一種誘導煙草產生對白粉病抗性的植物提取物及制備方法
【專利摘要】本發明屬于植物病蟲害綠色生態防治【技術領域】，本發明公開了一種誘導煙草產生對煙草白粉病抗性的植物提取物，該植物提取物是紅蔥提取物。該植物提取物還包括皂角提取物和水。該植物提取物中紅蔥、皂角和水的重量比為1-10：2：2-10。本發明發現紅蔥提取物能夠明顯誘導煙草植株產生對煙草白粉病抗性，所以可以防止和有效預防煙草產生白粉病，能夠從根本上抑制煙草白粉病對煙草生產的危害，不僅對煙草安全，還對人畜環境安全，而且具有巨大的經濟意義和環保生態價值。
【專利說明】一種誘導煙草產生對白粉病抗性的植物提取物及制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物病蟲害綠色生態防治【技術領域】，尤其涉及一種誘導煙草產生對白粉病抗性的植物提取物及制備方法。
【背景技術】
[0002]煙草白粉病俗稱“上灰”、“下霜”、“上硝”。該病多為害成熟老葉，由下向上發展。葉片發病，初為近圓形的黃褐色小斑，后斑上現白色粉狀小點，使病斑呈毯狀，斑塊擴大，白粉布滿整個葉片，病葉先褪綠變褐，后枯死。嚴重時為害嫩莖，病莖上也布滿白粉。病葉烘烤后薄如紙，色暗銹褐色，喪失經濟價值。中國各煙區均有發生，其中以華南、西南和華中煙區最為普遍，危害也較重。
[0003]病原為煙草白粉病菌，屬子囊菌亞門，核菌綱，白粉菌目，白粉菌屬。苗期和成株期均可發生。
[0004]煙草白粉病由半知菌亞門的煙草粉孢菌侵染所引起。其有性態則歸入子囊菌亞門的二孢白粉菌，但有性態很少發現。病菌菌絲具分隔，無色。無性態的分生孢子梗與菌絲垂直，絲狀，較短，無分枝，大小約80~120X12~14微米，頂生分生孢子。分生孢子串生，由上而下順次成熟，無色，單胞，圓筒形，大小為30~32 X 13~15微米。病菌生長適溫22°C~28°C。分生孢子萌發最適溫度23°C~25°C，最適相對濕度60%~80%。在相對濕度20%以下仍有少數孢子可以萌發，但在相對濕度100%或水滴中卻極少能萌發。病菌屬專性外寄生菌，全部菌絲體長在寄主表面，以吸胞伸入寄主表皮細胞內吸取養分。病菌存在生理分化現象，有許多不同致病型的生理小種，它們對不同寄主的致病力差異很大。病菌寄主范圍廣，除煙草外，還能侵染葫蘆科、菊科等100多種植物。
[0005]目前的防治方法主要有:
[0006](I)選用抗病品種
[0007](2)摘除染病腳葉
[0008]白粉病的發生自煙株下部較成熟的葉片開始，自下而上蔓延，煙農為了減少損失，往往將下部侵染白粉病的未成熟葉提前采烤，大大減少了田間傳染病源，對降低病情上升率有很好抑制作用。在烘烤過程中，吊黃后直接進入干筋期溫度，避免了定色期棕色反應。勿在低洼地、連作地種煙；整治排灌系統，實行高畦深溝栽培，雨后及時排除積水；配方施肥(N:P:K=1:2:3或1:2:2)，適時噴施葉面營養劑。
[0009](3)藥劑防治
[0010]20%粉銹寧可濕粉1000~1500倍液，70%托布津+75%百菌清可濕粉(I:1) 1000~1500倍液，50%退菌特可濕粉600倍液，40%三唑酮多菌靈可濕粉1000倍液，50%三唑酮硫磺懸浮劑800~1000倍液，或45%三唑酮福美雙可濕粉800~1000倍液，在植株封行時開始，連噴2~3次，隔7~10天一次，交替施用，噴勻噴足。
[0011](4)綁桿上炕前噴施甲基托布津
[0012]白粉病分生孢子·發芽最高溫度為32°C，烘烤時變黃溫度未超過32°C時，病害可繼續發展，往往I級病葉(病斑面積占葉面積5%以下)進入烤房后，病斑仍繼續擴大，甚至布滿全葉。綁桿上炕前對病葉噴施甲基托布津，能有效抑制病斑的擴展蔓延。
[0013](5)煙田積水
[0014]往往造成田間濕度大，利于病害流行，應采取高起壟栽培，經常保持水溝通暢，及時排除田間積水。
[0015](6)及時采烤腳葉
[0016]改善田間光照、通風條件，降低田間濕度，減少病害蔓延。
[0017]以上防治方法雖然能在一定程度上防治煙草白粉病的發生和蔓延，但是效果不是很理想，并且也不能從根本上杜絕煙草白粉病的發生。
[0018]植物中的天然活性物質是具有生物活性的天然寶庫，具有可產生超過40萬種的次生代謝產物，許多代謝產物具有抗菌活性，并具有誘導植株產生誘導抗性的功能，且來源于自然，對人、畜安全，無污染，成為當今新型殺菌劑和誘導抗性劑研究的熱點。近幾年來，國內外許多學者對一些植物的抗菌、誘導抗性做了深入的調查和研究，紅蔥為鳶尾科紅蔥屬植物，廣泛分布于廣西、云南。性苦、涼，鱗莖、全草可入藥。
[0019]植物擁有豐富的天然活性化合物，目前，國內外對植物源抑菌劑的研究較多。植物殺菌劑來源于自然、安全、無污染已成為當今新型殺菌劑創制研究的熱點。其結構類型涉及萜類、生物堿類、黃酮類等化合物。但是對植物可能產生的誘導抗性的研究才剛剛開始，本研究發明第一次印證了 紅蔥在煙草植物上產生的誘導抗性活性。

【發明內容】

[0020]本發明發現紅蔥提取物能夠誘導煙草植株產生對白粉病抗性，從而避免煙草發生白粉病。
[0021]本發明采用如下技術方案:
[0022]本發明的誘導煙草產生對白粉病抗性的植物提取物是紅蔥提取物。
[0023]該植物提取物還包括皂角提取物和水。
[0024]該植物提取物中紅蔥和皂角的重量比為1-10:2。
[0025]優選:2-5:2。
[0026]更優選:3:2。
[0027]該植物提取物中紅蔥、皂角和水的重量比為1-10:2:2_10。
[0028]優選:2-5:2:3_7。
[0029]更優選:3:2:5。
[0030]制備本發明的植物提取物的方法如下:
[0031](I)紅蔥提取物的制備，將紅蔥全株晾干，粉碎，用甲醇按1:5浸提兩次，過濾，濾液在30°C以下用旋轉蒸發儀減壓濃縮，得浸膏，低溫保存備用；
[0032](2)皂角提取物的制備，將皂角的果實晾干，粉碎，用甲醇按1:5浸提兩次，過濾，濾液在30°C以下用旋轉蒸發儀減壓濃縮，得浸膏，低溫保存備用；
[0033](3)混配，在使用時讓步驟(1)和步驟(2)制備的紅蔥提取物和皂角提取物加入水，按配比混合均勻即可使用。
[0034]本發明的積極效果如下:[0035]本發明發現紅蔥提取物能夠誘導煙草植株產生對白粉病抗性，所以可以預防和防止煙草產生白粉病，能夠從根本上解決白粉病對煙草的困擾，不僅安全環保，而且具有巨大的經濟意義。
【具體實施方式】
[0036]下面的實施例是對本發明的進一步詳細描述。
[0037]實施例1
[0038]1實驗準備
[0039]1.1測試菌株
[0040]病原為煙草白粉病[0041 ] 1.2誘導抗性植物組合
[0042]紅蔥，皂角。
[0043]1.3 儀器
[0044]超聲波清洗器HS-10260D，旋轉蒸發儀R-215(Bi)CHI )，電子天平AL204-1C (梅特勒-托利多儀器有限公司)，三用紫外分析儀WFH-203 (上海精科實業有限公司)，HPLC分析儀(Waters)，超凈工作臺SW-CJ-1F(蘇凈集團安泰公司制造)，全自動高壓滅菌鍋MLS-2420 (SANYO Electric Co，Ltd.)，電熱恒溫培養箱DHP-360 (北京市永光明醫療儀器廠)。
[0045]2紅蔥提取物的誘導抗性活性
[0046]2.1植物活性物質的提取
[0047]將紅蔥全株晾干，粉碎。稱取500g用甲醇按1:5浸提兩次，過濾。濾液在30°C以下用旋轉蒸發儀減壓濃縮，得浸膏，低溫保存備用。
[0048]將皂角的果實晾干，粉碎。稱取500g用甲醇按1:5浸提兩次，過濾。濾液在30°C以下用旋轉蒸發儀減壓濃縮，得浸膏，低溫保存備用。
[0049]2.2誘導抗性活性測定
[0050]實驗室采用盆栽法，田間直接噴施于煙田烤煙植株。測定樣品對煙草植株產生誘導抗性以后，對白粉病發病的抑制作用。
[0051]實驗室盆栽法:將紅蔥粗提物用水溶解，配制為20mg / mL的樣品溶液，以純水空白對照，每個樣品設3個重復。用病斑面積率，計算誘導抗性抑制率(％)，并對數據進行統計分析。按下式計算抑制率:
[0052]誘導抗性活性效果(％ )=(對照病斑面積-處理病斑面積)/對照病斑面積X 100
[0053]陽性對照采用75%百菌清可濕性粉劑(WP):用水溶解，配制為20mg / mL的陽性對照液。
[0054]田間誘導抗性效果:把紅蔥提取物、皂角提取物和水按照I '2:7、3:2:5、5:2:3的比例混合，用噴霧器噴施于13片葉的煙草植株，10天之后調查誘導抗性的效果。
[0055]2.3誘導抗性活性結果
[0056]實驗室的測定結果表明，紅蔥具有明顯的對煙草白粉病的誘導抗性活性效果。
[0057]表1:紅蔥提取物對煙草白粉病的誘導抗性活性作用
[0058]
【權利要求】
1.一種誘導煙草產生對白粉病抗性的植物提取物，其特征在于:該植物提取物是紅蔥提取物。
2.如權利要求1植物提取物，其特征在于:該植物提取物還包括皂角提取物和水。
3.如權利要求2植物提取物，其特征在于:該植物提取物中紅蔥和皂角的重量比為1-10:2。
4.如權利要求2植物提取物，其特征在于:該植物提取物中紅蔥和皂角的重量比為2~5:2o
5.如權利要求2植物提取物，其特征在于:該植物提取物中紅蔥和皂角的重量比為3:2。
6.如權利要求2植物提取物，其特征在于:該植物提取物中紅蔥、皂角和水的重量比為1-10:2:2-10。
7.如權利要求2植物提取物，其特征在于:該植物提取物中紅蔥、皂角和水的重量比為2~5:2:3_7。
8.如權利要求2植物提取物，其特征在于:該植物提取物中紅蔥、皂角和水的重量比為3:2:5ο
9.一種制備如權利要求2-8任一項所述的植物提取物的方法，其特征在于:方法如下:` (1)紅蔥提取物的制備，將紅蔥全株晾干，粉碎，用甲醇按1:5浸提兩次，過濾，濾液在30°C以下用旋轉蒸發儀減壓濃縮，得浸膏，低溫保存備用； (2)皂角提取物的制備，將皂角的果實晾干，粉碎，用甲醇按1:5浸提兩次，過濾，濾液在30°C以下用旋轉蒸發儀減壓濃縮，得浸膏，低溫保存備用； (3)混配，在使用時讓步驟(1)和步驟(2)制備的紅蔥提取物和皂角提取物加入水分，按配比混合均勻即可使用。
【文檔編號】A01N65/40GK103651617SQ201310637216
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年12月4日 優先權日:2013年12月4日
【發明者】肖志新, 浦勇, 馮繼明, 胡志明, 尚慧, 李永亮, 郭應成, 楊繼洪, 楊佩文, 李家瑞 申請人:云南省農業科學院農業環境資源研究所, 云南省煙草公司保山市公司, 中國煙草云南進出口有限公司