用于可被認為是同伴動物的不同類別的動物的適合性。
[0044]如本文所用，術語“食品”意指旨在用于被動物攝取，并為動物提供至少一種營養物的產品或組合物。術語“食品”包括任何食品、飼料、點心、食品補充劑、零食(treat )、玩具(可咀嚼和/或可消耗玩具)、膳食替代品或膳食代用品。“食品”涵蓋任何形式、固體、液體、凝膠或它們的混合物或組合的這種產品。因此，任意類型的飲料明確涵蓋于術語“食品”內。
[0045]術語“寵物食品”意指旨在被寵物消耗的組合物。
[0046]取決于寵物食品的水分含量(其為低的、中等的或高的)，存在三種主要類別或級別的寵物食品:
[0047]-干燥或含低水分的產品(具有小于約15%的水分):當寵物咀嚼時，它們通常產生嘎扎嘎扎的聲音；它們通常為高營養的，可被便宜地包裝(例如在袋中或盒子中)，并非常便于儲存和使用；然而，它們通常適口性最差；
[0048]-罐裝或濕潤或含高水分的產品(具有超過約50%的水分):通常為高肉含量產品，它們通常被認為是對寵物最具適口性；它們通常制造和包裝(主要在罐中)昂貴；
[0049]-半濕或半干或柔軟干燥或柔軟潮濕或含中級或中等水分的產品(具有約15至約50%的水分):通常包裝于適當的袋或盒子中，它們通常比罐裝食品適口性差，但比干燥食品適口性好。
[0050]營養均衡的寵物食品在本領域中廣泛已知和使用。
[0051]“營養全面”、“營養均衡”或“全面營養均衡食品”為含有用于食品預期的接受者或消費者的具有例如基于同伴動物營養領域的認可或主管當局的推薦的適當量和比例的全部已知所需的營養物的食品。因此，這種食品能夠用作膳食攝取的唯一來源以維持生命或促進生產，而無需添加補充營養源。
[0052]本文所用的術語“粗粒”指通過造粒或擠出方法形成的顆粒塊或片。通常，制備粗粒以提供干燥和半濕寵物食品。取決于方法或設備，片的尺寸和形狀可不同。例如，粗粒可具有球形、圓柱形、橢圓形或類似的形狀。它們可具有例如小于約2cm的最大尺寸。
[0053]術語““X”中的塊狀產品(ChUnk-1n-〃X〃piOdUCt)”在本文意指在制劑(所述制劑為“X制劑”)中包含塊狀的所有可食用食品。其經典例子為在凝膠中的塊狀產品、在肉汁中的塊狀產品等。該類別的“在X中的塊狀”產品也涵蓋除了可包含于X制劑(如凝膠、肉汁等)中的塊狀之外的可食用形式。例如，除了塊狀之外的其他形式可為切片產品、磨碎產品坐寸O
[0054]本文所用的術語“肉糕(loaf)”指作為潮濕產品獲得的可食用食品，并包括肉糜(terrine)、肉醬(ρ&?)、奶油凍等。
[0055]術語“食品補充劑”或“膳食補充劑”或“補充劑”意指旨在除了正常動物膳食之外攝取的產品。膳食補充劑可為任何形式，例如固體、液體、凝膠、片劑、膠囊、粉劑等。優選地，它們以方便的劑量形式提供。在一些實施方案中，它們以散裝銷售包裝(如散裝粉劑、液體、凝膠或油)提供。在其他實施方案中，補充劑以批量提供以包含于其他食品(如小吃、零食、補充劑條、飲料等)中。適口性增強組合物可用于以與它們用于改進營養均衡食品的適口性相同的方式來改進膳食補充劑的適口性。
[0056]術語“零食”(或“餅干”)意指設計為由所有者優選在非用餐時間喂養寵物，以協助、促進或維持寵物與其所有者之間的聯系過程的任何食品。用于狗的零食的例子為骨頭。零食可為營養的或不為營養的。零食通常以與營養均衡食品可相比的方式含有適口性增強劑。
[0057]“玩具”包括例如可咀嚼玩具。用于狗的玩具的例子為人造骨頭。玩具還包括可部分消耗的玩具(例如包含塑料組件)或可完全消耗的玩具(例如生皮)。
[0058]術語“動物消化物”在本文意指得自清潔的、未分解的動物組織的化學和/或酶水解的材料。在一些實施例中，如本文所用的動物消化物與美國飼料管制協會股份有限公司(Association Of American Feed Control Officials, Inc.) (AAFCO)所發布的定義完全一致。動物消化物優選衍生自動物組織以及魚類組織，不包括毛發、角、牙齒、蹄和羽毛。本領域技術人員將了解，盡管這種組織不是優選的，但即使在良好的制造實踐中，也可能不可避免地存在痕量。也不包括內臟內容物或外來物或排泄物，盡管有時存在痕量污染物。動物消化物可為干燥的或非干燥的。通常，動物消化物的例子為:
[0059]-家禽(或豬肉、牛肉、綿羊、羔羊、魚類等)的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的來自家禽(豬肉、牛肉等)的材料；
[0060]-豬肉(或牛肉、綿羊、羔羊、魚類等)副產物的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的來自豬肉(牛肉等)的材料，所述清潔的和未分解的組織來自家畜(豬、綿羊、羔羊等)的除了肉和骨頭之外的未提煉的清潔部分，例如肺、脾臟、腎臟、大腦、肝臟、血液、任選部分脫脂的低溫脂肪組織，以及清除了內容物的胃和腸。
[0061 ]-家禽副產物的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的材料，所述清潔的和未分解的組織來自家禽的除了肉和骨頭之外的未提煉的清潔部分，如肝臟、心臟、頭部、腳部和內臟。如本文所用，“家禽”涵蓋鳥類的任何物種或類別，優選小雞、火雞、鴨子等；以及
[0062]-魚類副產物的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的材料，所述清潔的和未分解的組織來自魚類的除了肉和骨頭之外的未提煉的清潔部分。如本文所用，“魚類”涵蓋魚類或甲殼類或軟體動物類的任何物種或類別，優選金槍魚、鮭魚、鱈魚、狗鱈、沙丁魚、蝦、魷魚等。
[0063]動物消化物也稱為“動物產物”或“動物副產物”，所有這些術語作為同義詞在本文使用。
[0064]然而，在本發明的上下文中，動物消化物優選通過酶水解動物內臟而獲得。[0065]如本文所用，術語“動物內臟”或“內臟”意指可用于制備如上定義的動物消化物(包括魚類消化物)的除了肉、魚肉和骨頭之外的動物和魚類組織。優選研磨如本文所用的動物內臟(包括魚類內臟)。有利地，可將一種或多種寵物食品成分(如下所定義，例如防腐齊U，如抗氧化劑)添加至所述(優選經研磨的)動物內臟中。
[0066]如本文所用，“寵物食品成分”為適用于寵物消耗的任何化合物、組合物或材料。寵物食品成分的非限制性的例子為PE、動物消化物、氮化合物(例如蛋白質、肽和氨基酸)、谷物、碳水化合物、脂肪或脂類、營養物、防腐劑(包括抗氧化劑)、表面活性劑、質地化(texturing)或組織化或穩定化試劑、著色劑、無機磷酸鹽化合物、益生元、益生菌等。
[0067]如本文所用，“適口性增強組合物成分”為適用于寵物消耗的任何化合物、組合物或材料。適口性增強組合物成分的非限制性的例子為動物消化物、氮化合物(例如蛋白質、肽和氨基酸)、碳水化合物、脂肪或脂類、營養物、防腐劑(包括抗氧化劑)、表面活性劑、質地化或組織化或穩定化試劑、無機磷酸鹽化合物、益生元、益生菌等。成分可原樣包含于適口性增強組合物中，或者它們可在組合物中接觸并原位反應，以產生也由術語“適口性增強組合物成分”涵蓋的經轉化的材料。在組合物中在一起反應的成分的例子為(不限于)氮化合物和碳水化合物，以獲得經轉化的材料，如美拉德反應所得產物等。
[0068]術語“肽鏈內切酶”或“內切蛋白酶”意指催化肽或蛋白質中的內部鍵的分裂的任何蛋白水解酶。
[0069]術語“堿性肽鏈內切酶”或“堿性內切蛋白酶”意指在等于或大于約7.0的pH下具有最佳水解活性的任何肽鏈內切酶或內切蛋白酶。這種酶優選在約7.0至約10.0的pH下為活性。
[0070]“蛋白質”或“多肽”包括可與動物消耗相容的所有常規蛋白質源，尤其是植物或蔬菜蛋白，動物蛋白和微生物蛋白(例如酵母)。
[0071]動物蛋白的例子為酪蛋白、白蛋白、動物消化物、禽肉粉、肉粉、骨粉、魚粉等。
[0072]蔬菜蛋白的例子為玉米麩質、大豆蛋白、大豆粉、水解蔬菜蛋白(HVP)等。
[0073]術語“酵母”在本文指任何酵母(優選為非活性的)，以及可與用于動物消耗的組合物相容的酵母副產物。酵母在本領域公知為富含蛋白質的。酵母包括但不限于啤酒酵母、面包酵母、圓酵母、糖蜜酵母等。酵母副產物包括但不限于酵母提取物、酵母水解產物、酵母自溶產物、酵母乳等。
[0074]術語“氨基酸”意指含有氨基和羧基的分子。在一些實施方案中，氨基酸為α-、β _、Y -或δ -氨基酸，包括它們的立體異構體和外消旋體。
[0075]如本文所用，術語“氮化合物”涵蓋二十種已知的天然氨基酸，以及氨基酸序列，即肽、寡肽和蛋白質或多肽。也包括來自對于在寵物食品中使用是可接受的任何來源的所有含氮化合物。適當的氮化合物可選自對于在寵物食品中使用是可接受的含硫的任何氮化合物，如含硫氨基酸(例如蛋氨酸、胱氨酸、半胱氨酸)、谷胱甘肽；其他氨基酸，如甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸等；以及其他化合物，如HVP、酵母自溶產物、酵母提取物、酵母水解產物；以及它們的組合。
[0076]谷物的例子為玉米、蜀黍、苜蓿、小麥、大麥、稻米、大豆等。
[0077]碳水化合物的例子包括右旋糖、左旋糖、蔗糖、多糖、纖維、淀粉等。優選地，碳水化合物為還原糖或含有還原糖。[0078]優選地，“還原糖”選自己糖、戊糖、葡萄糖、左旋糖、木糖、核糖、樹膠醛糖、淀粉水解產物等，以及它們的組合。
[0079]脂肪的例子包括牛脂、來自任何來源(如動物、植物(包括蔬菜))的油，或海洋油。可大量得到的植物油通常為菜籽油、豆油、玉米油、橄欖油、葵花油、亞麻籽油、棕櫚油、紅花油等，以及它們的副廣物。
[0080]典型的動物脂肪為牛脂、豬油、家禽脂肪等，以及它們的副產物。海洋油通常為金槍魚油、沙丁魚油、鮭魚油、:!是魚油、魚油等，以及它們的副產物。本文也涵蓋衍生自動物、植物、海洋來源的脂肪，或者由動物和植物制得的脂肪。
[0081]營養物的例子包括但不限于維生素、礦物質和電解質，如維生素A、C、E、B12、D3、葉酸、D-生物素、氰鈷維生素、煙酰胺、硫胺素、核黃素、吡哆醇、甲萘醌、β-胡蘿卜素、泛酸鈣、膽堿、纖維醇、?丐、鉀、鈉、鋅、鐵、猛、銅、碘等。
[0082]“防腐劑”特別地用于確保食品產品或食品組合物的長的保質期。防腐劑包括天然或合成抗氧化劑(如BHA、ΒΗΤ、沒食子酸丙酯、沒食子酸辛酯、生育酚、迷迭香提取物等)；以及山梨酸或山梨酸鹽(例如山梨酸鉀)，和其他酸，如磷酸等。“表面活性劑”為表面活性的分子。它們通常具有親水部分(例如一個或多個頭部基團)和疏水(或親脂)部分(例如一個或多個尾部)。它們以多種方式分類，例如根據它們的親水-親脂平衡(HLB)分類。它們也可或可選擇地基于在頭部基團中的形式帶電(formally-charged)的存在與否而分類為非離子型、離子型或兩性離子型化合物。表面活性劑是本領域公知的。可引用例如Tweene表面活性劑。表面活性劑包括但不限于乳化劑和潤濕劑。在一些情況中，術語“表面活性劑”和“乳化劑”可互換使用。
[0083]如本文所用，術語“無機磷酸鹽化合物”意指包含至少一個磷原子的化合物。該化合物可為天然的或合成的、電離的或非電離的。
[0084]“無機焦磷酸鹽”或“焦磷酸鹽”包括涵蓋單堿金屬焦磷酸鹽和多堿金屬焦磷酸鹽的堿金屬焦磷酸鹽。
[0085]SMxHyPn03n+1(當n=2時)為堿金屬焦磷酸鹽的通式。當M為單價金屬時,貝U x+y=n+2。當M為二價金屬時,則x+y=n。單價金屬焦磷酸鹽和二價金屬焦磷酸鹽可在本文使用。
[0086]單堿金屬焦磷酸鹽的例子包括焦磷酸三氫鈉、焦磷酸三氫鉀、焦磷酸氫鈣、焦磷酸氫鋇、焦磷酸氫鎂。
[0087]多堿金屬焦磷酸鹽涵蓋二堿金屬焦磷酸鹽、三堿金屬焦磷酸鹽、四堿金屬焦磷酸鹽等。
[0088]二堿金屬焦磷酸鹽的例子為焦磷酸二氫二鈉、焦磷酸二氫二鉀、焦磷酸二鈣、焦磷酸二鋇、焦磷酸二鎂、焦磷酸二錳、焦磷酸二鋅。
[0089]三堿金屬焦磷酸鹽為例如焦磷酸氫三鈉、焦磷酸氫三鉀。
[0090]焦磷酸鹽可為無水的或水合的。
[0091]“多磷酸鹽”具有式MxHyPn03n+1，其中η為3、4、5……。
[0092]多磷酸鹽的例子為三多磷酸鹽、五多磷酸鹽和六多磷酸鹽。
[0093]三多磷酸鹽包括三多磷酸鈉、三多磷酸鉀、三多磷酸鈣和三多磷酸鎂。
[0094]六多磷酸鹽包括六多磷酸鈉、六多磷酸鉀、六多磷酸|丐和六多磷酸鎂。
[0095]單磷酸鹽的例子包括單磷酸一鈉、單磷酸二鈉、單磷酸三鈉、單磷酸一鉀、單磷酸二鉀、單磷酸三鉀、單磷酸腺苷(AMP)、單磷酸鳥苷(GMP)、單磷酸肌苷(MP)、單磷酸尿苷(UMP)、單磷酸胞啶(CMP)。
[0096]“質地化試劑”或“組織化試劑”或“穩定化試劑”為影響可食用產品的質地或口感的成分，例如增加可食用產品的粘度的組分。
[0097]“著色劑”在本文意指適合(優選認證)用于寵物食品中的任何天然物質或任何合成顏色。著色劑特別地可用于在加工過程中彌補顏色改變，或將開胃的顏色提供給可食用
女口
廣叩ο
[0098]“益生菌”為活微生物，當攝取時，其通過改進宿主動物的腸道微生物平衡而對宿主動物具有有益作用。因此，益生菌通過保持宿主動物的健康和/或安全和/或康樂；和/或通過預防和/或治療特定的醫療狀況而有利地影響宿主動物。提供益生菌以促進如下過程:內生厭氧菌群限制消化道中潛在有害(大多數為需氧的)的細菌的濃度。用于寵物食品中的適當的益生菌的例子為(但不限于)乳酸菌,如乳桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳球菌屬(Lactococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.);以及其他類型的細菌。
[0099]“益生元”為通過如下方式有利影響宿主動物的非消化性食品成分:選擇性刺激微生物在消化道中的生長和/或活性，由此有利于宿主動物的健康和/或安全/或康樂的保持和/或改進。益生元的例子包括低聚果糖(F0S)、低聚木糖(X0S)、低聚半乳糖(GOS)和低聚甘露糖。
[0100]根據本發明，“熱反應”為通過在高溫下組合至少一種碳氫化合物(優選還原糖)和至少一種氮化合物而獲得的反應。這種反應實際上可包括多種伴隨和/或連續反應，包括例如美拉德反應。
[0101]如在本發明的方法的步驟d)中所指的術語“熱處理”涵蓋可有利地與如上定義的熱反應伴隨進行的熱處理以使酶失活。
[0102]因此，術語“美拉德成分”在本文意指一種或多種碳水化合物，優選為還原糖；和/或一種或多種氮化合物。實際上，美拉德成分為用于實現如上定義的一種或多種熱反應的成分。
[0103]如本文所用，術語“載體”意指“用于濃縮的載體”或“用于干燥的載體”，并涵蓋本領域公知的常規化合物。其例子為微生物蛋白質(例如酵母)、動物蛋白、蔬菜蛋白、碳水化合物(例如麥芽糖糊精、環糊精)，以及礦物質或無機化合物(包括如上定義的無機磷酸鹽化合物)。
[0104]由于難以或甚至不可能確定蛋白質水解產物的確切組成，因此制造者通常寧愿使用非直接參數，如蛋白質的肽鍵的水解度(DH)。DH表示為:(i)所得水解產物中氨基氮與全部氮的比例(AN/AT比)；(ii)水解產物中胺的存在jP(iii)水解產物的摩爾滲透壓濃度。可使用許多常規方法來確定DH。在食品工業中，更具體地在寵物食品工業中使用以定量DH的方法通常基于如下原理中的一者:(I)在沉淀劑(如三氯乙酸(TCA))的存在下確定可溶性氮；或(2)通過比色法(例如使用三硝基苯磺酸TNBS滴定)或釋放質子的pH滴定來確定游離α氨基。TCA可溶性氮可通過克耶達(Kjeldhal)分析(Α.0.A.C.1995)或雙縮脲反應(Hung等人，1984)而確定。這種方法詳細描述于Silvestre (1997)中。或者，DH可有利地通過如下所述的OPA (ο-酞二醒)-基方法(Nielsen, 2001)確定。
[0105]如本文所用，“涂布”指例如通過噴射、撒粉等將適口性增強組合物局部沉積至基礎食品組合物的表面上。
[0106]如本文所用，“包括(inclusion)”指在用于獲得最終寵物食品的進一步的加工步驟(包括熱處理和/或擠出和/或飯懼(retorting)等)之前,通過將適口性增強組合物與其他寵物食品成分混合，而將適口性增強組合物內部添加至寵物食品制劑中。
[0107]術語“單個包裝”意指試劑盒的組件在一個或多個容器中物理締合或與一個或多個容器物理締合，并被認為是用于制造、分送、銷售或使用的一個單元。容器包括但不限于袋、盒子、紙箱、瓶、小袋、任何類型或設計或材料的包裝、透明帶、收縮膠膜、裝訂的或另外粘貼的組件，或它們的組合。單個包裝可為物理締合的單獨組件的容器，使得它們可被認為是用于制造、分送、銷售或使用的一個單元。
[0108]如本文所用，“用于傳遞信息或指示的裝置”為適用于提供信息、指示、推薦和/或保證等的任意形式的試劑盒組件。這種裝置可包括含有信息的文件、數字儲存媒體、光儲存媒體、音頻展示、視覺顯示。傳遞方式可為顯示的網址、手冊、產品標簽、包裝說明書、廣告、視覺顯不等。
[0109]本發明的描述
[0110]本文顯示，當適當選擇用于通過酶水解動物內臟而制備動物消化物的條件時，可有利地增強寵物食品適口性。這些條件包括如下參數中的至少一者:酶的量、水解持續時間、目標DH值。優選地，適當選擇所有這3個參數以獲得寵物食品適口性的有利水平。
[0111]在圖1所示的第一方面中，本發明涉及一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括:
[0112]a)提供動物內臟；
[0113]b)使所述動物內臟與至少一種堿性肽鏈內切酶接觸；
[0114]c )使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟；
[0115]d)熱處理由此獲得的消化產物以使所述堿性肽鏈內切酶失活；以及
[0116]e)獲得具有增強適口性的所述動物消化物，
[0117]其中:
[0118](i)(參見圖2A)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計約0.017至0.682%的量(E)使用:
[0119]-則步驟c)中的所述水解在約1.5至約5.0小時的時間段(T)過程中進行；且
[0120]-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解程度(DH)，所述DH由等式(I)限定:
[0121]DH=25.5072+0.2104χΕ+16.5265χΤ_2.3666χΤ2-15.6816χΕ2+9.1270χΕχΤ
[0122](ii)(參見圖2Β)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.717至約1.137%的量(E)使用:
[0123]-則步驟c)中的所述水解在約0.25至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且
[0124]-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解程度(DH)，所述DH由等式(2)限定:
[0125]DH=22.9718+43.58χΕ+7.6128χΤ_0.6199χΤ2_21.2226χΕ2+2.3467χΕχΤ
[0126](iii)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.682至0.717%之間的量(E)使用:[0127]-則步驟c)中的所述水解在約1.5至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且
[0128]-在步驟d)之后獲得的消化產物具有優選約50至約70%的水解程度(DH)。
[0129]根據本發明的方法優選還包括在所述步驟a)之后的調節所述動物內臟的pH的步驟al)(圖1)。所述經調節的pH值取決于在本發明的方法中所用的堿性肽鏈內切酶。選擇所述經調節的PH值以有利于或甚至優化酶的水解活性。優選地，進行所述步驟al)以將PH調節至作為根據酶制造者的推薦的最佳pH值或pH范圍的pH值。這對于本領域技術人員是容易顯而易見的。PH可由對于用于寵物食品中是可接受的任何適當的化合物進行調節，如磷酸、苛性鈉、其他常規和適當的酸性或堿性調節劑，以及它們的組合。
[0130]水解的所述步驟c)優選在作為根據酶制造者的推薦的最佳溫度值或溫度范圍的溫度下進行。這屬于本領域常規手段。通常，步驟c)中的溫度為約50至約80°C，優選約55至約75°C，還優選約60至約70°C。
[0131]為了使堿性肽鏈內切酶失活，步驟d)的所述熱處理優選在約5至約60分鐘的時間段過程中在約80至約110°C的溫度下進行。還優選地，所述溫度為約90至約100°C，和/或所述時間段為約15至約45分鐘。
[0132]或者，酶的熱失活的所述步驟d)可有利地適于促進消化產物中的一個或多個熱反應。在這些情況下，本發明的方法的一個實施例還進行將一種或多種美拉德成分添加至所述步驟c)的消化產物中的步驟Cl)。例如，以約0.01至30%，優選0.1至20%，更優選0.1至15%的碳水化合物的濃度，且以約0.01至30%，優選0.01至20%，更優選0.01至15%的氮化合物的濃度添加碳水化合物和/或氮化合物。
[0133]當所述步驟d)使酶失活并使熱反應發生時，適當的溫度選擇為在約70至約130°C，優選約75至約125°C，還優選約80至約120°C的范圍內。該熱處理在足以進一步開發消化產物的風味的時間過程中進行，例如在約15分鐘至約20小時，優選約20分鐘至約10小時，還優選30分鐘至約6小時的時間段過程中。
[0134]優選地，根據本發明的方法還包括在所述步驟d)之后的過濾所得消化產物的步驟dl)(圖1)。可使用常規過濾裝置(如市售旋轉過濾器)進行過濾。有利地，所述過濾可在適當條件下進行，以從消化產物中去除直徑等于或大于約500 μ m，優選大于約400 μ m的粒子。
[0135]優選地，如果不進行步驟dl)或如果步驟dl)和d2)伴隨進行，則根據本發明的方法還包括冷卻得自步驟d)的消化產物的步驟d2)(圖1)。或者，如果步驟dl)在步驟d)之后作為單獨的步驟進行，則步驟d2)由冷卻得自所述步驟dl)的消化產物組成。根據一個實施方案，進行冷卻以達到干燥消化產物的小于或等于約100°C (優選約80至約99°C)的溫度。根據另一實施方案，進行冷卻以達到液體消化產物的小于或等于約45°C (優選25至40°C)的溫度。
[0136]根據如上提供的術語“百分比”的定義，如果不進行步驟dl)和d2)，則酶的量E相對于獲自步驟d)的消化產物的重量表示，且DH在該消化產物上測量。或者，如果步驟dl)和d2)均進行，則E值相對于在步驟d2)(其可與步驟dl)伴隨)結束時獲得的消化產物的重量表示，且DH在該消化產物上測量。還或者，如果僅進行一個步驟dl)或d2)，則E的量相對于在所述進行的步驟dl)或d2)結束時獲得的消化產物的重量表示，且DH在該消化產物上測量。[0137]優選地，根據本發明的方法還包括步驟d3)，所述步驟d3)由將如上定義的一種或多種寵物食品成分添加至消化產物組成，所述消化產物得自:
[0138]-如果在步驟d)之后不進行步驟dl)和d2)，則得自步驟d);或
[0139]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟dl)，則得自步驟dl);或
[0140]-在其他情況中(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨進行)，則得自步驟d2)(圖1)。
[0141]在一個實施方案中，本發明的方法還包括濃縮消化產物的步驟d4)，所述消化產物得自:
[0142]-如果在步驟d)之后不進行步驟dl)、d2)和d3)，則得自步驟d);或
[0143]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟dl)，則得自步驟dl);或
[0144]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟d2)，或如果在步驟d)之后僅進行步驟dl)和d2)(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨)，則得自步驟d2);或
[0145]-在其他情況中，得自步驟d3)(圖1)。
[0146]濃縮步驟d4)可使用常規裝置進行。例如，可使用市售裝置(例如濃縮器)。或者，可將適當比例的如上定義的一種或多種載體添加至消化產物中。有利地進行濃縮以獲得以經濃縮的消化產物重量計約5至約80%，優選約10至約70%，還優選約20至約60%的干物
質含量。
[0147]當步驟d)或dl)或d2)或d3)或d4)之后為步驟e)時，則所述方法有利地在步驟e)之前包括步驟d5)，所述步驟d5)由冷凍得自步驟d)、dl)、d2)、d3)和d4)中的在后步驟的消化產物組成(圖1)。冷凍通常盡可能迅速地進行以達到約-20°C的中心溫度。可使用常規冷凍裝置，如板式深凍機。
[0148]在一個實施方案中，本發明的方法還包括干燥消化產物的步驟d6)，所述消化產物得自:
[0149]-如果在步驟d)之后不進行步驟dl)、d2)、d3)和d4)，則得自步驟d);或
[0150]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟dl)，則得自步驟dl);或
[0151]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟d2)，或如果在步驟d)之后僅進行步驟dl)和d2)(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨)，則得自步驟d2);或
[0152]-如果步驟d3)為在步驟d)之后或在步驟dl)之后或在步驟d2)之后(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨)進行的僅有步驟，則得自步驟d3);或
[0153]-在其他情況中，得自步驟d4)(圖1)。
[0154]進行干燥步驟d6)以去除任何過量的水。特別地，所得水含量以由此獲得的干燥消化產物的重量計小于或等于約10%，優選為約I至約8%。例如，通過以適當的比例組合得自步驟d)或dl)或d2)或d3)或d4)的消化產物與如上定義的載體，并通過共混所述組分，而獲得干燥消化產物。然后通過蒸發干燥混合物，并獲得干燥消化產物。
[0155]特別地，當根據本發明的方法至少包括步驟a)、b)、c)、d)和e)和任選的選自al)、cl)、dl)、d2)、d3)和d4)中的至少一個步驟，且不包括步驟d5)和d6)時，由此獲得的具有增強適口性的動物消化物為液體(圖1)。明顯的是，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法可包括除了冷凍步驟d5)和干燥步驟d6)之外的任何步驟。優選地，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法不包括步驟d4)、d5)和d6)。還優選地，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法包括步驟a)、al)、b)、C)、Cl)、d)、dl)、d2)、d3)和e)，且不包括步驟d4)、d5)和d6)。甚至更優選地，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法由步驟a)、al)、b)、C)、、cl)、d)、dl)、d2)、d3)和e)組成。
[0156]還特別地，當根據本發明的方法至少包括所述步驟a)、b)、C)、d)、d5)和e)和任選的選自al)、Cl)、dl)、d2)、d3)和d4)中的至少一個步驟，且不包括步驟d6)時，由此獲得的具有增強適口性的動物消化物為冷凍的(圖1)。明顯的是，為了獲得具有增強適口性的冷凍動物消化物，所述方法包括冷凍步驟d5)，且不包括步驟d6)。優選地，為了獲得具有增強適口性的冷凍動物消化物，所述方法包括步驟a)、al)、b)、c)、cI)、d)、dl)、d2)、d3)、(14)、(15)和6)，且不包括步驟(16)。還優選地，為了獲得具有增強適口性的冷凍動物消化物，所述方法由步驟 8)、81)、13)、(3)、(31)、(1)、(11)、(12)、(13)、(14)、(15)和6)組成。
[0157]還特別地，當根據本發明的方法至少包括所述步驟a)、b)、C)、d)、d6)和e)和任選的選自al)、Cl)、dl)、d2)、d3)和d4)中的至少一個步驟，且不包括步驟d5)時，由此獲得的具有增強適口性的動物消化物為干燥的(圖1)。明顯的是，為了獲得具有增強適口性的干燥動物消化物，所述方法包括干燥步驟d6)，且不包括步驟d5)。優選地，為了獲得具有增強適口性的干燥動物消化物，所述方法包括步驟3)、&1)、13)、(3)、(31)、(1)、(11)、(12)、(13)、
(14)、(16)和6)，且不包括步驟(15)。還優選地，為了獲得具有增強適口性的干燥動物消化物，所述方法由步驟 8)、81)、13)、(3)、(31)、(1)、(11)、(12)、(13)、(14)、(16)和6)組成。
[0158]根據本發明的具有增強適口性的動物消化物(如在所述步驟e)中獲得)滿足PE的如上定義。該動物消化物可通常以以最終寵物食品重量計約0.01至約80%，優選約0.01至約60%，更優選約0.01至約40%，甚至更優選約0.01至約20%的比例直接原樣使用。或者，其可與一種或多種其他適口性增強組合物成分，特別是其他PE組合，且所有成分或所有PE可伴隨或連續應用。
[0159]在本發明的方法中，使用肽鏈內切酶，優選堿性肽鏈內切酶。用于本文的更特別適當的肽鏈內切酶為alcalase(無對應中譯文)型蛋白酶。可在本文使用的市售可得的酶的非限制性的例子為:Alcalase (諾維信，Bagsvaerd,DK)、P1.0tcx' (Danisco Genencor,Hanka,
Fl )、Food Pro* 堿(Danisco Genencor)、復合蛋白酶(Protemax) (Prozyn, Sao paulo, BR)和 Proleather (無對應中譯文)(Amano, Nishiki, JP)。
[0160]本發明的方法的有利的實施方案如下:
[0161]?在 i)中:
[0162]-所述量E為以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計約0.02至0.682%，優選約0.03至0.682%,還優選約0.05至0.682% ;和/或
[0163]-所述時間段T為約1.5至約4小時，優選約1.5至約3.5小時，還優選約1.5至約3小時；和/或
[0164]-所述DH為約50至約70%，優選約55至約65%；
[0165]?在 ii)中:
[0166]-所述量E為以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.717至約1.12%，優選
0.717至約1.1%，還優選0.717至約1.05% ;和/或
[0167]-所述時間段T為約0.5至約3.5小時，優選約I至約3小時，還優選約I至約2.5小時；和/或[0168]-所述DH為約50至約70%，優選約55至約65%；
[0169]?在 iii)中:
[0170]-所述時間段T為約1.5至約3.5小時，優選約1.5至約3小時，還優選約2至約3小時；和/或
[0171 ]-所述DH為約55至約70%，優選約55至約65%。
[0172]在本發明的方法中，使用OPA (O-酞二醛)_基方法(如在以下實施例中所述)確定DH值。
[0173]優選地，在本發明的方法中所用的內臟選自家禽、豬(pork)、牛(beef)、羔羊、綿羊、魚類和它們的組合的內臟。魚類內臟更優選地選自金槍魚、鮭魚、鱈魚、狗鱈、沙丁魚、蝦、魷魚和它們的組合的內臟。
[0174]在另一方面，本發明涉及一種可通過如本文所述的方法獲得的具有增強適口性的動物消化物。特別地，該動物消化物為干燥的或液體或冷凍的。
[0175]本發明的又一方面還涉及一種用于寵物食品的適口性增強組合物，其包含至少一種如上公開的具有增強適口性的動物消化物，和如上定義的一種或多種其他適口性增強組合物成分，如特別是如上所述的美拉德反應所得產物和/或無機磷酸鹽化合物和/或微生物蛋白質和/或動物蛋白和/或蔬菜蛋白和/或碳水化合物。
[0176]在所述適口性增強組合物中的美拉德反應所得產物的含量優選為以組合物重量計約0.01至99%，還優選約0.05至95%，更優選約0.1至90%，還更優選約0.2至85%，甚至更優選約0.5至80%。
[0177]在本文提供的適口性增強組合物中，所述無機磷酸鹽化合物優選以組合物重量計約0.01至75%，還優選約0.05至70%，更優選約0.1至65%，還更優選約0.25至60%的量存在。
[0178]所述無機磷酸鹽化合物優選選自磷酸、焦磷酸鹽、單磷酸鹽、多磷酸鹽和它們的組
口 ο
[0179]根據本發明的優選的無機磷酸鹽化合物為選自如下的焦磷酸鹽化合物:焦磷酸二鈉、焦磷酸三鈉、焦磷酸四鈉、焦磷酸二鉀、焦磷酸三鉀、焦磷酸四鉀、焦磷酸四鐵和它們的組合。一個更特別優選的焦磷酸鹽化合物為焦磷酸三鈉。
[0180]用于本發明的一個優選的焦磷酸鹽化合物為三多磷酸鈉。
[0181 ] 根據本發明的適口性增強組合物可為干燥的或液體或冷凍的。
[0182]本發明的又一方面還涉及一種用于增強寵物食品的適口性，或換言之用于制備具有增強適口性的寵物食品的方法，其中所述方法包括:
[0183]a)將如上定義的具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物添加至寵物食品制劑或混合物中；以及
[0184]b)獲得具有增強適口性的寵物食品。
[0185]諸如粗粒的干燥寵物食品通常可通過不同的方法制得。廣泛使用的這些方法中的一種為熱煉-擠出機(cooker-extruder)法。在熱煉-擠出機法中，首先將成分共混在一起以形成混合物。將該混合物轉移至回潮機(steam conditioner)中,所述混合物在回潮機中充分變潮濕而變得可擠出。然后該混合物進入熱煉-擠出機，在熱煉-擠出機中在高溫和高壓下熱煉所述混合物，然后迫使其通過模頭離開裝置。該模頭使擠出產物成型為具體形狀。通過周期性切掉產物的擠出流的端部而產生單獨的食品片。然后在熱風干燥器中干燥單獨的片。通常干燥產物直至其含有少于15%的水分，優選約4至10%的水分。然后通過散裝材料傳送機將經干燥的粒子或片轉移至涂布機，并用脂肪噴射。可將其他液體(例如磷酸)可選擇地施用至片，或者在脂肪之外施用。所得丸粒或粗粒構成基礎寵物食品制齊U，使用本發明的具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物來增強所述基礎寵物食品制劑的適口性。
[0186]肉汁基或凝膠基的潮濕寵物食品可通過如下方式制得:研磨肉類、肉類模仿物、肉類副產物、碳水化合物和/或谷物、質地化試劑，并經由低壓擠出形成研磨混合物，然后通過蒸汽通道熱煉。在通道出口處，將混合物切削成片。將肉汁型或凝膠型基質添加至所得片，然后在罐或小袋中密封并甑餾，以獲得在肉汁中的塊狀或在凝膠中的塊狀食品。
[0187]并非肉汁基或凝膠基的潮濕寵物食品可通過如下方式制得:研磨肉類、肉類模仿物、肉類副產物、碳水化合物和/或谷物，并與水和質地化試劑混合。然后，將全部混合物密封于罐中并甑餾，以獲得肉糕。
[0188]因此可取決于寵物食品、具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物，或者通過將所述具有增強適口性的動物消化物和/或所述適口性增強組合物摻入或包含至寵物食品制劑或混合物中，或者通過使用所述具有增強適口性的動物消化物和/或所述適口性增強組合物涂布所述寵物食品制劑或混合物，從而進行上述添加步驟a)。
[0189]例如，可引用用于涂布干燥寵物食品(如粗粒)的方法。可將未經涂布的、擠出的基礎寵物食品的粗粒置于容器(如桶或涂布機)中以用于混合。加熱脂肪(如豬脂或家禽脂肪)，然后以獲得粗粒的涂層的方式將其噴射至寵物食品上。涂層無需為連續層，但優選為均勻的。在脂肪之后，適口性增強組合物可施用作為液體或干粉，且同時混合產物。通常噴射具有增強適口性的液體動物消化物和/或液體適口性增強組合物，而通常撒粉具有增強適口性的干燥動物消化物和/或干燥適口性增強組合物。或者，具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物可與脂肪混合，并同時施用。還或者，在沉積脂肪之前涂布具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物。
[0190]或者，可根據如下方法將具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物摻入或包含至寵物食品制劑中。在熱煉之前，使具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物與寵物食品制劑的粗成分接觸。在此情況中，具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物組合至基礎食品制劑的蛋白質、纖維、碳水化合物和/或淀粉等，并在熱煉-擠出機中與那些材料一起熱煉。
[0191]可如下實現包含至潮濕寵物食品中。除了其他寵物食品成分之外，具有增強適口性的液體或干燥或冷凍動物消化物和/或液體或干燥或冷凍適口性增強組合物可在共混過程中施用至肉汁型或凝膠型基質。具有增強適口性的液體或干燥或冷凍動物消化物和/或液體或干燥或冷凍適口性增強組合物也可施用至用于塊狀或肉糕制劑的肉類(meat-by)混合物中。在此情況中，其可在研磨過程之前或之后添加至原料中。在塊狀制造的情況中，所述肉類混合物可在蒸汽或燒烤烘箱中熱煉，或者在肉糕制造的情況中，所述肉類混合物可直接密封于罐中。
[0192]本發明的PE可用于寵物食品(如含有適當的寵物食品成分(包括蛋白質、纖維、碳水化合物和/或淀粉等)的營養均衡混合物)中。這種混合物對于本領域技術人員而言是公知的，且它們的組成取決于許多因素，例如具體類型的寵物所需的食物平衡。另外的寵物食品成分可包括維生素、礦物質、調味品、防腐劑和表面活性劑。根據獸醫領域中的已知膳食標準，例如通過國家研究委員會(NRC)的如下推薦或美國飼料管制協會(AAFCO)的指導方針，來確定食物均衡，包括維生素、礦物質、脂類、蛋白質和碳水化合物的相對比例。
[0193]根據另一方面，本發明涉及一種具有增強適口性的寵物食品，其包含寵物食品混合物和如上所述的至少一種具有增強適口性的動物消化物和/或至少一種適口性增強組合物。
[0194]優選地，所述寵物食品可通過前述制備方法獲得。
[0195]優選地，所述寵物食品選自濕潤的營養均衡寵物食品、干燥營養均衡寵物食品、半潮濕營養均衡寵物食品、補充劑、零食和玩具。
[0196]濕潤營養均衡寵物食品優選選自:在凝膠中的塊狀食品、在肉汁中的塊狀食品、肉糕和湯。
[0197]干燥營養均衡寵物食品優選為粗粒。
[0198]優選地，所述寵物食品為貓食或狗食。
[0199]本發明的另一方面涉及一種用于喂養寵物的方法，其至少包括:
[0200]a)提供如上公開的寵物食品；以及
[0201]b)將所述寵物食品喂養至寵物。
[0202]優選地，所述寵物選自貓和狗。
[0203]本發明的又一方面還涉及一種用于增強寵物食品的適口性的試劑盒，其在單個包裝中的一個或多個容器中包括:
[0204]-如上所述的至少一種具有增強適口性的動物消化物和/或至少一種適口性增強組合物；
[0205]-任選的至少一種寵物食品成分；
[0206]-任選的用于傳遞有關使用所述具有增強適口性的動物消化物和/或所述適口性增強組合物和任選的所述寵物食品成分的信息或指示的裝置。
[0207]上述的具有增強適口性的動物消化物和適口性增強組合物提供了相比于現有技術顯著的優點。本發明的效果可通過通常稱為“雙碗測試”或“對抗測試”的測試進行測量。當然，本領域技術人員可自由使用除了下文所述的雙碗測試之外的任何其他適當的測試來測定偏好。這種可供選擇的測試是本領域已知的。
[0208]參照如下實施例進一步描述本發明，所述實施例僅以說明的目的呈現，而不旨在限制本發明的范圍。
[0209]實施例
[0210]A-DH測量方法(描沭于Nielsen等人，2001):
[0211]在蛋白水解產物中，監測反應的關鍵參數為水解度(DH)。DH定義為分裂的肽鍵的百分比:
[0212]DH=h/htotxl00%
[0213]其中ht(rt為每蛋白質當量的肽鍵總數，且h為水解的鍵的數目，h根據下式以絲氨酸-NH2的當量表示，因為絲氨酸顯示接近所有氨基酸的平均的響應:
[0214]h=(絲氨酸 ΝΗ2_β )/a meq/g 蛋白質[0215]食品蛋白質的大多數具有提供htot=8的125g/mol的氨基酸分子量的平均值，可適于肉類的7.6的值和魚類的8.6的值，α和β值對于肉類和魚類分別設定為1.00和0.40。
[0216]A-1-原理:
[0217]每個水解肽鏈產生游離的氨基。那些氨基與OPA反應而形成黃色絡合物，所述黃色絡合物隨后在340nm下在分光光度法中進行測量。光密度隨絡合物數目而變化。
[0218]方法則由如下組成:測量h值，然后測量水解產物的絲氨酸當量值，且比較在記錄的水解產物中形成的有色絡合物與在絲氨酸標樣(具有空白校正)中形成的絡合物的水平。
[0219]A-2-裝置:
[0220]錐形燒瓶，4小數位分析天平。移液管:適于體積。磁力攪拌器、渦流、分光光度計在 340nm。
[0221 ] A~3 -試劑:
[0222]OPA試劑在200ml燒瓶中如下制得:將7.620g四硼酸二鈉十水合物和200mg十二烷基硫酸鈉(SDS)溶解于150mL去離子水中。在繼續之前，試劑必須完全溶解。將160mg0PA97%溶解于4mL乙醇中。然后通過用去離子水沖洗，將OPA溶液定量轉移至上述溶液中。通過用去離子水沖洗，將176mg 二硫蘇糖醇99% (DTT)添加至溶液中。使用去離子水使溶液達到200mL。
[0223]通過將50mg絲氨酸溶解于500mL去離子水(0.9516meqv/L)中而制得絲氨酸標樣。
[0224]通過將200mg溶解于IOOmL去離子水中而制得樣品溶液。
[0225]A-4 -測量:
[0226]將3ml OPA置于6個微分光管。然后添加400 μ L水(空白)、絲氨酸標樣或樣品，在相同的+2分鐘反應時間完成測量。對于每個樣品，進行空白、然后兩個標樣測量、然后3個樣品測量。
[0227]在20°C下實現分析。
[0228]標樣和水空白的典型吸光度讀數分別為0.8和0.07。
[0229]A-5-h 和 DH 的測定
[0230]絲氨酸-NH2=(0D 樣品-OD 空白/OD 標樣-OD 空白)x0.9516meqv/Lx0.1χ100/ΧχΡ
[0231]其中絲氨酸-NH2=meqv絲氨酸NH2/g蛋白質；X=g樣品；P=樣品中的蛋白質％ ;0.1為以升(L)計的樣品體積。
[0232]h則為:h=(絲氨酸-ΝΗ2_β )/a meqv/g蛋白質,其中α和β如上給出。
[0233]DH 的計算:DH=h/ht()txlOO%。
[0234]B-使用“雙碗”測試的適口性評價:
[0235]B-1 -雙碗測試的原理:
[0236]測試基于如下假設:食品消耗得越多，則其越具適口性。
[0237]基于兩種食品之間的比較，進行單獨相對于(雙碗)癖好測試。取決于測試目的，對36條狗的組和40只貓的組進行測試。
[0238]B-2-測試的操作方法:
[0239]-稱量相同量的食品A和食品B，并置于相同的碗中。每個配給中存在的量能夠滿足每日需求。
[0240]-碗的分布:[0241]狗測試:將碗置于狗可到達的單獨的喂食器中。
[0242]貓測試:將碗同時呈現給單獨的放飼廄中的每只貓，在每一餐時交換碗的位置以避免由偏手性導致的選擇。
[0243]-測試持續時間:
[0244]*干燥食品的貓測試:約15分鐘至約20小時(如果在測試結束之前兩個碗中的一者被完全吃完，則移出兩個碗，停止測試);
[0245]*濕潤食品的貓測試:約15分鐘至約30分鐘(如果在測試結束之前兩個碗中的一者被完全吃完，則移出兩個碗，停止測試);
[0246]*狗測試:約15分鐘至約30分鐘(如果在測試結束之前兩個碗中的一者被完全吃完，則移出兩個碗，停止測試)。研究參數。
[0247]-測得的參數:首先消耗的食品(“初始吸引力”)和在測試結束時所消耗的每個食品的量；[0248]-計算的參數:以％計的單獨消耗比例(CR)
[0249]CRa=A 的消耗(g) XlOO/ (A+B 的消耗)(g)
[0250]CRb=B 的消耗(g) XlOO/ (A+B 的消耗)(g)；
[0251 ] O平均消耗比例(ACR)=所有單獨的比例的平均(賦予每個動物相等的重要性,而無論其尺寸或其相應的消耗如何)。
[0252]如果相比于預定值(其隨例如動物重量和/或新陳代謝而變化)，動物具有更高或更低的消耗，則不將它們考慮進統計處理。
[0253]B-3-統計分析:
[0254]使用統計分析來確定是否2個比例之間存在顯著差異。進行具有3個誤差閾值(SP5%、1% 和 0.1%)的 Student t 測試。
[0255]使用卡方檢驗(Ch1-square test)來確定以食品A作為首先食用的食品的寵物數量與以食品B作為首先食用的寵物數量之間是否存在顯著差異。
[0256]顯著水平如下所述:
[0257]NS 不顯著(ρ>0.05)
[0258]* 顯著(ρ〈0.05)
[0259]** 非常顯著 (ρ〈0.01)
[0260]林* 極非常顯著(ρ〈0.001)
[0261]C-本發明的實施方案的實施例:
[0262]用以說明本發明的本文公開的實施例涉及兩種適口性配置。
[0263]在實施例1中，如下3個參數(堿性肽鏈內切酶的量(Ε)、水解時間(T)和DH值)的變化允許獲得不同的動物消化物，比較所述不同的動物消化物的適口性。
[0264]在實施例2至4中，選擇堿性肽鏈內切酶的量E和動物內臟的水解時間T的一個特定組合，并在適口性測試中與使用中性肽鏈內切酶所獲得的類似的動物消化物進行比較。
[0265]實施例1:
[0266]在該實施例中，根據不同的水解條件制得不同的干燥動物消化物。根據圖1制得所有干燥動物消化物。液體消化產物A的配方描述于下表1中:
[0267]表1
【權利要求】
1.一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括: a)提供動物內臟； b)使所述動物內臟與至少一種堿性肽鏈內切酶接觸； c)使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟； d)熱處理由此獲得的消化產物以使所述堿性肽鏈內切酶失活；以及 e)獲得具有增強適口性的所述動物消化物， 其中: (i)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計約0.017至0.682%的量(E)使用: -則步驟c)中的所述水解在約1.5至約5.0小時的時間段(T)過程中進行；且-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解度(DH)，所述DH由等式(I)限定:
DH=25.5072+0.2104χΕ+16.5265χΤ_2.3666χΤ2-15.6816χΕ2+9.1270χΕχΤ (ii)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.717至約 1.137%的量(E)使用: -則步驟c)中的所述水解在約0.25至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解度(DH)，所述DH由等式(2)限定:
DH=22.9718+43.58χΕ+7.6128χΤ_0.6199χΤ2_21.2226χΕ2+2.3467χΕχΤ
(--)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.682至0.717%之間的量(E)使用: -則步驟c)中的所述水解在約1.5至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且 -在步驟d)之后獲得的消化產物具有優選約50至約70%的水解度(DH)。
2.根據權利要求1所述的方法，其還包括在所述步驟a)之后的調節所述動物內臟的pH的步驟al)。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其還包括將一種或多種美拉德成分添加至所述步驟c)的消化產物中的步驟Cl)。
4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其中所述步驟d)適于促進得自所述步驟c或Cl)的消化產物中的一個或多個熱反應。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其還包括過濾得自步驟d)的消化產物的步驟dl)。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其還包括冷卻得自所述步驟d)和dl)中的在后步驟的消化產物的步驟d2)。
7.根據權利要求6所述的方法，其中所述步驟d2)與所述步驟dl)伴隨，所述步驟dl)和d2)在得自步驟d)的消化產物上進行。
8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述量E以獲自所述步驟d)或dl)或d2)的消化產物的重量計，且其中所述DH為獲自所述步驟d)或dl)或d2)的所述消化產物所具有。
9.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其還包括將一種或多種寵物食品成分添加至得自所述步驟d)、dl)和d2)中的在后步驟的消化產物中的步驟d3)。
10.根據權利要求1至9中任一項所述的方法，其還包括濃縮得自所述步驟d)、dl)、d2)和d3)中的在后步驟的消化產物的步驟d4)。
11.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其還包括冷凍得自所述步驟d)、dl)、d2)、d3)和d4)中的在后步驟的消化產物的步驟d5)。
12.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其還包括干燥得自所述步驟d)、dl)、d2)、d3)和d4)中的在后步驟的消化產物的步驟d6)。
13.—種通過根據權利要求1至12中任一項所述的方法獲得的具有增強適口性的動物消化物。
14.一種包含寵物食品混合物和根據權利要求13所述的至少一種動物消化物的具有增強適口性的寵物食品。
15.一種用于制備根據權利要求14所述的具有增強適口性的寵物食品的方法，其中將所述動物消化物摻入所述寵物食品混合物中。
16.一種用于制備根據權利要求14所述的具有增強適口性的寵物食品的方法，其中使用所述動物消化物涂布所述寵物食品混合物。
【文檔編號】A23K1/18GK103841836SQ201280048117
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2012年10月3日 優先權日:2011年10月3日
【發明者】A·德拉托 申請人:特種寵物食品公司
【專利摘要】本發明涉及一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括：a）提供動物內臟；b）使所述動物內臟與適當量的至少一種堿性肽鏈內切酶接觸；c）使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟達合適的時間段；d）熱處理由此獲得的消化產物，以使所述堿性肽鏈內切酶失活；和e）獲得具有適當的水解度并顯示出增強適口性的所述動物消化物。本發明也涉及可通過這種方法獲得的具有增強適口性的動物消化物，以及其用于制備具有增強適口性的寵物食品的用途。
【專利說明】用于寵物食品中的具有增強的適口性的動物消化物
【技術領域】
[0001]本發明涉及寵物食品領域。更具體地，本發明涉及用于寵物食品中的適口性增強的動物消化物。
【背景技術】
[0002]蛋白水解物為寵物食品的標準組分，其通常將適口性賦予寵物食品。
[0003]蛋白水解通常可通過物理(加熱或剪切)或化學(酸或酶)方式實現。然而，酶水解為在食品工業中用于水解蛋白質的最廣泛的方法，特別是因為酶能夠獲得用于營養和/或感官目的的感興趣的水解物(或消化物)。
[0004]蛋白水解酶為蛋白酶或肽酶，蛋白酶或肽酶可被辨別:
[0005]-基于在酶的活性位點機理中涉及的關鍵氨基酸:絲氨酸、羧基、氫硫基或金屬，和/或
[0006]-通過它們處于活性的相對pH范圍:酸性、中性或堿性；和/或
[0007]-基于它們的水解能力:內切蛋白酶或肽鏈內切酶在蛋白質或肽的內部的氨基酸之間切斷，而外切蛋白酶或肽鏈端解酶在蛋白質或肽的端部分裂氨基酸。
[0008]作為常見內切蛋白酶的例子，可提及:作為高特異性內切蛋白酶的凝乳酶；具有相對較寬的特異性，但優選分裂涉及Phe、Met、Leu和Tryp殘基的鍵的胃蛋白酶；中性蛋白酶，如作為分裂Arg或Lys殘基與隨后的氨基酸之間的鍵的高特異性內切蛋白酶的胰蛋白酶；作為非特異性的氫硫基肽鏈內切酶的木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶；堿性蛋白酶，如完全非特異性的枯草桿菌蛋白酶等。
[0009]在食品工業中，公知的是蛋白水解影響生物、物理和化學性質以及食品加工，且這可能是有利的或不利的。在一方面，由于低分子量分布，水解通常改進溶解度以及耐熱性和耐PH性。在另一方面，水解通常增加摩爾滲透壓濃度并降低化學穩定性。此外，取決于酶、蛋白質源和/或反應條件，可能由于例如產生苦的肽而降低適口性。因此有必要適當確定酶、蛋白質源和反應條件(例如酶濃度和反應時間)，以獲得所得消化物的特定技術效果。
[0010]寵物食品制造者通常使用家畜的肝臟或內臟和動物副產物作為寵物食品生產中的蛋白質源。在內臟中，一些(例如腸)有利地富含蛋白水解酶，使得它們需要極少(如果有的話)的另外的蛋白酶以用于水解蛋白質。當使用動物器官作為蛋白質源時，也有可能利用內生蛋白水解酶。然而，在這些酶中，夕卜切蛋白酶通常過高表示(highly represented)而不能制得適當的消化物。因此，肉類來源通常被研磨，并用適當選擇的酶進行處理以提供高產率的調味肽。另外，由于寵物種類之間的口味偏好不同，因此寵物食品制造者需要選擇能夠獲得高產率的具有所需適口性性質的消化物的酶、蛋白質源和水解條件。除了優化適口性之外，所選的蛋白酶應該適于“友好的”加工條件，如分別有助于限制制造成本并防止細菌生長的適中的酶濃度以及溫度范圍。
[0011 ] 在寵物食品工業中，適口性增強劑(PE)對于動物消耗而言是非常有用的(如果不是必要的話)。許多寵物，特別是貓，可能甚至拒絕食用未經PE處理的擠壓的寵物食品。寵物食品通常含有調味組合物以增加其適口性，并使其吸引寵物。
[0012]PE為可單獨使用或組合使用的液體或干燥組合物。一些PE施用至寵物食品的外表面(涂層)，而其他PE摻入寵物食品材料中(內含物)。
[0013]調味蛋白水解物被廣泛用作PE。例如，以N0.W02011/043828公布的國際專利申請公開了增強可用作PE的動物消化物的適口性的方法。這些方法包括將抗膠凝劑添加至動物消化物，同時將PH調節至用于水解內臟蛋白質的蛋白酶的最佳值。而且，以N0.W02009/095417公布的國際專利申請描述了通過使用PE而增強寵物食品的適口性的方法，所述PE通過使用蛋白酶和脂酶的水解的連續步驟制得。
[0014]然而，持續努力開發改進寵物食品的適口性并同時保持其營養價值的加工和配方。
【發明內容】
[0015]本發明涉及一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括:
[0016]a)提供動物內臟；
[0017]b)使所述動物內臟與適當量的至少一種堿性肽鏈內切酶接觸；
[0018]c)使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟達到合適的時間段；
[0019]d)熱處理由此 獲得的消化產物以使所述堿性肽鏈內切酶失活；以及
[0020]e)獲得具有適當的水解度并顯示增強的適口性的所述動物消化物。
[0021]本發明也涉及可通過這種方法獲得的具有增強適口性的動物消化物，以及其用于制備具有增強適口性的寵物食品的用途。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0022]參照如下【專利附圖】
【附圖說明】本發明:
[0023]圖1:表示根據本發明的方法的各個實施方案的流程圖。必要步驟a)、b)、C)、d)和e)以實線表示；任選的步驟al)、cl)、dl)、d2)、d3)、d4)、d5)和d6)以虛線表示。
[0024]圖2:隨堿性肽鏈內切酶的量(E)和水解反應的時間(T)而變化的水解度(DH)的圖形表示。
[0025]?圖 2A:等式(I):
[0026]DH=25.5072+0.2104χΕ+16.5265χΤ_2.3666χΤ2-15.6816χΕ2+9.1270χΕχΤ
[0027]?圖 2Β:等式(2):
[0028]DH=22.9718+43.58χΕ+7.6128χΤ_0.6199χΤ2_21.2226χΕ2+2.3467χΕχΤ。
【具體實施方式】
[0029]定義
[0030]除非另外具體指出，否則百分比在本文以在本發明的方法的熱處理步驟d)之后獲得的液體消化產物的重量表示。該液體消化產物得自所述步驟d)。或者，如果步驟d)之后為過濾步驟dl)，則百分比以獲自所述步驟dl)的液體消化產物的重量表示。又或者，如果步驟d)或dl)之后為冷卻步驟d2)，則百分比以獲自所述步驟d2)的液體消化產物的重量表示(參見圖1)。[0031]在本公開中，范圍以簡寫描述，以避免不得不冗長陳述和描述范圍內的每一個值。當適當時，可選擇范圍內的任何適當的值作為范圍的上限值、下限值或端值。例如，0.1-1.0的范圍表示0.1和1.0的端值，以及0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9的中間值，和涵蓋于0.1-1.0內的所有中間范圍，如0.2-0.5,0.2-0.8,0.7-1.0等。
[0032]如在全文所用，詞語的單數形式包括復數，反之亦然，除非上下文明確相反表示。因此，引述“一種”和“所述”通常包括各自術語的復數。例如，引述“一種方法”或“一種食品”包括多個這種“方法”或“食品”。類似地，應當包含地解釋詞語“包含(comprise、comprises和comprising)”。同樣地,術語“包括(include、including)”和“或(or)”應當解釋為包含的。然而，所有這些術語必須考慮為涵蓋排他的實施方案，所述排他的實施方案也可使用諸如“由……組成”的詞語提及。
[0033]本文示例的方法和組合物和其他實施方案不局限于本文描述的特定的方法學、方案和試劑，因為如本領域技術人員將了解，它們可變化。
[0034]除非另外定義，否則本文所用的所有技術和科學術語、技術術語和縮略詞具有本發明的領域或術語所用的領域的技術人員所通常理解的含義。盡管類似于或等同于本文描述的那些的任何組合物、方法、制品或其他方式或材料可用于實施本發明，但是本文描述優選的組合物、方法、制品或其他方式或材料。[0035]當提及可測量的值(如含量、時距等)時如本文所用的術語“約”意在涵蓋指定值的土 10%，更優選±5%，甚至更優選±3%的變化，因為這種變化適于重現所公開的方法和產
品O
[0036]術語“適口性”意指相對于另一種食品組合物，動物對一種食品組合物的相對偏好。適口性指動物食用某種食品的總體意愿。有利地但并非必要地，適口性還指所食用的食品滿足動物的能力。每當動物例如對兩種或更多種食品中的一種顯示出偏好時，偏愛的食品更“可口”，并具有“增強的適口性”。相比于一種或多種其他食品，一種食品的相對適口性可以例如通過食品的相對消耗或表示適口性的偏好的其他適當量度，例如在并排、自由選擇比較中確定。其可有利地通過標準測試方案(如稱為“雙碗測試(two-bowl test)”或“對抗測試(versus test)”的測試(參見如下))確定，在所述標準測試方案中，動物具有接近兩種組合物的相等機會。這種偏好可源自動物感覺中的任意者，但通常特別地與味道、香味、風味、質地、氣味和/或口感相關。
[0037]本文表示為具有“增強適口性”的寵物食品為相對于對照組合物，寵物顯示出偏好的一種寵物食品。有利地，具有增強適口性的寵物食品不僅對寵物，還對寵物所有者是有吸引力或合意的。
[0038]術語“適口性增強劑(PE)”、“增味劑(palatant)”、“調味劑”、“適口性試劑”、“開胃因素”、“調味組合物”、“適口性增強組合物”、“風味增強劑”和任何其他類似的術語意指增強食品組合物對于動物的適口性的任何材料。PE可為單個材料或材料的共混物，其可為天然的、加工的或未加工的、合成的，或部分天然和部分合成的材料。通常，用于動物食品的PE為提供對于目標動物有吸引力或合意的香味、味道、回味、氣味、口感、質地和/或感官感覺的可食用組合物。
[0039]例如，PE可通過其氣味而貢獻初始食品吸引力，和/或不僅通過其氣味，還通過其味道和/或其回味和/或其口感和/或其質地而貢獻連續消耗。“初始吸引力”為誘導動物最初品嘗或嘗試食品的適口性的一方面，其可通過標準“第一選擇”或“第一消耗食品”而估量。“持續消耗”為誘導動物持續消耗最初僅品嘗或嘗試的食品的適口性的一方面。
[0040]術語“動物”在一般意義上使用，并意指基于可食用組合物的適口性可以選擇可食用組合物的人類或其他動物，包括鳥類、牛類、犬類、馬類、貓類、狼類、鼠類、羊類和豬類動物，因此涵蓋寵物。
[0041]本發明優選涉及寵物。
[0042]術語“寵物”和“同伴動物”為同義的，并意指包括但不限于貓、狗、兔、豚鼠、雪貂、
倉鼠、老鼠、沙鼠、鳥、馬、牛、山羊、綿羊、驢、豬等的任何家養動物。
[0043]在本發明的上下文中，優選諸如狗和貓的寵物。然而，盡管本公開集中于狗和貓，但本發明可適用于其他類別的同伴動物。如果需要，可測試本發明，以評價其用于可被認為是同伴動物的不同類別的動物的適合性。
[0044]如本文所用，術語“食品”意指旨在用于被動物攝取，并為動物提供至少一種營養物的產品或組合物。術語“食品”包括任何食品、飼料、點心、食品補充劑、零食(treat )、玩具(可咀嚼和/或可消耗玩具)、膳食替代品或膳食代用品。“食品”涵蓋任何形式、固體、液體、凝膠或它們的混合物或組合的這種產品。因此，任意類型的飲料明確涵蓋于術語“食品”內。
[0045]術語“寵物食品”意指旨在被寵物消耗的組合物。
[0046]取決于寵物食品的水分含量(其為低的、中等的或高的)，存在三種主要類別或級別的寵物食品:
[0047]-干燥或含低水分的產品(具有小于約15%的水分):當寵物咀嚼時，它們通常產生嘎扎嘎扎的聲音；它們通常為高營養的，可被便宜地包裝(例如在袋中或盒子中)，并非常便于儲存和使用；然而，它們通常適口性最差；
[0048]-罐裝或濕潤或含高水分的產品(具有超過約50%的水分):通常為高肉含量產品，它們通常被認為是對寵物最具適口性；它們通常制造和包裝(主要在罐中)昂貴；
[0049]-半濕或半干或柔軟干燥或柔軟潮濕或含中級或中等水分的產品(具有約15至約50%的水分):通常包裝于適當的袋或盒子中，它們通常比罐裝食品適口性差，但比干燥食品適口性好。
[0050]營養均衡的寵物食品在本領域中廣泛已知和使用。
[0051]“營養全面”、“營養均衡”或“全面營養均衡食品”為含有用于食品預期的接受者或消費者的具有例如基于同伴動物營養領域的認可或主管當局的推薦的適當量和比例的全部已知所需的營養物的食品。因此，這種食品能夠用作膳食攝取的唯一來源以維持生命或促進生產，而無需添加補充營養源。
[0052]本文所用的術語“粗粒”指通過造粒或擠出方法形成的顆粒塊或片。通常，制備粗粒以提供干燥和半濕寵物食品。取決于方法或設備，片的尺寸和形狀可不同。例如，粗粒可具有球形、圓柱形、橢圓形或類似的形狀。它們可具有例如小于約2cm的最大尺寸。
[0053]術語““X”中的塊狀產品(ChUnk-1n-〃X〃piOdUCt)”在本文意指在制劑(所述制劑為“X制劑”)中包含塊狀的所有可食用食品。其經典例子為在凝膠中的塊狀產品、在肉汁中的塊狀產品等。該類別的“在X中的塊狀”產品也涵蓋除了可包含于X制劑(如凝膠、肉汁等)中的塊狀之外的可食用形式。例如，除了塊狀之外的其他形式可為切片產品、磨碎產品坐寸O
[0054]本文所用的術語“肉糕(loaf)”指作為潮濕產品獲得的可食用食品，并包括肉糜(terrine)、肉醬(ρ&?)、奶油凍等。
[0055]術語“食品補充劑”或“膳食補充劑”或“補充劑”意指旨在除了正常動物膳食之外攝取的產品。膳食補充劑可為任何形式，例如固體、液體、凝膠、片劑、膠囊、粉劑等。優選地，它們以方便的劑量形式提供。在一些實施方案中，它們以散裝銷售包裝(如散裝粉劑、液體、凝膠或油)提供。在其他實施方案中，補充劑以批量提供以包含于其他食品(如小吃、零食、補充劑條、飲料等)中。適口性增強組合物可用于以與它們用于改進營養均衡食品的適口性相同的方式來改進膳食補充劑的適口性。
[0056]術語“零食”(或“餅干”)意指設計為由所有者優選在非用餐時間喂養寵物，以協助、促進或維持寵物與其所有者之間的聯系過程的任何食品。用于狗的零食的例子為骨頭。零食可為營養的或不為營養的。零食通常以與營養均衡食品可相比的方式含有適口性增強劑。
[0057]“玩具”包括例如可咀嚼玩具。用于狗的玩具的例子為人造骨頭。玩具還包括可部分消耗的玩具(例如包含塑料組件)或可完全消耗的玩具(例如生皮)。
[0058]術語“動物消化物”在本文意指得自清潔的、未分解的動物組織的化學和/或酶水解的材料。在一些實施例中，如本文所用的動物消化物與美國飼料管制協會股份有限公司(Association Of American Feed Control Officials, Inc.) (AAFCO)所發布的定義完全一致。動物消化物優選衍生自動物組織以及魚類組織，不包括毛發、角、牙齒、蹄和羽毛。本領域技術人員將了解，盡管這種組織不是優選的，但即使在良好的制造實踐中，也可能不可避免地存在痕量。也不包括內臟內容物或外來物或排泄物，盡管有時存在痕量污染物。動物消化物可為干燥的或非干燥的。通常，動物消化物的例子為:
[0059]-家禽(或豬肉、牛肉、綿羊、羔羊、魚類等)的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的來自家禽(豬肉、牛肉等)的材料；
[0060]-豬肉(或牛肉、綿羊、羔羊、魚類等)副產物的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的來自豬肉(牛肉等)的材料，所述清潔的和未分解的組織來自家畜(豬、綿羊、羔羊等)的除了肉和骨頭之外的未提煉的清潔部分，例如肺、脾臟、腎臟、大腦、肝臟、血液、任選部分脫脂的低溫脂肪組織，以及清除了內容物的胃和腸。
[0061 ]-家禽副產物的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的材料，所述清潔的和未分解的組織來自家禽的除了肉和骨頭之外的未提煉的清潔部分，如肝臟、心臟、頭部、腳部和內臟。如本文所用，“家禽”涵蓋鳥類的任何物種或類別，優選小雞、火雞、鴨子等；以及
[0062]-魚類副產物的消化物:得自清潔的和未分解的組織的化學和/或酶水解的材料，所述清潔的和未分解的組織來自魚類的除了肉和骨頭之外的未提煉的清潔部分。如本文所用，“魚類”涵蓋魚類或甲殼類或軟體動物類的任何物種或類別，優選金槍魚、鮭魚、鱈魚、狗鱈、沙丁魚、蝦、魷魚等。
[0063]動物消化物也稱為“動物產物”或“動物副產物”，所有這些術語作為同義詞在本文使用。
[0064]然而，在本發明的上下文中，動物消化物優選通過酶水解動物內臟而獲得。[0065]如本文所用，術語“動物內臟”或“內臟”意指可用于制備如上定義的動物消化物(包括魚類消化物)的除了肉、魚肉和骨頭之外的動物和魚類組織。優選研磨如本文所用的動物內臟(包括魚類內臟)。有利地，可將一種或多種寵物食品成分(如下所定義，例如防腐齊U，如抗氧化劑)添加至所述(優選經研磨的)動物內臟中。
[0066]如本文所用，“寵物食品成分”為適用于寵物消耗的任何化合物、組合物或材料。寵物食品成分的非限制性的例子為PE、動物消化物、氮化合物(例如蛋白質、肽和氨基酸)、谷物、碳水化合物、脂肪或脂類、營養物、防腐劑(包括抗氧化劑)、表面活性劑、質地化(texturing)或組織化或穩定化試劑、著色劑、無機磷酸鹽化合物、益生元、益生菌等。
[0067]如本文所用，“適口性增強組合物成分”為適用于寵物消耗的任何化合物、組合物或材料。適口性增強組合物成分的非限制性的例子為動物消化物、氮化合物(例如蛋白質、肽和氨基酸)、碳水化合物、脂肪或脂類、營養物、防腐劑(包括抗氧化劑)、表面活性劑、質地化或組織化或穩定化試劑、無機磷酸鹽化合物、益生元、益生菌等。成分可原樣包含于適口性增強組合物中，或者它們可在組合物中接觸并原位反應，以產生也由術語“適口性增強組合物成分”涵蓋的經轉化的材料。在組合物中在一起反應的成分的例子為(不限于)氮化合物和碳水化合物，以獲得經轉化的材料，如美拉德反應所得產物等。
[0068]術語“肽鏈內切酶”或“內切蛋白酶”意指催化肽或蛋白質中的內部鍵的分裂的任何蛋白水解酶。
[0069]術語“堿性肽鏈內切酶”或“堿性內切蛋白酶”意指在等于或大于約7.0的pH下具有最佳水解活性的任何肽鏈內切酶或內切蛋白酶。這種酶優選在約7.0至約10.0的pH下為活性。
[0070]“蛋白質”或“多肽”包括可與動物消耗相容的所有常規蛋白質源，尤其是植物或蔬菜蛋白，動物蛋白和微生物蛋白(例如酵母)。
[0071]動物蛋白的例子為酪蛋白、白蛋白、動物消化物、禽肉粉、肉粉、骨粉、魚粉等。
[0072]蔬菜蛋白的例子為玉米麩質、大豆蛋白、大豆粉、水解蔬菜蛋白(HVP)等。
[0073]術語“酵母”在本文指任何酵母(優選為非活性的)，以及可與用于動物消耗的組合物相容的酵母副產物。酵母在本領域公知為富含蛋白質的。酵母包括但不限于啤酒酵母、面包酵母、圓酵母、糖蜜酵母等。酵母副產物包括但不限于酵母提取物、酵母水解產物、酵母自溶產物、酵母乳等。
[0074]術語“氨基酸”意指含有氨基和羧基的分子。在一些實施方案中，氨基酸為α-、β _、Y -或δ -氨基酸，包括它們的立體異構體和外消旋體。
[0075]如本文所用，術語“氮化合物”涵蓋二十種已知的天然氨基酸，以及氨基酸序列，即肽、寡肽和蛋白質或多肽。也包括來自對于在寵物食品中使用是可接受的任何來源的所有含氮化合物。適當的氮化合物可選自對于在寵物食品中使用是可接受的含硫的任何氮化合物，如含硫氨基酸(例如蛋氨酸、胱氨酸、半胱氨酸)、谷胱甘肽；其他氨基酸，如甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸等；以及其他化合物，如HVP、酵母自溶產物、酵母提取物、酵母水解產物；以及它們的組合。
[0076]谷物的例子為玉米、蜀黍、苜蓿、小麥、大麥、稻米、大豆等。
[0077]碳水化合物的例子包括右旋糖、左旋糖、蔗糖、多糖、纖維、淀粉等。優選地，碳水化合物為還原糖或含有還原糖。[0078]優選地，“還原糖”選自己糖、戊糖、葡萄糖、左旋糖、木糖、核糖、樹膠醛糖、淀粉水解產物等，以及它們的組合。
[0079]脂肪的例子包括牛脂、來自任何來源(如動物、植物(包括蔬菜))的油，或海洋油。可大量得到的植物油通常為菜籽油、豆油、玉米油、橄欖油、葵花油、亞麻籽油、棕櫚油、紅花油等，以及它們的副廣物。
[0080]典型的動物脂肪為牛脂、豬油、家禽脂肪等，以及它們的副產物。海洋油通常為金槍魚油、沙丁魚油、鮭魚油、:!是魚油、魚油等，以及它們的副產物。本文也涵蓋衍生自動物、植物、海洋來源的脂肪，或者由動物和植物制得的脂肪。
[0081]營養物的例子包括但不限于維生素、礦物質和電解質，如維生素A、C、E、B12、D3、葉酸、D-生物素、氰鈷維生素、煙酰胺、硫胺素、核黃素、吡哆醇、甲萘醌、β-胡蘿卜素、泛酸鈣、膽堿、纖維醇、?丐、鉀、鈉、鋅、鐵、猛、銅、碘等。
[0082]“防腐劑”特別地用于確保食品產品或食品組合物的長的保質期。防腐劑包括天然或合成抗氧化劑(如BHA、ΒΗΤ、沒食子酸丙酯、沒食子酸辛酯、生育酚、迷迭香提取物等)；以及山梨酸或山梨酸鹽(例如山梨酸鉀)，和其他酸，如磷酸等。“表面活性劑”為表面活性的分子。它們通常具有親水部分(例如一個或多個頭部基團)和疏水(或親脂)部分(例如一個或多個尾部)。它們以多種方式分類，例如根據它們的親水-親脂平衡(HLB)分類。它們也可或可選擇地基于在頭部基團中的形式帶電(formally-charged)的存在與否而分類為非離子型、離子型或兩性離子型化合物。表面活性劑是本領域公知的。可引用例如Tweene表面活性劑。表面活性劑包括但不限于乳化劑和潤濕劑。在一些情況中，術語“表面活性劑”和“乳化劑”可互換使用。
[0083]如本文所用，術語“無機磷酸鹽化合物”意指包含至少一個磷原子的化合物。該化合物可為天然的或合成的、電離的或非電離的。
[0084]“無機焦磷酸鹽”或“焦磷酸鹽”包括涵蓋單堿金屬焦磷酸鹽和多堿金屬焦磷酸鹽的堿金屬焦磷酸鹽。
[0085]SMxHyPn03n+1(當n=2時)為堿金屬焦磷酸鹽的通式。當M為單價金屬時,貝U x+y=n+2。當M為二價金屬時,則x+y=n。單價金屬焦磷酸鹽和二價金屬焦磷酸鹽可在本文使用。
[0086]單堿金屬焦磷酸鹽的例子包括焦磷酸三氫鈉、焦磷酸三氫鉀、焦磷酸氫鈣、焦磷酸氫鋇、焦磷酸氫鎂。
[0087]多堿金屬焦磷酸鹽涵蓋二堿金屬焦磷酸鹽、三堿金屬焦磷酸鹽、四堿金屬焦磷酸鹽等。
[0088]二堿金屬焦磷酸鹽的例子為焦磷酸二氫二鈉、焦磷酸二氫二鉀、焦磷酸二鈣、焦磷酸二鋇、焦磷酸二鎂、焦磷酸二錳、焦磷酸二鋅。
[0089]三堿金屬焦磷酸鹽為例如焦磷酸氫三鈉、焦磷酸氫三鉀。
[0090]焦磷酸鹽可為無水的或水合的。
[0091]“多磷酸鹽”具有式MxHyPn03n+1，其中η為3、4、5……。
[0092]多磷酸鹽的例子為三多磷酸鹽、五多磷酸鹽和六多磷酸鹽。
[0093]三多磷酸鹽包括三多磷酸鈉、三多磷酸鉀、三多磷酸鈣和三多磷酸鎂。
[0094]六多磷酸鹽包括六多磷酸鈉、六多磷酸鉀、六多磷酸|丐和六多磷酸鎂。
[0095]單磷酸鹽的例子包括單磷酸一鈉、單磷酸二鈉、單磷酸三鈉、單磷酸一鉀、單磷酸二鉀、單磷酸三鉀、單磷酸腺苷(AMP)、單磷酸鳥苷(GMP)、單磷酸肌苷(MP)、單磷酸尿苷(UMP)、單磷酸胞啶(CMP)。
[0096]“質地化試劑”或“組織化試劑”或“穩定化試劑”為影響可食用產品的質地或口感的成分，例如增加可食用產品的粘度的組分。
[0097]“著色劑”在本文意指適合(優選認證)用于寵物食品中的任何天然物質或任何合成顏色。著色劑特別地可用于在加工過程中彌補顏色改變，或將開胃的顏色提供給可食用
女口
廣叩ο
[0098]“益生菌”為活微生物，當攝取時，其通過改進宿主動物的腸道微生物平衡而對宿主動物具有有益作用。因此，益生菌通過保持宿主動物的健康和/或安全和/或康樂；和/或通過預防和/或治療特定的醫療狀況而有利地影響宿主動物。提供益生菌以促進如下過程:內生厭氧菌群限制消化道中潛在有害(大多數為需氧的)的細菌的濃度。用于寵物食品中的適當的益生菌的例子為(但不限于)乳酸菌,如乳桿菌屬(Lactobacillus spp.)、乳球菌屬(Lactococcus spp.)、鏈球菌屬(Streptococcus spp.);以及其他類型的細菌。
[0099]“益生元”為通過如下方式有利影響宿主動物的非消化性食品成分:選擇性刺激微生物在消化道中的生長和/或活性，由此有利于宿主動物的健康和/或安全/或康樂的保持和/或改進。益生元的例子包括低聚果糖(F0S)、低聚木糖(X0S)、低聚半乳糖(GOS)和低聚甘露糖。
[0100]根據本發明，“熱反應”為通過在高溫下組合至少一種碳氫化合物(優選還原糖)和至少一種氮化合物而獲得的反應。這種反應實際上可包括多種伴隨和/或連續反應，包括例如美拉德反應。
[0101]如在本發明的方法的步驟d)中所指的術語“熱處理”涵蓋可有利地與如上定義的熱反應伴隨進行的熱處理以使酶失活。
[0102]因此，術語“美拉德成分”在本文意指一種或多種碳水化合物，優選為還原糖；和/或一種或多種氮化合物。實際上，美拉德成分為用于實現如上定義的一種或多種熱反應的成分。
[0103]如本文所用，術語“載體”意指“用于濃縮的載體”或“用于干燥的載體”，并涵蓋本領域公知的常規化合物。其例子為微生物蛋白質(例如酵母)、動物蛋白、蔬菜蛋白、碳水化合物(例如麥芽糖糊精、環糊精)，以及礦物質或無機化合物(包括如上定義的無機磷酸鹽化合物)。
[0104]由于難以或甚至不可能確定蛋白質水解產物的確切組成，因此制造者通常寧愿使用非直接參數，如蛋白質的肽鍵的水解度(DH)。DH表示為:(i)所得水解產物中氨基氮與全部氮的比例(AN/AT比)；(ii)水解產物中胺的存在jP(iii)水解產物的摩爾滲透壓濃度。可使用許多常規方法來確定DH。在食品工業中，更具體地在寵物食品工業中使用以定量DH的方法通常基于如下原理中的一者:(I)在沉淀劑(如三氯乙酸(TCA))的存在下確定可溶性氮；或(2)通過比色法(例如使用三硝基苯磺酸TNBS滴定)或釋放質子的pH滴定來確定游離α氨基。TCA可溶性氮可通過克耶達(Kjeldhal)分析(Α.0.A.C.1995)或雙縮脲反應(Hung等人，1984)而確定。這種方法詳細描述于Silvestre (1997)中。或者，DH可有利地通過如下所述的OPA (ο-酞二醒)-基方法(Nielsen, 2001)確定。
[0105]如本文所用，“涂布”指例如通過噴射、撒粉等將適口性增強組合物局部沉積至基礎食品組合物的表面上。
[0106]如本文所用，“包括(inclusion)”指在用于獲得最終寵物食品的進一步的加工步驟(包括熱處理和/或擠出和/或飯懼(retorting)等)之前,通過將適口性增強組合物與其他寵物食品成分混合，而將適口性增強組合物內部添加至寵物食品制劑中。
[0107]術語“單個包裝”意指試劑盒的組件在一個或多個容器中物理締合或與一個或多個容器物理締合，并被認為是用于制造、分送、銷售或使用的一個單元。容器包括但不限于袋、盒子、紙箱、瓶、小袋、任何類型或設計或材料的包裝、透明帶、收縮膠膜、裝訂的或另外粘貼的組件，或它們的組合。單個包裝可為物理締合的單獨組件的容器，使得它們可被認為是用于制造、分送、銷售或使用的一個單元。
[0108]如本文所用，“用于傳遞信息或指示的裝置”為適用于提供信息、指示、推薦和/或保證等的任意形式的試劑盒組件。這種裝置可包括含有信息的文件、數字儲存媒體、光儲存媒體、音頻展示、視覺顯示。傳遞方式可為顯示的網址、手冊、產品標簽、包裝說明書、廣告、視覺顯不等。
[0109]本發明的描述
[0110]本文顯示，當適當選擇用于通過酶水解動物內臟而制備動物消化物的條件時，可有利地增強寵物食品適口性。這些條件包括如下參數中的至少一者:酶的量、水解持續時間、目標DH值。優選地，適當選擇所有這3個參數以獲得寵物食品適口性的有利水平。
[0111]在圖1所示的第一方面中，本發明涉及一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括:
[0112]a)提供動物內臟；
[0113]b)使所述動物內臟與至少一種堿性肽鏈內切酶接觸；
[0114]c )使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟；
[0115]d)熱處理由此獲得的消化產物以使所述堿性肽鏈內切酶失活；以及
[0116]e)獲得具有增強適口性的所述動物消化物，
[0117]其中:
[0118](i)(參見圖2A)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計約0.017至0.682%的量(E)使用:
[0119]-則步驟c)中的所述水解在約1.5至約5.0小時的時間段(T)過程中進行；且
[0120]-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解程度(DH)，所述DH由等式(I)限定:
[0121]DH=25.5072+0.2104χΕ+16.5265χΤ_2.3666χΤ2-15.6816χΕ2+9.1270χΕχΤ
[0122](ii)(參見圖2Β)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.717至約1.137%的量(E)使用:
[0123]-則步驟c)中的所述水解在約0.25至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且
[0124]-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解程度(DH)，所述DH由等式(2)限定:
[0125]DH=22.9718+43.58χΕ+7.6128χΤ_0.6199χΤ2_21.2226χΕ2+2.3467χΕχΤ
[0126](iii)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.682至0.717%之間的量(E)使用:[0127]-則步驟c)中的所述水解在約1.5至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且
[0128]-在步驟d)之后獲得的消化產物具有優選約50至約70%的水解程度(DH)。
[0129]根據本發明的方法優選還包括在所述步驟a)之后的調節所述動物內臟的pH的步驟al)(圖1)。所述經調節的pH值取決于在本發明的方法中所用的堿性肽鏈內切酶。選擇所述經調節的PH值以有利于或甚至優化酶的水解活性。優選地，進行所述步驟al)以將PH調節至作為根據酶制造者的推薦的最佳pH值或pH范圍的pH值。這對于本領域技術人員是容易顯而易見的。PH可由對于用于寵物食品中是可接受的任何適當的化合物進行調節，如磷酸、苛性鈉、其他常規和適當的酸性或堿性調節劑，以及它們的組合。
[0130]水解的所述步驟c)優選在作為根據酶制造者的推薦的最佳溫度值或溫度范圍的溫度下進行。這屬于本領域常規手段。通常，步驟c)中的溫度為約50至約80°C，優選約55至約75°C，還優選約60至約70°C。
[0131]為了使堿性肽鏈內切酶失活，步驟d)的所述熱處理優選在約5至約60分鐘的時間段過程中在約80至約110°C的溫度下進行。還優選地，所述溫度為約90至約100°C，和/或所述時間段為約15至約45分鐘。
[0132]或者，酶的熱失活的所述步驟d)可有利地適于促進消化產物中的一個或多個熱反應。在這些情況下，本發明的方法的一個實施例還進行將一種或多種美拉德成分添加至所述步驟c)的消化產物中的步驟Cl)。例如，以約0.01至30%，優選0.1至20%，更優選0.1至15%的碳水化合物的濃度，且以約0.01至30%，優選0.01至20%，更優選0.01至15%的氮化合物的濃度添加碳水化合物和/或氮化合物。
[0133]當所述步驟d)使酶失活并使熱反應發生時，適當的溫度選擇為在約70至約130°C，優選約75至約125°C，還優選約80至約120°C的范圍內。該熱處理在足以進一步開發消化產物的風味的時間過程中進行，例如在約15分鐘至約20小時，優選約20分鐘至約10小時，還優選30分鐘至約6小時的時間段過程中。
[0134]優選地，根據本發明的方法還包括在所述步驟d)之后的過濾所得消化產物的步驟dl)(圖1)。可使用常規過濾裝置(如市售旋轉過濾器)進行過濾。有利地，所述過濾可在適當條件下進行，以從消化產物中去除直徑等于或大于約500 μ m，優選大于約400 μ m的粒子。
[0135]優選地，如果不進行步驟dl)或如果步驟dl)和d2)伴隨進行，則根據本發明的方法還包括冷卻得自步驟d)的消化產物的步驟d2)(圖1)。或者，如果步驟dl)在步驟d)之后作為單獨的步驟進行，則步驟d2)由冷卻得自所述步驟dl)的消化產物組成。根據一個實施方案，進行冷卻以達到干燥消化產物的小于或等于約100°C (優選約80至約99°C)的溫度。根據另一實施方案，進行冷卻以達到液體消化產物的小于或等于約45°C (優選25至40°C)的溫度。
[0136]根據如上提供的術語“百分比”的定義，如果不進行步驟dl)和d2)，則酶的量E相對于獲自步驟d)的消化產物的重量表示，且DH在該消化產物上測量。或者，如果步驟dl)和d2)均進行，則E值相對于在步驟d2)(其可與步驟dl)伴隨)結束時獲得的消化產物的重量表示，且DH在該消化產物上測量。還或者，如果僅進行一個步驟dl)或d2)，則E的量相對于在所述進行的步驟dl)或d2)結束時獲得的消化產物的重量表示，且DH在該消化產物上測量。[0137]優選地，根據本發明的方法還包括步驟d3)，所述步驟d3)由將如上定義的一種或多種寵物食品成分添加至消化產物組成，所述消化產物得自:
[0138]-如果在步驟d)之后不進行步驟dl)和d2)，則得自步驟d);或
[0139]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟dl)，則得自步驟dl);或
[0140]-在其他情況中(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨進行)，則得自步驟d2)(圖1)。
[0141]在一個實施方案中，本發明的方法還包括濃縮消化產物的步驟d4)，所述消化產物得自:
[0142]-如果在步驟d)之后不進行步驟dl)、d2)和d3)，則得自步驟d);或
[0143]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟dl)，則得自步驟dl);或
[0144]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟d2)，或如果在步驟d)之后僅進行步驟dl)和d2)(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨)，則得自步驟d2);或
[0145]-在其他情況中，得自步驟d3)(圖1)。
[0146]濃縮步驟d4)可使用常規裝置進行。例如，可使用市售裝置(例如濃縮器)。或者，可將適當比例的如上定義的一種或多種載體添加至消化產物中。有利地進行濃縮以獲得以經濃縮的消化產物重量計約5至約80%，優選約10至約70%，還優選約20至約60%的干物
質含量。
[0147]當步驟d)或dl)或d2)或d3)或d4)之后為步驟e)時，則所述方法有利地在步驟e)之前包括步驟d5)，所述步驟d5)由冷凍得自步驟d)、dl)、d2)、d3)和d4)中的在后步驟的消化產物組成(圖1)。冷凍通常盡可能迅速地進行以達到約-20°C的中心溫度。可使用常規冷凍裝置，如板式深凍機。
[0148]在一個實施方案中，本發明的方法還包括干燥消化產物的步驟d6)，所述消化產物得自:
[0149]-如果在步驟d)之后不進行步驟dl)、d2)、d3)和d4)，則得自步驟d);或
[0150]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟dl)，則得自步驟dl);或
[0151]-如果在步驟d)之后僅進行該步驟d2)，或如果在步驟d)之后僅進行步驟dl)和d2)(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨)，則得自步驟d2);或
[0152]-如果步驟d3)為在步驟d)之后或在步驟dl)之后或在步驟d2)之后(步驟d2)有可能與步驟dl)伴隨)進行的僅有步驟，則得自步驟d3);或
[0153]-在其他情況中，得自步驟d4)(圖1)。
[0154]進行干燥步驟d6)以去除任何過量的水。特別地，所得水含量以由此獲得的干燥消化產物的重量計小于或等于約10%，優選為約I至約8%。例如，通過以適當的比例組合得自步驟d)或dl)或d2)或d3)或d4)的消化產物與如上定義的載體，并通過共混所述組分，而獲得干燥消化產物。然后通過蒸發干燥混合物，并獲得干燥消化產物。
[0155]特別地，當根據本發明的方法至少包括步驟a)、b)、c)、d)和e)和任選的選自al)、cl)、dl)、d2)、d3)和d4)中的至少一個步驟，且不包括步驟d5)和d6)時，由此獲得的具有增強適口性的動物消化物為液體(圖1)。明顯的是，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法可包括除了冷凍步驟d5)和干燥步驟d6)之外的任何步驟。優選地，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法不包括步驟d4)、d5)和d6)。還優選地，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法包括步驟a)、al)、b)、C)、Cl)、d)、dl)、d2)、d3)和e)，且不包括步驟d4)、d5)和d6)。甚至更優選地，為了獲得具有增強適口性的液體動物消化物，所述方法由步驟a)、al)、b)、C)、、cl)、d)、dl)、d2)、d3)和e)組成。
[0156]還特別地，當根據本發明的方法至少包括所述步驟a)、b)、C)、d)、d5)和e)和任選的選自al)、Cl)、dl)、d2)、d3)和d4)中的至少一個步驟，且不包括步驟d6)時，由此獲得的具有增強適口性的動物消化物為冷凍的(圖1)。明顯的是，為了獲得具有增強適口性的冷凍動物消化物，所述方法包括冷凍步驟d5)，且不包括步驟d6)。優選地，為了獲得具有增強適口性的冷凍動物消化物，所述方法包括步驟a)、al)、b)、c)、cI)、d)、dl)、d2)、d3)、(14)、(15)和6)，且不包括步驟(16)。還優選地，為了獲得具有增強適口性的冷凍動物消化物，所述方法由步驟 8)、81)、13)、(3)、(31)、(1)、(11)、(12)、(13)、(14)、(15)和6)組成。
[0157]還特別地，當根據本發明的方法至少包括所述步驟a)、b)、C)、d)、d6)和e)和任選的選自al)、Cl)、dl)、d2)、d3)和d4)中的至少一個步驟，且不包括步驟d5)時，由此獲得的具有增強適口性的動物消化物為干燥的(圖1)。明顯的是，為了獲得具有增強適口性的干燥動物消化物，所述方法包括干燥步驟d6)，且不包括步驟d5)。優選地，為了獲得具有增強適口性的干燥動物消化物，所述方法包括步驟3)、&1)、13)、(3)、(31)、(1)、(11)、(12)、(13)、
(14)、(16)和6)，且不包括步驟(15)。還優選地，為了獲得具有增強適口性的干燥動物消化物，所述方法由步驟 8)、81)、13)、(3)、(31)、(1)、(11)、(12)、(13)、(14)、(16)和6)組成。
[0158]根據本發明的具有增強適口性的動物消化物(如在所述步驟e)中獲得)滿足PE的如上定義。該動物消化物可通常以以最終寵物食品重量計約0.01至約80%，優選約0.01至約60%，更優選約0.01至約40%，甚至更優選約0.01至約20%的比例直接原樣使用。或者，其可與一種或多種其他適口性增強組合物成分，特別是其他PE組合，且所有成分或所有PE可伴隨或連續應用。
[0159]在本發明的方法中，使用肽鏈內切酶，優選堿性肽鏈內切酶。用于本文的更特別適當的肽鏈內切酶為alcalase(無對應中譯文)型蛋白酶。可在本文使用的市售可得的酶的非限制性的例子為:Alcalase (諾維信，Bagsvaerd,DK)、P1.0tcx' (Danisco Genencor,Hanka,
Fl )、Food Pro* 堿(Danisco Genencor)、復合蛋白酶(Protemax) (Prozyn, Sao paulo, BR)和 Proleather (無對應中譯文)(Amano, Nishiki, JP)。
[0160]本發明的方法的有利的實施方案如下:
[0161]?在 i)中:
[0162]-所述量E為以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計約0.02至0.682%，優選約0.03至0.682%,還優選約0.05至0.682% ;和/或
[0163]-所述時間段T為約1.5至約4小時，優選約1.5至約3.5小時，還優選約1.5至約3小時；和/或
[0164]-所述DH為約50至約70%，優選約55至約65%；
[0165]?在 ii)中:
[0166]-所述量E為以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.717至約1.12%，優選
0.717至約1.1%，還優選0.717至約1.05% ;和/或
[0167]-所述時間段T為約0.5至約3.5小時，優選約I至約3小時，還優選約I至約2.5小時；和/或[0168]-所述DH為約50至約70%，優選約55至約65%；
[0169]?在 iii)中:
[0170]-所述時間段T為約1.5至約3.5小時，優選約1.5至約3小時，還優選約2至約3小時；和/或
[0171 ]-所述DH為約55至約70%，優選約55至約65%。
[0172]在本發明的方法中，使用OPA (O-酞二醛)_基方法(如在以下實施例中所述)確定DH值。
[0173]優選地，在本發明的方法中所用的內臟選自家禽、豬(pork)、牛(beef)、羔羊、綿羊、魚類和它們的組合的內臟。魚類內臟更優選地選自金槍魚、鮭魚、鱈魚、狗鱈、沙丁魚、蝦、魷魚和它們的組合的內臟。
[0174]在另一方面，本發明涉及一種可通過如本文所述的方法獲得的具有增強適口性的動物消化物。特別地，該動物消化物為干燥的或液體或冷凍的。
[0175]本發明的又一方面還涉及一種用于寵物食品的適口性增強組合物，其包含至少一種如上公開的具有增強適口性的動物消化物，和如上定義的一種或多種其他適口性增強組合物成分，如特別是如上所述的美拉德反應所得產物和/或無機磷酸鹽化合物和/或微生物蛋白質和/或動物蛋白和/或蔬菜蛋白和/或碳水化合物。
[0176]在所述適口性增強組合物中的美拉德反應所得產物的含量優選為以組合物重量計約0.01至99%，還優選約0.05至95%，更優選約0.1至90%，還更優選約0.2至85%，甚至更優選約0.5至80%。
[0177]在本文提供的適口性增強組合物中，所述無機磷酸鹽化合物優選以組合物重量計約0.01至75%，還優選約0.05至70%，更優選約0.1至65%，還更優選約0.25至60%的量存在。
[0178]所述無機磷酸鹽化合物優選選自磷酸、焦磷酸鹽、單磷酸鹽、多磷酸鹽和它們的組
口 ο
[0179]根據本發明的優選的無機磷酸鹽化合物為選自如下的焦磷酸鹽化合物:焦磷酸二鈉、焦磷酸三鈉、焦磷酸四鈉、焦磷酸二鉀、焦磷酸三鉀、焦磷酸四鉀、焦磷酸四鐵和它們的組合。一個更特別優選的焦磷酸鹽化合物為焦磷酸三鈉。
[0180]用于本發明的一個優選的焦磷酸鹽化合物為三多磷酸鈉。
[0181 ] 根據本發明的適口性增強組合物可為干燥的或液體或冷凍的。
[0182]本發明的又一方面還涉及一種用于增強寵物食品的適口性，或換言之用于制備具有增強適口性的寵物食品的方法，其中所述方法包括:
[0183]a)將如上定義的具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物添加至寵物食品制劑或混合物中；以及
[0184]b)獲得具有增強適口性的寵物食品。
[0185]諸如粗粒的干燥寵物食品通常可通過不同的方法制得。廣泛使用的這些方法中的一種為熱煉-擠出機(cooker-extruder)法。在熱煉-擠出機法中，首先將成分共混在一起以形成混合物。將該混合物轉移至回潮機(steam conditioner)中,所述混合物在回潮機中充分變潮濕而變得可擠出。然后該混合物進入熱煉-擠出機，在熱煉-擠出機中在高溫和高壓下熱煉所述混合物，然后迫使其通過模頭離開裝置。該模頭使擠出產物成型為具體形狀。通過周期性切掉產物的擠出流的端部而產生單獨的食品片。然后在熱風干燥器中干燥單獨的片。通常干燥產物直至其含有少于15%的水分，優選約4至10%的水分。然后通過散裝材料傳送機將經干燥的粒子或片轉移至涂布機，并用脂肪噴射。可將其他液體(例如磷酸)可選擇地施用至片，或者在脂肪之外施用。所得丸粒或粗粒構成基礎寵物食品制齊U，使用本發明的具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物來增強所述基礎寵物食品制劑的適口性。
[0186]肉汁基或凝膠基的潮濕寵物食品可通過如下方式制得:研磨肉類、肉類模仿物、肉類副產物、碳水化合物和/或谷物、質地化試劑，并經由低壓擠出形成研磨混合物，然后通過蒸汽通道熱煉。在通道出口處，將混合物切削成片。將肉汁型或凝膠型基質添加至所得片，然后在罐或小袋中密封并甑餾，以獲得在肉汁中的塊狀或在凝膠中的塊狀食品。
[0187]并非肉汁基或凝膠基的潮濕寵物食品可通過如下方式制得:研磨肉類、肉類模仿物、肉類副產物、碳水化合物和/或谷物，并與水和質地化試劑混合。然后，將全部混合物密封于罐中并甑餾，以獲得肉糕。
[0188]因此可取決于寵物食品、具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物，或者通過將所述具有增強適口性的動物消化物和/或所述適口性增強組合物摻入或包含至寵物食品制劑或混合物中，或者通過使用所述具有增強適口性的動物消化物和/或所述適口性增強組合物涂布所述寵物食品制劑或混合物，從而進行上述添加步驟a)。
[0189]例如，可引用用于涂布干燥寵物食品(如粗粒)的方法。可將未經涂布的、擠出的基礎寵物食品的粗粒置于容器(如桶或涂布機)中以用于混合。加熱脂肪(如豬脂或家禽脂肪)，然后以獲得粗粒的涂層的方式將其噴射至寵物食品上。涂層無需為連續層，但優選為均勻的。在脂肪之后，適口性增強組合物可施用作為液體或干粉，且同時混合產物。通常噴射具有增強適口性的液體動物消化物和/或液體適口性增強組合物，而通常撒粉具有增強適口性的干燥動物消化物和/或干燥適口性增強組合物。或者，具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物可與脂肪混合，并同時施用。還或者，在沉積脂肪之前涂布具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物。
[0190]或者，可根據如下方法將具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物摻入或包含至寵物食品制劑中。在熱煉之前，使具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物與寵物食品制劑的粗成分接觸。在此情況中，具有增強適口性的動物消化物和/或適口性增強組合物組合至基礎食品制劑的蛋白質、纖維、碳水化合物和/或淀粉等，并在熱煉-擠出機中與那些材料一起熱煉。
[0191]可如下實現包含至潮濕寵物食品中。除了其他寵物食品成分之外，具有增強適口性的液體或干燥或冷凍動物消化物和/或液體或干燥或冷凍適口性增強組合物可在共混過程中施用至肉汁型或凝膠型基質。具有增強適口性的液體或干燥或冷凍動物消化物和/或液體或干燥或冷凍適口性增強組合物也可施用至用于塊狀或肉糕制劑的肉類(meat-by)混合物中。在此情況中，其可在研磨過程之前或之后添加至原料中。在塊狀制造的情況中，所述肉類混合物可在蒸汽或燒烤烘箱中熱煉，或者在肉糕制造的情況中，所述肉類混合物可直接密封于罐中。
[0192]本發明的PE可用于寵物食品(如含有適當的寵物食品成分(包括蛋白質、纖維、碳水化合物和/或淀粉等)的營養均衡混合物)中。這種混合物對于本領域技術人員而言是公知的，且它們的組成取決于許多因素，例如具體類型的寵物所需的食物平衡。另外的寵物食品成分可包括維生素、礦物質、調味品、防腐劑和表面活性劑。根據獸醫領域中的已知膳食標準，例如通過國家研究委員會(NRC)的如下推薦或美國飼料管制協會(AAFCO)的指導方針，來確定食物均衡，包括維生素、礦物質、脂類、蛋白質和碳水化合物的相對比例。
[0193]根據另一方面，本發明涉及一種具有增強適口性的寵物食品，其包含寵物食品混合物和如上所述的至少一種具有增強適口性的動物消化物和/或至少一種適口性增強組合物。
[0194]優選地，所述寵物食品可通過前述制備方法獲得。
[0195]優選地，所述寵物食品選自濕潤的營養均衡寵物食品、干燥營養均衡寵物食品、半潮濕營養均衡寵物食品、補充劑、零食和玩具。
[0196]濕潤營養均衡寵物食品優選選自:在凝膠中的塊狀食品、在肉汁中的塊狀食品、肉糕和湯。
[0197]干燥營養均衡寵物食品優選為粗粒。
[0198]優選地，所述寵物食品為貓食或狗食。
[0199]本發明的另一方面涉及一種用于喂養寵物的方法，其至少包括:
[0200]a)提供如上公開的寵物食品；以及
[0201]b)將所述寵物食品喂養至寵物。
[0202]優選地，所述寵物選自貓和狗。
[0203]本發明的又一方面還涉及一種用于增強寵物食品的適口性的試劑盒，其在單個包裝中的一個或多個容器中包括:
[0204]-如上所述的至少一種具有增強適口性的動物消化物和/或至少一種適口性增強組合物；
[0205]-任選的至少一種寵物食品成分；
[0206]-任選的用于傳遞有關使用所述具有增強適口性的動物消化物和/或所述適口性增強組合物和任選的所述寵物食品成分的信息或指示的裝置。
[0207]上述的具有增強適口性的動物消化物和適口性增強組合物提供了相比于現有技術顯著的優點。本發明的效果可通過通常稱為“雙碗測試”或“對抗測試”的測試進行測量。當然，本領域技術人員可自由使用除了下文所述的雙碗測試之外的任何其他適當的測試來測定偏好。這種可供選擇的測試是本領域已知的。
[0208]參照如下實施例進一步描述本發明，所述實施例僅以說明的目的呈現，而不旨在限制本發明的范圍。
[0209]實施例
[0210]A-DH測量方法(描沭于Nielsen等人，2001):
[0211]在蛋白水解產物中，監測反應的關鍵參數為水解度(DH)。DH定義為分裂的肽鍵的百分比:
[0212]DH=h/htotxl00%
[0213]其中ht(rt為每蛋白質當量的肽鍵總數，且h為水解的鍵的數目，h根據下式以絲氨酸-NH2的當量表示，因為絲氨酸顯示接近所有氨基酸的平均的響應:
[0214]h=(絲氨酸 ΝΗ2_β )/a meq/g 蛋白質[0215]食品蛋白質的大多數具有提供htot=8的125g/mol的氨基酸分子量的平均值，可適于肉類的7.6的值和魚類的8.6的值，α和β值對于肉類和魚類分別設定為1.00和0.40。
[0216]A-1-原理:
[0217]每個水解肽鏈產生游離的氨基。那些氨基與OPA反應而形成黃色絡合物，所述黃色絡合物隨后在340nm下在分光光度法中進行測量。光密度隨絡合物數目而變化。
[0218]方法則由如下組成:測量h值，然后測量水解產物的絲氨酸當量值，且比較在記錄的水解產物中形成的有色絡合物與在絲氨酸標樣(具有空白校正)中形成的絡合物的水平。
[0219]A-2-裝置:
[0220]錐形燒瓶，4小數位分析天平。移液管:適于體積。磁力攪拌器、渦流、分光光度計在 340nm。
[0221 ] A~3 -試劑:
[0222]OPA試劑在200ml燒瓶中如下制得:將7.620g四硼酸二鈉十水合物和200mg十二烷基硫酸鈉(SDS)溶解于150mL去離子水中。在繼續之前，試劑必須完全溶解。將160mg0PA97%溶解于4mL乙醇中。然后通過用去離子水沖洗，將OPA溶液定量轉移至上述溶液中。通過用去離子水沖洗，將176mg 二硫蘇糖醇99% (DTT)添加至溶液中。使用去離子水使溶液達到200mL。
[0223]通過將50mg絲氨酸溶解于500mL去離子水(0.9516meqv/L)中而制得絲氨酸標樣。
[0224]通過將200mg溶解于IOOmL去離子水中而制得樣品溶液。
[0225]A-4 -測量:
[0226]將3ml OPA置于6個微分光管。然后添加400 μ L水(空白)、絲氨酸標樣或樣品，在相同的+2分鐘反應時間完成測量。對于每個樣品，進行空白、然后兩個標樣測量、然后3個樣品測量。
[0227]在20°C下實現分析。
[0228]標樣和水空白的典型吸光度讀數分別為0.8和0.07。
[0229]A-5-h 和 DH 的測定
[0230]絲氨酸-NH2=(0D 樣品-OD 空白/OD 標樣-OD 空白)x0.9516meqv/Lx0.1χ100/ΧχΡ
[0231]其中絲氨酸-NH2=meqv絲氨酸NH2/g蛋白質；X=g樣品；P=樣品中的蛋白質％ ;0.1為以升(L)計的樣品體積。
[0232]h則為:h=(絲氨酸-ΝΗ2_β )/a meqv/g蛋白質,其中α和β如上給出。
[0233]DH 的計算:DH=h/ht()txlOO%。
[0234]B-使用“雙碗”測試的適口性評價:
[0235]B-1 -雙碗測試的原理:
[0236]測試基于如下假設:食品消耗得越多，則其越具適口性。
[0237]基于兩種食品之間的比較，進行單獨相對于(雙碗)癖好測試。取決于測試目的，對36條狗的組和40只貓的組進行測試。
[0238]B-2-測試的操作方法:
[0239]-稱量相同量的食品A和食品B，并置于相同的碗中。每個配給中存在的量能夠滿足每日需求。
[0240]-碗的分布:[0241]狗測試:將碗置于狗可到達的單獨的喂食器中。
[0242]貓測試:將碗同時呈現給單獨的放飼廄中的每只貓，在每一餐時交換碗的位置以避免由偏手性導致的選擇。
[0243]-測試持續時間:
[0244]*干燥食品的貓測試:約15分鐘至約20小時(如果在測試結束之前兩個碗中的一者被完全吃完，則移出兩個碗，停止測試);
[0245]*濕潤食品的貓測試:約15分鐘至約30分鐘(如果在測試結束之前兩個碗中的一者被完全吃完，則移出兩個碗，停止測試);
[0246]*狗測試:約15分鐘至約30分鐘(如果在測試結束之前兩個碗中的一者被完全吃完，則移出兩個碗，停止測試)。研究參數。
[0247]-測得的參數:首先消耗的食品(“初始吸引力”)和在測試結束時所消耗的每個食品的量；[0248]-計算的參數:以％計的單獨消耗比例(CR)
[0249]CRa=A 的消耗(g) XlOO/ (A+B 的消耗)(g)
[0250]CRb=B 的消耗(g) XlOO/ (A+B 的消耗)(g)；
[0251 ] O平均消耗比例(ACR)=所有單獨的比例的平均(賦予每個動物相等的重要性,而無論其尺寸或其相應的消耗如何)。
[0252]如果相比于預定值(其隨例如動物重量和/或新陳代謝而變化)，動物具有更高或更低的消耗，則不將它們考慮進統計處理。
[0253]B-3-統計分析:
[0254]使用統計分析來確定是否2個比例之間存在顯著差異。進行具有3個誤差閾值(SP5%、1% 和 0.1%)的 Student t 測試。
[0255]使用卡方檢驗(Ch1-square test)來確定以食品A作為首先食用的食品的寵物數量與以食品B作為首先食用的寵物數量之間是否存在顯著差異。
[0256]顯著水平如下所述:
[0257]NS 不顯著(ρ>0.05)
[0258]* 顯著(ρ〈0.05)
[0259]** 非常顯著 (ρ〈0.01)
[0260]林* 極非常顯著(ρ〈0.001)
[0261]C-本發明的實施方案的實施例:
[0262]用以說明本發明的本文公開的實施例涉及兩種適口性配置。
[0263]在實施例1中，如下3個參數(堿性肽鏈內切酶的量(Ε)、水解時間(T)和DH值)的變化允許獲得不同的動物消化物，比較所述不同的動物消化物的適口性。
[0264]在實施例2至4中，選擇堿性肽鏈內切酶的量E和動物內臟的水解時間T的一個特定組合，并在適口性測試中與使用中性肽鏈內切酶所獲得的類似的動物消化物進行比較。
[0265]實施例1:
[0266]在該實施例中，根據不同的水解條件制得不同的干燥動物消化物。根據圖1制得所有干燥動物消化物。液體消化產物A的配方描述于下表1中:
[0267]表1
【權利要求】
1.一種用于制備具有增強適口性的動物消化物的方法，所述方法包括: a)提供動物內臟； b)使所述動物內臟與至少一種堿性肽鏈內切酶接觸； c)使所述堿性肽鏈內切酶水解所述動物內臟； d)熱處理由此獲得的消化產物以使所述堿性肽鏈內切酶失活；以及 e)獲得具有增強適口性的所述動物消化物， 其中: (i)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計約0.017至0.682%的量(E)使用: -則步驟c)中的所述水解在約1.5至約5.0小時的時間段(T)過程中進行；且-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解度(DH)，所述DH由等式(I)限定:
DH=25.5072+0.2104χΕ+16.5265χΤ_2.3666χΤ2-15.6816χΕ2+9.1270χΕχΤ (ii)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.717至約 1.137%的量(E)使用: -則步驟c)中的所述水解在約0.25至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且-在步驟d)之后獲得的消化產物具有約45至約70%的水解度(DH)，所述DH由等式(2)限定:
DH=22.9718+43.58χΕ+7.6128χΤ_0.6199χΤ2_21.2226χΕ2+2.3467χΕχΤ
(--)如果所述堿性肽鏈內切酶以在步驟d)之后獲得的消化產物的重量計0.682至0.717%之間的量(E)使用: -則步驟c)中的所述水解在約1.5至約4.0小時的時間段(T)過程中進行；且 -在步驟d)之后獲得的消化產物具有優選約50至約70%的水解度(DH)。
2.根據權利要求1所述的方法，其還包括在所述步驟a)之后的調節所述動物內臟的pH的步驟al)。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其還包括將一種或多種美拉德成分添加至所述步驟c)的消化產物中的步驟Cl)。
4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其中所述步驟d)適于促進得自所述步驟c或Cl)的消化產物中的一個或多個熱反應。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其還包括過濾得自步驟d)的消化產物的步驟dl)。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其還包括冷卻得自所述步驟d)和dl)中的在后步驟的消化產物的步驟d2)。
7.根據權利要求6所述的方法，其中所述步驟d2)與所述步驟dl)伴隨，所述步驟dl)和d2)在得自步驟d)的消化產物上進行。
8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述量E以獲自所述步驟d)或dl)或d2)的消化產物的重量計，且其中所述DH為獲自所述步驟d)或dl)或d2)的所述消化產物所具有。
9.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其還包括將一種或多種寵物食品成分添加至得自所述步驟d)、dl)和d2)中的在后步驟的消化產物中的步驟d3)。
10.根據權利要求1至9中任一項所述的方法，其還包括濃縮得自所述步驟d)、dl)、d2)和d3)中的在后步驟的消化產物的步驟d4)。
11.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其還包括冷凍得自所述步驟d)、dl)、d2)、d3)和d4)中的在后步驟的消化產物的步驟d5)。
12.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其還包括干燥得自所述步驟d)、dl)、d2)、d3)和d4)中的在后步驟的消化產物的步驟d6)。
13.—種通過根據權利要求1至12中任一項所述的方法獲得的具有增強適口性的動物消化物。
14.一種包含寵物食品混合物和根據權利要求13所述的至少一種動物消化物的具有增強適口性的寵物食品。
15.一種用于制備根據權利要求14所述的具有增強適口性的寵物食品的方法，其中將所述動物消化物摻入所述寵物食品混合物中。
16.一種用于制備根據權利要求14所述的具有增強適口性的寵物食品的方法，其中使用所述動物消化物涂布所述寵物食品混合物。
【文檔編號】A23K1/18GK103841836SQ201280048117
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2012年10月3日 優先權日:2011年10月3日
【發明者】A·德拉托 申請人:特種寵物食品公司
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