本發明涉及脂質體領域，具體而言，涉及一種脂質體及其制備方法。

背景技術：

脂質體(Oiposomes)一般由復合磷脂組成,擁有仿生物膜的雙分子層結構。脂質體作為藥物載體,可以包封水溶性和脂溶性物質,并且具有靶向性、緩釋性、無免疫原性和易降解等突出的特點。

脂質體根據結構和所包含的雙層磷脂膜層數,可分為單室脂質體和多室脂質體。由一層雙分子層構成的稱為單室脂質體,根據粒徑的不同單室脂質體又可以細分為大單室脂質體(粒徑在0.1～1μm之間)和小單室脂質體(粒徑在0.02～0.08μm,亦稱為納米脂質體)。與單室脂質體對應,含有多層雙分子層的脂質體被稱為多室脂質體,粒徑在1～5μm之間。

制備脂質體的基本條件是使用優級或性能良好的磷脂,常用的有天然和合成的。合成磷脂不易氧化,組成固定,一直被認為是最佳的脂質體膜材,但是其價格昂貴。天然磷脂按照來源分為蛋黃磷脂和大豆磷脂,其中大豆磷脂膽固醇含量較低,脂肪酸含量較高,以其為膜材制備的脂質體具有很好的流動性和滲透性,不僅有利穿透表面屏障,而且有利于引發細胞之間生化反應。

因而，以大豆磷脂為原料制備脂質體一直也是人們研究的重點所在，人們在這方面也做出了很多的探索和研究。然而，現有的由大豆磷脂制備脂質體的方法還有很多缺陷。例如，在制備過程中，由于磷脂在水中難以溶劑，因而會產生磷脂分散性差、容易生成水溶性顆粒以及粘性物體沉淀等現象；同時，所制得的脂質體穩定性差，必須在低溫條件下保存，且保質期較短。

有鑒于此，特提出本發明。

技術實現要素：

本發明的第一目的在于提供一種脂質體的制備方法，所述方法中，通過在將磷脂和水攪拌混合后，再研磨和打磨，從而可以使得磷脂能夠在水體中有效分散，并與水體混合，進而也使得所制得的脂質體具有良好的穩定性，并且能夠在常溫下長期保存不變質。

本發明的第二目的在于提供一種脂質體，本發明脂質體由本發明方法制備得到，因而具有脂質體穩定性好，可以長期常溫保存不變質等優點。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種脂質體制備方法，所述方法包括如下步驟：將水與磷脂攪拌混合后，繼續研磨以及打磨，即得所述脂質體。

本發明中，通過在將磷脂與水攪拌混合后，進一步采用研磨以及打磨的方法，可以使得磷脂能夠充分在水中分散，并與水充分接觸溶解，避免發生磷脂沉淀和分層現象；而這也使得進一步所制得的脂質體在水體中具有良好的分散和穩定性，并能夠在常溫下長期保存不變質。

可選的，本發明中，所述磷脂為大豆磷脂。

可選的，本發明中，所述將水與磷脂攪拌混合為將水加入磷脂中后再進行攪拌混合。

可選的，本發明中，所述水的體積升數與磷脂的質量克數比例為(80～120)：(5～100)；例如，本發明中，所述水的體積升數與磷脂的質量克數比例可以為，但不限于：(85、90、95、100、105、110或者115)：(5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90或者95)等。

本發明中，通過對磷脂和水用量的調整和優化，從而能夠使得磷脂能夠更加充分的在水體中分散以及溶解，進而能夠提高所制得的脂質體的穩定性。

可選的，本發明中，所述水的體積升數與磷脂的質量克數比例為(90～105)：(5～30)。

本發明中，通過對所用原料磷脂和水用量的進一步調整和優化，從而能夠進一步提高所制得的脂質體的穩定性。

可選的，本發明中，所述攪拌混合的時間為20～45min；例如，所述攪拌混合的時間可以為，但不限于22、25、27、30、32、35、37、40或者42min等。

本發明中，通過對攪拌混合時間的調整和優化，從而可以在實現水和磷脂的充分混合的同時，還不會由于攪拌混合時間過長所導致的脂質體整體制備效率的降低以及對脂質體結構的影響。

可選的，本發明中，所述攪拌混合的溫度為20～40℃；例如，所述攪拌混合的溫度可以為，但不限于22、25、27、30、32、35或者37℃等。

本發明中，通過對攪拌混合溫度的選擇和調整，從而可以使得原料磷脂具有較好的流動性。

可選的，本發明中，所述研磨的時間為3～10min；例如，所述研磨的時間可以為，但不限于4、5、6、7、8或者9min等。

本發明中，通過對研磨時間的調整和優化，從而可以在實現攪拌后的混合體系再次充分研磨混合的同時，還不會由于研磨時間過長所導致的脂質體整體制備效率的降低以及對脂質體結構的影響。

本發明中，所述研磨為將攪拌混合后所得混合體系在研磨機中進行研磨。

可選的，本發明中，所述研磨的溫度為20～40℃；例如，所述研磨的溫度可以為，但不限于22、25、27、30、32、35或者37℃等。

本發明中，通過對研磨溫度的選擇和調整，從而可以使得待研磨的混合體系具有良好的流動性，并使得磷脂能夠與水體充分混合，并在在水體中進一步有效分散和溶解。

可選的，本發明中，所述打磨的時間為25～35min；例如，所述打磨的時間可以為，但不限于27、29、30、32或者34min等。

本發明中，所述打磨為將研磨后所得混合體系在打磨機中進行的打磨；具體的，是將研磨后的混合體系置于封閉容器中，并在離心圓周運動條件下在打磨機中進行打磨。

可選的，本發明中，所述打磨的溫度為25～40℃；例如，所述打磨的溫度可以為27、29、30、32、35或者37℃等。

同時，本發明還提供了一種脂質體，所述脂質體是由本發明所述方法制備得到的。

本發明脂質體由本發明所述方法制備得到，因此具有脂質體溶液穩定性好，不會發生沉淀以及分層等現象；同時，脂質體質量好，保質期長等優點。

進一步的，本發明脂質體的制備方法步驟如下：

(1)在20～40℃溫度條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為(80～120)：(5～100)，將水與磷脂攪拌混合20～40min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入研磨機中，并在20～40℃條件下，研磨3～10min；

(3)將研磨后所得混合體系引入打磨機中，即，在25～40℃的溫度條件下，將研磨后所得混合體系置于封閉容器中，并在離心圓周運動條件下在打磨機中進行打磨25～35min，即得所述脂質體。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：

(1)本發明中，通過在將磷脂與水攪拌混合后，進一步采用研磨以及打磨的方法，可以使得磷脂能夠充分在水中分散，并使得進一步所制得的脂質體在水體中具有良好的分散和穩定性，并能夠在常溫下長期保存不變質；

(2)本發明中，通過對原料磷脂以及水用量的選擇和調整，以及對攪拌混合、研磨以及打磨等制備步驟條件的進一步選擇和調整，從而可以進一步優化反應流程，同時還能夠提高所制得脂質體的穩定性；

(3)本發明中，通過采用本發明方法制備脂質體，具有所制得的脂質體溶液穩定性好，不會發生沉淀以及分層等現象；同時，脂質體質量好，保質期長等優點。

具體實施方式

下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發明，而不應視為限制本發明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規產品。

實施例1

按照如下所述方法制備實施例1的脂質體：

(1)在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：10，將水加入磷脂中，并攪拌混合30min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入研磨機中，并在20～40℃條件下，研磨4～5min；

(3)將研磨后所得混合體系引入打磨機中，并在25～30℃的溫度條件下，打磨25～35min，即得實施例1脂質體。

同時，實施例1脂質體制備過程中，并未發現反應體系出現渾濁或者沉淀；將實施例1所制得的脂質體放置60min后，并未出現沉淀。

實施例2

按照如下所述方法制備實施例2的脂質體：

(1)在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：50，將水加入磷脂中，并攪拌混合30min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入研磨機中，并在20～40℃條件下，研磨4～5min；

(3)將研磨后所得混合體系引入打磨機中，并在25～30℃的溫度條件下，打磨25～35min，即得實施例2脂質體。

同時，實施例2脂質體制備過程中，并未發現反應體系出現渾濁或者沉淀；將實施例2所制得的脂質體放置60min后，并未出現沉淀。

實施例3

按照如下所述方法制備實施例3的脂質體：

(1)在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：80，將水加入磷脂中，并攪拌混合30min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入研磨機中，并在20～40℃條件下，研磨4～5min；

(3)將研磨后所得混合體系引入打磨機中，并在25～30℃的溫度條件下，打磨25～35min，即得實施例3脂質體。

同時，實施例3脂質體制備過程中，并未發現反應體系出現渾濁或者沉淀；將實施例3所制得的脂質體放置60min后，并未出現沉淀。

實施例4

按照如下所述方法制備實施例4的脂質體：

(1)在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：10，將水加入磷脂中，并攪拌混合30min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入研磨機中，并在20～40℃條件下，研磨4～5min；

(3)將研磨后所得混合體系引入打磨機中，并在25～30℃的溫度條件下，打磨50min，即得實施例4脂質體。

同時，實施例4脂質體制備過程中，并未發現反應體系出現渾濁或者沉淀；將實施例4所制得的脂質體放置60min后，并未出現沉淀。

實施例5

按照如下所述方法制備實施例5的脂質體：

(1)在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：10，將水加入磷脂中，并攪拌混合30min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入研磨機中，并在20～40℃條件下，研磨15min；

(3)將研磨后所得混合體系引入打磨機中，并在25～30℃的溫度條件下，打磨25～35min，即得實施例5脂質體。

同時，實施例5脂質體制備過程中，并未發現反應體系出現渾濁或者沉淀；將實施例5所制得的脂質體放置60min后，并未出現沉淀。

實驗例1

分別將實施例1-5所制得脂質體在常溫下保存，并分別在12、24、36個月后對實施例1-5的脂質體進行檢測，結果如下：

由實驗例1可知，本發明方法所制得的脂質體具有良好的穩定性，可以在室溫下長期(＞12個月)保存，同時還不會發生渾濁、沉淀或者脂質體懸浮現象。

對比例1

在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：10，將水加入磷脂中，并攪拌混合。在攪拌10min后，即發現混合體系已經為渾濁液體；靜置放置60min后，發現磷脂和水已經明顯分離，并且出現粘結狀沉淀物。

對比例2

在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：10，將水加入磷脂中，攪拌混合50min，并反復攪拌5次；然后，靜置放置60min后，發現混合體系出現少量油、水以及磷脂分層現象，并且出現了粘結狀沉淀物。

對比例3

按照對比例2所述方法，并加快攪拌速度，以進行對比例3脂質體的制備實驗。結果發現，所制得的混合體系中，仍有分層以及粘結狀沉淀現象。

對比例4

按照如下所述方法制備對比例4的脂質體：

(1)在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：10，將水加入磷脂中，并攪拌混合30min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入研磨機中，并在20～40℃條件下，研磨4～5min，即得對比例4的脂質體。

對比例4脂質體制備過程中，并未發現反應體系出現渾濁或者沉淀；將對比例4所制得的脂質體放置60min后，出現油水分層現象；進一步將對比例4所制得脂質體放置12h后，出現少量懸浮物；放置3d后，出現粘結狀沉淀物。

對比例5

按照如下所述方法制備對比例5的脂質體：

(1)在20～30℃條件下，按照水的體積升數與磷脂的質量克數比例為100：10，將水加入磷脂中，并攪拌混合30min；

(2)將攪拌混合后所得混合體系引入打磨機中，并在25～30℃的溫度條件下，打磨25～35min，即得對比例5的脂質體。

對比例5脂質體制備過程中，并未發現反應體系出現渾濁或者沉淀；將對比例5所制得的脂質體放置12h后，出現油水分層現象；進一步將對比例5所制得脂質體放置5d后，出現少量懸浮物；放置30d后，出現粘結狀沉淀物。

本發明方法操作簡便，而且由本發明方法所制得的脂質體具有穩定性好，可以長期常溫保存不變質等優點。

盡管已用具體實施例來說明和描述了本發明，然而應意識到，在不背離本發明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權利要求中包括屬于本發明范圍內的所有這些變化和修改。