油桐葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑及其制備方法
【專利摘要】油桐葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑及其制備方法，所述復配殺蟲劑由以下質量百分比的原料混配制成：油茶果殼提取物25～55%；球孢白僵菌菌劑12～32%；表面活性劑8～25%；助劑8～25%；填料3～25%。本發明還包括所述復配殺蟲劑的制備方法。本發明復配殺蟲劑具有殺蟲譜寬、活性高、效果穩定、環境影響小、殺蟲效果快、藥效保持時間長、抗藥性強、使用方便等特點。利用本發明，還可提高油茶的附加值，同時推動白僵菌的工業規模化發展。
【專利說明】油桐葉提取物與金龜子綠僵菌復配殺蟲劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種植物源殺蟲劑與微生物殺蟲劑復配殺蟲劑及其制備方法，尤其是涉及一種油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑及其制備方法
【背景技術】
[0002]目前在全球范圍內，由于農業害蟲所造成的農產品損失每年達到15~25%。大規模地使用化學農藥是當前控制害蟲的主要策略。但是化學農藥的殺蟲專一性差，田間殘效期較長，同時容易誘發害蟲對其產生抗藥性，特別是殘留化學農藥對農產品和環境的污染，導致婦女流產、嬰兒畸形以及誘發人類各種癌癥等疾病，因此隨著人類環境保護意識的增強，高效低毒的生物農藥已成為當今農藥的發展方向。相對于常規的化學農藥而言，生物農藥具有作用方式獨特，防止對象專一，對天敵等有益生物安全，用量小，降解快，對人、畜、環境風險性低，特別適用于病、蟲、草害綜合防治等特點。
[0003]在眾多的新型生物農藥中，植物源農藥具有安全，高效，低毒，低殘留等化學農藥所不能媲美的優點，以其在自然環境中自身易降解、無公害的優勢已成為綠色農藥的首選之一。盡管植物源農藥有諸多優點，但也有其自身的弱點。如，對光不穩定，植物活性毒素只有在光照條件下才有作用，但其光活性過程也是降解過程、持效期短。
[0004]微生物農藥是21世紀農藥工業的新產業，代表著植物保護的方向，其最大的優勢在于克服化學農藥對生態環境的污染和減少在農副產品中農藥殘留量；但是，微生物殺蟲劑也具有一些不足之處，如較化學農藥見效慢，某些微生物在自然環境中穩定性相對較差，長期使用可能誘導害蟲的抗藥性而提高藥用成本，研究不夠深入。
[0005]W^iCamellia O/ei/era)起源于中國，為山茶科山茶屬植物,在中國具有悠久的栽培歷史，主要分布在湖南、江西、`湖北、廣西、安徽等17個省的丘陵地區，以湖南栽培最多。油茶是與橄欖、油棕樹和椰子齊名的世界四大木本食用油源樹種。油茶果殼是油茶果的外殼，是油茶加工生產中的重要副產品，資源十分豐富。油茶果殼的主要化學成分是木質素、高聚糖、茶皂素和多酚等天然化合物，是提煉和制取工業和化工農藥等的重要原料，綜合利用大有作為。其中油茶果殼中的多縮戊搪，在酸性條件下加熱，可得到15 —16%的糠醛。糠醛可以制得多種化工產品，國內以糠醛為原料合成高效低毒的農藥馬拉松；還有從油茶果殼中提取茶皂素，單獨作為農藥助劑，可提高農藥的殺蟲、殺菌效果。然而，長期以來，油茶果殼大多被農村居民直接作燃料，僅有少數油茶果殼作為工業資源利用提取茶皂素、多糖和抗氧化物質等。目前還未見到利用油茶果殼提取植物源殺蟲劑的報道。
[0006]白僵菌)是目前害蟲防治中應用較廣的一種昆蟲病原真菌，其殺蟲譜廣，對多種農林害蟲具有致死作用，且致病力強，對環境無污染。在森林防護中具有經濟和持效的作用，在蟲害的防治中所創造的社會生態效益，是化學防治無法比擬的。白僵菌屬分為6個種，分別為球孢白僵菌{Beauveriabassiana)、布氏白僵菌(Peauveriabrongniartif)、多形白僵菌(Beauveriaamorpha)、蘇格拉白僵菌Qiemveriacaledonica)、黏抱白僵菌Beauveriavelata)和螺抱白僵菌iBeauveriavermiconia)。其中被廣泛選擇作為真菌殺蟲劑應用于防治森林害蟲、農業害蟲的是球孢白僵菌，因而通常所說的白僵菌生物農藥多指的是球孢白僵菌生物農藥。由于白僵菌孢子萌發的適宜條件是溫度為15~30°C，相對濕度為90~100% ;溫度過高(30°C以上)孢子萌發率低，菌絲易老化；溫度過低(15°C以下)孢子萌發率低，菌絲生長緩慢。高濕度有利于孢子吸收水分萌發；低濕度難以吸收水分致使萌發率低甚至不萌發。所以，目前白僵菌防治蟲害的主要問題是防治效果受環境的濕度影響較大，在相對濕度較低時，防治效果不理想，且殺蟲效率不高和殺蟲速度較慢，影響了其在農林害蟲中的防治效果。
[0007]近年來，生物農藥與化學農藥的復配研究十分活躍，對于解決化學農藥所帶來的問題具有十分積極的作用。例如，CN201210137912.4公開了一種植物提取物與化學農藥復配殺蟲劑及其制備方法，利用牛心樸子提取物，阿維菌素，助溶劑，乳化劑，溶劑混配而成；既發揮了牛心樸子提取物，阿維菌素二者各自的優勢，又補充各自的不足。可以起到增效作用，減少化學農藥的用量；降低殘留污染，延緩害蟲的抗藥性；彌補了植物農藥緩效、使用成本較高的缺點。201310388344.X公開了一種白僵菌毒死蜱殺蟲劑及其制備方法；利用白僵菌孢子粉I~50%、毒死蜱原藥3~5%、紫外保護劑0.5~5%、載體40~95%%混配而成，這種由微生物殺蟲劑與化學農藥復配殺蟲劑同時具有速效性和長效性兩個特點，減少化學農藥的使用量，降低害蟲的抗藥性。但是生物農藥與化學農藥的復配農藥與綠色農藥還是有一定的距離。

【發明內容】

[0008]本發明要解決的技術問題是，提供一種油茶果殼提取物與球孢白僵菌bassiana)復配殺蟲劑，該復配殺蟲劑殺蟲活性高，為油茶加工副產物油茶果殼的利用提供了有效途徑。
[0009]本發明解決其技術問題采用的技術方案是:
本發明之油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑由以下質量百分比的原料混配制成:油茶果殼提取物25~55% ;`球孢白僵菌菌劑12~32% ;表面活性劑8~25% ;助劑8~25% ;填料3~25%。
[0010]進一步，所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，由以下質量百分比的原料制成:油茶果殼提取物30~50% ;球孢白僵菌菌劑15~30% ;表面活性劑10~20% ;助劑10~20% ;填料5~20%。
[0011]進一步，所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，由以下質量百分比的原料制成:油茶果殼提取物50%、球孢白僵菌菌劑15% ;表面活性劑10% ;助劑20% ;填料5%。
[0012]進一步，所述油茶果殼提取物采用以下方法制成:
(1)混合溶劑提取:將油茶果殼經過60~80°C(優選70°C )烘烤8~10小時(優選9小時)后，經粉碎機粉碎，過200目篩，對過篩物體積比:8~10:1，優選9:1用甲醇和丙酮混合提取液加熱至65~75°C (優選70°C )回流提取2~4次(優選3次)，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質量(g)=6~8:l (優選7:1 )，每次提取時間為2~4小時(優選3小時)，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發，得甲醇和丙酮提取物浸膏；揮發的甲醇和丙酮回收利用；
(2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質量(g) =2~3:1 (優選2.5:1)；
(3)萃取:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入正己烷，所加入正己烷的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=2~4:1 (優選3:1)，攪拌5~10分鐘(優選8分鐘)，然后靜置萃取6~8小時(優選7小時)后分層，取上層溶劑相進行減壓蒸餾回收正己烷，收集下層水相，反復萃取3~5次(優選3次)，合并每次萃取的下層水相；
(4)二次萃取:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入二氯乙烷，所加入二氯乙烷的體積:下層水相合并液的體積=2~4:1 (優選3: 1)，攪拌5~10分鐘(優選8分鐘)，然后靜置萃取6~8小時(優選7小時)后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收二氯乙烷，得下層濃縮液，反復萃取3~5次(優選3次)，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的二氯乙烷，得到油茶果殼提取物浸膏，烘干，即為油茶果殼提取物。
[0013]進一步，所述球孢白僵菌菌劑中分生孢子的濃度為101°~IO12個/g的孢子粉(活孢率達90%以上)。 [0014]進一步,所述表面活性劑為十二烷基苯橫酸納、十二烷基硫酸納、十二烷基苯橫酸鈣、壬基酚聚氧乙烯醚和山梨醇聚氧乙烯醚中的一種或幾種的混合物。
[0015]進一步，所述助劑為聚乙烯醇、Morwet D-400、羧甲基纖維素、分散劑Z、木質素磺酸鈣中的一種或幾種的混合物。
[0016]進一步，所述填料為硅藻土、膨潤土、凹凸棒土、淀粉、白炭黑和高嶺土中的一種或幾種的混合物。
[0017]本發明之油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑的制備方法:將烘干的油茶果殼提取物用粉碎機粉碎，過200目篩，再將過篩物與球孢白僵菌菌劑、表面活性劑、助劑、填料按預定配比混勻，即成。
[0018]研究表明，油茶果殼提取物中的茶皂素殺蟲劑藥效持續時間超過其它植物型殺蟲劑和化學農藥，具有高效性，與其它農藥復配，還可以節省原藥的50%~70%。茶皂素與其它化學農藥相比，一個顯著的特點，就是對高級動物口服無毒性，克服了化學農藥對人體的毒害作用。
[0019]本發明之油茶果殼提取物的制備方法，采用有機混合溶劑提取與水提聯合提取，所得油茶果殼提取物中茶皂素純度更高，色澤更好，品質更佳；同時也降低了溶劑的損耗，實現了溶劑的循環利用，縮短了提取時間，大大地節約能源，工藝簡單可靠，易于工業化。
[0020]本發明利用油茶果殼提取物(植物源殺蟲劑)與球孢白僵菌劑(微生物殺蟲劑)進行復配制成一種新型殺蟲劑，該新型復配殺蟲劑中，油茶果殼提取物與球孢白僵菌混配，具有縮短潛伏期和增強侵染力的協同增效作用，制成的復配殺蟲劑具有殺蟲譜寬、活性高、效果穩定、環境影響小、殺蟲效果快、藥效保持時間長、抗藥性強、使用方便等特點。試驗證明，在噴灑稀釋1000倍的本發明復配殺蟲劑72小時后，平均殺蟲率可達90%以上。該復配殺蟲劑不但可以減少微生物農藥速效性差的缺點，還可以提高植物源殺蟲劑的殺蟲活性。
[0021]本發明之油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑可用于果樹、蔬菜、茶葉、甘庶或瓜類等經濟作物的害蟲的防治。利用本發明，可充分利用山區豐富的油茶果殼資源，開發出綠色植物源殺蟲劑，不但解決目前生物農藥缺乏的問題，而且可以促進山區經濟的發展；同時，也可推動白僵菌的工業規模化發展。【具體實施方式】
[0022]以下結合實施例對本發明作進一步說明。
[0023]實施例1
本實施例復配殺蟲劑由以下質量百分比的原料配制而成:油茶果殼提取物過200目篩的過篩物50%、球孢白僵菌菌劑(分生孢子的濃度為IO12個/g)15%、十二烷基苯磺酸鈣10%、Morwet D-400 20%、硅藻土 5%。
[0024]所述油茶果殼提取物浸膏粉按照以下方法制成:
Cl)混合溶劑提取:將油茶果殼經過70°C烘烤10小時后，經粉碎機粉碎，過200目篩，對過篩物用體積比:9:1甲醇和丙酮混合提取液加熱至70°C回流提取3次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質量(g)=7:l，每次提取時間為3小時，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發，得到甲醇和丙酮提取物浸膏；揮發的甲醇和丙酮回收利用；
(2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入的水的質量相當于浸膏質量的2.5倍；
(3)萃取:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入正己烷，所加入正己烷的體積相當于甲醇和丙酮提取物水溶液的體積3倍，攪拌8分鐘，然后靜置萃取7小時后分層，取上層溶劑相進行減壓蒸餾回收正己烷，收集下層水相，反復萃取3次，合并每次萃取的下層水相；
(4)二次萃取:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入二氯乙烷，所加入二氯乙烷的體積相當于下層水相合并液的體積3倍，攪拌8分鐘，然后靜置萃取7小時后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收二氯乙烷，得下層濃縮液，反復萃取3次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的二氯乙烷，得到油茶果殼提取物浸膏。
[0025]將所述油茶果殼提取物浸膏干燥后，經粉碎機粉碎，過200目篩，即得過200目篩的油茶果殼提取物浸膏粉。
[0026]本發明油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑的制備方法:將過200目篩的油茶果殼提取物浸膏粉與球孢白僵菌菌劑(分生孢子的濃度為IO12個/g)、十二烷基苯磺酸鈣、Morwet D-400、娃藻土按質量百分比50: 15: 10: 20: 5混勻。本實施例1油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑殺蟲藥效如表1-3所示。
[0027](一)對斜紋夜蛾的毒殺作用
將實施例1復配殺蟲劑用水按不同倍數(1000倍、1500倍、2000倍)稀釋后，噴灑到甘藍葉表面，然后將活的斜紋夜蛾飼養于甘藍葉上進行殺蟲藥效試驗，重復三次，另設3組對照組:對照組1:不噴灑實施例1復配殺蟲劑；對照組2:噴灑稀釋1000倍的油茶果殼提取物殺蟲劑(具體配方:油茶果殼提取物浸膏粉、十二烷基苯磺酸HMorwet D-400、娃藻土按質量百分比65: 10: 20: 5混勻);對照組3:噴灑稀釋1000倍的球孢白僵菌殺蟲劑(具體配方:球孢白僵菌孢子粉(分生孢子的濃度為IO12個/g)、十二烷基苯磺酸鈣、Morwet D-400、硅藻土按質量百分比65: 10: 20: 5混勻)。分別在不同的時間對殺蟲效果進行統計，結果見表1。
【權利要求】
1.一種油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，由以下質量百分比的原料混配制成:油茶果殼提取物25~55% ;球孢白僵菌菌劑12~32% ;表面活性劑8~25% ；助劑8~25% ;填料3~25%。
2.根據權利要求1所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，由以下質量百分比的原料混配制成:油茶果殼提取物30~50% ;球孢白僵菌菌劑15~30% ；表面活性劑10~20% ;助劑10~20% ;填料5~20%。
3.根據權利要求1所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，由以下質量百分比的原料混配制成:油茶果殼提取物50%、球孢白僵菌菌劑15% ;表面活性劑10% ;助劑20% ;填料5%O
4.根據權利要求1或2或3所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述油茶果殼提取物采用以下方法制成: Cl)混合溶劑提取:將油茶果殼經過60~80°C烘烤8~10小時后，經粉碎機粉碎，過200目篩，對過篩物用體積比:8~10:1甲醇和丙酮混合提取液加熱至65~75°C回流提取2~4次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質量(g) =6~8:1，每次提取時間為2~4小時，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發，得甲醇和丙酮提取物浸膏；揮發的甲醇和丙酮回收利用； (2)水提:向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質量(g)=2~3:1 ; (3)萃取:向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入正己烷，所加入正己烷的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=2~4:1，攪拌5~10分鐘，然后靜置萃取6~8小時后分層，取上層溶劑 相進行減壓蒸餾回收正己烷，收集下層水相，反復萃取3~5次，合并每次萃取的下層水相； (4)二次萃取:向步驟(3)所得下層水相合并液中加入二氯乙烷，所加入二氯乙烷的體積:下層水相合并液的體積=2~4:1,攪拌5~10分鐘,然后靜置萃取6~8小時后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收二氯乙烷，得下層濃縮液，反復萃取3~5次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的二氯乙烷，得到油茶果殼提取物浸膏，烘干，即為油茶果殼提取物。
5.根據權利要求4所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(I )，將油茶果殼經過70°C烘烤9小時后，經粉碎機粉碎，過200目篩，對過篩物用體積比:9:1甲醇和丙酮混合提取液加熱至70°C回流提取3次，每次加入甲醇和丙酮混合提取液的體積(ml):過篩物的質量(g)=7:l，每次提取時間為3小時，合并每次的提取液后，用旋轉蒸發儀進行減壓蒸餾去除甲醇和丙酮，直至甲醇和丙酮全部揮發，得甲醇和丙酮提取物浸膏。
6.根據權利要求4或5所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(2)，向步驟(1)所述甲醇和丙酮提取物浸膏中加水混勻，所加入水的體積(ml):甲醇和丙酮提取物浸膏質量(g)=2.5:l。
7.根據權利要求4~6之一所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(3)，向步驟(2)所述甲醇和丙酮提取物水溶液中加入正己烷，所加入正己烷的體積:甲醇和丙酮提取物水溶液的體積=3:1，攪拌8分鐘，然后靜置萃取7小時后分層，取上層溶劑相進行減壓蒸餾回收正己烷，收集下層水相，反復萃取3次，合并每次萃取的下層水相。
8.根據權利要求4~7之一所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述步驟(4)，向步驟(3)所得下層水相合并液中加入二氯乙烷，所加入二氯乙烷的體積:下層水相合并液的體積=3:1，攪拌8分鐘，然后靜置萃取7小時后分層，取下層溶劑相進行減壓蒸餾回收二氯乙烷，得下層濃縮液，反復萃取3次，合并每次萃取的下層濃縮液后，進行減壓蒸餾去除殘余的二氯乙烷，得到油茶果殼提取物浸膏，烘干，即為油茶果殼提取物。
9.根據權利要求1~8之一所述的油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑，其特征在于，所述球孢白僵菌菌劑中分生孢子的濃度為IOltl~IO12個/g的孢子粉；所述表面活性劑為十二烷基苯橫酸納、十二烷基硫酸納、十二烷基苯橫酸鈣、壬基酚聚氧乙稀釀和山梨醇聚氧乙烯醚中的一種或幾種的混合物；所述助劑為聚乙烯醇、Morwet D-400、羧甲基纖維素、分散劑Z、木質素磺酸鈣中的一種或幾種的混合物；所述填料為硅藻土、膨潤土、凹凸棒土、淀粉、白炭黑和高嶺土中的一種或幾種的混合物。
10.一種如權利要求1~9之一所述油茶果殼提取物與球孢白僵菌復配殺蟲劑的制備方法，其特征在于，將烘干的油茶果殼提取物用粉碎機粉碎，過200目篩，再將過篩物與球孢白僵菌菌齊?、表面活性劑、助齊?、填料按預定配比混勻，即成。
【文檔編號】A01N63/04GK103814957SQ201410076250
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2014年3月4日 優先權日:2014年3月4日
【發明者】毛紹名, 章懷云, 劉高強 申請人:中南林業科技大學