1.一種野茉莉種胚苗莖段離體快繁方法,其特征在于包括以下步驟:
A.選取野茉莉種子消毒處理后,切取種胚接種于初代培養(yǎng)基,獲得無菌苗;
B. 將步驟A獲得的無菌苗剪取莖段接種到增殖培養(yǎng)基中,誘導(dǎo)叢生芽;
C.將步驟B形成的芽接種于生根培養(yǎng)基中,誘導(dǎo)生根,獲得生根苗;
D.將步驟C小苗先后經(jīng)溫室煉苗、溫室移栽,得到健壯的野茉莉苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟A種子消毒具體方法為:選取飽滿野茉莉種子,剝除木質(zhì)種皮,流水沖洗12h,蒸餾水沖洗1遍,于超凈工作臺上用75% 酒精浸泡1min,期間攪拌,然后轉(zhuǎn)入 0.1% NaCIO溶液中滅菌15 min,無菌水沖洗 5 ~6次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟A所選外植體材料為野茉莉成熟種胚。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟A中初代培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基(其中MS培養(yǎng)基組分為:硝酸銨1650.0mg/L,硝酸鉀1900.0mg/L,二水合氯化鈣440.0mg/L,七水硫酸鎂370.0mg/L,磷酸二氫鉀170mg/L,乙二胺四乙酸二鈉37.3mg/L,七水硫酸鐵27.8mg/L,碘化鉀0.83mg/L,四水硫酸錳22.3mg/L,二水鉬酸鈉0.25mg/L,硼酸6.2mg/L,五水硫酸銅0.025mg/L,六水氯化鈷0.025mg/L,肌醇100.0mg/L,鹽酸硫胺素0.1mg/L,鹽酸吡哆醇0.5 mg/L,甘氨酸2.0 mg/L)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟B中所述誘導(dǎo)增殖的具體步驟是:將無菌苗莖段每2~3 個節(jié)剪成一段,插入增殖培養(yǎng)基誘導(dǎo)叢生芽,增殖培養(yǎng)基為:MS+細(xì)胞分裂素6-芐氨基腺嘌呤 (6-BA) 0.3mg?L-1 或MS+6- 芐氨基腺嘌呤(6-BA) 0.3mg?L-1+吲哚丁酸(IBA)0.3mg?L-1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟C誘導(dǎo)生根的具體步驟是:將無菌苗轉(zhuǎn)入MS+吲哚丁酸100 mg?L-1處理7d,再轉(zhuǎn)入1/2 MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟C中1/2 MS培養(yǎng)基組分為:硝酸銨825.0mg/L,硝酸鉀950.0mg/L,二水合氯化鈣220.0mg/L,七水硫酸鎂185.0mg/L,磷酸二氫鉀85.0mg/L,乙二胺四乙酸二鈉37.3mg/L,七水硫酸鐵27.8mg/L,碘化鉀0.83mg/L,四水硫酸錳22.3mg/L,二水鉬酸鈉0.25mg/L,硼酸6.2mg/L,五水硫酸銅0.025mg/L,六水氯化鈷0.025mg/L,肌醇100.0mg/L,鹽酸硫胺素0.1mg/L,鹽酸吡哆醇0.5 mg/L,甘氨酸2.0 mg/L)。
8.所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟D中所述煉苗移栽方法為:將生根苗從培養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到室溫散射光條件下先擰松瓶蓋煉苗7 d, 然后揭開瓶蓋,于室內(nèi)放置 4~5 d,取出生根苗( 根長約2.0 ~ 3.0cm), 洗凈根部培養(yǎng)基,溫室移栽,基質(zhì)為珍珠巖與草炭按照1:1 比例混合而成, 基質(zhì)濕度為70% 左右, 覆膜保濕,待長出新葉后,逐步撤去覆膜。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于培養(yǎng)基均添加3%蔗糖和0.8%瓊脂,pH 為5.8 ~ 6.0。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野茉莉組培方法,其特征在于步驟A-D中材料培育的環(huán)境條件為:溫度24±2℃,光照時間12h/d,光照強(qiáng)度2500 ~ 2800lux。