專利名稱：含抗壞血酸或其鹽的灌洗液及其用途的制作方法
技術領域：
本申請涉及醫學領域，特別涉及用于醫學操作中的灌洗液。
背景技術：
目前，肌肉骨骼疾病是導致世界上殘疾的主要原因，并占醫療費用的25%。隨著人們體育運動的增加，運動損傷也逐漸增多，這也引起了對運動損傷的有效治療方法的廣泛社會關注。運動損傷包括各種形式的肌腱和韌帶損傷，其占用了相當比重的醫療衛生資源。這些損傷以其愈合緩慢和恢復機制差為特點。但是，至今為止，還沒有非常有效的改善肌腱和韌帶損傷愈合的方法。

發明內容
在一實施方案中，提供灌洗液，其含有15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽；以及電解質，所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。在另一實施方案中，提供治療個體肌腱和/或韌帶損傷的方法，其包括用本文所公開的灌洗液灌洗所述肌腱和/或韌帶。 在另一實施方案中，提供抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在制備用于促進治療個體肌腱和/或韌帶損傷的愈合的灌洗液中的用途，其中所述抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在所述灌洗液中的濃度為15_50mM，所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。


本文的附圖作為說明書一部分，示例性說明本申請的一個或多個實施方案，并與本文的描述一起來解釋所公開的實施方案。該附圖僅是示例性說明本文的一個或多個實施方案，并不能理解為對其的限制。圖1為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液對大鼠模型中肌腱治愈的彈性模量的影響。圖2為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液對大鼠模型中肌腱治愈的極限抗拉強度的影響。圖3為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液灌洗對大鼠模型中接受ACL重建之后的大鼠的靜態前后膝松弛度的影響。圖4為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液灌洗對大鼠模型中接受ACL重建之后的膝關節強度的影響。實施方案的詳細描述定義
本文所用術語“個體”或“患者”并不僅限于人類，也包括除人類以外的其他的哺乳動物。在一些實施方案中，所述“個體”或“患者”可以交替使用并指實施外科手術的個體或患有肌腱和/或韌帶損傷的個體。本文所用術語“滲透壓”"同滲容摩(osmolarity)"指每升溶液中含有的溶解物質(溶質)的濃度(滲透壓摩爾，Osm)，其形成溶液的滲透壓。本文所用單數形式的“a”，“an”和“the”也包括復數，除非另有所指。具體而言，當使用不定冠詞時，其應根據說明書理解為既包括復數又包括單數，除非另有所指。本文所用術語“約”或大約，當其與數值一起使用時，其意為與該數值具有1%至5%以內的變量的數值。其他的實施方案能夠根據以下實施方案的詳細描述而顯而易見。應該理解，以下詳細描述和實施例在說明實施方案時，僅僅是示例性的，因為對本領域技術人員來說，在發明精神范疇內，對這些實施方案進行修改或替換是顯而易見的。本申請所引用的所有公開出版物、專利文獻以及其他參考文獻均以引用的方式并入本文成為本申請的一部分，就如同單獨地詳細地進行描述一樣。
具體實施例方式在一實施方案中，提供灌洗液，其含有15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽；以及電解質，所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。在另一實施方案中，提供治療個體肌腱和/或韌帶損傷的方法，其包括用本文所公開的灌洗液灌洗所述肌腱和/或韌帶。在另一實施方案中，提供抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在制備用于促進治療個體肌腱和/或韌帶損傷的愈合的灌洗液中的用途，其中所述抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽所述灌洗液中的濃度為15_50mM,所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。在一個實施方案中，本文所公開的灌洗液能夠用于外科手術、外科操作或醫學過程。在另一實施方案中，所述外科手術選自整形外科手術、關節鏡手術以及開放傷手術。在另一實施方案中，所述灌洗液是外科灌洗液。在另一實施方案中，所述灌洗液用于促進個體肌腱或韌帶的愈合。在另一實施方案中，所述灌洗液的同滲容摩為290m0sm至310m0sm。在另一實施方案中，所述灌洗液與欲應用的組織是生理匹配的或是與該組織是等滲的。在一具體的實施方案中，所述灌洗液具有約298m0sm等滲容摩。在一實施方案中，所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽選自抗壞血酸鈉、抗壞血酸鉀、抗壞血酸鈣以及以上任意的組合。在另一實施方案中，所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽是抗壞血酸鈉。在一些實施方案中，所述灌洗液中的電解質選自氯化鈉、氯化鉀、聯氯化鈣、硫酸鎂以及以上任意的組合。

在本文的公開的實施方案中，可以通過調節所述灌洗液中電解質或非電解質分子的濃度來調節期望的滲透壓范圍。在一些實施方案中，電解質或非電解質物質的濃度可以根據如下已知的計算公式來計算:ImOsm(毫等滲容摩)=lmmol/L電解質離子或非電解質分子濃度(張強等，第二章“滅菌制劑與無菌制劑”，見“藥劑學”，第一版，北京大學醫學出版社，2005年I月，ρρ113)ο在一個具體的實施方案中，所述電解質為氯化鈉、其在灌洗液中的濃度為99-133mM。在另一實施方案，所述灌洗液由15-50mM抗壞血酸鈉與99-133mM氯化鈉水溶液組成。在一個實施方案中，所述灌洗液具有生理范圍的pH，例如為5.5-8.5、或5.5-7.4或 5.5-6.7。在其他的實施方案中，本文所公開的灌洗液可以利用或不用緩沖系統來將其pH維持在上述范圍。當不需要緩沖系統時，所述電解質即可維持所述灌洗液的PH范圍。當需要緩沖系統時，所述緩沖系統包含重碳酸鹽離子或兩性離子化合物，例如N- (2-羥乙基)哌嗪-N’ -乙磺酸，常稱為HEPES。在一些實施方案中，本文所公開的灌洗液是安全、無毒和/或穩定的溶液。本申請說明書通篇所用的“一(個)實施方案”、“另一實施方案” “其他實施方案”或“一些實施方案”，是指與該實施方案有關的一些具體的特征、結構或特性被包括至少一個實施方案中。因此，顯而易見的是，在本申請說明書通篇出現的“一(個)實施方案”、“另一實施方案” “其他實施方案”或“一些實 施方案”并不必然地指該實施方案本身，它們相互之間可以替換使用，而且，重要的是，所包含的具體的特征、結構或特性可以適當地替換或組合成一個或更多個實施方案。以下將以急性蓋肌腱損傷模型和前交叉韌帶重建(ACLR)模型為例，示例性說明肌腱和/或韌帶的損傷愈合的實施方案，應理解，這些例子僅僅是示例性地說明本文所公開的實施方案，不應理解為對其他方法和其他手術形式的限制。實施例實施例1采用二個月齡的雄性SD大鼠的膝蓋骨肌腱窗損傷動物模型，來證明本文公開的灌洗液對急性肌腱損傷愈合的作用。在此實施例中，實驗組中，采用的灌洗液分別含有15mM、50mM和150mM抗壞血酸鈉，而對照組采用生理鹽水。其中三個實驗組中所用灌洗液分別為:LD vitC:含 3mg/ml (或約 15mM)抗壞血酸鈉，7.8g/L NaCl ；MD vitC:含 10mg/ml (或約 5OmM)，5.8g/L NaCl ；HD vitC:僅含 15mg/ml (或約 151mM)抗壞血酸鈉。動物在第42天處死后，通過生物力學試驗來檢測本文所公開的灌洗液對組織愈合中機械強度的作用，結果如圖1和圖2所示。實驗證明，在手術中開始應用本文所公開的灌洗液是有利的并能夠促進肌腱損傷的愈合。如圖1所示，在成熟的膝蓋肌腱窗模型中，SD大鼠(η = 10)接受生理鹽水(鹽水)，15mM抗壞血酸鈉(LD vitC), 50mM抗壞血酸鈉(MD vitC)或150mM抗壞血酸鈉(HDvitC)對傷口進行灌洗。在第6周，LD vitC(p = 0.008)和MD vitC組(p = 0.004)的膝蓋肌腱彈性模量顯著高于鹽水組(P = 0.022)，這表明，在肌腱性能重建中，含15mM或50mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水，是較好的外科灌洗液。此外，ACLR MD vitC組的靜態A-P松弛也低于ACLR鹽水組，但由于樣本量小而沒有觀察到顯著性。在另一增加樣本量的實驗中，在膝關節韌帶松弛重建中，含50mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水。如圖2所示,在相同的模型中，LD vitC組(P = 0.001)和MD vitC組(p = 0.001)的極限抗拉強度明顯好于鹽水組的膝極限抗拉強度，表明在肌腱張力恢復方面含15mM和50mM抗壞血酸鈉的灌洗液是較好的灌洗液。實施例2在動物實驗中，采用三個月齡的雄性SD大鼠的前交叉韌帶(ACL)重建模型來證明本文公開的灌洗液對肌腱損傷愈合的作用。實驗組中，采用的灌洗液分別含有15mM、50mM和150mM抗壞血酸鈉，而對照組采用生理鹽水。其中三個實驗組中所用灌洗液分別為:LD vitC:含 3mg/ml (或 15mM)抗壞血酸鈉，7.8g/L NaClMD vitC:含 10mg/ml (或 50mM)，5.8g/L NaClHD vitC:僅含 15mg/ml (或 151mM)抗壞血酸鈉。動物在第42天處死后，通過生物力學試驗來檢測靜態的前后(A-P)膝松弛性和膝強度，結果如圖3和圖4所示。實驗證明，在手術中開始應用本文所公開的灌洗液是有利的并能夠促進前交叉韌帶移植物的 愈合。如圖3所示，在成熟的ACL重建模型中，SD大鼠(η = 8)接受ACL重建手術(ACLR)或假手術。在手術中，利用生理鹽水(ACLR鹽水)，15mM抗壞血酸鈉(ACLR LD vitC),50mM抗壞血酸鈉(ACLR MD vitC)或150mM抗壞血酸鈉(ACLR HD vitC)對傷口進行灌洗。在第6周，ACLR LD vitC組的靜態A-P松弛顯著低于ACLR鹽水組(p = 0.022)，這表明，在膝關節韌帶松弛重建中，含15mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水。此外，ACLR MD vitC組的靜態A-P松弛也低于ACLR鹽水組，但由于樣本量小而沒有觀察到顯著性。在另一增加樣本量的實驗中，在膝關節韌帶松弛重建中，含50mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水。如圖4所示，在相同的模型中，ACLR LD vitC組的膝強度明顯好于ACLR鹽水組的膝強度(P = 0.04)，表明在膝關節性能恢復方面含15mM抗壞血酸鈉的灌洗液是較好的灌洗液。此外，ACLR MD vitC組的膝強度也高于ACLR鹽水組，但由于樣本量小而沒有觀察到顯著性。這也表明在膝關節功能恢復中，含50mM抗壞血酸鈉的灌洗液好于生理鹽水。再者，利用本文所公開的灌洗液處理的動物模型，未表現出任何副作用，并隨后的人體實驗表明其是高度安全并能夠耐受的。因此，本文所公開的灌洗液在臨池應用中不會產生安全問題。討論肌腱好韌帶損傷的愈合通常包括四個不同的階段，即炎癥期、細胞聚集期、組織修復期和重建期。已知的促進肌腱和韌帶愈合的嘗試多數針對愈合的后期，例如增加細胞增殖和基質的合成等。本申請實施例的實驗結果表明，抗壞血酸及其藥物可接受的鹽表現出對受損肌腱和韌帶的機械性能產生積極的作用。這些證據證明，在愈合的早期甚至在手術過程中局部應用抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽會對發揮有益的作用。
由于抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽具有極高的安全性，它們能夠廣泛地應用于臨床實踐，例如手術或創傷中的肌腱和/或韌帶的愈合，并對醫生和患者產生積極的作用 。
權利要求
1.灌洗液，包含 15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽,和 電解質， 所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的等滲容摩。
2.如權利要求1所述的灌洗液,其中所述灌洗液的等滲容摩為290m0sm至310m0sm。
3.如權利要求1或2所述的灌洗液，其中所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽選自抗壞血酸鈉、抗壞血酸鉀、抗壞血酸鈣以及上述的任意組合。
4.如權利要求1-3中任一項所述的灌洗液，其中所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽為抗壞血酸鈉。
5.如權利要求1-4中任一項所述的灌洗液，其中所述電解質選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硫酸鎂及其任意的組合。
6.如權利要求1-5中任一項所述的灌洗液，其中所述電解質為99-133mM濃度的氯化· 鈉。
7.如權利要求1-6中任一項所述灌洗液，其中所述灌洗液由15-50mM抗壞血酸鈉和99-133mM氯化鈉水溶液組成。
8.如權利要求1-7中任一項所述的灌洗液，其中所述灌洗液具有5.5-8.5,5.5-7.4或5.5-6.7 的 pH 值。
9.如權利要求1-8中任一項所述的灌洗液，其中所述灌洗液用于外科手術、外科操作或醫學操作或者用于促進個體的肌腱和/或韌帶損傷的愈合。
10.如權利要求1-9中任一項所述的灌洗液，其中所述外科手術選自整形外科手術、關節鏡手術以及開放傷手術。
11.15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在制備用于促進個體的肌腱和/或韌帶損傷的愈合或者治療個體的肌腱和/或韌帶損傷的權利要求ι- ο任一項所述的灌洗液中的用途。
12.如權利要求11所述的用途，其中所述個體正經歷外科手術、外科操作或醫學操作、或者患有肌腱和/或韌帶損傷。
13.如權利要求11或12所述的用途，其中所述個體為哺乳動物或人。
全文摘要
本申請公開了含有15-50mm抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽、以及電解質的灌洗液。還公開了該灌洗液的用途。
文檔編號A61K31/375GK103070859SQ201110342820
公開日2013年5月1日 申請日期2011年10月25日 優先權日2011年10月25日
發明者陳啟明 申請人:香港中文大學