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制造必需脂肪酸的非人轉基因動物及其用途的制作方法

文檔序號:11140123閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種非人轉基因動物,所述非人轉基因動物具有含有可操作地連接至啟動子的第一外源和/或異源核酸分子的基因組,其中,所述第一外源和/或異源核酸分子包含:(i)SEQ ID NO.1的核苷酸序列;或(ii)作為SEQ ID NO.1的生物活性變體且與SEQ ID NO.1具有至少約70%的一致性的核苷酸序列,其中,當在所述轉基因動物中表達所述第一外源和/或異源核酸分子時,所述轉基因動物由飽和脂肪和/或碳水化合物制造n-6脂肪酸。

2.如權利要求1所述的非人轉基因動物,其中,所述基因組進一步含有第二外源和/或異源核酸分子,所述第二外源和/或異源核酸分子含有編碼將至少一種n-6脂肪酸轉化為一種或多種n-3脂肪酸的酶的核苷酸序列,其中,當在所述轉基因動物中表達所述第一外源和/或異源核酸分子以及第二外源和/或異源核酸分子時,所述轉基因動物由飽和脂肪和/或碳水化合物制造n-3脂肪酸和任選的n-6脂肪酸。

3.如權利要求2所述的非人轉基因動物,其中,編碼將至少一種n-6脂肪酸轉化為一種或多種n-3脂肪酸的酶的核苷酸序列是:(i)SEQ ID NO.2的核苷酸序列;或(ii)作為SEQ ID NO.2的生物活性變體且與SEQ ID NO.2具有至少約70%的一致性核苷酸序列。

4.如權利要求1-3中任一項所述的非人轉基因動物,其中,所述轉基因動物中的n-6脂肪酸與n-3脂肪酸的比值為約1:1或更低。

5.如權利要求1-4中任一項所述的非人轉基因動物,其中,所述非人轉基因動物選自于由奶牛、小鼠、大鼠、豬、綿羊、山羊、魚、水牛、兔、家禽和牲畜所組成的組。

6.如權利要求1-5中任一項所述的非人轉基因動物,其中,所述基因組進一步包含與受脂肪代謝影響的病癥相關的基因修飾。

7.如權利要求6所述的非人轉基因動物,其中,所述基因修飾包括與受脂肪代謝影響的病癥相關的基因的插入、缺失和/或突變。

8.衍生自權利要求2-5中任一項所述的非人轉基因動物的食物產品。

9.如權利要求8所述的食物產品,其中,所述食物產品包括肉、奶、蛋、乳制品或它們的任意組合。

10.如權利要求8或9所述的食物產品,其中,所述食物產品中的n-6脂肪酸與n-3脂肪酸的比值為約1或更少。

11.增高動物或由其衍生的食物產品中的n-3脂肪酸含量的方法,所述方法包括:用高碳水化合物和/或高飽和脂肪的飲食飼喂權利要求2-7中任一項所述的非人轉基因動物,從而使所述轉基因動物將至少一部分碳水化合物和/或飽和脂肪轉化為n-3脂肪酸。

12.如權利要求11所述的方法,其中,所述高碳水化合物和/或高飽和脂肪的飲食將必需脂肪酸排除在外。

13.如權利要求11或12所述的方法,其中,將至少一部分碳水化合物和/或飽和脂肪轉化為n-6脂肪酸。

14.如權利要求11-13中任一項所述的方法,其中,所述轉基因動物或由其衍生的食物產品中的n-6脂肪酸與n-3脂肪酸的比值為約1或更少。

15.轉基因構建體,所述轉基因構建體包含可操作地連接至啟動子的第一外源和/或異源核酸分子,其中,所述第一外源和/或異源核酸分子包含:(i)SEQ ID NO.1的核苷酸序列;或(ii)作為SEQ ID NO.1的生物活性變體且與SEQ ID NO.1具有至少約70%的一致性的核苷酸序列,并且其中,所述啟動子至少指導動物細胞中的所述第一外源和/或異源核酸分子的表達。

16.如權利要求15所述的轉基因構建體,所述轉基因構建體進一步包含第二外源和/或異源核酸分子,所述第二外源和/或異源核酸分子含有編碼將n-6脂肪酸轉化為n-3脂肪酸的酶的核苷酸序列。

17.如權利要求16所述的轉基因構建體,其中,編碼將n-6脂肪酸轉化為n-3脂肪酸的酶的核苷酸序列是:(i)SEQ ID NO.2的核苷酸序列;或(ii)作為SEQ ID NO.2的生物活性變體且與SEQ ID NO.2具有至少約70%的一致性的核苷酸序列。

18.如權利要求16或17所述的轉基因構建體,其中,所述第二外源和/或異源核酸分子可操作地連接至相同的啟動子或不同的啟動子,其中,所述相同的啟動子或不同的啟動子指導轉基因動物細胞中的所述第二外源和/或異源核酸分子的表達。

19.如權利要求15-18中任一項所述的轉基因構建體,其中,轉基因動物細胞衍生自如下動物,所述動物選自于由奶牛、小鼠、大鼠、豬、綿羊、山羊、魚、水牛、兔、家禽和牲畜所組成的組。

20.一種治療與缺乏n-3脂肪酸相關的病癥的方法,所述方法包括向被診斷為患有與缺乏n-3脂肪酸相關的病癥或具有與缺乏n-3脂肪酸相關的病癥的風險的受試者給予權利要求8-10中任一項所述的食物產品,其中,所述食物產品的給予增高了受試者中的n-3脂肪酸的含量,從而治療所述病癥。

21.如權利要求20所述的方法,其中,所述病癥選自與如下所組成的組:肥胖、糖尿病、癌癥、心臟疾病、炎癥性疾病、神經退行性疾病、神經精神疾病、骨關節炎、狼瘡、非酒精性脂肪肝疾病、結腸炎和它們的任意組合。

22.確定n-3脂肪酸對與脂肪代謝相關的病癥的影響的方法,所述方法包括:

a.在權利要求1-7中任一項所述的非人轉基因動物中誘導與脂肪代謝相關的病癥的至少一個表型;

b.用高碳水化合物和/或高飽和脂肪的飲食飼喂所述非人轉基因動物;

c.檢測來自(b)的所述非人轉基因動物的響應;以及

d.將所述非人轉基因動物的檢測到的響應與對照進行比較,

其中,所述非人轉基因動物與對照之間的響應方面的差異決定了n-3脂肪酸對所述病癥的影響。

23.如權利要求22所述的方法,其中,所述誘導包括對非人轉基因動物的基因組中的至少一個基因進行修飾,其中,所述的至少一個基因與所述病癥相關。

24.如權利要求23所述的方法,其中,通過插入、缺失和/或突變對所述基因組中的至少一個基因進行修飾。

25.如權利要求22-24中任一項所述的方法,其中,所述誘導包括向所述非人轉基因動物給予誘導病癥的試劑。

26.如權利要求22-25中任一項所述的方法,其中,所述對照是用低碳水化合物和/或低飽和脂肪的飲食飼喂的同類的非人轉基因動物。

27.如權利要求22-25中任一項所述的方法,其中,所述對照是不能將碳水化合物和/或飽和脂肪轉化為一種或多種n-3脂肪酸的非人動物。

28.如權利要求22-25中任一項所述的方法,其中,所述對照是野生型非人動物。

29.如權利要求22-28中任一項所述的方法,其中,所述非人轉基因動物的響應包括與基因組學、代謝組學、脂質組學或蛋白質組學相關的分析物的表達水平。

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