本發明涉及化工
技術領域:
,具體涉及一種具有殺菌消毒作用的中藥揮發油組合物以及空氣殺菌消毒劑。
背景技術:
:目前國內常用的空氣消毒方法有化學試劑法,如過氧乙酸、過氧化氫、甲醛、84消毒液、戊二醛等,以及紫外線照射、臭氧發生器等物理方法。這些方法雖然能夠殺滅致病微生物,作用迅速,有效濃度低,但各有一定的缺陷,如毒性、刺激性、金屬腐蝕性、持續效果差;許多本身又構成污染物,不同程度地影響人體健康,不適合有人環境;消毒時所有人員必須離場,操作系統要有防護措施;消毒后異味不能很快消除,長期使用會對人體有蓄積中毒的危險等。經空氣傳播致病菌所引發的傳染性疾病屬中醫“溫病”范疇,治療藥物以清熱解毒和芳香化濕兩類中藥為主。而蒼術和艾葉屬芳香化濕類中藥。現代研究表明,兩種中藥均有較強的體外抗菌作用,對環境及人體皮膚黏膜消毒或者清潔衛生具有廣泛的使用價值。以蒼術和艾葉為原料開發空氣殺菌消毒劑目前尚無文獻報道。蒼術現載入《中國藥典》2015年版一部,為菊科植物茅蒼術atractylodeslancea(thunb.)dc.或北蒼術atractylodeschinensis(dc.)koidz.的干燥根莖。具有燥濕健脾,祛風散寒、明目的功效。研究表明,蒼術提取液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用較明顯,對白色念珠菌和大腸桿菌的抑菌作用次之。艾葉現載入《中國藥典》2015年版一部,為菊科植物艾artemisiaargyilevl.etvan.var.argyi的干燥葉。具有散寒止痛,溫經止血的功效。研究表明,艾葉揮發油體外對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌具有抑菌作用,其抑菌作用優于或等同于紅霉素。以蒼術和艾葉為原料,利用中藥現代化技術手段開發出其中的抗菌成分,然后應用于空氣殺菌消毒劑中,具有廣闊的市場前景。技術實現要素:本發明為了克服現有技術中天然活性來源的空氣殺菌消毒劑種類稀少的問題,提供一種具有殺菌消毒作用的中藥揮發油組合物以及包含該組合物的空氣殺菌消毒劑。本發明所要解決的上述技術問題,通過以下技術方案予以實現:一種具有殺菌消毒作用的中藥揮發油組合物,包含蒼術揮發油和艾葉揮發油;所述的蒼術揮發油和艾葉揮發油的質量比為1~3:1~3。發明人經大量實驗表明,將蒼術揮發油和艾葉揮發油混合后能產生協同的抗菌消毒作用。優選地,所述的蒼術揮發油和艾葉揮發油的質量比為2:1。優選地,所述的蒼術揮發油為從中藥茅蒼術或北蒼術中提取的揮發油。優選地,所述的蒼術揮發油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將中藥茅蒼術或北蒼術粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得茅蒼術或北蒼術超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為40~60兆帕,萃取溫度為50~60℃,流速為30~40升/小時,提取時間為1~3小時,同時加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的茅蒼術或北蒼術超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為98:2~90:10的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的蒼術揮發油。最優選地,所述的蒼術揮發油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將中藥茅蒼術或北蒼術粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得茅蒼術或北蒼術超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為50兆帕,萃取溫度為55℃,流速為35升/小時,提取時間為2小時,同時加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的茅蒼術或北蒼術超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為95:5的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的蒼術揮發油。優選地,所述的艾葉揮發油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將艾葉粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得艾葉超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為20~30兆帕,萃取溫度為30~40℃,流速為20~30升/小時,提取時間為1~3小時,同時加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的艾葉超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為99:1~95:5的氯仿和甲醇組成的混合溶劑體系進行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的艾葉揮發油。最優選地,所述的艾葉揮發油通過包含如下步驟的方法制備得到:(1)將艾葉粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得艾葉超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為25兆帕,萃取溫度為35℃,流速為25升/小時,提取時間為2小時,同時加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的艾葉超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為97:3的氯仿和甲醇組成的混合溶劑體系進行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的艾葉揮發油。發明人經大量的實驗研究表明在上述方法下制備得到的蒼術揮發油和艾葉揮發油能夠最大程度的富集蒼術和艾葉中的抗菌消毒成分。一種空氣殺菌消毒劑,包含權利要求1~7任一項所述的中藥揮發油組合物。優選地,空氣殺菌消毒劑中所述的中藥揮發油組合物的質量百分比為0.1~20%。優選地,所述的空氣殺菌消毒劑為液體殺菌劑,還包含酒精。有益效果:本發明提供了一種具有全新殺菌消毒作用的中藥組合物,通過本發明所述方法制備得到的蒼術揮發油和艾葉揮發油具有非常好的抗菌和抗流感病毒作用;尤其是將其二者混合后能夠產生協同抗菌消毒作用;使用二者天然成分為原料配制空氣殺菌消毒劑效果顯著且不會對人體產生危害。具體實施方式以下結合具體實施例來進一步解釋本發明,但實施例對本發明不做任何形式的限定。實施例中未注明具體條件者,按照常規條件或制造商建議的條件進行。其中,所用試劑或儀器未注明生產廠商者,均為可以通過市購獲得的常規產品。實施例1原料揮發油的制備1、茅蒼術揮發油的制備(1)將中藥茅蒼術粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得茅蒼術超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為50兆帕,萃取溫度為55℃,流速為35升/小時,提取時間為2小時,同時加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的茅蒼術超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為95:5的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的茅蒼術揮發油。2、北蒼術揮發油的制備(1)將中藥北蒼術粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得北蒼術超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為50兆帕,萃取溫度為55℃,流速為35升/小時,提取時間為2小時,同時加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的北蒼術超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為95:5的石油醚和丙酮組成的混合溶劑體系進行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的北蒼術揮發油。3、艾葉揮發油的制備(1)將艾葉粉碎,然后使用超臨界二氧化碳萃取方法萃取得艾葉超臨界二氧化碳萃取物;所述的超臨界二氧化碳萃取方法的具體條件為:萃取壓力為25兆帕,萃取溫度為35℃,流速為25升/小時,提取時間為2小時,同時加入乙醇作為提攜劑;(2)將步驟(1)得到的艾葉超臨界二氧化碳萃取物上硅膠柱,用體積比為97:3的氯仿和甲醇組成的混合溶劑體系進行洗脫;收集洗脫液濃縮干燥即得所述的艾葉揮發油。實施例2本發明揮發油抑菌實驗待測樣品:茅蒼術揮發油、北蒼術揮發油、艾葉揮發油、茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:1、茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:1、茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:3、北蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:1、乳酸諾氟沙星。上述比例為質量比。在無菌條件下在培養基中加入0.2ml濃度為1×107個/ml的菌液(具體菌種見表1),用滅菌的l型涂抹棒涂抹均勻,在室溫下干燥5min,用無菌鑷子將牛津杯放入培養皿中,然后在牛津杯中加入200μl濃度為1g/ml的待測樣品溶液,將培養皿放入培養箱中,在37℃中培養24h,測量抑菌圈圈直徑。測試效果見表1所示。表1本發明提取抑菌實驗結果(單位mm)白葡萄球菌結核桿菌肺炎球菌大腸桿菌茅蒼術揮發油28.43±1.1525.33±1.7821.11±1.1220.01±1.25北蒼術揮發油27.12±1.2126.12±1.8222.03±1.2020.75±1.33艾葉揮發油29.01±1.3026.82±1.9422.81±1.2521.12±1.45茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:114.43±0.8711.33±1.018.14±0.679.44±0.86茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:116.26±0.9312.16±1.128.87±0.729.75±1.03茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:317.12±0.9913.44±1.219.02±0.8610.24±1.12北蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:115.28±0.8811.12±1.098.34±0.719.48±0.97乳酸諾氟沙星29.12±1.2226.33±2.4322.34±1.4621.17±1.52從表1數據體外抗菌數據可以看出,按本發明所述方法制備得到的茅蒼術揮發油、北蒼術揮發油和艾葉揮發油具有非常好的抗菌效果,其對白葡萄球菌、結核桿菌、肺炎球菌和大腸桿菌的抑菌效果與陽性對照藥乳酸諾氟沙星相當。這說明將茅蒼術、北蒼術和艾葉在本發明所述方法參數下先進行二氧化碳超臨界萃取再進行硅膠柱層析富集能夠得到具有非常優異抗菌效果的有效成分。此外,從表1數據中可以看出,茅蒼術揮發油或北蒼術揮發油和艾葉揮發油組合后的到的組合物的抗菌效果進一步加強,表1數據顯示,茅蒼術揮發油或北蒼術揮發油和艾葉揮發油組合后的抗菌作用都遠遠強于單獨一種揮發油的抗菌作用,這說明茅蒼術揮發油或北蒼術揮發油和艾葉揮發油組合后再抗菌作用上發生了協同作用,從而進一步提高了抗菌效果。其中,從表1數據中還可以看出將茅蒼術揮發油或北蒼術揮發油與艾葉揮發油以質量比2:1組合后的協同效果更明顯。實施例3本發明揮發油抗甲型流感病毒活性測試待測樣品:茅蒼術揮發油、北蒼術揮發油、艾葉揮發油、茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:1、茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:1、茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:3、北蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:1、利巴韋林。上述比例為質量比。取mdck細胞生長至單層的96孔細胞培養板,棄去上清液,用pbs洗兩遍,每孔分別加入用mem二倍稀釋的藥液與病毒液100μl,另外設細胞對照組、病毒對照組,置于37℃、飽和濕度、5%co2培養箱中孵育。72h后,0.5mmwst-1溶液加入到每孔中(wst-1的濃度為0.25mm)。4小時后,用酶標儀在450nm測吸光度。ic50計算方式如下:細胞存活率=(細胞對照孔od值-加藥孔od值)×100%;以藥物濃度為x軸,細胞存活率為y軸,在origin作圖,求出50%細胞存活率對應的濃度則為ic50。將待測樣品進行抗甲型流感病毒活性測試,結果見表2。表2.本發明揮發油抗甲型流感病毒活性測試結果h1n1病毒ic50(μg/ml)茅蒼術揮發油45.3±9.6北蒼術揮發油46.3±9.8艾葉揮發油48.2±10.3茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:124.1±7.1茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:125.2±7.5茅蒼術揮發油:艾葉揮發油=1:325.9±7.9北蒼術揮發油:艾葉揮發油=2:124.5±7.8利巴韋林42.5±9.0從表2數據體外抗h1n1流感病毒數據可以看出,按本發明所述方法制備得到的茅蒼術揮發油、北蒼術揮發油和艾葉揮發油具有非常好的抗h1n1流感病毒效果,其抗h1n1流感病毒的效果與陽性對照藥利巴韋林相當。此外,從表2數據中可以看出,茅蒼術揮發油或北蒼術揮發油和艾葉揮發油組合后的到的組合物的抗h1n1流感病毒效果進一步加強,表2數據顯示,茅蒼術揮發油或北蒼術揮發油和艾葉揮發油組合后的抗h1n1流感病毒作用都遠遠強于單獨一種揮發油的抗h1n1流感病毒作用,這說明茅蒼術揮發油或北蒼術揮發油和艾葉揮發油組合后再抗h1n1流感病毒作用上發生了協同作用,從而進一步提高了抗h1n1流感病毒效果。實施例4一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發油占10重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發油由實施例1制備得到的茅蒼術揮發油和艾葉揮發油按質量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實施例5一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發油占10重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發油由實施例1制備得到的北蒼術揮發油和艾葉揮發油按質量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實施例6一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發油占5重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發油由實施例1制備得到的北蒼術揮發油和艾葉揮發油按質量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實施例7一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發油占1重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發油由實施例1制備得到的北蒼術揮發油和艾葉揮發油按質量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實施例8一種空氣殺菌消毒劑組成:中藥揮發油占20重量%,余量為乙醇;所述的中藥揮發油由實施例1制備得到的北蒼術揮發油和艾葉揮發油按質量比2:1混合而成。制備方法:將中藥揮發油溶于乙醇中即得所述的空氣殺菌消毒劑。實施例9空氣殺菌消毒劑殺菌效果測試選擇25m2的密閉房間,在室內無人情況下進行殺菌效果觀察。采樣:(1)消毒前采樣:用六級篩孔空氣撞擊式采樣器進行空氣中自然菌采樣,作為消毒前樣本。(2)消毒后采樣:取實施例6制備的空氣殺菌消毒劑,對密閉房間進行消毒,噴霧量均為1ml/m3,15min后采樣,作為消毒后樣本。采樣平板直接放入37℃培養箱中培養48h,計數生長菌落數以及消毒率。消毒效率=(消毒前樣本菌數-消毒后樣本菌數)/消毒前樣本菌數×100%。結果顯示:消毒前樣本菌數為24615cfu/m3,消毒后的樣本菌數為48cfu/m3,消毒率為99.80%,上述結果表明,本發明制備的空氣殺菌消毒劑具有非常好的除菌效果。當前第1頁12