專利名稱：與人血管生成素-2特異性結合的藥物融合體的制作方法
技術領域：
本發明屬于基因工程領域，涉及一類與人血管生成素-2結合的特異性藥物融合體及其應用。主要涉及通過基因工程手段將具有活性的、能與人血管生成素-2結合的多肽片段(幻 通過連接鏈與由(X)n鏡像氨基酸序列組成的多肽片段(X’)n連接在一起，在連接鏈處有聚合物、脂肪酸和糖修飾任一種修飾。所形成的藥物融合體包含2段反向重復的多肽片段序列(X)n與(X’)n。本發明還涵蓋了該多肽及其修飾產物在治療伴隨血管異常增生的疾病應用。
背景技術：
很多疾病與血管異常生成相關，如老年性黃斑病變、腫瘤及炎性疾病等。目前的研究進展表明，在血管發生進程中，有很多信號系統參與，其中Tie-2受體酪氨酸激酶信號通路研究的較為充分，血管生成素是Tie-2受體的特異性配體。目前已發現4中血管生成素，分別命名為血管生成素-I、血管生成素_2、血管生成素-3及血管生成素-4。體內和體外試驗研究表明，血管生成素-2在上述病理發生進程中與Tie-2受體結合，有益于血管可塑性狀態，在這些病理進程中血管生成素-2的表達被顯著上調。相反，正常組織的血管生成素-2表達十分有限。因此通過阻斷血管生成素-2與Tie-2受體結合是治療腫瘤、老年性黃斑病變及炎癥的有效方法。研究發現一類小肽可顯著抑制血管生成素的活性(CN 200910159451. 9，在此引入作為參考)，但這類小肽分子量較小(約1000-2000道爾頓)，很容易在人體內被腎清除，無法在體內發揮其有效活性。因此本發明的目的是提供一種體內長效的血管生成素-2特異性結合藥物融合體。
發明內容
針對上述不足，本發明提供了下述構型的化合物
權利要求
1.具有下式的與人血管生成素-2特異性結合的藥物融合體
2.根據權利要求I所述的藥物融合體，其結構特征在于所述藥物融合體中包含2段反向重復的多肽序列(互為鏡像的(幻 與(X’)n)，所述的2段重復序列((幻 與(X’)n)通過連接鏈Y連接在一起；在連接鏈的部位有聚合物、脂肪酸或糖其中任一種修飾；X與Y間和X’與Y間不存在或有1-20個氨基酸殘基間隔。
3.根據權利要求I和權利要求2所述，η是4。
4.根據權利要求I和權利要求2所述，η是3。
5.根據權利要求I和權利要求2所述，η是2。
6.根據權利要求I和權利要求2所述，η是I。
7.根據權利要求1-6所述，藥物融合體中連接鏈Y包含一個可發生化學修飾的氨基酸位點。
8.根據權利要求1-6所述，藥物融合體中X選自 Ca)在SEQ ID No: I給出的序列； (b)Ca)的氨基酸序列中，具有在一個或多個位置的氨基酸被絲氨酸替換； (C) Ca)的氨基酸序列中，具有在一個或多個位置的氨基酸被甘氨酸替換； Cd) Ca)的氨基酸序列中，具有在一個或多個位置的氨基酸被丙氨酸替換； Ce)氨基酸組成中有>80%與(a)的氨基酸序列相同的氨基酸序列。
9.根據權利要求1-7項所述的藥物融合體中，連接鏈Y長度為3-20個氨基酸，所述連接鏈包括但不限于SEQ NO 2給出的氨基酸序列。
10.根據權利要求7所述修飾，可發生化學修飾的氨基酸位點為賴氨酸。
11.任一項在前權利要求所述，藥物融合體的化學修飾，包括但不限于脂肪酸修飾、聚乙二醇修飾、包含乙氧基重復結構的嵌段共聚物修飾、糖修飾任一種。
12.根據權利要求11所述修飾，是通過Z末端的化學反應基團和連接鏈Y上游離的半胱氨酸反應進行修飾，制備藥物融合體。
13.根據權利要求11所述修飾制備的藥物融合體中Z為脂肪酸，所述脂肪酸的碳鏈長度為5-30個。
14.根據權利要求11所述修飾制備的藥物融合體中Z為聚乙二醇，所述聚乙二醇的分子量范圍為5000-40000道爾頓之間。
15.根據權利要求11所述修飾制備的藥物融合體中Z為包含乙氧基重復結構的嵌段共聚物，所述的包含乙氧基重復結構的嵌段共聚物的分子量范圍為5000-40000道爾頓之間。
16.根據權力要求14所述的藥物融合體，聚乙二醇包括線性的聚乙二醇和分枝型聚乙二醇。
17.—種編碼權利要求1-10任一項的多肽的核苷酸序列。
18.—種包含權利要求17的表達載體的宿主細胞。
19.權利要求18的宿主細胞為真核細胞。
20.權利要求18的宿主細胞為原核細胞。
21.任一項在前權利要求所述的藥物融合體在治療伴隨血管異常增生的疾病應用。
22.權利要求21所述的疾病，包括老年性黃斑病變、腫瘤、炎性疾病、子宮內膜異位癥。
全文摘要
本發明公開了一類與人血管生成素-2特異性結合的藥物融合體，還公開了該類藥物融合體的制備方法及利用該藥物融合體治療老年性黃斑病變、腫瘤、炎性疾病、子宮內膜異位癥的方法。
文檔編號A61K38/18GK102949732SQ201110404479
公開日2013年3月6日 申請日期2011年12月8日 優先權日2011年9月16日
發明者于鵬展 申請人:西藏海思科藥業集團股份有限公司