所屬領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，但不局限于尖葉對齒蘚。

背景技術(shù)：

苔蘚是第一批登陸的綠色高等植物，適應(yīng)范圍及廣，在生態(tài)系統(tǒng)中的作用至關(guān)重要，例如沙漠中苔蘚結(jié)皮占據(jù)植被覆蓋的40％以上(魏江春，2005)。有案例顯示苔蘚在干旱和半干旱地區(qū)對于水土保持和大氣氮循環(huán)貢獻巨大。庫布齊沙漠東緣的拉特旗人工接種形成苔蘚結(jié)皮，使得表土質(zhì)地也發(fā)生了明顯的變化，其中沙粒含量逐漸減少，粉粒、黏粒含量增加(wuetal.,2014；young&reed,2017)。在有苔蘚結(jié)皮的植被覆蓋區(qū)明顯比沒有苔蘚結(jié)皮的地方水土保持效果好，植被退化的問題弱。苔蘚作為先鋒植物，能在極端環(huán)境中生長，優(yōu)于其他高等綠色植物(baquiranetal.,2016；deane-coe&stanton,2017)。城市化建設(shè)的加快和人類活動造成越來越嚴重的生態(tài)環(huán)境破壞，山體破損，公路邊坡裸露以及“五采區(qū)”大面積的破壞。修復(fù)與恢復(fù)生態(tài)系統(tǒng)對我國環(huán)境保護、生態(tài)建設(shè)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和社會經(jīng)濟可持續(xù)發(fā)展均具有重要的現(xiàn)實意義。

尖葉對齒蘚(didymodonconstrictus(mitt.)k.saito)是云南山坡、巖石面廣泛分布的一種苔蘚，生境極廣，既能適應(yīng)林下潮濕陰暗，又能適應(yīng)陽光充足的地方。具有耐貧瘠、耐高溫、低溫、生長快和耐脫水等多種優(yōu)點，與極端抗旱的苔蘚品種山墻蘚或齒肋赤蘚等近一年的生育周期相比具有應(yīng)用優(yōu)勢。作為先鋒物種生長迅速，能在被干擾的生境中第一時間形成群落加速微生境恢復(fù)速率。本發(fā)明以其為材料，為后期對齒蘚運用于生態(tài)修復(fù)提供技術(shù)指導(dǎo)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在提供一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，包括對齒蘚的擴大繁殖、定植于試驗地、養(yǎng)護和監(jiān)測方法。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，該方法包括對齒蘚的擴大繁殖、定植于試驗地、養(yǎng)護和監(jiān)測步驟。

如所述的一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，該方法包括以下步驟：采集對齒蘚莖葉配子體和孢子朔，空氣干燥5天；打磨粉碎至50-100目以1g:20l的比例接種于泥炭蘚和椰糠的混合基質(zhì)；在溫度為23℃，80μmolphotonsm^-2s^-1光強，16小時長日照下的培養(yǎng)箱中生長2周，期間用體式顯微鏡和倒置顯微境觀察計算生長效率；試驗點先制備一層改良bcd培養(yǎng)基涂層，然后將生長2周的對齒蘚與基質(zhì)混合物粉碎后均勻撒播在涂層上，覆蓋藍色尼龍網(wǎng)，每天噴霧3次保濕，每次10分鐘，一個月后揭開尼龍網(wǎng)自然條件下生長。

如所述的一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，其中所述的打磨粉碎是使用中藥粉碎機，參數(shù)設(shè)置為50-100目。

如所述的一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，其中所述的椰糠經(jīng)過水洗，除去鹽離子，然后與泥炭蘚1:5混合。

如所述的一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，培養(yǎng)基設(shè)置是利用bcd基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為背景培養(yǎng)基，其中的改良bcd培養(yǎng)基配方為：mgso4.7h2o1μm，kh2po418.4μm，kno310μm，feso4.7h2o45μm；cuso4.5h2o0.22μm，h3bo310μm，cocl2.6h2o0.23μm，na2moo4.2h2o0.1μm，znso4.7h2o0.19μm，mncl2.4h2o2μm，ki0.17μm，5mmcacl2，瓊脂1％，按照所述成分逐一加到沸水中溶解，涼至45℃在試驗地做成涂層。

如所述的一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，其中苔蘚配子體生長狀態(tài)觀測采用體式顯微鏡觀測，并每天拍照記錄，對比分枝及生長狀態(tài)，用student’st-test統(tǒng)計分析。

所述的一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法用于因建筑、修路、開礦導(dǎo)致破損的植被的生態(tài)修復(fù)。

所述的一種對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法用于土壤、石質(zhì)、水泥的各種坡度的植被修復(fù)。

對齒蘚用于生態(tài)修復(fù)的方法，其中所述的培養(yǎng)2周期間同時與同樣處理的大灰蘚和皺葉青蘚做對照，發(fā)現(xiàn)對齒蘚的恢復(fù)最快，生長是最旺盛的。

附圖說明

圖1為本發(fā)明對齒蘚、皺葉青蘚、大灰蘚生長2周后分枝數(shù)情況統(tǒng)計。

具體實施方式

下面結(jié)合附圖，用本發(fā)明的實施例來進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此來限定本發(fā)明。

實施例1：

1.材料和方法：

1.1研究材料：

本發(fā)明使用材料為三種苔蘚，尖葉對齒蘚(didymodonconstrictus(mitt.)k.saito)、皺葉青蘚(brachytheciumkuroishicumbesch.)和大灰蘚(hypnumplumaeformewilson)，采集地點是中國科學(xué)院昆明植物研究所溫室，具體位置是alt.1938m，北緯25°9ˊ19〞，東經(jīng)101°44ˊ35〞。

1.2研究方法：

1.2.1實驗設(shè)計：采集尖葉對齒蘚莖葉配子體和孢子朔，空氣干燥5天；打磨粉碎至50-100目以1g:20l的比例接種于泥炭蘚和椰糠的混合基質(zhì)；在溫度為23℃，80μmolphotonsm^-2s^-1光強，16小時長日照下的培養(yǎng)箱中生長2周，期間用體式顯微鏡和倒置顯微境觀察計算生長效率；試驗點先制備一層改良的bcd培養(yǎng)基涂層，然后將生長2周的尖葉對齒蘚與基質(zhì)混合物粉碎后均勻撒播在涂層上，覆蓋藍色尼龍網(wǎng)，每天噴霧3次保濕，每次10分鐘，一個月后揭開尼龍網(wǎng)自然條件下生長。

1.2.2配子體接種技術(shù)：利用中藥粉碎機進行植物材料的機械打磨，1g植物材料混合于20l泥炭蘚與椰糠的混合基質(zhì)中，鋪成1-5mm厚度，置于23℃，80μmolphotonsm^-2s^-1光強，16h長日照培養(yǎng)。

1.2.3培養(yǎng)基配置：mgso4.7h2o1μm，kh2po418.4μm，kno310μm，feso4.7h2o45μm；cuso4.5h2o0.22μm，h3bo310μm，cocl2.6h2o0.23μm，na2moo4.2h2o0.1μm，znso4.7h2o0.19μm，mncl2.4h2o2μm，ki0.17μm，5mmcacl2，瓊脂1％，按照所述成分逐一加到沸水中溶解，涼至45℃在試驗地做成涂層。改配方添加了鈣離子，有利于細胞大量繁殖時細胞壁的生長。

1.2.4生長狀態(tài)觀測：采用體式顯微鏡照相，隨機挑選3種苔蘚每個時間點不少于5個顯微照片，統(tǒng)計分枝數(shù)，用student’st-test統(tǒng)計分析。本發(fā)明使用的體式顯微鏡儀器型號：奧林巴斯szx16。

2.結(jié)果

2.1對齒蘚、皺葉青蘚、大灰蘚生長2周后分枝數(shù)情況統(tǒng)計：

苔蘚的體細胞再生能力極強，經(jīng)過植株材料的機械粉碎后有可能進行大量繁殖。然而孢子囊僅僅在溫度交替變化時產(chǎn)生，但敗育率較高，因此，利用配子體繁殖是很有利的途徑。為了比較不同種苔蘚的再生能力，選取3種綜合抗逆能力比較強，適應(yīng)極端生境苔蘚試驗，在同樣粉碎后接種并噴水后觀察，對齒蘚立即恢復(fù)綠色，說明在這種培養(yǎng)條件下對齒蘚的恢復(fù)能力最強。5天后觀察，3種苔蘚都萌發(fā)出新枝，皺葉青蘚的萌發(fā)最慢。生長2周后統(tǒng)計分枝數(shù)，發(fā)現(xiàn)對齒蘚的數(shù)量最多，證明對齒蘚具備最旺盛的分生能力。橫坐標(biāo)顯示生長天數(shù)，縱坐標(biāo)顯示分枝數(shù)。星號顯示該數(shù)值與統(tǒng)一生長時期皺葉青蘚分枝數(shù)比較時t-test檢測在p<0.01水平上的顯著性差異；數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準誤，n≧5(圖1)。

2.2試驗地在接種對齒蘚生長1月前后的情況

對齒蘚的繁殖能力極強，在bcd涂層上定植噴霧保持一定濕度生長1個月后，苔蘚成功覆蓋于表面，有明顯的綠化效果。