1.一種紫斑牡丹初代培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)外植體選擇:選擇紫斑牡丹鱗芽為外植體,清洗,預(yù)冷24-48小時;
(2)消毒及接種:在無菌條件下,將步驟(1)所得鱗芽剝?nèi)[片,消毒,然后接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上;
(3)愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng):將接種后的外植體放在培養(yǎng)室中培養(yǎng),紅光培養(yǎng)7-10天。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫斑牡丹初代培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)方法,其特征在于,所述紫斑牡丹為“紫斑”油用牡丹。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫斑牡丹初代培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)方法,其特征在于,所述步驟(1)中清洗方法為:用洗衣粉溶液浸泡2小時,再輕輕刷洗鱗芽外表面,然后放在自來水流水下沖洗24小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫斑牡丹初代培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)方法,其特征在于,所述步驟(1)中的預(yù)冷溫度為0-4℃。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫斑牡丹初代培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)方法,其特征在于,所述步驟(2)中消毒方法為:先用75%酒精消毒20-30秒,再用0.1%升汞消毒10-15分鐘,再用無菌水沖洗5-6次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫斑牡丹初代培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)方法,其特征在于,所述步驟(2)中培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基,其中6-BA1-2mg/L,NAA0.3-0.5mg/L,硝酸銀4-5mg/L,7g/L瓊脂,30g/L蔗糖,pH調(diào)至5.8。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫斑牡丹初代培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)方法,其特征在于,所述步驟(3)中培養(yǎng)時的溫度為25士2℃。