專利名稱：一種畜禽糞污微生物除臭菌劑、其制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種微生物除臭菌劑及其制備方法，具體涉及根據(jù)微生物生態(tài)學(xué)原理，利用菌株之間的共生、互生、協(xié)同作用等相互作用關(guān)系構(gòu)建成的微生物除臭菌劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
惡臭污染是世界公認(rèn)的七大環(huán)境公害之一，隨著我國 農(nóng)業(yè)和農(nóng)村經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，畜牧業(yè)得到持續(xù)健康快速的發(fā)展，但由畜禽糞便引起的惡臭污染已成為惡臭污染的最主要貢獻(xiàn)之一，尤其是隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們生活水平的逐步提高，對環(huán)境質(zhì)量的要求也日趨強(qiáng)烈，由畜禽糞便等所產(chǎn)生的惡臭越來越受到人們的關(guān)注。糞便惡臭污染不但給人們生活帶來不便，而且其中含有多種有毒成分，其中氨氣、硫化氫、硫醇和甲硫醇是主要有害氣體成分，給養(yǎng)殖環(huán)境帶來很大危害，影響?zhàn)B殖動(dòng)物的健康生長，需大量化學(xué)消毒剤、抗生素等藥物進(jìn)行場區(qū)消毒和衛(wèi)生防疫，導(dǎo)致大量化學(xué)消毒剤、抗生素等大量有害物質(zhì)通過食物鏈進(jìn)入人體，嚴(yán)重危及人類健康與食品安全。同時(shí)大量的化學(xué)有害物質(zhì)也對水體和土壌造成嚴(yán)重危害。并且臭氣氣體的排放會對周邊環(huán)境造成嚴(yán)重污染，人們長期吸入后對身體健康造成嚴(yán)重傷害。因此實(shí)施畜禽糞便惡臭污染控制和管理，開展脫除惡臭氣體的研究具有重要意義。目前，針對畜禽糞便惡臭脫除研究可分為化學(xué)除臭和生物除臭兩大方面，化學(xué)除臭原理是通過外源強(qiáng)氧化物質(zhì)對惡臭成份進(jìn)行氧化降解，近而消除惡臭，其雖針對性強(qiáng)，見效快，但其應(yīng)用范圍小，遇到復(fù)雜惡臭氣體成份時(shí)，除臭效能將失效，并且使用化學(xué)除臭劑后殘留的化學(xué)物質(zhì)往往會引起二次污染。生物除臭原理是通過外源功能菌種或生物酶對惡臭的直接降解或?qū)Ξa(chǎn)惡臭微生物的抑制來脫除惡臭。生物除臭能持久消除惡臭，無二次污染，使用方便，成本低廉等特點(diǎn)，成為惡臭控制的研究熱點(diǎn)。生物除臭的核心是高效除臭功能微生物菌劑，通過分離篩選高效除臭功能菌株并優(yōu)化組合配伍成微生物除臭菌劑，再接種于畜禽糞便中可以有效降低其釋放的惡臭強(qiáng)度，達(dá)到畜禽糞便惡臭原位控制目的。

發(fā)明內(nèi)容
針對畜禽養(yǎng)殖場畜禽舎、糞污貯存池等主要惡臭釋放源，本發(fā)明的目的是提供一種高效微生物除臭菌劑及其制備方法。本發(fā)明提供ー種畜禽糞污微生物除臭菌劑，該菌劑含有保藏號為CGMCC NO :5982的酵母菌種杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和保藏號為CGMCC NO :5984的酵母菌種釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae。進(jìn)ー步地，本發(fā)明的畜禽糞污微生物除臭菌劑中，所述的杰丁畢赤酵母Pichiajadinii和釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae的菌液比例為2 I (體積/體積)。其中涉及的相關(guān)保藏信息為
保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院，中國科學(xué)院微生物研究所；保藏日期2012年4月10日；保藏編號CR(CGMCC NO :5982)和 NR (CGMCC NO :5984);分類名:CR 為杰丁畢赤酵母 Pichia jadinii,NR 為釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae。本發(fā)明可以通過以下方式來實(shí)現(xiàn)I、所用的菌株為ニ株酵母菌，分別是CR (CGMCC NO :5982)和 NR (CGMCC NO :5984)，其中 CR 為杰丁畢赤酵母 Pichiajadinii, NR 為釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae。2、ニ株酵母菌的優(yōu)化配伍比例為CR NR=2:1 (體積/體積)，其中CR和NR分別為ニ株酵母菌發(fā)酵后的菌液，其菌液濃度均為108CFU/mL?！?、培養(yǎng)基(I) YPD固體培養(yǎng)基,用于菌種活化,其配方為蛋白胨20g、牛肉膏 10g、葡萄糖 20g、水 1000mL、瓊脂 15-20g、pH 6. 5-7. O0(2)用于微生物除臭菌劑發(fā)酵的液體培養(yǎng)基配方為蛋白胨5g、麥芽浸粉10g、氯化鈉5g、葡萄糖20g、水1000mL、pH 6. 5-7. O0固體菌劑所用吸附劑為經(jīng)過滅菌處理的干燥麩皮或米糠或木屑或其混合物，其用量為每升混合菌液(微生物除臭菌劑)加入吸附劑I千克；用于活化菌劑的促進(jìn)劑為麥芽浸粉，其用量為每千克烘干菌劑中加入促進(jìn)劑5g。4、菌劑的制備方法液態(tài)微生物除臭菌劑的制備方法為( I)將兩種菌種分別接入YPD固體斜面培養(yǎng)基活化備用。(2)將滅菌處理過的液體培養(yǎng)基定量備用。(3)將活化后的菌種分別接入滅菌處理過的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時(shí)。(4)分別將培養(yǎng)好的各菌液計(jì)數(shù)調(diào)節(jié)(優(yōu)選分別調(diào)ニ菌株的含菌量均為IO8CFU/mL)，然后將兩種菌液進(jìn)行組合(優(yōu)選按比例為2 1 (體積/體積)進(jìn)行組合)，即為液態(tài)微生物除臭菌劑。固態(tài)微生物除臭菌劑的制備方法為( I)將滅菌處理過的麩皮或米糠或木屑或其混合物干燥定量，作吸附劑用。(2)每升混合菌液(上面制備得到的液態(tài)微生物除臭菌劑)加入吸附劑I千克，攪拌混勻，然后在40°C恒溫培養(yǎng)箱中烘干培養(yǎng)20-24小吋，至含水量為15-20%，即為烘干菌齊U，在按每千克烘干菌劑中加入5g促進(jìn)劑，攪拌均勻，即為固態(tài)微生物除臭菌劑，定量封包低溫保存。所述的吸附劑為經(jīng)過滅菌處理的干燥麩皮或米糠或木屑或其混合物；所述的促進(jìn)劑為用于活化菌劑的麥芽浸粉。上述制備的微生物除臭菌劑的主要指標(biāo)為液態(tài)微生物除臭菌劑活菌數(shù)大于等于I億CFU/mL ；pH 6-7 ;懸液、顏色微紅。固態(tài)微生物除臭菌劑活菌數(shù)大于等于I億CFU/g ;顆粒干燥、表面乳白。5、使用方法及條件
該微生物除臭菌劑用于畜禽養(yǎng)殖場畜禽舍、糞污貯存池等臭氣釋放場所。其使用方法為液態(tài)微生物除臭菌劑直接噴灑于畜禽舍和糞污貯存池；固態(tài)微生物除臭菌劑先用生理鹽水把菌劑調(diào)勻，在30°C環(huán)境下活化3-5小吋，隨后散撒在畜禽舍和糞污貯存池。本發(fā)明的優(yōu)越之處在于(I)菌劑微生物可以在糞污中良好生長，占據(jù)有利生態(tài)位，抑制了產(chǎn)惡臭微生物生長繁殖，降低惡臭釋放強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn)了惡臭原位源頭控制。(2)菌劑由有益微生物 酵母菌構(gòu)成，酵母菌在糞污中的生長繁殖，構(gòu)建充滿有益微生物的養(yǎng)殖環(huán)境，有效改善了養(yǎng)殖環(huán)境，提高了養(yǎng)殖動(dòng)物免疫力，減少了抗生素使用量，保證了養(yǎng)殖動(dòng)物食用安全。(3)實(shí)現(xiàn)了菌株的有效組合，組合后的菌劑比單菌除臭效果明顯提高。(4)改進(jìn)了菌劑的保藏方法，延長了產(chǎn)品的使用壽命。(5)符合生物安全法規(guī)，菌劑中包含的菌株均從被畜禽糞便污染長期脅迫選擇環(huán)境中篩選得到，不會對周圍環(huán)境和生態(tài)平衡造成危害。(6)使用方面,包裝、運(yùn)輸便利，易形成商品化。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例詳細(xì)地說明本發(fā)明。實(shí)施方案為便于更好的理解本發(fā)明，但并非對本發(fā)明的限制。一、微生物除臭菌劑的制備實(shí)施例I :(I)、將高溫滅菌處理(121°C、30分鐘)的YPD固體培養(yǎng)基定量備用，固體YI3D培養(yǎng)基的配方為蛋白胨20g、牛肉膏10g、葡萄糖20g、水1000mL、瓊脂15-20g、pH 6. 5-7.0。(2)、將菌種CR和NR分別接入滅菌處理過(121°C、30分鐘)的YPD固體斜面培養(yǎng)
基中活化備用。(3)、將高溫滅菌處理過(121°C、30分鐘)的液體培養(yǎng)基定量備用，液體培養(yǎng)基配方為蛋白胨5g、麥芽膏10g、葡萄糖20g、水IOOOmL, pH 6. 5-7.0。(4)、將活化的菌種分別接入到液體培養(yǎng)基中振蕩(30°C、160轉(zhuǎn)/分鐘)培養(yǎng)24小時(shí)。(5)、將培養(yǎng)好的菌液計(jì)數(shù)，調(diào)ニ菌株的含菌量為108CFU/mL，在按CR NR=2:1的體積比進(jìn)行組合成混合菌液，即為液態(tài)微生物除臭菌劑。(6)、將定量的混合菌液(液態(tài)微生物除臭菌劑)加入吸附劑中，加入量為混合菌液IL+吸附劑lKg，然后在40°C的恒溫培養(yǎng)箱中烘干(含水量為15% 20%)，在按每千克烘干菌劑中加入5g促進(jìn)劑，攪拌均勻，最后封包低溫保存(4°C -IO0O0ニ、微生物除臭菌劑的應(yīng)用實(shí)施例2 向裝有200g新鮮豬糞的燒杯(1L)中加入IOml液態(tài)微生物除臭菌劑，保鮮膜密封燒杯；同時(shí)做不加菌劑的對照，每組實(shí)驗(yàn)設(shè)置三個(gè)重復(fù)，15天后測定惡臭強(qiáng)度、氨氣濃度、硫化氫濃度，測定結(jié)果如下表I :表I :菌劑除臭效果
權(quán)利要求
1.一種畜禽糞污微生物除臭菌劑，其特征在于，其中含有保藏號為CGMCC NO :5982的酵母菌種杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和保藏號為CGMCC NO :5984的酵母菌種釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae。
2.一種如權(quán)利要求I所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑，其特征在于，所述的杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae的菌液比例為2 :1 (體積/體積)。
3.—種如權(quán)利要求I所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，先將保藏號為CGMCC NO :5982的酵母菌種杰丁畢赤酵母Pichia jadinii和保藏號為CGMCC NO:5984的酵母菌種釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae分別在YPD固體斜面培養(yǎng)基中活化，再分別接種到菌劑液體培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時(shí)，分別調(diào)二菌株的含菌量均為108CFU/mL，然后將兩種菌液進(jìn)行組合，制備得到液態(tài)微生物除臭菌劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，兩種菌液按比例為2:1 (體積/體積)進(jìn)行組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，所述的菌劑液體培養(yǎng)基的配方為蛋白胨5g、麥芽浸粉10g、氯化鈉5g、葡萄糖20g、水lOOOmL、pH6.5~7. O0
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，將制得的液態(tài)微生物除臭菌劑按每升混合菌液加入吸附劑I千克的比例，攪拌混勻，然后在40°C恒溫培養(yǎng)箱中烘干培養(yǎng)20-24小時(shí),至含水量為15-20%,即為烘干菌劑，在按每千克烘干菌劑中加入5g促進(jìn)劑，攪拌均勻，即為固態(tài)微生物除臭菌劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑的制備方法，其特征在于，所述的吸附劑為經(jīng)過滅菌處理的干燥麩皮或米糠或木屑或其混合物；所述的促進(jìn)劑為用于活化菌劑的麥芽浸粉。
8.權(quán)利要求I所述的畜禽糞污微生物除臭菌劑在畜禽糞污處理的除臭處理中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其具體使用方法為液態(tài)微生物除臭菌劑直接噴灑于畜禽舍和糞污貯存池；固態(tài)微生物除臭菌劑先用生理鹽水把菌劑調(diào)勻，在30°C環(huán)境下活化3-5小時(shí)，隨后散撒在畜禽舍和糞污貯存池。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種畜禽糞污微生物除臭菌劑、其制備方法及應(yīng)用。公開了用于公廁除臭的復(fù)合生物制劑，該復(fù)合生物制劑含有保藏編號為CGMCC NO5983的乳酸菌種乳桿菌Lactobacillus sp、保藏編號為CGMCC NO5985的乳酸菌種嗜熱鏈球菌Streptococcus thermophilus和桔皮提取液。本發(fā)明還公開了上述復(fù)合生物制劑的制備方法，包括液態(tài)復(fù)合生物制劑和固態(tài)復(fù)合生物制劑的制備方法；以及該復(fù)合生物制劑的用途。
文檔編號C12N1/18GK102851210SQ20121019060
公開日2013年1月2日 申請日期2012年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月11日
發(fā)明者閆志英, 劉曉風(fēng), 袁月祥, 廖銀章, 李志東, 許力山 申請人:中國科學(xué)院成都生物研究所