專利名稱：一種eb病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法
技術領域：
本發明涉及一種病理特征分析方法，具體而言，涉及EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法。
背景技術：
胃癌是世界范圍內最常見的惡性腫瘤之一，其死亡率占所有惡性腫瘤的第二位， 每年有876000例新發病例，多數文獻認為EB病毒感染胃癌的構成比約為10%，這部分胃癌禾爾為 EB 病毒相關胃癌(Epstein-Barr virus-associated gastric cancinoma, EBVaGC)。 明確EB病毒在胃癌發生、發展中的作用及其臨床病理特征。

發明內容
本發明的目的是提供用原位雜交法檢測胃癌組織芯片中EB病毒編碼的小RNA (EBERs)，分析EB病毒相關胃癌病理形態及患者年齡、性別、淋巴結轉移狀況等臨床特征。為實現上述技術目的，達到上述技術效果，本發明通過以下技術方案實現 一種EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法
步驟1、臨床資料，收集醫院手術切除胃癌標本若干例，標本中位年齡58 68歲，所有標本均經兩位病理專家進行組織病理證實，患者術前均未進行放療和化療；
步驟2、組織芯片的構建，組織標本經1 7%的甲醛固定、常規石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對應找出蠟塊上相應部位并做標記，選取無壞死的腫瘤組織，自制 10 X 2 10 X 32的組織陣列，每例組織塊取1 3個組織芯，其直徑為0. 6 2. 6毫米的蠟塊，有定位用的空位；
步驟3、試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA ；
步驟4、原位雜交染色結果判斷標準，僅為細胞核著棕褐色為陽性，細胞漿和細胞膜在核分裂時可以有陽性著色，但視為陰性；
步驟5、統計學方法，所有實驗均采用統計軟件分析，組間差異采用X2檢驗，以P小于等于0. 1被認為差異有顯著性。進一步的，所述步驟1標本中位年齡63歲。進一步的，所述步驟2標本經4%的甲醛固定。進一步的，所述步驟2自制10X 16和10X9的組織陣列。進一步的，所述步驟2的組織陣列為6個蠟塊每個蠟塊75例X 2點和1個蠟塊每個蠟塊40例X 2點的組織陣列。進一步的，所述步驟2每例組織塊取2個組織芯，其直徑為1. 6毫米的蠟塊。進一步的，所述步驟5分化程度P小于等于0. 05被認為差異有顯著性。進一步的，所述步驟5采用SPSSl 1. 0統計軟件分析。本發明的有益效果是
EB病毒獨立存在于胃癌及其淋巴結轉移癌細胞核中，提示EB病毒和腫瘤細胞同時復制；與非EB病毒感染胃癌相比，EB病毒相關胃癌具有獨特的臨床病理特征。
具體實施例方式一種EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法
步驟1、臨床資料，收集醫院手術切除胃癌標本若干例，標本中位年齡58 68歲，所有標本均經兩位病理專家進行組織病理證實，患者術前均未進行放療和化療；
步驟2、組織芯片的構建，組織標本經1 7%的甲醛固定、常規石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對應找出蠟塊上相應部位并做標記，選取無壞死的腫瘤組織，自制 10 X 2 10 X 32的組織陣列，每例組織塊取1 3個組織芯，其直徑為0. 6 2. 6毫米的蠟塊，有定位用的空位；
步驟3、試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA ；
步驟4、原位雜交染色結果判斷標準，僅為細胞核著棕褐色為陽性，細胞漿和細胞膜在核分裂時可以有陽性著色，但視為陰性；
步驟5、統計學方法，所有實驗均采用統計軟件分析，組間差異采用X2檢驗，以P小于等于0. 1被認為差異有顯著性。進一步的，所述步驟1標本中位年齡63歲。進一步的，所述步驟2標本經4%的甲醛固定。進一步的，所述步驟2自制IOX 16和10X9的組織陣列。進一步的，所述步驟2的組織陣列為6個蠟塊每個蠟塊75例X2點和1個蠟塊每個蠟塊40例X 2點的組織陣列。進一步的，所述步驟2每例組織塊取2個組織芯，其直徑為1. 6毫米的蠟塊。進一步的，所述步驟5分化程度P小于等于0. 05被認為差異有顯著性。進一步的，所述步驟5采用SPSSl 1. 0統計軟件分析。以上所述僅為本發明的優選實施例而已，并不用于限制本發明，對于本領域的技術人員來說，本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
權利要求
1.一種EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于步驟1、臨床資料，收集醫院手術切除胃癌標本若干例，標本中位年齡58 68歲，所有標本均經兩位病理專家進行組織病理證實，患者術前均未進行放療和化療；步驟2、組織芯片的構建，組織標本經1 7%的甲醛固定、常規石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對應找出蠟塊上相應部位并做標記，選取無壞死的腫瘤組織，自制 10 X 2 10 X 32的組織陣列，每例組織塊取1 3個組織芯，其直徑為0. 6 2. 6毫米的蠟塊，有定位用的空位；步驟3、試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA ；步驟4、原位雜交染色結果判斷標準，僅為細胞核著棕褐色為陽性，細胞漿和細胞膜在核分裂時可以有陽性著色，但視為陰性；步驟5、統計學方法，所有實驗均采用統計軟件分析，組間差異采用X2檢驗，以P小于等于0. 1被認為差異有顯著性。
2.根據權利要求1所述的EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟1標本中位年齡63歲。
3.根據權利要求1所述的EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2標本經4%的甲醛固定。
4.根據權利要求1所述的EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2自制IOX 16禾口 10X9的組織陣列。
5.根據權利要求1、4所述的EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2的組織陣列為6個蠟塊每個蠟塊75例X2點和1個蠟塊每個蠟塊40例X2點的組織陣列。
6.根據權利要求1所述的EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟2每例組織塊取2個組織芯，其直徑為1. 6毫米的蠟塊。
7.根據權利要求1所述的EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟5分化程度P小于等于0. 05被認為差異有顯著性。
8.根據權利要求1所述的EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，其特征在于所述步驟5采用SPSSl 1. 0統計軟件分析。
全文摘要
本發明公開了一種EB病毒相關胃癌臨床病理特征分析方法，臨床資料，收集醫院手術切除胃癌標本若干例；組織芯片的構建，組織標本經甲醛固定、常規石蠟包埋制片，HE染色后，在顯微鏡下定位、對應找出蠟塊上相應部位并做標記，選取無壞死的腫瘤組織，自制組織陣列；試劑，EBERs即EB病毒編碼的小RNA；原位雜交染色結果判斷標準，僅為細胞核著棕褐色為陽性，細胞漿和細胞膜在核分裂時可以有陽性著色，但視為陰性；統計學方法，所有實驗均采用統計軟件分析，組間差異采用χ2檢驗。本發明提供了用原位雜交法檢測胃癌組織芯片中EB病毒編碼的小RNA，分析EB病毒相關胃癌病理形態及患者年齡、性別、淋巴結轉移狀況等臨床特征。
文檔編號C12Q1/70GK102505046SQ201110321390
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月21日 優先權日2011年10月21日
發明者郭云娣 申請人:蘇州衛生職業技術學院