專(zhuān)利名稱(chēng)：利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢液生產(chǎn)高蛋白飼料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于環(huán)境工程和生物工程領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)是一種利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法。
背景技術(shù)：
鳥(niǎo)苷又名鳥(niǎo)嘌呤核苷或9-(0-D-呋喃核糖基)鳥(niǎo)嘌呤。鳥(niǎo)苷的用途十分廣泛，可用于合成食品增鮮劑一 5'-鳥(niǎo)苷酸二鈉、呈味核苷酸二鈉以及作為醫(yī)藥產(chǎn)品的重要中間體， 可形成一系列的下游醫(yī)藥產(chǎn)品，包括核苷類(lèi)抗病毒藥物如利巴韋林、阿昔洛韋等，也是用于制造無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷(Acyclovir)、三氮唑核苷(ATC)、三磷酸鳥(niǎo)苷鈉(GTP)等藥物的主要原料。目前，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)鳥(niǎo)苷需求量大約在3 500噸/年，且以每年10%的速度增長(zhǎng)。鳥(niǎo)苷生產(chǎn)采用發(fā)酵法，該法會(huì)產(chǎn)生大量發(fā)酵廢水。鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中殘?zhí)橇考s為3%， 總氮含量約為0. 6%，氨氮含量約為0. 5%，無(wú)機(jī)鹽含量約為4. 0%-5. 0%，廢液pH7. 0，是一種高 B0D、高氨氮營(yíng)養(yǎng)豐富的有機(jī)廢水，直接排放會(huì)造成水體生物因缺氧而大量死亡，處理后達(dá)標(biāo)排放不僅增加生產(chǎn)成本，而且廢水中的營(yíng)養(yǎng)成分不能充分利用，造成資源浪費(fèi)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是解決鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢液直接排放對(duì)環(huán)境的污染問(wèn)題，另一目的就是提供一種利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法。本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法，其特征在于包括有以下步驟
1)在IL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加鹿糖0. 5 g-2. 0 g,蛋白胨0.1 g -0. 5 g，酵母膏0.5 g -1.0 g，得到生產(chǎn)蛋白飼料的發(fā)酵培養(yǎng)基；
2)菌種活化，分別挑取枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌接種于相應(yīng)的斜面培養(yǎng)基上，于30°C -37°C，培養(yǎng)10 hr-20 hr,分別得到枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的斜面種子；
3)搖瓶種子培養(yǎng)，將步驟2)得到的活化好的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的斜面種子分別接種至三角搖瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，得到枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的搖瓶種子；
4)發(fā)酵種子培養(yǎng)，將步驟3)中培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的搖瓶種子按體積百分比5%-10%的接種量分別接種于種子罐中，于30°C -37°C，培養(yǎng)20 hr-40 hr，得到枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的種子液；
5)混合發(fā)酵培養(yǎng)，將步驟4)中培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的種子液， 采用步驟I)所述的發(fā)酵培養(yǎng)基，按5%-10%的總接種量接種于發(fā)酵罐中，于34°C _36°C，通風(fēng)比為0. 13-0. 15，培養(yǎng)40 hr-48 hr，得到混合培養(yǎng)液；
6)噴霧干燥，將步驟5)的混合培養(yǎng)液進(jìn)行噴霧干燥、粉碎，即得蛋白飼料。按上述方案，步驟2)所用的用于菌種活化的斜面培養(yǎng)基為枯草芽孢桿菌的斜面培養(yǎng)基組成為葡萄糖0. 5 g,蛋白胨0.6 g，酵母膏0.7 g,氯化鈉0.5 g,瓊脂2.0 g,去離子水100 mL ;地衣芽孢桿菌的斜面培養(yǎng)基組成為葡萄糖0.5 g，蛋白胨0.7 g，酵母膏0.8 g，氯化鈉0.5 g,瓊脂2.0 g,去離子水100 mL ;酵母菌的斜面培養(yǎng)基組成為鹿糖2.0 g,酵母膏0. 8 g，氯化鈉0. 5 g，瓊脂2. 0 g，去離子水100 mL。按上述方案，步驟3)中搖瓶種子培養(yǎng)條件為，枯草芽孢桿菌采用如下培養(yǎng)基在 100 mL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏1.0 g-3.0 g，培養(yǎng)基pH7. 0，于35°c-37°c，200 rpm振搖培養(yǎng)20 hr-24 hr ;地衣芽孢桿菌采用如下培養(yǎng)基在100 mL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加蛋白胨 0.5 g-1.5 g、酵母膏 1.0 g-2. 0 g，培養(yǎng)基 pH7.0，于 35°C-37°C，180 rpm 振搖培養(yǎng) 26 hr-30 hr ;酵母菌采用如下培養(yǎng)基在100 mL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏0. 5 g-1. 0 g、鹿糖 0.5 g-2. 0 g，于 28°C-32°C，150 rpm 振搖培養(yǎng) 40 hr-48 hr。按上述方案，步驟4)中發(fā)酵種子培養(yǎng)條件為枯草芽孢桿菌采用如下培養(yǎng)基 在I L鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏5 g-30 g，調(diào)pH7.0，接種量為體積百分比5%-7%，于 35°C-37°C，通風(fēng)比為0. 13-0. 15，培養(yǎng)20 hr-24 hr，取樣，稀釋10倍，于650 nm測(cè)菌體密度，使之達(dá)I. 46-1. 52 ;地衣芽孢桿菌采用如下培養(yǎng)基在I L鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加蛋白胨
5.0 g-15.0 g、酵母膏 10. 0 g -20. 0 g，調(diào)pH7.0。接種量為 7%-10%，于 35°C-37°C，通風(fēng)比為
0.13-0. 15，培養(yǎng)26 hr-30 hr,取樣，稀釋10倍，于650 nm測(cè)菌體密度，使之達(dá)I. 48-1. 52 ； 酵母菌采用如下培養(yǎng)基在I L鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏5. 0 g-10. 0 g、鹿糖5.0 g-20. 0 g，接種量為7%-10%，于28°C-32°C，通風(fēng)比為0. 10-0. 12，培養(yǎng)40 hr -48 hr，取樣，稀釋10 倍，于650 nm測(cè)菌體密度，使之達(dá)I. 44-1. 53。按上述方案，步驟5)中混合發(fā)酵的接種量為按枯草芽孢桿菌接種量I. 0%-3. 0%、 地衣芽孢桿菌接種量2. 0%-4. 0%、酵母菌接種量2. 0%-3. 0%。按上述方案，所述的蛋白飼料為淡黃色粉末，菌群總數(shù)6. 83X IO8-L 47X IO9 CFU / g，粗蛋白含量為48%-51%。富含礦質(zhì)和維生素，是一種優(yōu)質(zhì)的禽畜蛋白飼料。本發(fā)明利用鳥(niǎo)苷廢水為原料，發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料，其中菌群總數(shù)為
6.83 X IO8-L 47 X IO9 CFU / g，粗蛋白含量為48%_51%，富含礦質(zhì)和維生素，是一優(yōu)質(zhì)的蛋白禽畜飼料。本發(fā)明不僅解決了鳥(niǎo)苷發(fā)酵產(chǎn)生的廢水排放對(duì)環(huán)境的污染，而且降低了蛋白飼料的生產(chǎn)成本，做到資源的最大化利用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但是不會(huì)構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制
實(shí)施例I一種以鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料法方法如下
步驟一，菌種活化，挑取枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌接種于相應(yīng)的斜面培養(yǎng)基上，枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌于37°C分別培養(yǎng)10 hr和16 hr ;酵母菌于30°C，培養(yǎng) 20 hr o枯草芽孢桿菌的斜面培養(yǎng)基組成為葡萄糖0. 5 g，蛋白胨0. 6 g，酵母膏0. 7 g，氯化鈉0. 5 g，瓊脂2. 0 g，去離子水100 mL ;地衣芽孢桿菌的斜面培養(yǎng)基組成為葡萄糖0. 5 g，蛋白胨0.7 g，酵母膏0.8 g,氯化鈉0.5 g,瓊脂2.0 g,去離子水100 mL ;酵母菌的斜面培養(yǎng)基組成為蔗糖2.0 g，酵母膏0.8 g，氯化鈉0.5 g，瓊脂2.0 g，去離子水100 mL。
步驟二，搖瓶種子培養(yǎng)，將步驟一中活化好的枯草芽孢桿菌接種于已滅菌含酵母膏2. 0 g、鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水100 mL, pH 7. 0的搖瓶中，于37°C，200 rpm振搖培養(yǎng)20 hr ;將步驟二中活化好的地衣芽孢桿菌接種于已滅菌含蛋白胨1.0 g、酵母膏I. 5 g、鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水 100 mL、pH7. 0的搖瓶中，于35°C，180 rpm振搖培養(yǎng)24 hr ;將步驟二中活化好的酵母菌接種于已滅菌含鹿糖1.0 g，酵母膏0.7 g，鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水100 mL的搖瓶中，于30°C, 150 rpm 振搖培養(yǎng)48 hr o步驟三，發(fā)酵種子培養(yǎng)。將步驟二中搖瓶培養(yǎng)的菌液分別接種于種子罐中進(jìn)行種子培養(yǎng)。枯草芽孢桿菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為
2.0%的酵母膏，調(diào)pH7. 0，121°C滅菌30 min，冷卻。以5%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，37°C，通風(fēng)比0. 13，培養(yǎng)20 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.46。然后壓入500 L的種子罐中，于37°C，通風(fēng)比0. 12，培養(yǎng)20 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為I. 48。地衣芽孢桿菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為 1.0%的蛋白胨、I. 5%的酵母膏，調(diào)pH7. O。121°C滅菌30 min，冷卻。以7%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，35°C，通風(fēng)比0. 14，培養(yǎng)26 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.49。然后壓入500 L的種子罐中，于35°C，通風(fēng)比0. 14，培養(yǎng) 26 hr,使稀釋10倍的菌體密度在650 nm處達(dá)I. 48。酵母菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加補(bǔ)加體積質(zhì)量比為I. 0% 的蔗糖、0. 7%的酵母膏，pH自然。121°C滅菌30 min，冷卻。以10%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，30°C，通風(fēng)比0. 10，培養(yǎng)48 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.53。然后壓入500 L的種子罐中，30°C，通風(fēng)比0. 10，培養(yǎng)48 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為I. 54。步驟四，混合發(fā)酵培養(yǎng)。取蔗糖18 kg，蛋白胨12 kg，酵母膏18 kg，鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水 36 m3，混合溶解后加入50 m3的發(fā)酵罐中，121 °C滅菌30 min。冷卻，接種枯草芽孢桿菌I. 2 m3、地衣芽孢桿菌I. 4 m3、酵母菌I. 4 m3 (總接種量10%)，36°C，通風(fēng)比為0. 13，培養(yǎng)40 hr,放罐。步驟五，噴霧干燥。將步驟四中混合發(fā)酵液進(jìn)行噴霧干燥、粉碎，得菌體蛋白(為淡黃色粉末)，其中菌群總數(shù)為為I. 07X IO9CFU / g，粗蛋白含量為50.6%。實(shí)施例2 —種以鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料法方法如下
步驟一，同實(shí)施例I進(jìn)行菌種活化。步驟二，搖瓶種子培養(yǎng)，將步驟一中活化好的枯草芽孢桿菌接種于已滅菌含酵母膏I. 0 g、鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水100 mL, pH7. 0的搖瓶中，于35°C，200 rpm振搖培養(yǎng)24 hr ;將步驟二中活化好的地衣芽孢桿菌接種于已滅菌含蛋白胨0.5 g、酵母膏2.0 g、鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水 100 mL、pH7. 0的搖瓶中，于36°C，180 rpm振搖培養(yǎng)30 hr ;將步驟二中活化好的酵母菌接種于已滅菌含鹿糖0.5 g，酵母膏1.0 g，鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水100 mL的搖瓶中，于28°C, 150 rpm 振搖培養(yǎng)44 hr o步驟三，發(fā)酵種子培養(yǎng)。將步驟二中搖瓶培養(yǎng)的菌液分別接種于種子罐中進(jìn)行種子培養(yǎng)。
枯草芽孢桿菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為 1.0%的酵母膏，調(diào)pH7. 0，121°C滅菌30 min，冷卻。以6%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，35°C，通風(fēng)比0. 15，培養(yǎng)24 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為I. 51。然后壓入500 L的種子罐中，于35°C，通風(fēng)比0. 15，培養(yǎng)24 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為I. 49。地衣芽孢桿菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為
0.5%的蛋白胨、2. 0%的酵母膏，調(diào)pH7. O。121°C滅菌30 min，冷卻。以9%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，36°C，通風(fēng)比0. 13，培養(yǎng)30 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.48。然后壓入500 L的種子罐中，于36°C，通風(fēng)比0. 13，培養(yǎng) 30 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為I. 49。酵母菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為0. 5%的蔗糖、1.0%的酵母膏，pH自然。121°C滅菌30 min，冷卻。以7%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，28°C，通風(fēng)比0. 12，培養(yǎng)44 hr，稀釋10倍的菌體密度在 650 nm處為1.44。然后壓入500 L的種子罐中，28°C，通風(fēng)比0. 12，培養(yǎng)44 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為I. 46。步驟四，混合發(fā)酵培養(yǎng)。取蔗糖40 kg，蛋白胨18 kg，酵母膏24 kg，鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水 36 m3，混合溶解后加入50 m3的發(fā)酵罐中，121 °C滅菌30 min。冷卻，接種枯草芽孢桿菌0. 8 m3、地衣芽孢桿菌I. I m3、酵母菌0.9 m3 (總接種量7%)，34°C，通風(fēng)比為0. 14，培養(yǎng)45 hr,放罐。步驟五，噴霧干燥。將步驟四中混合發(fā)酵液進(jìn)行噴霧干燥、粉碎，得菌體蛋白(為淡黃色粉末)，其中菌群總數(shù)9. 26 X IO8CFU / g，粗蛋白含量為51.0%。實(shí)施例3 —種以鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料法方法如下
步驟一，同實(shí)施例I進(jìn)行菌種活化。步驟二，搖瓶種子培養(yǎng)，將步驟二中活化好的枯草芽孢桿菌接種于已滅菌含酵母膏3.0 g、鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水100 mL，pH7. 0的搖瓶中，于36°C，200 rpm振搖培養(yǎng)22 hr ;將步驟一中活化好的地衣芽孢桿菌接種于已滅菌含蛋白胨I. 5 g、酵母膏0.5 g、鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水 100 mL、pH7. 0的搖瓶中，于37°C，180 rpm振搖培養(yǎng)28 hr ;將步驟二中活化好的酵母菌接種于已滅菌含鹿糖2.0 g，酵母膏0.5 g，鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水100 mL的搖瓶中，于32°C, 150 rpm 振搖培養(yǎng)40 hr o步驟三，發(fā)酵種子培養(yǎng)。將步驟二中搖瓶培養(yǎng)的菌液分別接種于種子罐中進(jìn)行種子培養(yǎng)。枯草芽孢桿菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為
3.0%的酵母膏，調(diào)pH7. 0，121°C滅菌30 min，冷卻。以7%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，36°C，通風(fēng)比0. 14，培養(yǎng)22 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.49。然后壓入500 L的種子罐中，于36°C，通風(fēng)比0. 14，培養(yǎng)22 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.52。地衣芽孢桿菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為
1.5%的蛋白胨、0.5%的酵母膏，調(diào)pH7. O。121°C滅菌30 min，冷卻。以10%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，37°C通風(fēng)比0. 15，培養(yǎng)28 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 11111處為1.52。然后壓入500 L的種子罐中，于37°C，通風(fēng)比0. 15，培養(yǎng)28 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.51。酵母菌種子液培養(yǎng)。培養(yǎng)基制備在鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加體積質(zhì)量比為2. 0%的蔗糖、0.5%的酵母膏，pH自然。121°C滅菌30 min，冷卻。以9%接種量，將步驟二中培養(yǎng)的搖瓶種子，接種于10 L的種子罐中，32°C，150 rpm，通風(fēng)比0. 11，培養(yǎng)40 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為1.45。然后壓入500 L的種子罐中，32°C，150 rpm，通風(fēng)比0. 11，培養(yǎng)40 hr，稀釋10倍的菌體密度在650 nm處為I. 46。步驟四，混合發(fā)酵培養(yǎng)。取蔗糖72 1^，蛋白胨3.6 kg，酵母膏36 kg，鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水36 m3，混合溶解后加入50 m3的發(fā)酵罐中，121 °C滅菌30 min。冷卻，接種枯草芽孢桿菌 0.5 m3、地衣芽孢桿菌0.8 m3、酵母菌0.7 m3 (總接種量5%)，35°C，通風(fēng)比為0. 15，培養(yǎng)48 hr，放罐。步驟五，噴霧干燥。將步驟四中混合發(fā)酵液進(jìn)行噴霧干燥、粉碎，得菌體蛋白(為淡黃色粉末)，其中菌群總數(shù)6. 97 X IO8CFU / g，粗蛋白含量為48.6%。
權(quán)利要求
1.利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法，其特征在于包括有以下步驟1)在IL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加鹿糖O. 5 g-2. O g,蛋白胨O. I g -O. 5 g，酵母膏O. 5 g -I. O g，得到生產(chǎn)蛋白飼料的發(fā)酵培養(yǎng)基；2)菌種活化，分別挑取枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌接種于相應(yīng)的斜面培養(yǎng)基上，于30°C -37°C，培養(yǎng)10 hr-20 hr,分別得到枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的斜面種子；3)搖瓶種子培養(yǎng)，將步驟2)得到的活化好的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的斜面種子分別接種至三角搖瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，得到枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的搖瓶種子；4)發(fā)酵種子培養(yǎng)，將步驟3)中培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的搖瓶種子按體積百分比5%-10%的接種量分別接種于種子罐中，于30°C -37°C，培養(yǎng)20 hr-40 hr，得到枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的種子液；5)混合發(fā)酵培養(yǎng)，將步驟4)中培養(yǎng)的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌的種子液， 采用步驟I)所述的發(fā)酵培養(yǎng)基，按5%-10%的總接種量接種于發(fā)酵罐中，于34°C _36°C，通風(fēng)比為O. 13-0. 15，培養(yǎng)40 hr-48 hr，得到混合培養(yǎng)液；6)噴霧干燥，將步驟5)的混合培養(yǎng)液進(jìn)行噴霧干燥、粉碎，即得蛋白飼料。
2.根據(jù)權(quán)利I所述的利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法，其特征在于步驟2)所用的用于菌種活化的斜面培養(yǎng)基為枯草芽孢桿菌的斜面培養(yǎng)基組成為葡萄糖O. 5 g，蛋白胨O. 6 g，酵母膏O. 7 g,氯化鈉O. 5 g,瓊脂2. O g,去離子水100 mL ;地衣芽孢桿菌的斜面培養(yǎng)基組成為葡萄糖O. 5 g，蛋白胨O. 7 g，酵母膏O. 8 g，氯化鈉O. 5 8，瓊脂2.0 g，去離子水100 mL ;酵母菌的斜面培養(yǎng)基組成為蔗糖2.0 g，酵母膏0.8 g，氯化鈉0.5 g，瓊脂2.O g，去離子水100 mL。
3.根據(jù)權(quán)利I所述的利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法，其特征在于步驟3)中搖瓶種子培養(yǎng)條件為，枯草芽孢桿菌米用如下培養(yǎng)基在100 mL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏I. O g-3. O g，培養(yǎng)基ρΗ7·0，于35°C_37°C，200 rpm振搖培養(yǎng)20 hr-24 hr ;地衣芽孢桿菌采用如下培養(yǎng)基在100 mL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加蛋白胨O. 5 g-1.5 g、酵母膏I. O g-2. O g，培養(yǎng)基pH7. 0，于35°C-37°C，180 rpm振搖培養(yǎng)26 hr-30 hr ;酵母菌采用如下培養(yǎng)基 在100 mL鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏O. 5 g-1.0 g、蔗糖O. 5 g-2. O g，于28°C _32°C，150 rpm 振搖培養(yǎng) 40 hr-48 hr。
4.根據(jù)權(quán)利I所述的利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法中，其特征在于步驟4)中發(fā)酵種子培養(yǎng)條件為枯草芽孢桿菌采用如下培養(yǎng)基在I L鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏5 g-30 g，調(diào)pH7. 0，接種量為體積百分比5%-7%，于35°C-37°C，通風(fēng)比為O. 13-0. 15，培養(yǎng)20 hr-24 hr,取樣，稀釋10倍，于650 nm測(cè)菌體密度，使之達(dá)I. 46-1. 52 ;地衣芽孢桿菌采用如下培養(yǎng)基在I L鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加蛋白胨5. O g-15. O g、酵母膏10. O g -20.0 g，調(diào) ρΗ7· 0，接種量為 7%-10%，于 35°C _37°C，通風(fēng)比為 O. 13-0. 15，培養(yǎng) 26 hr-30 hr，取樣，稀釋10倍，于650 nm測(cè)菌體密度，使之達(dá)I. 48-1. 52 ;酵母菌采用如下培養(yǎng)基在I L鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水中補(bǔ)加酵母膏5. O g-10. O 8、蔗糖5.0 g-20. O g，接種量為7%_10%，于28°C _32°C， 通風(fēng)比為O. 10-0. 12，培養(yǎng)40 hr -48 hr，取樣，稀釋10倍，于650 nm測(cè)菌體密度，使之達(dá) I. 44-1. 53。
5.根據(jù)權(quán)利I所述的利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法中，其特征在于步驟5)中混合發(fā)酵的接種量為按枯草芽孢桿菌接種量I. 0%-3. 0%、地衣芽孢桿菌接種量2.0%-4. 0%、酵母菌接種量2. 0%-3. 0%進(jìn)行接種。
6.根據(jù)權(quán)利I所述的利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法中，其特征在于所述的蛋白飼料為淡黃色粉末，菌群總數(shù)6. 83 X IO8-L 47 X IO9 CFU / g，粗蛋白含量為48%_51%。
全文摘要
本發(fā)明屬于環(huán)境工程和生物工程領(lǐng)域，具體來(lái)說(shuō)是一種利用鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水生產(chǎn)蛋白飼料的方法，包括以下幾個(gè)步驟第一，菌種活化；第二，搖瓶種子培養(yǎng)；第三，生產(chǎn)種子培養(yǎng)；第四，以鳥(niǎo)苷發(fā)酵廢水為原料，接種枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、酵母菌，進(jìn)行混合發(fā)酵；第五，噴霧干燥、粉碎，得蛋白飼料。該蛋白飼料含菌群總數(shù)為6.83×108-1.47×109CFU／g，粗蛋白含量為49%-51%，富含礦質(zhì)和維生素，是一優(yōu)質(zhì)的蛋白禽畜飼料。
文檔編號(hào)C12P21/00GK102578389SQ20121003318
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年2月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月15日
發(fā)明者戶(hù)業(yè)麗, 程波 申請(qǐng)人:武漢工程大學(xué)