油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑及其制備方法
【專利摘要】油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑及其制備方法，所述復配殺蟲劑由以下質(zhì)量百分比的原料制成：油茶葉提取物30～60%、金龜子綠僵菌10～30%、表面活性劑5～20%、助劑10～20%、填料5～15%。本發(fā)明還包括所述復配殺蟲劑的制備方法。本發(fā)明復配殺蟲劑具有殺蟲譜寬、活性高、效果穩(wěn)定、殺蟲效果快、抗藥性強、殘效期長、環(huán)境影響小、使用方便等特點；利用本發(fā)明，還可提高油茶的附加值，同時，也可推動綠僵菌的大規(guī)模應用。
【專利說明】油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物源殺蟲劑與微生物殺蟲劑復配殺蟲劑及其制備方法，尤其是涉及一種油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑及其制備方法。
【背景技術】
[0002]目前在全球范圍內(nèi)，由于農(nóng)業(yè)害蟲所造成的農(nóng)產(chǎn)品損失每年達到15~25%。大規(guī)模地使用化學農(nóng)藥是當前控制害蟲的主要策略。但是化學農(nóng)藥的殺蟲專一性差，田間殘效期較長，同時容易誘發(fā)害蟲對其產(chǎn)生抗藥性，特別是殘留化學農(nóng)藥對農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境的污染，導致婦女流產(chǎn)、嬰兒畸形以及誘發(fā)人類各種癌癥等疾病，因此隨著人類環(huán)境保護意識的增強，高效低毒的生物農(nóng)藥已成為當今農(nóng)藥的發(fā)展方向。相對于常規(guī)的化學農(nóng)藥而言，生物農(nóng)藥具有作用方式獨特，防止對象專一，對天敵等有益生物安全，用量小，降解快，對人、畜、環(huán)境風險性低，特別適用于病、蟲、草害綜合防治等特點，是一種安全性更高的無污染農(nóng)藥或無公害農(nóng)藥，即與環(huán)境相容、作用機制獨特的綠色農(nóng)藥。
[0003]W^iCamellia O/ei/era)起源于中國，為山茶科山茶屬植物,在中國具有悠久的栽培歷史，主要分布在湖南、江西、湖北、廣西、安徽等17個省的丘陵地區(qū)，以湖南栽培最多。油茶是與橄欖、油棕樹和椰子齊名的世界四大木本食用油源樹種。油茶葉是油茶樹的葉片，油茶葉所含的化學成分主要有皂苷類、黃酮類及鞣質(zhì)類，是醫(yī)藥、農(nóng)藥工業(yè)的原料。其中皂苷類化合物是當今天然藥物研究的熱門領域，具有多種藥理作用；而且茶皂素單獨作為農(nóng)業(yè)助劑，可提高農(nóng)藥的殺蟲、殺菌效果，這些優(yōu)點是化學合成表面活性劑所無法與之相比的；是當前市場重要的天然的非離子綠色表面活性劑；單獨作為生物農(nóng)藥，茶皂素可直接用于防治某些病害蟲。符合當前農(nóng)藥工業(yè)和農(nóng)業(yè)綠色環(huán)保的可持續(xù)發(fā)展，具有良好的應用前景。但該屬植物化學成分復雜，生物活性多樣，長期以來，油茶的開發(fā)和應用都未涉及農(nóng)藥領域，它的藥用價值被忽略，油茶葉大多掉落在油茶林地，直接腐爛而浪費。目前還沒有報道利用油茶葉提取植物源殺蟲劑，若能充分利用油茶葉資源，發(fā)掘其藥用價值，開發(fā)出植物源殺蟲劑，可以使其變廢為寶，增加農(nóng)村地區(qū)的農(nóng)民收入，還利于促進我國油茶產(chǎn)業(yè)化的健康發(fā)展，產(chǎn)生良好的社會效益和經(jīng)濟效益。
[0004]綠層蔑(Metarhizium中文通用名:金龜子綠僵菌(簡稱綠僵菌),屬子囊菌門、肉座菌目、麥角菌科、綠僵菌屬，是一種廣譜的昆蟲病原菌。綠僵菌是能夠寄生于多種害蟲的一類殺蟲真菌，通過體表入侵作用進入害蟲體內(nèi)，在害蟲體內(nèi)不斷增繁殖通過消耗營養(yǎng)、機械穿透、產(chǎn)生毒素，并不斷在害蟲種群中傳播，使害蟲致死。綠僵菌具有一定的專一性，對人畜無害，同時還具有不污染環(huán)境、無殘留、害蟲不會產(chǎn)生抗藥性、菌劑易生產(chǎn)等優(yōu)點，具有廣闊的應用前景，在國外應用其防治害蟲的面積超過白僵菌，防治效果可與白僵菌媲美。目前白僵茵防治蟲害的主要問題是綠僵菌單獨使用，毒力不夠，殺蟲效率不高、殺蟲速度較慢，受環(huán)境影響較大和效果不穩(wěn)定等弱點，影響了其在農(nóng)林害蟲中的防治效果，因而在一定程度上限制了該類真菌殺蟲劑的大規(guī)模應用。
[0005]近年來，復配殺蟲劑對于解決單劑農(nóng)藥所帶來的問題具有十分積極的作用。例如，CN200910225149.9公開了一種綠僵菌復配殺蟲組合物及其應用，組合物的有效成分為金龜子綠僵菌和一種新煙堿類殺蟲劑，其中組合物中綠僵菌的含量為I~100億孢子/克，新煙堿類殺蟲劑的含量為10~200克/千克，其余為農(nóng)藥輔助成分。這種綠僵菌與化學農(nóng)藥的復配組合物，與單用綠僵菌比較施用方便，藥效穩(wěn)定，速效性好；與單用化學農(nóng)藥相比，持效期長，減少化學農(nóng)藥的使用量，減少環(huán)境污染；組合物有效組分的作用機理不同，害蟲不容易產(chǎn)生抗藥性；但是這種復配農(nóng)藥與綠色農(nóng)藥要求有一定的距離。中國發(fā)明專科申請201310480725.0公開了一種殺蟲劑組合物，該殺蟲劑組合物包括以下重量份的原料:茶皂素25-30份；綠僵菌15-20份；伏蟲隆6-9份；增效組分10-13份；乳化劑5_7份；這種綠僵菌與植物殺蟲劑、化學殺蟲劑的復配使得蟲害大大減少，并且通過增效組分也可以大大提高藥劑到達靶標的濃度，取得更好的殺蟲效果。其中伏蟲隆是苯甲酰脲類殺蟲劑，雖然是一種重要的高效低毒殺蟲劑，但是這種復配農(nóng)藥與綠色農(nóng)藥還是有一定的距離。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明要解決的技術問題是，提供一種油茶葉提取物與綠僵菌復配殺蟲劑，該復配殺蟲劑殺蟲譜寬，活性高，效果穩(wěn)定，殺蟲效果快，殘效期長，對環(huán)境影響小，使用方便；且為油茶葉資源的利用提供了一條有效途徑。
[0007]本發(fā)明解決其技術問題采用的技術方案是:
本發(fā)明之一種油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶葉提取物30~60% ;金龜子綠僵菌10~30% ;表面活性劑5~20% ;助劑10~20% ；填料5~15%。
[0008]進一步，所述油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶葉提取物60% ;金龜子綠僵菌10% ;表面活性劑10% ;助劑15% ;填料5%。
[0009]進一步，所述油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，所述由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶葉提取物40% ;金龜子綠僵菌20% ;表面活性劑20% ;助劑10% ;填料10%。
[0010]進一步，所述油茶葉提取物采用以下方法制成:
(O混合溶劑提取:將油茶葉經(jīng)曬干后，經(jīng)粉碎機粉碎，過200目篩，對過篩物用體積比:I~3:1 (優(yōu)選2:1)甲醇和丙酮混合提取液加熱至65~80°C (優(yōu)選75°C )回流提取2~4次(優(yōu)選3次)，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質(zhì)量(g)=7~9:1(優(yōu)選8:1 )，每次提取時間為2~4小時(優(yōu)選3小時)，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發(fā)儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得甲醇和丙酮提取物浸膏；揮發(fā)的甲醇和丙酮回收循環(huán)利用；
(2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質(zhì)量(g)=2~4:1 (優(yōu)選3:1);
(3)萃取:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入環(huán)己烷，所加入環(huán)己烷的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=2~4:1 (優(yōu)選3:1 )，攪拌5~10分鐘(優(yōu)選10分鐘)，然后靜置萃取2~4小時(優(yōu)選3小時)后分層，取上層溶劑相進行減壓蒸餾回收環(huán)己烷，收集下層水相，反復萃取3~5次(優(yōu)選3次)，合并每次萃取的下層水相；
(4)二次萃取:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加入四氯化碳的體積:下層水相合并液的體積=2~4:1(優(yōu)選3:1)，攪拌5~10分鐘(優(yōu)選10分鐘)，然后靜置萃取2~4小時(優(yōu)選3小時)后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復萃取3~5次(優(yōu)選3次)，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶葉提取物浸膏，即為油茶葉提取物。
[0011]進一步，所述金龜子綠僵菌是活孢子的濃度為101°個/g~IO12個/g的孢子粉。
[0012]進一步,所述表面活性劑為十二烷基苯橫酸納、十二烷基硫酸納、十二烷基苯橫酸鈣、壬基酚聚氧乙烯醚和山梨醇聚氧乙烯醚中的一種或幾種的混合物。
[0013]進一步，所述助劑為聚乙烯醇、Morwet D-400、羧甲基纖維素、分散劑Z、木質(zhì)素磺酸鈣中的一種或幾種的混合物。
[0014]進一步，所述填料為硅藻土、膨潤土、凹凸棒土、淀粉、白炭黑和高嶺土中的一種或幾種的混合物。[0015]本發(fā)明之油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑的制備方法:將油茶葉提取物浸膏干燥后，經(jīng)粉碎機粉碎，過200目篩，再將過篩物與金龜子綠僵菌
anisopIiae )、表面活性劑、助劑、填料按預定質(zhì)量百分比混勻，即成。
[0016]研究表明，油茶葉提取物中的茶皂素殺蟲劑藥效持續(xù)時間超過其它植物型殺蟲劑和化學農(nóng)藥，具有高效性，與其它農(nóng)藥復配，還可以節(jié)省原藥的50%~70%。茶皂素與其它化學農(nóng)藥相比，一個顯著的特點，就是對高級動物口服無毒性，克服了化學農(nóng)藥對人體的毒害作用。
[0017]本發(fā)明之油茶葉提取物的制備方法，采用混合溶劑提取與水提聯(lián)合提取，環(huán)己烷、四氯化碳二次萃取，各部分萃取液經(jīng)減壓蒸餾，所得油茶葉提取物中茶皂素純度更高，色澤更好，品質(zhì)更高；同時實現(xiàn)了溶劑的循環(huán)利用，溶劑損耗少，提取時間短，大大地節(jié)約能源，工藝簡單可靠，易于實現(xiàn)工業(yè)化。
[0018]本發(fā)明利用油茶葉提取物(植物源殺蟲劑)與綠僵菌(微生物殺蟲劑)進行復配制成一種新型殺蟲劑，該復配殺蟲劑具有殺蟲譜寬、活性高、效果穩(wěn)定、殺蟲效果快、抗藥性強、殘效期長、環(huán)境影響小、使用方便的特點；試驗證明，在噴灑稀釋1000倍的本發(fā)明復配殺蟲劑72小時后，平均殺蟲率可達80%以上。該復配殺蟲劑不但可以微生物農(nóng)藥速效性差的缺點，還可以提高植物源殺蟲劑的殺蟲活性。
[0019]本發(fā)明之油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑可用于果樹、蔬菜、茶葉、甘庶或瓜類等經(jīng)濟作物害蟲的防治。利用本發(fā)明，可充分利用山區(qū)豐富的油茶葉資源，解決目前生物農(nóng)藥缺乏的問題，而且可以促進山區(qū)經(jīng)濟的發(fā)展，同時，也可推動綠僵菌的大規(guī)模應用。
【具體實施方式】
[0020]以下結合實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0021]實施例1
本實施例復配殺蟲劑由以下質(zhì)量百分比的原料配制而成:油茶葉提取物60%、金龜子緣懂麗iMetarhiζium anisopliae)孢子粉(孢子粉中含活孢子的濃度為101°個/g) 10%、十二烷基苯磺酸鈉10%、Morwet D-400 15%、硅藻土 5%。
[0022]所述油茶葉提取物按照以下方法制備而成:
(I)混合溶劑提取:將油茶葉經(jīng)曬干后，用粉碎機粉碎，過200目篩，對過篩物加甲醇和丙酮混合提取液(甲醇和丙酮體積比8:1 )，加熱至75°C回流提取3次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質(zhì)量(g) =8:1，每次提取時間為3小時，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發(fā)儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得到甲醇和丙酮提取物浸膏；揮發(fā)的甲醇和丙酮回收利用；
(2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，得甲醇和丙酮提取物水溶液，所加入的水的質(zhì)量相當于浸膏質(zhì)量的3倍；
(3)萃取:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入環(huán)己烷，所加入環(huán)己烷的體積相當于甲醇和丙酮提取物水溶液的體積3倍，攪拌10分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取上層溶劑相進行減壓蒸餾回收環(huán)己烷，收集下層水相，反復萃取3次，合并每次萃取的下層水相；
(4)二次萃取:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加入四氯化碳的體積相當于下層水相合并液的體積3倍，攪拌10分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復萃取3次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶葉提取物浸膏，烘干，即為油茶葉提取物。
[0023]本實施例復配殺蟲劑制備:將所述油茶葉提取物用粉碎機粉碎，過200目篩，將所述過200目篩的油茶葉提取物粉與金龜子綠僵菌(ifeiarAiziw?孢子粉(孢子粉中含活孢子的濃度為IO12個/g)、十二烷基苯磺酸鈉、Morwet D-400、娃藻土混勻，即成。
[0024]本實施例油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑殺蟲藥效如表1-3所示。
[0025](一)對斜紋夜蛾的毒殺作用
將實施例1復配殺蟲劑用水按不同倍數(shù)(1000倍、1500倍、2000倍)稀釋后，噴灑到甘藍葉表面，然后將活的斜紋夜蛾飼養(yǎng)于甘藍葉上進行殺蟲藥效試驗，重復三次，另設3組對照組:對照組1:不噴灑實施例1復配殺蟲劑；對照組2:噴灑稀釋1000倍的油茶葉提取物殺蟲劑(具體配方:油茶葉提取物浸膏粉、十二烷基苯磺酸鈉、Morwet D-400、娃藻土按質(zhì)量百分比70: 10: 15: 5混勻)；對照組3:噴灑稀釋1000倍的金龜子綠僵菌殺蟲劑(具體配方:金龜子綠僵菌aflisoWiae)孢子粉(活孢子的濃度為IO12個/g)、十二燒基苯磺酸鈉、Morwet D-400、硅藻土按質(zhì)量百分比70: 10: 15: 5混勻)。分別在不同的時間對殺蟲效果進行統(tǒng)計，結果見表1。
【權利要求】
1.一種油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶葉提取物30~60%、金龜子綠僵菌10~30%、表面活性劑5~20%、助劑10~20%、填料5~15%。
2.如權利要求1所述的所述油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶葉提取物60% ;金龜子綠僵菌10% ;表面活性劑10% ;助劑15% ;填料5%
3.如權利要求1所述的所述油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，由以下質(zhì)量百分比的原料制成:油茶葉提取物40% ;金龜子綠僵菌20% ;表面活性劑20% ;助劑10% ;填料10%。
4.根據(jù)權利要求1或2或3所述的油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述油茶葉提取物采用以下方法制成: (1)混合溶劑提取:將油茶葉曬干后，用粉碎機粉碎，加入甲醇和丙酮混合提取液，所述甲醇和丙酮混合提取液中，甲醇和丙酮的體積比為I~3: 1，加熱至65~80°C回流提取2~4次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質(zhì)量(g)=7~9:1，每次提取時間為2~4小時，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發(fā)儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得甲醇和丙酮提取物浸膏；揮發(fā)的甲醇和丙酮回收利用； (2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，得甲醇和丙酮提取物水溶液，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質(zhì)量(g)=2~4:1 ; (3)萃取:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入環(huán)己烷，所加環(huán)己烷的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=2~4:1，攪拌5~10分鐘，然后靜置萃取2~4小時后分層，取上層溶劑相進行減壓蒸餾回收環(huán)己烷，收集下層水相，反復萃取3~5次，合并每次萃取的下層水相； (4)二次萃取:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加四氯化碳的體積:下層水相合并液的體積=2~4:1,攪拌5~10分鐘,然后靜置萃取2~4小時后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復萃取3~5次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶葉提取物浸膏，烘干，即得油茶葉提取物。
5.根據(jù)權利要求4所述的油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(1)，將油茶葉曬干后，用粉碎機粉碎，過200目篩，在過篩物中加入甲醇和丙酮混合提取液，所述甲醇和丙酮混合提取液中，甲醇和丙酮的體積比為2:1，加熱至75°C回流提取3次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質(zhì)量(g)=8:l，每次提取時間為3小時，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發(fā)儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發(fā)，得甲醇和丙酮提取物浸膏。
6.根據(jù)權利要求4或5所述的油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(2)，向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質(zhì)量(g)=3:l。
7.根據(jù)權利要求4~6之一所述的油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(3)，向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入環(huán)己烷，所加環(huán)己烷的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=3:1，攪拌10分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取上層溶劑相進行減壓蒸餾回收環(huán)己烷，收集下層水相，反復萃取3次，合并每次萃取的下層水相。
8.根據(jù)權利要求4~7之一所述的油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(4)，向步驟(3)所得下層水相合并液中加入四氯化碳，所加入四氯化碳的體積:下層水相合并液的體積=3:1，攪拌10分鐘，然后靜置萃取3小時后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收四氯化碳，得下層濃縮液，反復萃取3次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的四氯化碳，得到油茶葉提取物浸膏。
9.根據(jù)權利要求1~8之一所述的油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述金龜子綠僵菌是活孢子的濃度為101°個/g~IO12個/g的孢子粉； 所述表面活性劑為十二烷基苯磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、十二烷基苯磺酸鈣、壬基酚聚氧乙烯醚和山梨醇聚氧乙烯醚中的一種或幾種的混合物；所述助劑為聚乙烯醇、MorwetD-400、羧甲基纖維素、分散劑Z、木質(zhì)素磺酸鈣中的一種或幾種的混合物；所述填料為硅藻土、膨潤土、凹凸棒土、淀粉、白炭黑和高嶺土中的一種或幾種的混合物。
10.一種如權利要求1~9之一所述的油茶葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑的制備方法，其特征在于，將油茶葉提取物浸膏干燥后，經(jīng)粉碎機粉碎，過200目篩，再將過篩物與金龜子綠僵菌(Metarhizium anisopIiae)、表面活性劑、助劑、填料按預定質(zhì)量百分比混勻，即成。
【文檔編號】A01N65/08GK103828842SQ201410076112
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月4日 優(yōu)先權日:2014年3月4日
【發(fā)明者】毛紹名, 章懷云, 劉高強 申請人:中南林業(yè)科技大學