本發明公開了一種防治玉米小斑病土壤改良劑的制備方法，屬于土壤改良劑領域。
背景技術：
玉米病害是制約玉米產量和質量的主要因素。由玉蜀黍平臍蠕孢菌引起的玉米小斑病是一種世界性的玉米葉部真菌病害。近年來，隨著鮮食玉米種植產業化的發展、玉米品種的更新和栽培制度的變革，玉米小斑病在我國玉米主產區發生日益嚴重。玉米小斑病在整個玉米生育期均可發生，尤其在玉米植株抽雄后的溫暖潮濕條件下最有利于病害發生、流行。一般感病品種減產10%以上，嚴重發生年份減產20%～80%，甚至毀種絕收。該病害具有發生普遍、蔓延擴展速度快等特點，在我國現已發展成為玉米生產上最重要的病害。
目前，我國對玉米小斑病的防治主要采用化學防治方法。玉米種植區連年使用單一化學藥劑防治玉米小斑病，容易導致田間抗藥性的產生，使防治效果降低、用藥成本增加。如何開發新型藥劑，是當前預防和控制玉米小斑病急需解決的難題。
淡紫擬青霉菌劑與進口的化學殺蟲劑相比，殺線蟲效果相當或接近，而其生產成本較低，且有后效，并具有不污染農產品、不污染環境的優點。淡紫擬青霉類環境友好的殺蟲菌劑的研發成功對于我國的食品與農作物安全、農業的可持續發展均具有重要意義，因此，淡紫擬青霉菌劑在植物寄生線蟲的生物防治上具有較大的潛力。
技術實現要素：
本發明主要解決的技術問題：針對目前玉米種植區連年使用單一化學藥劑防治玉米小斑病，容易導致田間抗藥性的產生，使防治效果降低，持效期縮短，不利于環境的可持續發展的問題，提供了一種利用淡紫擬青霉菌制備土壤改良劑防治玉米小斑病的方法，本發明先取活蟬蛹將，將其腹部劃出口子后放入蜂蜜中浸泡，浸泡后曬干得固體培養基，將淡紫擬青霉種子液均勻噴灑在固體培養基表面進行發酵培養，直至長滿淡紫色絨毛菌后干燥、研磨，得覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末，再將廢棄的螃蟹殼分別進行酸泡和堿泡，沖洗、干燥后和覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末、磷酸二氫銨、紫云英秸稈、草炭份茶粕混合，即可得到防治玉米小斑病土壤改良劑，本發明制備得到的土壤改良劑可顯著抑制玉米小斑病菌菌絲體生長，大幅度降低玉米小斑病的發病率，與傳統化學殺蟲劑相比，不會污染農作物，不產生抗藥性，防治時間長，在農用領域具有廣闊應用前景。
為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：
（1）稱取200～400g活蟬蛹，在每只蟬蛹的腹部劃開1cm長度的口子，將劃口后的蟬蛹放入600～800g蜂蜜中浸泡，浸泡30～50h后取出，將覆有蜂蜜的蟬蛹取出，放入太陽下暴曬2～4天，暴曬后收集；
（2）量取300～400mL淡紫擬青霉種子液均勻噴灑在上述暴曬后的蟬蛹表面，噴灑后放入無菌環境下攪拌混合均勻，將攪拌后的蟬蛹放入玻璃容器中，并用紗布封住容器口，放入溫度為28～30℃，濕度為80～85%的環境下進行發酵培養，培養2～4天后調節環境中的濕度為40～50%，繼續發酵培養至生長出淡紫色的絨毛菌，并完全履蓋在蟬蛹表面；
（3）收集上述長滿絨毛菌的蟬蛹，放入真空干燥箱中，在30～35℃條件下真空干燥3～5h，干燥后加入研缽中進行研磨10～15min，收集覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末，備用；
（4）稱取300～500g廢棄的螃蟹殼，表面洗凈后放入烘箱中，在100～110℃條件下干燥5～10h，干燥后放入粉碎機中粉碎，過120～150目篩，得蟹殼粉末，將蟹殼粉末按質量比1:5與質量分數20%鹽酸混合，攪拌混合均勻后浸泡5～7h，浸泡后抽濾，將濾渣用去離子水洗滌3～5次，將洗滌后濾渣按質量比1:5與質量分數10%氫氧化鈉溶液混合，浸泡3～5h后過濾，得濾渣，用清水洗滌后放入烘箱中，在60～70℃條件下干燥5～10h，得干燥物；
（5）按重量份數計，分別選取50～70份步驟（3）覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末、25～30份上述干燥物、3～5份磷酸二氫銨、10～20份紫云英秸稈、5～10份草炭、10～15份茶粕，攪拌混合均勻后在室溫下放置8～10h，放置后裝袋，即可得到防治玉米小斑病土壤改良劑。
本發明的應用方法：將本發明制備得到的防治玉米小斑病土壤改良劑播撒在玉米田中，在玉米苗期階段，播撒量為150～200g/m2，待玉米生長至穗期階段時，播撒量為280～400g/m2，播撒后自然生長至成熟，對玉米小斑病的防治率達到95%以上，對玉米小斑病具有較好的防治效果，使玉米增產5～8%，具有廣闊應用前景。
本發明的有益效果是：
（1）本發明制備得到的土壤改良劑可顯著抑制玉米小斑病菌菌絲體生長，大幅度降低玉米小斑病的發病率；
（2）本發明制備得到的防治玉米小斑病土壤改良劑與傳統化學殺蟲劑相比，不會污染農作物，不產生抗藥性，防治時間長，在農用領域具有廣闊應用前景。
具體實施方式
稱取200～400g活蟬蛹，在每只蟬蛹的腹部劃開1cm長度的口子，將劃口后的蟬蛹放入600～800g蜂蜜中浸泡，浸泡30～50h后取出，將覆有蜂蜜的蟬蛹取出，放入太陽下暴曬2～4天，暴曬后收集；量取300～400mL淡紫擬青霉種子液均勻噴灑在上述暴曬后的蟬蛹表面，噴灑后放入無菌環境下攪拌混合均勻，將攪拌后的蟬蛹放入玻璃容器中，并用紗布封住容器口，放入溫度為28～30℃，濕度為80～85%的環境下進行發酵培養，培養2～4天后調節環境中的濕度為40～50%，繼續發酵培養至生長出淡紫色的絨毛菌，并完全履蓋在蟬蛹表面；收集上述長滿絨毛菌的蟬蛹，放入真空干燥箱中，在30～35℃條件下真空干燥3～5h，干燥后加入研缽中進行研磨10～15min，收集覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末，備用；稱取300～500g廢棄的螃蟹殼，表面洗凈后放入烘箱中，在100～110℃條件下干燥5～10h，干燥后放入粉碎機中粉碎，過120～150目篩，得蟹殼粉末，將蟹殼粉末按質量比1:5與質量分數20%鹽酸混合，攪拌混合均勻后浸泡5～7h，浸泡后抽濾，將濾渣用去離子水洗滌3～5次，將洗滌后濾渣按質量比1:5與質量分數10%氫氧化鈉溶液混合，浸泡3～5h后過濾，得濾渣，用清水洗滌后放入烘箱中，在60～70℃條件下干燥5～10h，得干燥物；按重量份數計，分別選取50～70份覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末、25～30份上述干燥物、3～5份磷酸二氫銨、10～20份紫云英秸稈、5～10份草炭、10～15份茶粕，攪拌混合均勻后在室溫下放置8～10h，放置后裝袋，即可得到防治玉米小斑病土壤改良劑。
實例1
稱取200g活蟬蛹，在每只蟬蛹的腹部劃開1cm長度的口子，將劃口后的蟬蛹放入600g蜂蜜中浸泡，浸泡30h后取出，將覆有蜂蜜的蟬蛹取出，放入太陽下暴曬2天，暴曬后收集；量取300mL淡紫擬青霉種子液均勻噴灑在上述暴曬后的蟬蛹表面，噴灑后放入無菌環境下攪拌混合均勻，將攪拌后的蟬蛹放入玻璃容器中，并用紗布封住容器口，放入溫度為28℃，濕度為80%的環境下進行發酵培養，培養2天后調節環境中的濕度為40%，繼續發酵培養至生長出淡紫色的絨毛菌，并完全履蓋在蟬蛹表面；收集上述長滿絨毛菌的蟬蛹，放入真空干燥箱中，在30℃條件下真空干燥3h，干燥后加入研缽中進行研磨10min，收集覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末，備用；稱取300g廢棄的螃蟹殼，表面洗凈后放入烘箱中，在100℃條件下干燥5h，干燥后放入粉碎機中粉碎，過120目篩，得蟹殼粉末，將蟹殼粉末按質量比1:5與質量分數20%鹽酸混合，攪拌混合均勻后浸泡5h，浸泡后抽濾，將濾渣用去離子水洗滌3次，將洗滌后濾渣按質量比1:5與質量分數10%氫氧化鈉溶液混合，浸泡3h后過濾，得濾渣，用清水洗滌后放入烘箱中，在60℃條件下干燥5h，得干燥物；按重量份數計，分別選取50份覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末、25份上述干燥物、3份磷酸二氫銨、10份紫云英秸稈、5份草炭、10份茶粕，攪拌混合均勻后在室溫下放置8h，放置后裝袋，即可得到防治玉米小斑病土壤改良劑。
將本發明制備得到的防治玉米小斑病土壤改良劑播撒在玉米田中，在玉米苗期階段，播撒量為150g/m2，待玉米生長至穗期階段時，播撒量為280g/m2，播撒后自然生長至成熟，對玉米小斑病的防治率達到96%，對玉米小斑病具有較好的防治效果，使玉米增產5%，具有廣闊應用前景。
實例2
稱取300g活蟬蛹，在每只蟬蛹的腹部劃開1cm長度的口子，將劃口后的蟬蛹放入700g蜂蜜中浸泡，浸泡40h后取出，將覆有蜂蜜的蟬蛹取出，放入太陽下暴曬3天，暴曬后收集；量取350mL淡紫擬青霉種子液均勻噴灑在上述暴曬后的蟬蛹表面，噴灑后放入無菌環境下攪拌混合均勻，將攪拌后的蟬蛹放入玻璃容器中，并用紗布封住容器口，放入溫度為29℃，濕度為83%的環境下進行發酵培養，培養3天后調節環境中的濕度為45%，繼續發酵培養至生長出淡紫色的絨毛菌，并完全履蓋在蟬蛹表面；收集上述長滿絨毛菌的蟬蛹，放入真空干燥箱中，在33℃條件下真空干燥4h，干燥后加入研缽中進行研磨13min，收集覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末，備用；稱取400g廢棄的螃蟹殼，表面洗凈后放入烘箱中，在105℃條件下干燥8h，干燥后放入粉碎機中粉碎，過140目篩，得蟹殼粉末，將蟹殼粉末按質量比1:5與質量分數20%鹽酸混合，攪拌混合均勻后浸泡6h，浸泡后抽濾，將濾渣用去離子水洗滌4次，將洗滌后濾渣按質量比1:5與質量分數10%氫氧化鈉溶液混合，浸泡4h后過濾，得濾渣，用清水洗滌后放入烘箱中，在65℃條件下干燥8h，得干燥物；按重量份數計，分別選取60份覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末、27份上述干燥物、4份磷酸二氫銨、15份紫云英秸稈、8份草炭、13份茶粕，攪拌混合均勻后在室溫下放置9h，放置后裝袋，即可得到防治玉米小斑病土壤改良劑。
將本發明制備得到的防治玉米小斑病土壤改良劑播撒在玉米田中，在玉米苗期階段，播撒量為170g/m2，待玉米生長至穗期階段時，播撒量為350g/m2，播撒后自然生長至成熟，對玉米小斑病的防治率達到98%，對玉米小斑病具有較好的防治效果，使玉米增產6%，具有廣闊應用前景。
實例3
稱取400g活蟬蛹，在每只蟬蛹的腹部劃開1cm長度的口子，將劃口后的蟬蛹放入800g蜂蜜中浸泡，浸泡50h后取出，將覆有蜂蜜的蟬蛹取出，放入太陽下暴曬4天，暴曬后收集；量取400mL淡紫擬青霉種子液均勻噴灑在上述暴曬后的蟬蛹表面，噴灑后放入無菌環境下攪拌混合均勻，將攪拌后的蟬蛹放入玻璃容器中，并用紗布封住容器口，放入溫度為30℃，濕度為85%的環境下進行發酵培養，培養4天后調節環境中的濕度為50%，繼續發酵培養至生長出淡紫色的絨毛菌，并完全履蓋在蟬蛹表面；收集上述長滿絨毛菌的蟬蛹，放入真空干燥箱中，在35℃條件下真空干燥5h，干燥后加入研缽中進行研磨15min，收集覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末，備用；稱取500g廢棄的螃蟹殼，表面洗凈后放入烘箱中，在110℃條件下干燥10h，干燥后放入粉碎機中粉碎，過150目篩，得蟹殼粉末，將蟹殼粉末按質量比1:5與質量分數20%鹽酸混合，攪拌混合均勻后浸泡7h，浸泡后抽濾，將濾渣用去離子水洗滌5次，將洗滌后濾渣按質量比1:5與質量分數10%氫氧化鈉溶液混合，浸泡5h后過濾，得濾渣，用清水洗滌后放入烘箱中，在70℃條件下干燥10h，得干燥物；按重量份數計，分別選取70份覆有淡紫擬青霉菌的蟬蛹粉末、30份上述干燥物、5份磷酸二氫銨、20份紫云英秸稈、10份草炭、15份茶粕，攪拌混合均勻后在室溫下放置8～10h，放置后裝袋，即可得到防治玉米小斑病土壤改良劑。
將本發明制備得到的防治玉米小斑病土壤改良劑播撒在玉米田中，在玉米苗期階段，播撒量為200g/m2，待玉米生長至穗期階段時，播撒量為400g/m2，播撒后自然生長至成熟，對玉米小斑病的防治率達到99%，對玉米小斑病具有較好的防治效果，使玉米增產8%，具有廣闊應用前景。