專利名稱：一種基于保加利亞乳桿菌發酵的含ace抑制肽的羊乳飲料的制備方法
技術領域：
本發明屬于羊奶發酵技術領域，涉及一種基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法。
背景技術：
高血壓是全球最常見的慢性病，也是心腦血管病最 主要的危險因素，可引起腦卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性腎臟病等多種并發癥，不僅致殘、致死率高，而且嚴重消耗醫療和社會資源，給家庭和國家造成沉重負擔。按病因一般將高血壓分為兩大類由一些已知原因引起的高血壓，稱為繼發性高血壓，僅占高血壓病例的5%;另一大類高血壓的發病原因不清楚，稱為原發性高血壓，這種高血壓占高血壓患者的95%以上，是危害人體健康的主要疾病。ACE抑制肽是一類具有降血壓功能的多肽類物質，一方面它對于人體的升血壓系統——激肽釋放酶-激肽系統(KKS)起到抑制作用，另一方面又對于人體的降血壓系統——腎素-血管緊張素系統(RAS)起到促進作用，ACE抑制肽對于血壓正常的動物或人沒有降血壓作用，具有安全性高，無毒副作用的特點。目前，研究者已分離出多種天然來源的ACE抑制肽，其中大多是利用蛋白酶水解各種食物蛋白得到。有研究發現，一些酸奶也具有降血壓功能，并有學者從中分離得到了 ACE抑制肽。羊奶以其營養豐富、易于吸收等諸多優點被譽為奶中精品。保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)是酸奶發酵的常用菌,屬于乳桿菌屬熱乳酸桿菌亞屬，具有一系列的益生作用，包括調節胃腸道菌群平衡、促進人體消化吸收、增加人體免疫功能、抗癌抗腫瘤、降血壓、降低膽固醇等。

發明內容
本發明解決的問題在于提供一種基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，所制備的羊奶既具有酸羊奶的營養價值，還含有抑制率較高的ACE抑制肽，不僅促進了羊奶資源的開發利用，對于高血壓的防治以及高血壓患者的營養保健也有積極作用。本發明是通過以下技術方案來實現—種基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)將保加利亞乳桿菌L6接種于羊奶或羊奶復原乳中，在30 40°C下恒溫厭氧發酵10 15h，得到發酵羊奶；所述的羊奶或羊奶復原乳中還添加有質量濃度為0. 01 0. 09%的維生素C ；2)按質量份數計，將35 50份的發酵羊奶與10 20份的濃縮果汁，5 10份的蔗糖，0.01 0. 02份的牛磺酸，0. 001 0. 002份的維生素E，0. 001 0. 002份的煙酰胺，0. 001 0. 002份的檸檬酸鋅，0. 15 I. 0份的穩定劑及28 50份的水混合均勻，在35 45°C、10 20Mpa條件下均質，得到含ACE抑制肽的羊乳飲料。所述的保加利亞乳桿菌L6 在接種之前還進行以下活化I)將保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養10 14h，完成第一次活化；2)按體積分數計，取3 7%第一次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養10 14h，完成第二次活化；3)按體積分數計，取3 7%第二次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養10 14h，完成第三次活化；完成第三次活化后，按體積分數計，取3 7%第三次活化的菌液接種于含維生素C的羊奶或羊奶復原乳中。所述的羊奶復原乳為羊奶粉與水以10 20 :100的質量比溶解于水中。所述的濃縮果汁為濃縮蘋果汁、濃縮橙汁中的一種或兩種。所述穩定劑為果膠、羧甲基纖維素鈉中的一種或兩種。所述含ACE抑制肽的羊乳飲料中保加利亞乳桿菌L6的活菌數大于108cfu/mL。所述含ACE抑制肽的羊乳飲料中ACE抑制肽抑制率為65 85%。所述制備的含ACE抑制肽的羊乳飲料在制備預防高血壓或高血壓輔助治療的飲品中應用。與現有技術相比，本發明具有以下有益的技術效果本發明提供的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，采用以保加利亞乳桿菌L6單菌株發酵的方式制備羊奶飲品，方法簡便易行，不僅除去了羊奶中的膻味，還保留了羊奶中豐富的營養物質，凝乳細膩，易于吸收，口感純正。羊奶中的鈣、鉀、磷脂、核苷酸的含量比牛奶中的高，脂肪顆粒小，易于被人體吸收且不引起發胖，膽固醇含量低，相比于牛奶營養更加豐富；所制備的發酵羊奶中保加利亞乳桿菌活菌數大于108cfu/mL，可提供包括調節胃腸道菌群平衡、增強免疫力、降低膽固醇等一系列的益生作用。進一步的，還在發酵過程中添加了維生素C，不僅提供了人體所需的營養物質，還提高了發酵羊奶中ACE抑制肽的抑制率；而為了保證羊奶發酵過程中產生的ACE抑制肽具有較高抑制率，在發酵結束后還添加了穩定劑。本發明提供的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，所制得的發酵羊奶中ACE抑制肽抑制率可達到65 90%，堅持長期飲用，可以有效地預防高血壓的發病，同時也可用于高血壓患者的輔助治療，可應用于制備預防高血壓或高血壓輔助治療的飲品中。本發明提供的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，還添加了牛磺酸、維生素C、維生素E、煙酰胺、檸檬酸鋅，營養豐富且均衡。本發明所述的羊乳飲料呈奶白色乳狀，具有酸奶的清香口感以及淡淡的果香，酸甜適中，有利于人們堅持長期飲用。
具體實施方式
下面結合具體的實施例對本發明做進一步的詳細說明，所述是對本發明的解釋而不是限定。實施例I基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)取0. 4g保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有IOmL滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養12h，完成第一次活化；取5%上述第一次活化的菌液，按上述操作方法進行第二次、第三次活化，共活化3次，即得到活化好的菌種。2)將IOOmL鮮羊奶過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40±3°C;將質量分數為20%的維生素C濃溶液過濾除菌后，取40 ii L加入上述鮮羊奶中并混合均勻； 再接入5mL活化好的保加利亞乳桿菌L6，在37 °C恒溫厭氧發酵12h，凝乳破碎，用200目濾網過濾，得到發酵羊奶。所得發酵羊奶中保加利亞乳桿菌L6活菌數為4. IOX 108cfu/mL，其中ACE抑制肽抑制率為83. 53%。3)按質量份數計，將6. 7份的蔗糖、0. 01份的牛磺酸、0. 002份的維生素E，0. 001份的煙酰胺，0. 001份的檸檬酸鋅，0. 3份的果膠用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌20min，然后加入40份的發酵羊奶和10份的濃縮蘋果汁，補加32. 986份的水，混合均勻，再在370C UOMpa條件下均質，即得到產品。ACE抑制肽抑制率的檢測方法為紫外分光光度法用含有0. 3mol/L NaCl 的 0. lmol/L 硼酸鹽緩沖液(pH8. 3)將 HHL (Hip-His-Leu)配成5mmol/L的溶液。在IOmL試管中分別加入200 y L的5mmol/L Hip-His-Leu溶液和80 u L的發酵乳上清液，于37°C下保溫5min后，再加入20 y L ACE溶液(溶解于蒸餾水中，活力為0. lU/mL)，混勻后在37°C下保溫30min進行反應，之后加入250 y L lmol/L HCl終止反應，再加入I. 5mL醋酸乙酯，經15s振蕩混勻后，靜置5min，用移液管吸取I. OmL的醋酸乙酯層，于120°C烘干30min,再加入I. OmL蒸懼水,混勻后在228nm處測定吸光度。在上述條件下，抑制50%的ACE活性(IC50)為樣品的一個活性單位。ACE 抑制率=[(B-A) / (B-C) ] X 100%式中A——含有發酵乳乳清(或溶于蒸餾水的多肽溶液)和ACE溶液的吸光度；B—不含發酵乳乳清(或溶于蒸餾水的多肽溶液)樣品，但含有ACE溶液的吸光度；C—為含脫脂乳乳清(或蒸餾水)，但不含ACE溶液的吸光度。實施例2基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)取0. 4g保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有IOmL滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養12h，完成第一次活化；取5%上述第一次活化的菌種，按上述操作方法進行第二次活化，共活化3次，即得到活化好的菌種。2)將14g羊奶粉溶解于IOOmL的水中，在90°C滅菌15min，冷卻至40±3°C ;將質量分數為20%的維生素C濃溶液過濾除菌后，取24 ii L加入上述羊奶復原乳中并混合均勻；
再接入7mL活化好的保加利亞乳桿菌L6，在40°C恒溫厭氧發酵10h，凝乳破碎，用200目濾網過濾，得到發酵羊奶。所得發酵羊奶中保加利亞乳桿菌L6活菌數為4. 69X 108cfu/mL，其中ACE抑制肽抑制率為78. 44%。3)按質量份數計，將5份的蔗糖、0. 02份的牛磺酸、0. 001份的維生素E，0. 002份的煙酰胺，0. 002份的檸檬酸鋅，0. 2份的羧甲基纖維素鈉用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌20min，然后加入50份的發酵羊奶和15份的濃縮橙汁，補加19. 775份的水，混合均勻，再在40°C、IOMpa條件下均質，即得到產品。實施例3基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)取0. 4g保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有IOmL滅菌羊奶復原乳的厭 氧管中，充分混勻后在37°C培養12h，完成第一次活化；取5%上述第一次活化的菌種，按上述操作方法進行第二次活化，共活化3次，即得到活化好的菌種。2)將14g羊奶粉溶解于IOOmL的水中，在90°C滅菌15min，冷卻至40±3°C ;將質量分數為20%的維生素C濃溶液過濾除菌后，取56 ii L加入上述羊奶復原乳中并混合均勻；再接入7mL活化好的保加利亞乳桿菌L6，在36 °C恒溫厭氧發酵14h，凝乳破碎，用200目濾網過濾，得到發酵羊奶。所得發酵羊奶中保加利亞乳桿菌L6活菌數為4. 30X 108cfu/mL，其中ACE抑制肽抑制率為75. 53%。按質量份數計，將9份的蔗糖、0. 02份的牛磺酸、0. 002份的維生素E，0. 001份的煙酰胺，0. 001份的檸檬酸鋅，0. I份的果膠，0. 2份的羧甲基纖維素鈉用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌15min，然后加入40份的發酵羊奶、10份的濃縮橙汁、10份的濃縮蘋果汁，補加20. 676份的水，混合均勻，再在35°C、10Mpa條件下均質，即得到產品。實施例4基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)取0. 4g保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有IOmL滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養12h，完成第一次活化；取5%上述第一次活化的菌液，按上述操作方法進行第二次、第三次活化，共活化3次，即得到活化好的菌種。2)將IOOmL鮮羊奶過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40±3°C;將質量分數為20%的維生素C濃溶液過濾除菌后，取52 ii L加入上述鮮羊奶中并混合均勻；再接入6mL活化好的保加利亞乳桿菌L6，在38 °C恒溫厭氧發酵llh，凝乳破碎，用200目濾網過濾，得到發酵羊奶。所得發酵羊奶中保加利亞乳桿菌L6活菌數為4. 22X 108cfu/mL，其中ACE抑制肽抑制率為85. 45%。3)按質量份數計，將8份的蔗糖、0. 01份的牛磺酸、0. 002份的維生素E，0. 001份的煙酰胺，0. 001份的檸檬酸鋅，0. 2份的果膠，0. I份的羧甲基纖維素鈉用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌20min，然后加入40份的發酵羊奶和15份的濃縮橙汁，補加26. 686份的水，混合均勻，再在37 °C、IOMpa條件下均質，即得到產品。實施例5基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，包括以下步驟I)取0. 4g保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有IOmL滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C培養12h，完成第一次活化；取5%上述第一次活化的菌液，按上述操作方法進行第二次、第三次活化，共活化3次，即得到活化好的菌種。2)將IOOmL鮮羊奶過濾凈化后在90°C滅菌15min，冷卻至40±3°C;將質量分數為20%的維生素C濃溶液過濾除菌后，取21 u L加入上述鮮羊奶中并混合均勻；再接入5mL活化好的保加利亞乳桿菌L6，在40°C恒溫厭氧發酵10h，凝乳破碎，用200目濾網過濾，得到發酵羊奶。所得發酵羊奶中保加利亞乳桿菌L6活菌數為4. 07X 108cfu/mL，其中ACE抑制肽抑制率為78. 92%。3)按質量份數計，將9份的蔗糖、0. 02份的牛磺酸、0. 002份的維生素E，0. 001份的煙酰胺，0. 001份的檸檬酸鋅，0. 3份的羧甲基纖維素鈉用10份的水溶解，在65°C巴氏殺菌15min，然后加入40份的發酵羊奶、10份的濃縮橙汁、10份的濃縮蘋果汁，補加20. 676份 的水，混合均勻，再在35 °C、IOMpa條件下均質，即得到產品。所制備的發酵羊奶堅持長期飲用，可以有效地預防高血壓的發病，同時也可用于高血壓患者的輔助治療，可應用于制備預防高血壓或高血壓輔助治療的飲品中。
權利要求
1.一種基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 1)將保加利亞乳桿菌L6接種于羊奶或羊奶復原乳中，在30 40°C下恒溫厭氧發酵10 15h，得到發酵羊奶； 所述的羊奶或羊奶復原乳中還添加有質量濃度為0. 01 0. 09%的維生素C ； 2)按質量份數計，將35 50份的發酵羊奶與10 20份的濃縮果汁，5 10份的蔗糖，0. 01 0. 02份的牛磺酸，0. 001 0. 002份的維生素E，0. 001 0. 002份的煙酰胺，0.001 0. 002份的檸檬酸鋅，0. 15 I. 0份的穩定劑及28 50份的水混合均勻，在35 450C、10 20Mpa條件下均質，得到含ACE抑制肽的羊乳飲料。
2.如權利要求I所述的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的保加利亞乳桿菌L6在接種之前還進行以下活化 1)將保加利亞乳桿菌L6的凍干菌粉接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養10 14h,完成第一次活化； 2)按體積分數計，取3 7%第一次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養10 14h，完成第二次活化； 3)按體積分數計，取3 7%第二次活化的菌液，接種于裝有滅菌羊奶復原乳的厭氧管中，充分混勻后在37°C厭氧培養10 14h，完成第三次活化； 完成第三次活化后，按體積分數計，取3 7%第三次活化的菌液接種于含維生素C的羊奶或羊奶復原乳中。
3.如權利要求I所述的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的羊奶復原乳為羊奶粉與水以10 20 :100的質量比溶解于水中。
4.如權利要求I所述的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，其特征在于，所述的濃縮果汁為濃縮蘋果汁、濃縮橙汁中的一種或兩種。
5.如權利要求I所述的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，其特征在于，所述穩定劑為果膠、羧甲基纖維素鈉中的一種或兩種。
6.如權利要求I所述的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，其特征在于，所述發酵羊奶中保加利亞乳桿菌L6的活菌數大于108cfu/mL。
7.如權利要求I所述的基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，其特征在于，所述發酵羊奶中ACE抑制肽抑制率為65 85%。
8.權利要求I所述制備的含ACE抑制肽的羊乳飲料在制備預防高血壓或高血壓輔助治療的飲品中應用。
全文摘要
本發明公開了一種基于保加利亞乳桿菌發酵的含ACE抑制肽的羊乳飲料的制備方法，將保加利亞乳桿菌L6接種于含維生素C的羊奶或羊奶復原乳中，在30～40℃下恒溫厭氧發酵10～15h，得到發酵羊奶；將發酵羊奶與濃縮果汁、蔗糖、牛磺酸、維生素E、煙酰胺、檸檬酸鋅混合后均質，得到含ACE抑制肽的羊乳飲料。所制備的羊乳飲料既具有酸羊奶的營養價值和獨特風味，而且口感舒適，還含有抑制率較高的ACE抑制肽，不僅促進了羊奶資源的開發利用，對于高血壓的防治以及高血壓患者的營養保健也有積極作用。
文檔編號A23C9/13GK102948480SQ20121047079
公開日2013年3月6日 申請日期2012年11月19日 優先權日2012年11月19日
發明者陳合, 吉喆, 舒國偉 申請人:陜西科技大學