本發明涉及植物組織培養育苗技術領域，具體涉及一種巖筍組織培養育苗方法。
背景技術：
巖筍，為蘭科植物筍蘭Thunia alba (Lindl.) Rchb.f.的全草，又稱通蘭、巖角、石竹子、巖竹。多年生附生草本，高約30～50厘米·須根多數，肉質狀，灰白色或淺褐色。巖筍味甘、性平，據《云南中草藥》、《貴州藥植目錄》和《云南思茅中草藥選》記載，其具有止咳平喘、活血祛瘀等作用，用于治療肺炎、氣管及支氣管炎、胃及十二指腸潰瘍、骨折與跌打勞傷等。巖筍具有很高的藥用價值，有著巨大的市場前景。因巖筍種子具有種子細小量大、無胚乳，自然條件下需要與適宜的菌根真菌才能萌發，自然環境破壞和人為過度采挖，在加上種子萌發條件苛刻，致使野生資源在原始生境恢復異常困難。
目前，還沒有一種關于巖筍組織培養育苗的方法，并無人工種植及人工育苗的出現，在一定程度上制約了巖筍的規?；绾头N植。
技術實現要素：
本發明要解決的技術問題是：提供一種巖筍組織培養育苗方法，提高巖筍組培苗栽培的成活率，節約成本，為巖筍規?；缟a提供關鍵技術。
本發明的目的是通過以下技術方案實現的：
一種巖筍組織培養育苗方法，包括以下步驟：
（1）培養基制備：培養基包括誘導萌發培養基、增殖培養基和生根培養基；其中，誘導萌發培養基為MS+NAA0.2mg/L+KT0.5mg/L+花寶1號0.7g/L+香蕉泥30g/L+土豆泥20g/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+PH5.9；增殖培養基為MS+IBA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+PH5.9；生根培養基為2/3MS+NAA0.8mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.5g/L+瓊脂5g/L+ph5.9；將配制好的誘導萌發培養基以每瓶60ml，生根培養基每瓶120ml裝入培養瓶中，采用121℃、0.5Mpa進行滅菌25min后冷卻凝固后備用；
（2）外植體制備：秋季在成熟植株上采摘飽滿的碩果作為外植體，并進行清洗、消毒；
（3）接種培養：接種器具進行滅菌，雙手消毒后，將步驟（2）中制備得到的外植體在超凈工作臺內，按無菌操作要求把碩果切開，將其中的種子均勻的撒入誘導萌發培養基中，蓋好瓶蓋后放置于消毒后的標準培養室內進行誘導萌發培養，出苗后接入生根培養基中進行生根培養2~3個月；
（4）馴化：將生根培養得到幼苗取出，用1000倍多菌靈浸泡10min后流水沖洗后種植于泥炭土、珍珠巖、鋸木屑混合基質中，馴化初期用3針遮陰網遮陰10天，馴化60天即可移栽大田。
優選的，步驟（2）中外植體清洗、消毒的步驟是：用肥皂水侵泡30分鐘后沖洗干凈表面污跡，然后流水沖洗至少30min，用小刀將碩果上的疤痕去除，待表面水分蒸發后，在超凈工作臺上用75%的乙醇侵泡5~10min，中途不斷搖晃碩果，然后用無菌水沖洗3~5遍后用無菌鑷子取出放置在濃度為0.1~0.2%升汞中侵泡10~15min，中途不斷搖晃碩果，再用無菌水沖洗5~8遍后用無菌鑷子取出放置在墊有無菌吸水紙的接種盤上，即可。
優選的，步驟（3）中，在培養室中進行誘導萌發培養、生根培養的具體操作為：在培養室內進行誘導萌發培養包括暗培養和光培養，暗培養時溫度控制在18~22℃、濕度40-50%，暗培養7~10天之后轉入光培養，光培養光照3500LUX每天8小時；待誘導萌發培養苗高2~3cm，莖稈直徑大于0.3cm的苗在超凈工作臺內按無菌要求轉接入生根培養基中進行生根培養，生根培養溫度為25℃，光照3500LUX每天8小時；其他幼苗可轉至增殖培養基中擴大繁殖。
優選的，步驟（4）中，泥炭土、珍珠巖、鋸木屑三者的體積比為4：1：1，所混合得到的種植基質PH6.5~6.8。
本發明的有益效果：運用本發明進行巖筍組織培養育苗，萌發率達到90%以上，繁殖系數達到3~5，具有繁殖系數高、繁殖速度快的特點，而且繁育出來的種苗具有與母體相同的植物特征，抗性好。大大解決了巖筍繁殖困難的問題，有利于巖筍進行規?；?、工廠化生產。
具體實施方式
下面結合具體的實施例對發明進行進一步介紹：
一種巖筍組織培養育苗方法，包括以下步驟：
（1）培養基制備：培養基包括誘導萌發培養基、增殖培養基和生根培養基；其中，誘導萌發培養基為MS+NAA0.2mg/L+KT0.5mg/L+花寶1號0.7g/L+香蕉泥30g/L+土豆泥20g/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+PH5.9；增殖培養基為MS+IBA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+PH5.9；生根培養基為2/3MS+NAA0.8mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.5g/L+瓊脂5g/L+ph5.9；將配制好的誘導萌發培養基以每瓶60ml，生根培養基每瓶120ml裝入培養瓶中，采用121℃、0.5Mpa進行滅菌25min后冷卻凝固后備用。
（2）外植體制備：秋季在成熟植株上采摘飽滿的碩果作為外植體，并進行清洗、消毒，步驟是：用肥皂水侵泡30分鐘后沖洗干凈表面污跡，然后流水沖洗至少30min，用小刀將碩果上的疤痕去除，待表面水分蒸發后，在超凈工作臺上用75%的乙醇侵泡5~10min，中途不斷搖晃碩果，然后用無菌水沖洗3~5遍后用無菌鑷子取出放置在濃度為0.1~0.2%升汞中侵泡10~15min，中途不斷搖晃碩果，再用無菌水沖洗5~8遍后用無菌鑷子取出放置在墊有無菌吸水紙的接種盤上，即可。
（3）接種培養：接種器具進行滅菌，雙手消毒后，將步驟（2）中制備得到的外植體在超凈工作臺內，按無菌操作要求把碩果切開，將其中的種子均勻的撒入誘導萌發培養基中，蓋好瓶蓋后放置于消毒后的標準培養室內進行誘導萌發培養、生根培養，具體操作如下：在培養室中進行誘導萌發培養、生根培養的具體操作為：在培養室內進行誘導萌發培養包括暗培養和光培養，暗培養時溫度控制在18~22℃、濕度40-50%，暗培養7~10天之后轉入光培養，光培養光照3500LUX每天8小時；待誘導萌發培養苗高2~3cm，莖稈直徑大于0.3cm的苗在超凈工作臺內按無菌要求轉接入生根培養基中進行生根培養，生根培養溫度為25℃，光照3500LUX每天8小時；其他幼苗可轉至增殖培養基中擴大繁殖。
（4）馴化：將生根培養得到幼苗取出，用1000倍多菌靈浸泡10min后流水沖洗后種植于泥炭土、珍珠巖、鋸木屑混合基質中，泥炭土、珍珠巖、鋸木屑三者的體積比為4：1：1，所混合得到的種植基質PH6.5~6.8，馴化初期用3針遮陰網遮陰10天，馴化60天即可移栽大田。
以上內容是結合具體的優選實施方式對本發明所作的進一步詳細說明，不能認定本發明的具體實施只局限于這些說明。對于本發明所屬技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應當視為屬于本發明的保護范圍。