本發明涉及酵素粉制備領域，尤其涉及一種枸杞酵素的制備方法。

背景技術：

酵素是日本和臺灣地區的說法，通常稱作“酶”，其是催化特定化學反應的蛋白質、rna或其復合體，也有專家認為酵素是由多種氨基酸、維生素及礦物質構成的活性物質，被稱為“活性的物質”和“掌握所有生命活動的物質”。眾所周知，營養素必須在酵素的作用下分解到15μm左右的小分子，才能穿過腸壁上皮細胞，被毛細血管吸收，在口腔有淀粉酵素，胃里有胃蛋白酶，肝臟則分泌脂肪酵素，而脾臟則分泌各種綜合酵素，這些酵素通過對營養素的分解促進其吸收，從而達到全面調理的綜合作用。由此可知，酵素的作用至關重要。

傳統酵素生產采用微生物自然發酵，發酵過程不可控，極易受到有害微生物污染，所得產品不但質量不穩定，還容易存在質量安全隱患，并且發酵周期較長，至少數月至一年。發酵周期過長，效率低，成本高。

技術實現要素：

本發明所要解決的技術問題是提供一種成本低廉、周期短的枸杞酵素的制備方法。

為解決上述問題，本發明所述的一種枸杞酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將枸杞鮮果榨汁，在果汁中按1：1的重量比加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱25~30分鐘，經自然冷卻至室溫，得到枸杞原液；

⑵在所述枸杞原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于50~60℃酶解3~4小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于40~50℃酶解2~4小時，得到酶解液；

⑶所述酶解液中按其重量依次接種1~2%酵母菌、8~10%乳酸鏈球菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養1~3天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到枸杞酵素液；

⑷所述枸杞酵素液經冷凍干燥、粉碎至500~1000目后，按每l所述枸杞酵素液添加10mg聚賴氨酸，即得枸杞酵素粉。

所述步驟⑵中果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸所述枸杞原液中加入12~15g。

所述果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.5~1的重量比混合而成。

所述步驟⑵中果膠酶是指聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合。

所述步驟⑵中蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量均按每噸所述枸杞原液中加入14~15g；所述蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶是指將蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶按1：1：1的重量比混合而成。

所述步驟⑶中酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。

所述步驟⑷中冷凍干燥的條件是指溫度為-40℃~-80℃，真空度為10~40pa。

本發明與現有技術相比具有以下優點：

1、本發明采用純種混合發酵技術，克服傳統酵素制備過程采用天然微生物發酵導致的酶活力低，易受有害菌污染，質量安全不可控，制備周期長的缺點。

2、本發明采用可大量分泌乳酸鏈球菌素的益生菌——乳酸鏈球菌作為發酵菌株，使得所得酵素既具有益生菌活性，高酶活力，且該菌株生長過程分泌的乳酸鏈球菌素可作為天然生物防腐劑殺滅有害微生物，結合營養補充劑兼天然防腐劑——聚賴氨酸，替代了傳統化學防腐劑的使用。

3、本發明所得產品營養價值更高，且無化學防腐劑，更天然健康安全。

4、將實施例1~3的枸杞酵素分別按照gb/t23527-2009蛋白酶制劑中蛋白酶測定方法；gb/t24401-2009a-淀粉酶制劑中淀粉酶測定方法；gb/t23535-2009脂肪酶制劑中脂肪酶的測定方法和gb/t5009.171-2003保健食品中超氧化物歧化酶(sod)活性的測定方法分別測量蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及sod活性，取枸杞原液作為對比例。結果如表1所示：

表1

結果顯示，本發明的枸杞酵素包含豐富的生物酶活性成分，較枸杞果汁具有顯著提高，取得了顯著的技術效果，是一種非常優異的保健產品。

具體實施方式

實施例1一種枸杞酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將枸杞鮮果榨汁，在果汁中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱25分鐘，經自然冷卻至室溫，得到枸杞原液。

⑵在枸杞原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于50℃酶解3小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于40℃酶解2小時，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸枸杞原液中加入12g。果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.5的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶是指聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量均按每噸枸杞原液中加入14g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶是指將蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶按1：1：1的重量比混合而成。

⑶酶解液中按其重量依次接種1%酵母菌、8%乳酸鏈球菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養1天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到枸杞酵素液。

其中：酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。

⑷枸杞酵素液在溫度為-40℃、真空度為10pa的條件下經冷凍干燥、粉碎至500目后，按每l枸杞酵素液添加10mg聚賴氨酸，即得枸杞酵素粉。

實施例2一種枸杞酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將枸杞鮮果榨汁，在果汁中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱30分鐘，經自然冷卻至室溫，得到枸杞原液。

⑵在枸杞原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于60℃酶解4小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于50℃酶解4小時，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸枸杞原液中加入15g。果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：1的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶同實施例1。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量均按每噸枸杞原液中加入15g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶同實施例1。

⑶酶解液中按其重量依次接種2%酵母菌、10%乳酸鏈球菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養3天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到枸杞酵素液。

其中：酵母菌同實施例1。

⑷枸杞酵素液在溫度為-80℃、真空度為40pa的條件下經冷凍干燥、粉碎至1000目后，按每l枸杞酵素液添加10mg聚賴氨酸，即得枸杞酵素粉。

實施例3一種枸杞酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將枸杞鮮果榨汁，在果汁中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱28分鐘，經自然冷卻至室溫，得到枸杞原液。

⑵在枸杞原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于55℃酶解3.5小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于45℃酶解3小時，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸枸杞原液中加入13g。果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.8的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶同實施例1。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量均按每噸枸杞原液中加入14.5g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶同實施例1。

⑶酶解液中按其重量依次接種1.5%酵母菌、9%乳酸鏈球菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養2天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到枸杞酵素液。

其中：酵母菌同實施例1。

⑷枸杞酵素液在溫度為-60℃、真空度為25pa的條件下經冷凍干燥、粉碎至800目后，按每l枸杞酵素液添加10mg聚賴氨酸，即得枸杞酵素粉。