納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法
【專利摘要】本發明涉及一種納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，將菜籽粕微粉碎后，分別用納豆菌發酵處理和用蛋白酶水解處理，最后噴霧干燥得菜籽粉。本發明利用納豆菌發酵聯合蛋白酶法水解制備的營養菜籽粉富含納豆激酶和多肽，使菜籽餅的附加值產品大幅度提高；該菜籽粉可以常規方法制備成膠囊、片劑和顆粒劑，可作為保健食品，在輔助溶解血栓、降血脂和保護肝損傷等方面具有明顯效果。
【專利說明】納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于食品加工領域，涉及ー種納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法。
【背景技術】
[0002]油菜是重要的油料作物之一，我國油菜產量居世界第一位。一般情況下，油菜籽經加工可得約3506菜籽油和65%左右菜籽柏。菜籽柏中富含粗蛋白質，粗脂肪，卵磷脂，多種維生素，氨基酸等，其蛋白質中可消化蛋白質含量可達27.8%。此外，菜籽柏中還含有較高膽堿，生物素，葉酸，煙酸及硫氨素，核黃素等B族維生素和Ca、P、Fe、Se、Cu、Zn、Mn等多種微量元素。菜籽柏的粗蛋白質含量一般在35%-45%，為優質的全價植物蛋白，對其進行開發利用具有重要的經濟意義與社會意義。但是，目前我國對菜籽柏的利用相當有限，僅用作肥料或按少量比例添加到反芻動物和淡水魚類的養殖飼料中，這造成了一定的資源浪費。
[0003]多肽具有良好的持水力，凝膠性，表面活性等物理功能特性及抗氧化、降血脂、調節免疫力等多種生理功能；納豆菌發酵可產生大量的納豆激酶，具有稀血液、溶血栓、痩身美容等功效，菜籽餅營養豐富，目前還未應用于納豆菌發酵，菜籽柏富含蛋白質，利用納豆菌發酵聯合蛋白酶法水解制備的營養菜籽粉富含納豆激酶、多肽等營養成分，使菜籽餅的附加值產品大幅度提高，具有顯著的社會意義和經濟意義。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供一種納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，解決目前菜籽柏中的粗蛋白質不能得到充分利用的問題。
[0005]本發明通過以下技術方案來實現:
納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，該方法包括以下步驟:
(1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網；
(2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量3-6倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g，于110-121°C條件下蒸煮30min,冷卻備用；
(3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養1_5天；此步驟中土豆液體培養基指的是PDA液體培養基，為現有技術，不做其他嚴格限制；
(4)復合酶酶解:發酵結束后，加入去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整pH至
6.0-8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為30-45°C條件下，酶解 0.5-6h ；
(5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養粉，噴霧干燥エ藝參數為:進風溫度>150°C，出風溫度く 100°C。
[0006]本發明的エ藝方法，步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉的4-5倍，蒸煮溫度為115-120°C。
[0007]本發明的エ藝方法，步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉的4.5倍，蒸煮溫度為118°C。
[0008]本發明的エ藝方法，步驟(3)中培養時間為2-4天。
[0009]本發明的エ藝方法，步驟(3)中培養時間為3天。
[0010]本發明的エ藝方法，步驟(4)中pH調整至6.5-7.5，酶解溫度為35_40°C，酶解時間為l-5h。
[0011]本發明的エ藝方法，步驟(4)中pH調整至7.0，酶解溫度為38°C，酶解時間為3h。
[0012]本發明的エ藝方法，步驟(5)中進風溫度為160_180°C，出風溫度為60_80°C。
[0013]本發明的エ藝方法，步驟(5)中進風溫度為180°C，出風溫度為60°C。
[0014]作為本發明的最佳實施方式，納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，該方法包括以下步驟:
(1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網；
(2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量4.5倍的去離子水，加入淀粉酶lOu/g，于118°C條件下蒸煮30min,冷卻備用；
(3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養3天；
(4)復合酶酶解:發酵結束后，加入去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整pH至7.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h ；
(5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養粉，噴霧干燥エ藝參數為:進風溫度180°C，出風溫度60°C。
[0015]采用上述技術方案的積極效果:本發明利用納豆菌發酵聯合蛋白酶法水解制備的營養菜籽粉富含納豆激酶和多肽，エ藝合理、營養豐富、質細、溶解性好、保存期長，使菜籽餅的附加值產品大幅度提高；該菜籽粉可以常規方法制備成膠囊、片劑和顆粒劑，可作為保健食品，在輔助溶解血栓、降血脂和保護肝損傷等方面具有明顯效果，具有顯著的社會意義和經濟意義。
【具體實施方式】
[0016]下面結合實施例對本發明的技術方案做進ー步的說明，但不應理解為對本發明的限制:
本發明中生物材料的來源:
1、納豆菌CICC N0.10459購于中國エ業微生物菌種保藏中心。
[0017]實施例1
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網；加入物料重量4倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于115°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉速為160rpm條件下發酵3天，發酵結束后，加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整pH至8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為45°C條件下，酶解2h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數為進風溫度170°C，出風溫度90°C，得營養粉。
[0018]實施例2 稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網；加入物料重量5倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于120°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉速為160rpm條件下發酵5天，發酵結束后，加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整pH至8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為45°C條件下，酶解0.5h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數為進風溫度155°C，出風溫度70°C，得營養粉。
[0019]實施例3
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網；加入物料重量4倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于115°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉速為160rpm條件下發酵4天，發酵結束后，加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整PH至7.5，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為40°C條件下，酶解Ih ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數為進風溫度160°C，出風溫度80°C，得營養粉。
[0020]實施例4
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網；加入物料重量4.5倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于118°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉速為160rpm條件下發酵3天，發酵結束后，加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整PH至7.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數為進風溫度180°C，出風溫度60°C，得營養粉。
[0021]實施例5
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網；加入物料重量6倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于121°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉速為160rpm條件下發酵I天，發酵結束后，加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整PH至6.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為30°C條件下，酶解6h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數為進風溫度155°C，出風溫度80°C，得營養粉。
[0022]實施例6
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網；加入物料重量3倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于110°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉速為160rpm條件下發酵2天，發酵結束后，加入一定量的去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整PH至6.5，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為35°C條件下，酶解5h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數為進風溫度170°C，出風溫度70°C，得營養粉。
[0023]對比例
中國專利CN101610689A制備高蛋白菜籽粉，粉細度為32-60目，蛋白質達到40%，主要應用于飼料和肥料，目前還未見利用菜籽柏制備營養粉作為ー種食品原料出售。
[0024]實施例3中所制得的菜籽多肽營養粉，采用雙縮脲法檢測營養粉中多肽的含量，多肽的轉化率為87.2%。[0025]轉化率的檢測方法:游離氨基酸采用甲醛滴定法；蛋白質采用凱氏定氮法。多肽采用雙縮脲法檢測。
[0026]多肽轉化率計算公式:轉化率=(T2-T1) / (P1-P2)。
[0027]式中:T2為酶解后多肽含量；T1為酶解前多肽含量；P1為酶解前總蛋白含量；P2為酶解前酸溶性蛋白含量。
[0028]本發明生產得到的營養多肽粉的技術指標如表1:
表I菜籽多肽營養粉技術指標
【權利要求】
1.一種納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網； (2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量3-6倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g，于110-121°C條件下蒸煮30min,冷卻備用； (3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養1_5天； (4)復合酶酶解:發酵結束后，加入去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整pH至6.0-8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為30-45°C條件下，酶解 0.5-6h ； (5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養粉，噴霧干燥エ藝參數為:進風溫度>150°C，出風溫度く 100°C。
2.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉重量的4-5倍，蒸煮溫度為115-120°C。
3.根據權利要求2所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉重量的4.5倍，蒸煮溫度為118°C。
4.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(3)中培養時間為2-4天。
5.根據權利要求4所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(3)中培養時間為3天。
6.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(4)中pH調整至6.5-7.5，酶解溫度為35-40°C，酶解時間為l_5h。
7.根據權利要求6所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(4)中pH調整至7.0，酶解溫度為38°C，酶解時間為3h。
8.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(5)中進風溫度為160-180°C，出風溫度為60-80°C。
9.根據權利要求8所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(5)中進風溫度為180°C，出風溫度為60°C。
10.根據權利要求1所述的納豆菌發酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網； (2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量4.5倍的去離子水，加入淀粉酶lOu/g，于118°C條件下蒸煮30min,冷卻備用； (3)納豆菌發酵:納豆菌采用土豆液體培養基擴大培養24h，將擴大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉速為160rpm條件下培養3天； (4)復合酶酶解:發酵結束后，加入去離子水，使發酵液中料液比達到1:10，調整pH至7.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h ； (5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養粉，噴霧干燥エ藝參數為:進風溫度180°C，出風溫度60°C。
【文檔編號】A23J3/14GK103431154SQ201310405557
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年9月9日 優先權日:2013年9月9日
【發明者】莊義慶, 吳琴燕, 楊敬輝 申請人:江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所