專利名稱：欖香烯脂質體及其制備方法
技術領域：
本發明屬于醫藥技術領域，確切地說它是脂溶性藥物欖香烯脂質體及其制備方法。
背景技術：
欖香烯是從中藥或某些植物中提取得到的倍半萜烯類混合物，拉丁名為elemenum，英文名為elemene。欖香烯為以β-欖香烯為主和含有少量其他倍半萜烯(α-欖香烯、γ-欖香烯、δ-欖香烯)的混合物。β-欖香烯的化學結構為1-甲基-1-乙烯基-2，4-二異丙烯基環己烷，分子式為C15H24，有揮發性，脂溶性強。欖香烯在臨床上用于治療癌性胸、腹水，肝癌、宮頸癌、腦瘤、肺癌、食道癌等多種癌癥。其在殺傷癌細胞的時候，并不對正常細胞造成傷害。大量臨床研究表明，其治療癌性胸腹水時，效果顯著優于順鉑。藥理研究表明，欖香烯具有改善微循環、升高白細胞水平、提高機體免疫力的作用。欖香烯是一個非常有應用前景的抗癌藥物。
欖香烯可以從溫郁金(Curcuma Wenyujin Y.H.Chen et C.Ling，也叫溫莪術)、香茅(Cymbopoqon Citratus(DC.)Stapt)、人參、白術、莪術、廣藿香、沒藥、丁香、毛蒼術、蛇床子、防風、天女木蘭等60余種中藥和植物中提取得到。其中溫郁金、香茅在我國資源充足，價廉易得。
近年來，天然藥物的抗癌活性研究已經越來越受到重視。在1977年，莪術油作為抗癌藥物就已經被載入中華人民共和國藥典。1983年，郭永等首次從溫莪術中提取得到欖香烯，之后時繼彗等首次報道欖香烯具有抗癌活性。欖香烯為強脂溶性成分，不溶于水，臨床上一般都是將其制成乳劑應用。
有專利(公開號CN1076613A)涉及欖香烯乳注射液及其制備方法，得到的注射液為乳劑，粒徑較大，平均粒徑一般不超過15μm，特別是不超過2μm。粒徑較大，會有靜脈刺激性和產生疼痛。
有專利(公開號CN1507857A)涉及欖香烯脂肪乳注射液及制備方法，得到脂肪乳注射液，粒徑較大，pH值偏高，最高可達pH10，超過靜脈注射pH允許范圍。
有專利(公開號CN1221607A)脂溶性藥物脂質體生產工藝及欖香烯脂質體注射液。原料在臨界或超臨界的二氧化碳下溶解后，然后緩慢地釋放二氧化碳并加入分散液。最后過1μm的微孔濾膜得到成多層脂質體，粒度仍然很大有專利(公開號CN1244389A)涉及欖香烯注射液及制備方法。用丙二醇和CremphorEL(聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸酯35)溶解欖香烯得到澄明溶液，但丙二醇、CremphorEL用量均過大，二者用量分別是欖香烯量的7.5-14倍，9-16倍。CremphorEL用量過大，會產生過敏反應(Allen Zhang J.et al.Development and characterization of a novel C remphor EL free liposome-basedpaclitaxel(LEP-ETU)formulation.European journal of pharmaceutics andbiopharmaceutics.xx(2004)1-11)。
有專利(公開號CN1508176A)涉及欖香烯的羥丙基β-環糊精包合物及制劑和制備方法，得到包合物冷凍干燥制備凍干粉針，但冷凍干燥耗時長，欖香烯又具有揮發性，長時間減壓凍干會造成原料的大量損失。
有專利(公開號CN1451377 A)涉及欖香烯注射劑及制備方法和用途。但是利用旋轉蒸發儀成膜和二氧化碳臨界和超臨界方法來制備。前者沒有工業化大生產的可能，且用到氯仿等有毒的有機溶劑，制備前體脂質體中同樣用凍干方法處理，不適合欖香烯。
以上專利文獻所公開的制劑在貯藏穩定性、臨床應用的刺激性和過敏反應、抗癌活性等方面都存在不足。

發明內容
本發明的目的是提供一種欖香烯新的注射劑型、口服劑型、輸液劑型、氣霧劑型即欖香烯脂質體及其制備方法，以改善欖香烯口服吸收差，生物利用度低；欖香烯注射劑穩定性差的缺陷。同時，作為膜材的磷脂，本身無毒，而且能增強人體免疫力，具有許多保健功能。大量研究證明，磷脂可降低血清膽固醇、甘油三酯含量，預防動脈硬化并可清掃血管使其柔軟，能顯著減輕動脈粥狀硬化及心肌缺血------再灌注損傷程度，清除動脈硬化引發的心腦血管疾病等多種慢性病變的誘發因素。因此磷脂對心腦血管疾病有積極的預防治療作用。
本發明中用于制備脂質體各種劑型的制劑所需的原料可以使用市售的欖香烯產品(欖香烯提取物)、β-欖香烯產品(β-欖香烯提取物)、香茅提取物、溫郁金提取物、姜黃提取物、白術提取物、以及丁香、沒藥、毛蒼術、毛蒼術、蛇床子、防風、天女木蘭等60余種植物的提取產品，也可以是β-欖香烯、α-欖香烯、γ-欖香烯、δ-欖香烯的單體或他們中的任意幾種混合物，還可以是化學合成的欖香烯及其衍生物。欖香烯脂質體含有從植物中提取的具有總欖香烯異構體含量≥75％的提取物，將欖香烯與磷脂、膽固醇等輔料制備成脂質體，分散相的平均粒徑≤500nm。本發明制備脂質體的磷脂，可以是大豆卵磷脂、氫化大豆磷脂，也可以是合成磷脂，其組成包括欖香烯、磷脂、膽固醇、。磷脂與欖香烯的重量比為0.4∶1～40∶1，膽固醇與磷脂的重量比為0～4∶1。制劑中總欖香烯異構體的最終濃度為1～10mg/ml。脂質體的包封率≥85％。具體涉及到的劑型為欖香烯脂質體、欖香烯立體穩定脂質體、欖香烯熱敏脂質體、欖香烯熱敏長循環脂質體、欖香烯納米脂質體、欖香烯長循環納米脂質體、欖香烯熱敏納米脂質體、欖香烯熱敏長循環納米脂質體。制備方法可以采用能工業化大生產的乙醇注入法、反相蒸發法、擠出法、機械法(包括均質機、乳勻機等各種操作機械制備脂質體的方法)等。制備脂質體所使用的分散介質可以是水、磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、碳酸鹽緩沖液、5％葡萄糖水溶液等。用欖香烯脂質體可以制成注射液、輸液、口服液、氣霧劑和固體制劑等劑型。
本發明的優點是制劑在肝臟中的分布高，而在腎臟中的分布少，靶向效果明顯優于專利03114984.7配制的普通注射液，利于疾病的治療。通過藥效學試驗也證明了制劑的效果。
具體實施例方式本發明的具體制備方法，由下列實施實例舉例說明，但本發明的保護范圍，不局限于此。
實施例1取0.4g大豆磷脂，0.1g膽固醇，0.05g欖香烯、適量VE用乙醚注入法或乙醇注入法，注入到10ml的pH 8 Tris緩沖液中，即得欖香烯脂質體。
實施例2取0.75g大豆磷脂、0.25g膽固醇、0.075g欖香烯、適量VE用40ml氯仿-乙醚(1∶1)溶解，置于500ml燒瓶中，在旋轉薄膜蒸發器上減壓成膜并除盡有機溶劑，加25ml pH7.4的磷酸鹽緩沖液水化，得欖香烯脂質體實施例3稱取0.60g大豆磷脂、0.2g膽固醇、0.075g欖香烯、適量VE加10ml氯仿溶解，置于150ml茄形瓶中，減壓蒸發氯仿，在瓶內壁形成一層脂質薄膜。加入5ml氯仿，10ml乙醚，然后加入15ml欖香烯的磷酸鹽緩沖液(pH7.4)中，浴式超聲3分鐘使形成均一單相體系，減壓蒸發去除氯仿乙醚至凝膠形成，繼續減壓蒸發5～10分鐘，蝸旋振蕩至水性懸濁液即脂質體形成。
實施例4稱取0.60g大豆磷脂、0.2g膽固醇、0.1g聚乙二醇2000磷脂酰乙醇胺、0.05g欖香烯，即得欖香烯立體穩定脂質體。
實施例5稱取0.50g合成磷脂即二棕櫚酰磷脂酰膽堿DPPC和二棕櫚酰磷脂酰甘油DPPG混合物(DPPC∶DPPG＝7∶3molar)、0.17g膽固醇、0.03g欖香烯，即得欖香烯熱敏脂質體。
實施例6稱取0.40g合成磷脂即二棕櫚酰磷脂酰膽堿DPPC和二棕櫚酰磷脂酰甘油DPPG混合物(DPPC∶DPPG＝7∶3molar)、0.05g膽固醇、0.1g聚乙二醇2000磷脂酰乙醇胺，0.04g欖香烯，即得欖香烯熱敏長循環脂質體。
實施例7將各種欖香烯脂質體過0.22μm微孔濾膜滅菌，充N2，灌封，得各種欖香烯脂質體注射液。
實施例8將各種欖香烯脂質體過100nm微孔濾膜滅菌，充N2，灌封，得各種欖香烯納米脂質體注射液。
實施例9將各種欖香烯脂質體過0.22μm微孔濾膜滅菌，充N2，灌封，得各種欖香烯脂質體氣霧劑。
上述實施例3、實施例10、實施例15樣品在4℃放置，至少穩定一年。
權利要求
1.香烯脂質體，其特征在于它含有從植物中提取的具有總欖香烯異構體含量≥75％的提取物，將欖香烯與磷脂、膽固醇等輔料制備成脂質體，分散相的平均粒徑≤500nm。
2.根據權利要求1所述的欖香烯脂質體，其特征在于膜材磷脂可以采用天然磷脂、或氫化的大豆磷脂或合成磷脂。
3.根據權利要求1所述的欖香烯脂質體，其特征在于磷脂與藥物的重量比為0.4∶1～40∶1，制劑中總欖香烯異構體的最終濃度為1～10mg/ml。
4.根據權利要求1所述的欖香烯脂質體，其特征在于脂質體的包封率≥85％。
5.根據權利要求1所述的欖香烯脂質體，其特征在于具體涉及到的劑型為欖香烯脂質體、欖香烯立體穩定脂質體、欖香烯熱敏脂質體、欖香烯熱敏長循環脂質體、欖香烯納米脂質體、欖香烯長循環納米脂質體、欖香烯熱敏納米脂質體、欖香烯熱敏長循環納米脂質體
6.根據權利要求1或2所述的欖香烯脂質體，其特征在于用該脂質體可制得注射液、輸液、口服液、氣霧劑、固體制劑等劑型。
7.欖香烯脂質體的制備方法，其特征在于制備方法可以采用能工業化大生產的乙醇注入法、反相蒸發法、擠出法、機械法等。
8.根據權利要求1所述的欖香烯脂質體，其特征在于制備脂質體所使用的分散介質可以是水、磷酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、碳酸鹽緩沖液、5％葡萄糖水溶液等。
全文摘要
本發明是欖香烯脂質體新劑型及其制備方法，所制制劑在肝臟中的分布高，而在腎臟中的分布少，生物利用度高，靶向效果明顯優于普通注射液，利于疾病的治療。它含有從植物中提取的具有總欖香烯異構體含量≥75％的提取物，將欖香烯與磷脂、膽固醇等輔料制備成脂質體，分散相的平均粒徑≤500nm。膜材磷脂可以采用天然磷脂、或氫化的大豆磷脂或合成磷脂。磷脂與藥物的重量比為0.4∶1～40∶1，制劑中總欖香烯異構體的最終濃度為1～10mg/ml。欖香烯脂質體的制備方法可以采用乙醇注入法、反相蒸發法、擠出法、機械法等。采用本發明所制備的脂質體可以制成口服、注射、輸液、氣霧劑、固體制劑等劑型。
文檔編號A61K9/127GK1650846SQ20041008286
公開日2005年8月10日 申請日期2004年12月7日 優先權日2004年12月7日
發明者鄧英杰, 王秀敏, 張修宇 申請人:沈陽藥科大學