1.間歇浸沒式荔浦芋組培苗快速增殖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:
(1)建立間歇浸沒液體培養(yǎng)系統(tǒng):分別配置繼代增殖液體培養(yǎng)基和生根液體培養(yǎng)基,并將所配置的培養(yǎng)基和間歇浸沒式生物反應(yīng)器滅菌后備用;
(2)接種與繼代增殖培養(yǎng):制備荔浦芋外植體,并將荔浦芋外植體接種于間歇浸沒式生物反應(yīng)器中,并在繼代增殖液體培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng);
(3)生根培養(yǎng):繼代增殖培養(yǎng)結(jié)束后,將間歇浸沒式生物反應(yīng)器中的培養(yǎng)基替換為生根液體培養(yǎng)基,并繼續(xù)進(jìn)行生根培養(yǎng);
(4)生根苗移栽:生根培養(yǎng)結(jié)束后,將所得組培生根苗移栽至培養(yǎng)杯中育苗,并將所得種苗移栽至田地。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)中所述繼代增殖液體培養(yǎng)基為添加有6-BA、NAA、PP333以及白砂糖的基礎(chǔ)MS培養(yǎng)基;
其中,6-BA的濃度為4~5mg/L,NAA的濃度為0.05~0.1mg/L,PP333的濃度為0.2~0.5mg/L,白砂糖的濃度為30~40g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(1)中所述生根液體培養(yǎng)基為NAA、IBA、PP333以及白砂糖的基礎(chǔ)MS培養(yǎng)基;
其中NAA的濃度為0.3~0.5mg/L,IBA的濃度為0.4~0.5mg/L,PP333的濃度為0.4~0.5mg/L,白砂糖的濃度為30~40g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)制備荔浦芋外植體的具體步驟如下:取荔浦芋莖尖分生組織培養(yǎng)的第3代或第4代組培苗,并將誘導(dǎo)出的不定芽切為單芽或雙芽,剝離老葉,并保留芽體1~2cm,即得到荔浦芋外植體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)中荔浦芋外植體的接種密度為:每升培養(yǎng)液中接種10~15株外植體。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)中繼代增殖培養(yǎng)的具體條件為:培養(yǎng)溫度25~30℃,光照強(qiáng)度1500~1800Lx,光照時(shí)間10~12h/d,培養(yǎng)時(shí)間25~30d。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,步驟(2)中繼代增殖培養(yǎng)的浸沒頻率為5~10min/4~5h。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)中生根培養(yǎng)的條件為:培養(yǎng)溫度27~30℃,光照強(qiáng)度1500~1800Lx,光照時(shí)間13~16h/d,培養(yǎng)時(shí)間20~25d。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,步驟(3)中生根培養(yǎng)的浸沒頻率為3~4min/6~8h。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述方法培育得到的荔浦芋種苗。