專利名稱：益生菌高濃度活性菌粉的生產方法
技術領域：
本發明涉及一種益生菌高濃度活性菌粉的生產方法，屬于生物技術領域，生產出來的益生菌菌粉常用于食品、藥品、保健品和動物飼料中。
背景技術：
益生菌(Probiotics) —詞來源于希臘語，意思是“對生命有益”，翻譯成中文即益生菌或益生素，又稱促生素、微生態制劑、活菌制劑等，是一類能夠促進宿主腸內微生物菌群的生態平衡，對宿主健康和生理功能產生有益作用的活性微生物，目前常用于食品、藥品、保健品和動物飼料中，起到改善腸道菌群結構、促進腸道中有益菌的增殖、抑制有害菌的生長，提高機體免疫力、抵御疾病、促進生長等作用。盡管益生菌對人體健康的有益作用人所共知，但是益生菌普遍抗逆性較差，在生產過程中容易失活，因此，如何將發酵后的活菌菌體成功地從發酵液中分離出來并保持其活性，成了決定益生菌實際應用效果的關鍵因素之一。目前采用的菌體分離方法主要有過濾分離、高速離心分離等。常規的過濾方法如板框壓濾因需要加入大量的硅藻土等助濾劑，難于提高活菌濃度，而膜分離等過濾方法，除成本高之外，由于益生菌發酵液粘度高、菌體小，過濾困難，容易堵塞，不易清洗，膜污染嚴重；高速離心設備投入成本高、能耗大，高速離心過程中容易導致細胞破裂，降低益生菌的活性。因此，目前的工藝條件下，很難生產出每克菌粉活菌含量在IO13以上的益生菌菌粉。

發明內容
為了有效解決上述問題，本發明提出了一種益生菌高濃度活性菌粉的生產方法，在益生菌液態發酵后的發酵液中，加入生物安全性高的酸性殼聚糖溶液作為生物沉降劑，將菌體得以自然沉降分離 ，沉降得到的菌體濃縮漿液經冷凍干燥得到具有高濃度活菌含量的益生菌菌粉。本發明的具體技術方案如下:
(O選取乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、明串球菌屬、丙酸桿菌屬、芽孢桿菌屬的益生菌或酵母菌類益生菌的菌種，進行液態發酵生產，獲得含有活菌的發酵液；
(2)將殼聚糖用1%乙酸溶液配制成的1.(Γ10.0 g/L殼聚糖溶液；
(3)在發酵液緩慢加入占總體積10%的上述殼聚糖溶液并攪拌5 30min ；
(4)靜置0.5飛h，將菌體充分沉降；
(5)吸去上層清液或放出下層菌泥，得到菌體濃縮漿液；
(6)菌體濃縮漿液經真空冷凍干燥得到高濃度活性菌粉。本發明由于采用的生物沉降劑生物毒性低、用量小，因而分離過程中對對益生菌傷害小且稀釋度低，生產出的益生菌菌粉具有很高的活菌含量，每克菌粉中的活菌數量可以達到IO13數量級，且操作簡便，成本低，污染小，具有很高的應用價值。
具體實施例方式將通過如下的實施例來對本發明進行進一步的闡述:
選取I株枯草芽孢桿菌菌種，活化后通過3級發酵，在發酵生產罐中得到約600 L含有活菌的發酵液；將殼聚糖用1%乙酸溶液配制成的3.0 g/L殼聚糖溶液，往發酵液中緩慢加入約66 L的殼聚糖溶液，100 r/min攪拌15 min，靜置3 h，將菌體充分沉降；打開生產罐底部閥門，緩慢放出 沉降下來的下層菌泥，將得到的菌體濃縮漿液在-6(T-7(TC溫度下、抽真空4 5Pa、冷凍干燥24 h，得到約I kg的高濃度活性菌粉，經活菌計數芽孢桿菌含量為2.6X1013f/g。
權利要求
1.一種益生菌高濃度活性菌粉的生產方法，在益生菌液態發酵后的發酵液中，加入生物安全性高的酸性殼聚糖溶液作為生物沉降劑，將菌體得以自然沉降分離，沉降得到的菌體濃縮漿液經冷凍干燥后得到具有高濃度活菌含量的益生菌菌粉。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述的益生菌包括乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、明串球菌屬、丙酸桿菌屬、芽孢桿菌屬的益生菌以及酵母菌。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于:所述的生物沉降劑指的是酸性殼聚糖溶液，即用1%乙酸溶液配制成的1.(Γιο.0 g/L殼聚糖溶液，在發酵液中的加入量為占加入后總體積10%的體 積含量。
全文摘要
本發明涉及一種益生菌高濃度活性菌粉的生產方法，在益生菌液態發酵后的發酵液中，加入生物安全性高的酸性殼聚糖溶液作為生物沉降劑，將菌體得以自然沉降分離，沉降得到的菌體濃縮漿液經冷凍干燥得到具有高濃度活菌含量的益生菌菌粉。由于采用的生物沉降劑生物毒性低、用量小，因而分離過程中對益生菌傷害小且稀釋度低，生產出的益生菌菌粉具有很高的活菌含量，每克菌粉中的活菌數量可以達到1013數量級，且操作簡便，成本低，污染小，具有很高的應用價值。
文檔編號C12R1/01GK103194406SQ20131008361
公開日2013年7月10日 申請日期2013年3月17日 優先權日2013年3月17日
發明者袁書林, 郭小華 申請人:袁書林