專利名稱：心腦浸液中和營養培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種心腦浸液中和營養培養基，其主要成分是牛心浸液、犢牛腦浸 液、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液經一定的工 藝制成。臨床對已治療的患者的標本需經培養才能證實是否痊愈。心腦浸液中和營養培養基 能夠檢測臨床大量使用抗生素后的不同菌屬陽性結果，此培養基營養豐富，常用于營養要求 較高的細菌分離培養。細菌接種分離培養好壞，會直接影響檢測結果。往往需要將樣本通過 不同方法進行分離培養，來進行細菌種類的鑒別，這是目前微生物實驗室最常用的手段。由 于目前培養條件的應用范圍所限，供一般標本的分離培養用的培養基沒有特效的，存在所分 離培養基營養不足、培養時間長、易出現假陽性或假陰性等問題。隨著生物研究的進展，國 內外對細菌鑒別的培養基研究也在不斷的發展。傳統常規檢測診斷方法是先將樣本進行細菌 培養分離，選擇標準典型菌株再進行血清學鑒定檢測。整個檢測確診過程耗時長、治療的患 者臨床又使用了抗生素，操作繁瑣，試劑質量無法保證，嚴重影響了致病菌確認工作、對快 速準確診斷，搶救病人帶來極大的困難。本發明打破傳統常規分步檢測手段，特別是針對臨 床大量使用抗生素或大量使用消毒液的樣本，在培養基中增加中和劑，從而減少由于檢測手 段落后而造成對人體健康的危害，較傳統方法具有明顯的應用價值，對指導臨床診斷和治療， 防止濫用抗菌藥物具有重要意義。
背景技術：
本發明的目的在于提供一種能克服已有培養基不足的心腦浸液中和營養培養 基。與其它同類培養基相比具備下列特點營養豐富，用于臨床標本營養要求較高的細菌， 中和營養要求高的細菌增菌的規范鑒定。在培養基中增加中和劑，能夠檢測臨床大量使用抗 生素后的不同菌屬陽性結果，靈敏度高
發明內容
本發明的要點在于選擇合適的組分，并進行合理混配，經混合、溶解、高溫滅 菌、冷卻、分裝等工藝而成一種心腦浸液中和營養培養基。
本發明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％):犢牛腦浸液200-220mL;牛心浸液 220-250mL;胰蛋白胨10.0-12.0;葡萄糖2.0-2.2;氯化鈉5.0-5.5;磷酸氫二鈉 2.5-3.0; 5g/L對氨基苯甲酸溶液4.0-5.0mL; lmol/L硫酸鎂溶液18. 0-20. OmL;蒸餾水加至 1000ml。
本培養基含有豐富的營養成分，如犢牛腦浸液、牛心浸液、胰蛋白胨是培養基中的主要 營養成分，可供營養要求較高的細菌生長，常用于純種分離培養，在通常室溫下或37i:培養， 培養24小時后，即可純種分離，或移種到選擇性培養基上以分離致病菌。氯化鈉用于調整滲 透壓；磷酸鹽為細菌提供良好的磷源，兼有緩沖作用。對氨基苯甲酸中和血液中磺胺類藥物 的抑菌作用；硫酸鎂破壞血液中存在的四環素、金霉素、新霉素、多黏菌素及鏈霉素的抑菌 作用。配成的培養基呈淡黃色透明液體。質控菌株為腦膜炎奈瑟氏菌(ATCC3090)、肺炎鏈球 菌(ATCC19615)、化膿性鏈球菌(ATCC6303)，質控菌株接種于此培養基后，經35士2。C培養 18 24h，生長情況良好。
本發明產品的制備方法是1) 、將胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液、蒸餾水
置于三角燒瓶內，混合；
2) 、加熱溶解，調pH7.3 7.5,以絨布過濾燒瓶內,后置于壓力蒸氣滅菌器內，12rC15min高
壓滅菌；
3) 、取出后冷至5(TC左右，加無菌的牛心浸液、犢牛腦浸液，輕輕搖勻，分裝于試管，抽樣
于37。C培養18-24小時，如無細菌生長，冷藏備用。
本發明具有以下優點(1)心腦浸液中和營養培養基，營養豐富、配制簡單，可用于各 種營養要求較高的細菌增菌培養；(2)選擇性強、檢出率高，臨床應用效果滿意，尤其是對排 除大量使用抗生素的影響有顯著作用；(3)較傳統的培養基檢測耗時短、特異性強、穩定性好。
具體實施例方式
按照下表所列數據(重量百分比％)進行配置 配方一
犢牛腦浸液 牛心浸液 胰蛋白胨 葡萄糖 氯化鈉 磷酸氫二鈉
5g/L對氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
200-220mL 220-250mL 10. 0-12. 0
2. 0-2. 2
5. 0-5. 5
2. 5-3. 0
4. 0—5. 0mL 18. 0-20. 0mL 加至1000ml
配方二
犢牛腦浸液
牛心浸液
胰蛋白胨
葡萄糖
氯化鈉
磷酸氫二鈉
5g/L對氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
210-220mL 218-250mL 10. 5-12.0 2. 0-2. 2 5. 0-5. 5 2. 5-3. 0 4. 0-5. 0mL 18. 5-20. 0mL 加至1000ml
配方三
犢牛腦浸液 200-210mL
牛心浸液 220-245mL胰蛋白胨 葡萄糖. 氯化鈉 磷酸氫二鈉
5g/L對氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
配方四
犢牛腦浸液
牛心浸液
胰蛋白胨
葡萄糖
氯化鈉
磷酸氫二鈉
5g/L對氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
10. 0-11. 5
2. 0-2. 2
5. 0-5. 5
2. 5-3. 0 4. 0-5. 0mL
18. 0-19. 8mL 加至1000ml
205-218mL 225-245mL 10.0-12.0 2. 0-2. 2 5. 0-5. 5 2. 5-3. 0 4, 0-5. 0mL 18. 2-19. 8mL 加至1000ml
權利要求
1、本發明涉及一種心腦浸液中和營養培養基，其特征在于具有如下的配方(組分及其重量百分比％)犢牛腦浸液200-220mL；牛心浸液220-250mL；胰蛋白胨10.0-12.0；葡萄糖2.0-2.2；氯化鈉5.0-5.5；磷酸氫二鈉2.5-3.0；5g/L對氨基苯甲酸溶液4.0-5.0mL；1mol/L硫酸鎂溶液18.0-20.0mL；蒸餾水550mL。
2、 一種權利要求1所述心腦浸液中和營養培養基的制備方法，其特征在于具有如下的 歩驟1) 、將胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液、蒸餾水置于三角燒瓶內，混合；2) 、加熱溶解，調pH7.3、.5，以絨布過濾燒瓶內,后置于壓力蒸氣滅菌器內，12rC15min高壓滅菌；3) 、取出后冷至5(TC左右，加無菌的牛心浸液、犢牛腦浸液，輕輕搖勻，分裝于試管，抽樣于37'C培養18-24小時，如無細菌生長，冷藏備用。
全文摘要
本發明涉及一種心腦浸液中和營養培養基，其主要成分是犢牛腦浸液、牛心浸液、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液經一定的工藝制成。常用于營養要求較高的細菌分離培養。本發明具有以下優點(1)心腦浸液中和營養培養基，營養豐富、配制簡單，可用于各種營養要求較高的細菌增菌培養；(2)選擇性強、檢出率高，臨床應用效果滿意，尤其是對排除大量使用抗生素的影響有顯著作用；(3)較傳統的培養基檢測耗時短、特異性強、穩定性好。
文檔編號C12Q1/04GK101659979SQ20081014719
公開日2010年3月3日 申請日期2008年8月25日 優先權日2008年8月25日
發明者濤 薄 申請人:濤 薄