本發(fā)明屬于飼料添加劑
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：隨著人們生活水平的不斷提高，人們鑄件認(rèn)識到抗生素長期添加到飼料中可通過食物鏈對人類的健康造成嚴(yán)重危害，而益生菌是一類對宿主有益的活性微生物，是定植于人體腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)，能產(chǎn)生確切健康功效從而改善宿主微生態(tài)平衡、發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱，目前世界上研究的功能最強大的產(chǎn)品主要是以上各類微生物組成的復(fù)合活性益生菌，其廣泛應(yīng)用于生物工程、工農(nóng)業(yè)、食品安全以及生命健康領(lǐng)域，從禽畜養(yǎng)殖方面來說，對復(fù)合益生菌制劑的研究克服了長期使用抗生素的給養(yǎng)殖業(yè)造成的種種弊端，對發(fā)展綠色飼料添加劑具有廣闊的運用前景。目前在益生菌對禽畜作用的方面取得一定的成效，如申請?zhí)朿n201610995509.3《一種牛用復(fù)合型合生元微生態(tài)制劑及其制備方法》公開了一種牛用復(fù)合型合生元微生態(tài)制劑及其制備方法，由益生菌和益生元組成；益生菌∶益生元質(zhì)量比＝1∶1～5的比例混合；益生菌由乳桿菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和鼠李糖乳桿菌組成；益生元由低聚糖和酸化劑組成；低聚糖為寡甘露糖、果寡糖、低聚異麥芽糖以及木寡糖，酸化劑由乳酸、檸檬酸、延胡索酸組成的復(fù)合酸化劑；如申請?zhí)朿n201210144064.x《一種奶牛用益生菌混合制劑制備方法》公開了益生菌混合制劑的制備方法：將白地霉、扣囊擬內(nèi)孢霉、嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和雙歧桿菌菌種分別接種到各自的種子培養(yǎng)基中，在28-32℃、通風(fēng)條件下培養(yǎng)16-20小時，將培養(yǎng)成熟的種子分別接種到由玉米糖化液制備的發(fā)酵培養(yǎng)基中，其接種量為10％，在32±1℃、通風(fēng)條件下發(fā)酵24-48小時，將培養(yǎng)成熟的種子接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中，其接種量為每種菌種各10％，在45±1℃、通風(fēng)條件下發(fā)酵48-56小時，即得到干燥的益生菌菌劑，而6月齡犢牛耐低溫性能差、消化功能不完善、生長迅速、缺乏先天免疫力，身體各器官處于發(fā)育階段，胃腸功能還未發(fā)育完全，消化器官的發(fā)育主要表現(xiàn)為內(nèi)臟器官中微生物菌群、腸道容積和表面積的增加、各種消化酶發(fā)育演變以及各種代謝特征的變化，這些變化必將導(dǎo)致生長犢牛對食入飼糧中的各營養(yǎng)成分的消化率產(chǎn)生影響，因此，將益生菌制劑運用到犢牛的上是有著積極意義的。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題，提供了一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑及其制備方法。具體是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑，包括以下按重量份計的原料：植物乳桿菌12～18、乳酸場球菌6～9、嗜酸乳桿菌20～30、嗜熱鏈球菌10～20、中藥劑15～25、培養(yǎng)基10～20。包括以下按重量份計的原料：植物乳桿菌15、乳酸場球菌8、嗜酸乳桿菌25、嗜熱鏈球菌15、中藥劑20、培養(yǎng)基15。所述的中藥劑，由以下按重量份計的原料組成：槐花8～12、生地黃15～20、薏米12～18、蓮子10～20、杜仲6～9、白術(shù)8～12、茯苓12～18、川穹2～4、淮山1～3、谷芽8～12、麥冬5～8。所述的培養(yǎng)基，由以下按重量份計的原料組成：大豆蛋白胨8～12、葡萄糖15～25、檸檬酸二銨0～4、瓊脂0～20、礦物質(zhì)0.18～0.25、去離子水800～1200。所述的礦物質(zhì)，由以下按重量份計的原料組成：氯化鈉1～3、磷酸氫二鉀0～2、硫酸鎂0.08～0.12、硫酸錳0.03～0.06、硫酸亞鐵0.01～0.03。所述的6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)菌株培養(yǎng)：采集牛的養(yǎng)殖場內(nèi)的土壤、鋪墊物、食槽內(nèi)殘渣，與生理鹽水按1∶10的質(zhì)量比混合稀釋，將稀釋液涂覆在培養(yǎng)基上，培養(yǎng)；(2)菌株分離、篩選：將培養(yǎng)基上的菌落按照平板劃線分離法進行分離，對分離的菌株進行抗病毒、耐酸、耐膽鹽的特性篩選，得復(fù)合益生菌；(3)制備中藥劑：將中藥劑包括的原料按比例稱取混合，加水，煎煮50～60min后，過濾，加入濾液質(zhì)量5倍量的乙醇，浸提6～8h，回收乙醇，將殘余液濃縮，即得中藥劑；(4)將復(fù)合益生菌和中藥劑按比例混合，拌勻，即得復(fù)合益生菌制劑。所述的培養(yǎng)，其培養(yǎng)溫度為35～38℃，培養(yǎng)時間為6～8h，ph值為6.5～7。所述的乙醇，其濃度≥65％。所述的6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑，使用時，將本發(fā)明制劑和犢牛飼料按0.2～0.3％∶1的質(zhì)量比混合后，對犢牛進行喂食。所述的抗病毒、耐酸、耐膽鹽的特性篩選，參照(《兩株耐酸耐膽鹽人腸源菌株的鑒定及系統(tǒng)發(fā)育分析》，汪川，張朝武，陳會超，余倩，裴曉方，劉衡川，四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2008-03-15)以及(《耐酸耐膽鹽乳酸菌的鑒定及篩選》，李利，孔麗，張寧，趙偉超，肖亦農(nóng)，李炳學(xué)，韓曉日，食品科學(xué)，2015-04-08)進行特性篩選。綜上所述，本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明的復(fù)合益生菌制劑是由復(fù)合益生菌和中藥劑組合制成，能顯著增強犢牛的免疫抵抗性，調(diào)節(jié)腸胃功能，有效的降低了犢牛的腹瀉發(fā)病率和發(fā)燒率，保證了犢牛的正常生長，顯著提高了犢牛的日增重，避免單獨使用益生菌和單獨使用中藥產(chǎn)品的缺點，通過中藥和益生菌之間相輔相成，同時也通過中藥的有益成分促進益生菌的生長，二者之間沒有抑制拮抗的作用，結(jié)合二者的功效制備的復(fù)合制劑，能顯著提高犢牛的采食量，提高飼料消化率，提高犢牛的特異性免疫和非特異性免疫水平，促進胃腸消化功能的完善，克服了禽畜養(yǎng)殖業(yè)長期使用抗生素的給養(yǎng)殖業(yè)造成的種種弊端，對發(fā)展綠色飼料添加劑具有廣闊的運用前景。具體實施方式下面對本發(fā)明的具體實施方式作進一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施方式，任何在本實施例基本精神上的改進或代替，仍屬于本發(fā)明權(quán)利要求所要求保護的范圍。實施例1一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑，包括以下按重量份計的原料：植物乳桿菌12kg、乳酸場球菌6kg、嗜酸乳桿菌20kg、嗜熱鏈球菌10kg、中藥劑15kg、培養(yǎng)基10kg。所述的中藥劑，由以下按重量份計的原料組成：槐花8kg、生地黃15kg、薏米12kg、蓮子10kg、杜仲6kg、白術(shù)8kg、茯苓12kg、川穹2kg、淮山1kg、谷芽8kg、麥冬5kg。所述的培養(yǎng)基，由以下按重量份計的原料組成：大豆蛋白胨8kg、葡萄糖15kg、礦物質(zhì)0.18kg、去離子水800kg。所述的礦物質(zhì)，由以下按重量份計的原料組成：氯化鈉1kg、硫酸鎂0.08kg、硫酸錳0.03kg、硫酸亞鐵0.01kg。所述的6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)菌株培養(yǎng)：采集牛的養(yǎng)殖場內(nèi)的土壤、鋪墊物、食槽內(nèi)殘渣，與生理鹽水按1∶10的質(zhì)量比混合稀釋，將稀釋液涂覆在培養(yǎng)基上，在溫度為35℃，ph值為6.5的環(huán)境下培養(yǎng)6h；(2)菌株分離、篩選：將培養(yǎng)基上的菌落按照平板劃線分離法進行分離，對分離的菌株進行抗病毒、耐酸、耐膽鹽的特性篩選，得復(fù)合益生菌；(3)制備中藥劑：將中藥劑包括的原料按比例稱取混合，加水，煎煮50min后，過濾，加入濾液質(zhì)量5倍量的濃度≥65％的乙醇，浸提6～8h，回收乙醇，將殘余液濃縮，即得中藥劑；(4)將復(fù)合益生菌和中藥劑按比例混合，拌勻，即得復(fù)合益生菌制劑。實施例2一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑，包括以下按重量份計的原料：植物乳桿菌18、乳酸場球菌9、嗜酸乳桿菌30、嗜熱鏈球菌20、中藥劑25、培養(yǎng)基20。所述的中藥劑，由以下按重量份計的原料組成：槐花12kg、生地黃20kg、薏米18kg、蓮子20kg、杜仲9kg、白術(shù)12kg、茯苓18kg、川穹4kg、淮山3kg、谷芽12kg、麥冬8kg。所述的培養(yǎng)基，由以下按重量份計的原料組成：大豆蛋白胨12kg、葡萄糖25kg、檸檬酸二銨4kg、瓊脂20kg、礦物質(zhì)0.25kg、去離子水1200kg。所述的礦物質(zhì)，由以下按重量份計的原料組成：氯化鈉3kg、磷酸氫二鉀2kg、硫酸鎂0.12kg、硫酸錳0.06kg、硫酸亞鐵0.03kg。所述的6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)菌株培養(yǎng)：采集牛的養(yǎng)殖場內(nèi)的土壤、鋪墊物、食槽內(nèi)殘渣，與生理鹽水按1∶10的質(zhì)量比混合稀釋，將稀釋液涂覆在培養(yǎng)基上，在溫度為38℃，ph值為7的環(huán)境下培養(yǎng)6～8h；(2)菌株分離、篩選：將培養(yǎng)基上的菌落按照平板劃線分離法進行分離，對分離的菌株進行抗病毒、耐酸、耐膽鹽的特性篩選，得復(fù)合益生菌；(3)制備中藥劑：將中藥劑包括的原料按比例稱取混合，加水，煎煮60min后，過濾，加入濾液質(zhì)量5倍量的濃度≥65％的乙醇，浸提8h，回收乙醇，將殘余液濃縮，即得中藥劑；(4)將復(fù)合益生菌和中藥劑按比例混合，拌勻，即得復(fù)合益生菌制劑。實施例3一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑，包括以下按重量份計的原料：植物乳桿菌15kg、乳酸場球菌8kg、嗜酸乳桿菌25kg、嗜熱鏈球菌15kg、中藥劑20kg、培養(yǎng)基15kg。所述的中藥劑，由以下按重量份計的原料組成：槐花10kg、生地黃18kg、薏米15kg、蓮子15kg、杜仲8kg、白術(shù)10kg、茯苓15kg、川穹3kg、淮山2kg、谷芽10kg、麥冬7kg。所述的培養(yǎng)基，由以下按重量份計的原料組成：大豆蛋白胨10kg、葡萄糖20kg、檸檬酸二銨2kg、瓊脂10kg、礦物質(zhì)0.2kg、去離子水1000kg。所述的礦物質(zhì)，由以下按重量份計的原料組成：氯化鈉2kg、磷酸氫二鉀1kg、硫酸鎂0.1kg、硫酸錳0.05kg、硫酸亞鐵0.02kg。所述的6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)菌株培養(yǎng)：采集牛的養(yǎng)殖場內(nèi)的土壤、鋪墊物、食槽內(nèi)殘渣，與生理鹽水按1∶10的質(zhì)量比混合稀釋，將稀釋液涂覆在培養(yǎng)基上，在溫度為37℃，ph值為6.8的環(huán)境下培養(yǎng)7h；(2)菌株分離、篩選：將培養(yǎng)基上的菌落按照平板劃線分離法進行分離，對分離的菌株進行抗病毒、耐酸、耐膽鹽的特性篩選，得復(fù)合益生菌；(3)制備中藥劑：將中藥劑包括的原料按比例稱取混合，加水，煎煮55min后，過濾，加入濾液質(zhì)量5倍量的濃度≥65％的乙醇，浸提7h，回收乙醇，將殘余液濃縮，即得中藥劑；(4)將復(fù)合益生菌和中藥劑按比例混合，拌勻，即得復(fù)合益生菌制劑。實施例4一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑，包括以下按重量份計的原料：植物乳桿菌12kg、乳酸場球菌9kg、嗜酸乳桿菌20kg、嗜熱鏈球菌20kg、中藥劑15kg、培養(yǎng)基10kg。所述的中藥劑，由以下按重量份計的原料組成：槐花8kg、生地黃20kg、薏米12kg、蓮子20kg、杜仲6kg、白術(shù)12kg、茯苓12kg、川穹4kg、淮山1kg、谷芽12kg、麥冬5kg。所述的培養(yǎng)基，由以下按重量份計的原料組成：大豆蛋白胨8kg、葡萄糖25kg、瓊脂20kg、礦物質(zhì)0.18kg、去離子水1200kg。所述的礦物質(zhì)，由以下按重量份計的原料組成：氯化鈉1kg、磷酸氫二鉀2kg、硫酸鎂0.08kg、硫酸錳0.06kg、硫酸亞鐵0.01kg。所述的6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)菌株培養(yǎng)：采集牛的養(yǎng)殖場內(nèi)的土壤、鋪墊物、食槽內(nèi)殘渣，與生理鹽水按1∶10的質(zhì)量比混合稀釋，將稀釋液涂覆在培養(yǎng)基上，在溫度為35℃，ph值為6.5的環(huán)境下培養(yǎng)8h；(2)菌株分離、篩選：將培養(yǎng)基上的菌落按照平板劃線分離法進行分離，對分離的菌株進行抗病毒、耐酸、耐膽鹽的特性篩選，得復(fù)合益生菌；(3)制備中藥劑：將中藥劑包括的原料按比例稱取混合，加水，煎煮50min后，過濾，加入濾液質(zhì)量5倍量的濃度≥65％的乙醇，浸提8h，回收乙醇，將殘余液濃縮，即得中藥劑；(4)將復(fù)合益生菌和中藥劑按比例混合，拌勻，即得復(fù)合益生菌制劑。實施例5一種6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑，包括以下按重量份計的原料：植物乳桿菌12～18、乳酸場球菌6～9、嗜酸乳桿菌20～30、嗜熱鏈球菌10～20、中藥劑15～25、培養(yǎng)基10～20。所述的中藥劑，由以下按重量份計的原料組成：槐花8kg、生地黃20kg、薏米12kg、蓮子20kg、杜仲6kg、白術(shù)12kg、茯苓12kg、川穹4kg、淮山1kg、谷芽12kg、麥冬8kg。所述的培養(yǎng)基，由以下按重量份計的原料組成：大豆蛋白胨8kg、葡萄糖15kg、檸檬酸二銨4kg、礦物質(zhì)0.25kg、去離子水800kg。所述的礦物質(zhì)，由以下按重量份計的原料組成：氯化鈉1kg、磷酸氫二鉀2kg、硫酸鎂0.12kg、硫酸錳0.03kg、硫酸亞鐵0.03kg。所述的6月齡犢牛用復(fù)合益生菌制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)菌株培養(yǎng)：采集牛的養(yǎng)殖場內(nèi)的土壤、鋪墊物、食槽內(nèi)殘渣，與生理鹽水按1∶10的質(zhì)量比混合稀釋，將稀釋液涂覆在培養(yǎng)基上，在溫度為35℃，ph值為6.5的環(huán)境下培養(yǎng)8h；(2)菌株分離、篩選：將培養(yǎng)基上的菌落按照平板劃線分離法進行分離，對分離的菌株進行抗病毒、耐酸、耐膽鹽的特性篩選，得復(fù)合益生菌；(3)制備中藥劑：將中藥劑包括的原料按比例稱取混合，加水，煎煮60min后，過濾，加入濾液質(zhì)量5倍量的濃度≥65％的乙醇，浸提6h，回收乙醇，將殘余液濃縮，即得中藥劑；(4)將復(fù)合益生菌和中藥劑按比例混合，拌勻，即得復(fù)合益生菌制劑。實驗例隨機選取身體健康、活動能立強的6月齡的犢牛，隨機分為3組，采用日常管理方式進行喂養(yǎng)，且均由同一人進行喂養(yǎng)，不同之處在于，第一組在犢牛飼料中添加本實施例1～5制備的任一復(fù)合益生菌制劑，添加量是將本實施例1～5制備的任一制劑和犢牛飼料按0.2～0.3％：1的質(zhì)量比混合后，對犢牛進行喂食，第二組在犢牛飼料中添加本實施例1～5制備的任一復(fù)合益生菌，添加量是將本實施例1～5制備的任一復(fù)合益生菌和犢牛飼料按0.2～0.3％：1的質(zhì)量比混合后，對犢牛進行喂食，第三組在犢牛飼料中添加本實施例1～5制備的任一中藥劑，添加量是將本實施例1～5制備的任一中藥劑和犢牛飼料按0.2～0.3％：1的質(zhì)量比混合后，對犢牛進行喂食，實驗時間為3個月，分別對三組不同喂養(yǎng)情況下犢牛的生長情況進行統(tǒng)計，結(jié)果如表1所示：表1項目第一組第二組第三組腹瀉發(fā)病率％1.561.862.12發(fā)燒發(fā)病率％0.691.121.47平均日增重kg0.95±0.080.87±0.120.73±0.03由表1可知，本發(fā)明制備的復(fù)合益生菌制劑，能顯著增強犢牛的免疫抵抗性，調(diào)節(jié)腸胃功能，有效的降低了犢牛的腹瀉發(fā)病率和發(fā)燒率，保證了犢牛的正常生長，顯著提高了犢牛的日增重，本發(fā)明的復(fù)合益生菌制劑是由復(fù)合益生菌和中藥劑組合制成，其中復(fù)合益生菌和中藥劑單獨使用時都能對犢牛的生長具有明顯的促進作用，也能提高犢牛的特異性和非特異性免疫，降低疾病的發(fā)病率，本發(fā)明將二者共同作用于犢牛時，其對犢牛的促進生長的作用以及對犢牛的免疫增強作用明顯優(yōu)于二者單獨使用的時候。當(dāng)前第1頁12