鹿草降血脂提取物的制備及分離方法
【專利摘要】本發明涉及一種鹿草降血脂提取物的制備及分離方法。本發明以菊科植物鹿草為原料制備含有效成分黃酮及其甙類和三萜及其皂甙類的降血脂活性提取物，其中含有結構式如下所示的矢車菊素(1)及白樺脂醇(2)。該提取物具有降血脂作用，可降低甘油三脂、總膽固醇、和低密度脂蛋白，明顯增加高/低密度脂蛋白比值。本發明采用溶劑提取結合柱層析純化、可快速常量制備分離鹿草降血脂提取物。方法實用簡便，產品降血脂成分含量高，適宜作為降血脂原料藥及天然血脂調節劑的開發應用。
【專利說明】鹿草降血脂提取物的制備及分離方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種以菊科植物鹿草為原料制備具有降血脂活性的提取物及分離的方法。
【背景技術】
[0002]自上世紀90年代后期，心血管病已經逐漸成為我國城鄉居民的第一死因，目前已占死亡人數的近40 %。心血管病主要是由于動脈硬化、糖尿病、不良的脂血癥、高血壓和肥胖癥等因素造成的。臨床研究表明降低固醇可減少冠心病患者的死亡和心肌梗死發生率，質代紊亂所致的高脂血癥與人類的頭號殺手心腦血管疾病發生有著密切關系。因此，調節血脂藥已為當今心血管疾病領域的研究熱點之一。研究證實許多中藥有很好的低血脂作用，其以降甘油三酯為主的降低血脂作用.與西藥相比毒副作用相對較小。而在藥效上各有側重，作用機理和途徑也有所不同，具有多途徑綜合療效的中藥往往是較好的降脂藥。因此中藥在治療高脂血癥疾病中有良好的開發前景。本發明根據上述市場需求和天然藥物有效低毒的降血脂特點，從獨特的新疆民間草藥-鹿草中研究降血脂活性提取物的制備方法，對開發防治心血 管疾病的中藥具有積極意義。
[0003]鹿草{Rhaponticumcarthamoides (ffilld.) Iijin.菊科管狀花亞科漏蘆屬的一種多年生草本植物。俗稱新疆人參，花紫紅色。故又稱紅花漏蘆。在我國僅分布在新疆，民間長期入藥，具補氣健腦功效，主治神經衰弱、食欲不振[新疆生物土壤研究所，《新疆中草藥》，新疆人民出版社，烏魯木齊，251，1975]，在當地少數民族心目中是個寶藥。前蘇聯學者發現鹿草具有降血脂和適應原樣作用，其總黃酮可減少血脂和游離脂肪酸含量[姜曉峰等，中國藥學雜志，1995，30:522]。在防治心血管疾病方面具有開發潛力，我們對新疆鹿草黃酮活性的初步活性研究結果表明其總黃酮有保護心肌和降血脂的作用[李迪明等，International Symposium CRI, CA and DT, Sept.2001 Nanjing, China:25-27]。
[0004]為開發我國新疆這種藥用植物的獨特資源，挖掘其潛在的應用價值，我們以降血脂活性篩選為先導對鹿草降血脂提取物的制備工藝和有效成分鑒定進行研究，優選出了一個最佳提取分離制備工藝。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種從菊科植物鹿草制備具有降血脂活性的提取物及分離方法。
[0006]在鹿草降血脂活性的研究中，我們發現該植物的脂溶性成與分水溶性成分均具有降血脂活性，二者都為有效部位，其大極性組分作用大于小極性組分，脂溶性成分對總膽固醇和甘油三酯有明顯的降低作用，水溶性成分除具有相同作用外，尚可降低低密度脂蛋白(LDL)，并增加高/低密度脂蛋比值。鹿草降血脂提取物的化學研究顯示其中主要有效成分的結構類型為五環三萜(羽扇豆烷型和齊墩果烷型)和黃酮類(黃酮醇、雙氫黃酮和花青素類)類化化合物。故本發明針對以上研究所確定的降血脂活性部位，對鹿草降血脂活性提取物的制備及分離方法進行了研究，該方法實用、簡便，為進一步從鹿草中開發降血脂藥奠定了基礎。
[0007]—種以鹿草植物為原料，制備具有降血脂活性提取物的方法，其特征在于采用溶劑提取鹿草植物得總浸膏，該浸膏(或用乙酸乙酯或乙醚-丙酮-甲醇或水-正丁醇萃取所得部位浸膏)經過硅膠柱層析(或聚酰胺柱層析或葡聚糖凝膠S^hadex LH-20柱層析)、混合溶劑梯度洗脫的方法，分離純化得到含有總甙、總黃酮及其甙類和總三萜及其皂甙類的降血脂活性提取物，該提取物中含有以矢車菊素(化合物I)即花青素類為結構特征的水溶性降血脂成分及以白樺脂醇即羽扇豆烷型五環三萜(化合物2)為結構特征的脂溶性降血脂成分:
[0008]
【權利要求】
1.一種以菊科植物鹿草為原料，制備及分離具有降血脂活性提取物的方法，其特征在于采用以下方法制備得到含有黃酮及其甙類和三萜及其皂甙類的降血脂活性提取物，該提取物中含有以矢車菊素(化合物I)即花青素類為結構特征的水溶性降血脂成分及以白樺脂醇即羽扇豆烷型五環三萜(化合物2)為結構特征的脂溶性降血脂成分: 將鹿草植物用溶劑提取得總浸膏，該浸膏(或用乙酸乙酯或乙醚-丙酮-甲醇或水-正丁醇萃取所得部位浸膏)經過硅膠柱層析(或聚酰胺柱層析或葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱層析)、混合溶劑梯度洗脫的方法，分離純化得到以上降血脂活性提取分離物。
2.如權利要求書I所述的方法，其特征在于:在上述方法中，總浸膏提取時溶劑與原料的物料比在2: I到10: I范圍內，提取時如采用室溫下浸提，則每次7天，浸提3~4次；亦可采用加熱回流提取或煮提，每次2~3小時，提取3次；或采用超生提取等其它現有技術進行提取；提取或萃取溶劑可選擇水、1-5% (V/V)鹽酸或醋酸水、75-95% (V/V)乙醇或甲醇、正丁醇、異丙醇、乙酸乙酯、丙酮種的一種、兩種或三種，其中以制備高活性的水溶性提取物為目標所優選的提取溶劑是水或混合溶媒系統:水-正丁醇(0.5-1: 0.5-8)。
3.如權利要求書I所述的方法，其特征在于:硅膠柱層析時選用的溶劑體系為石油醚比乙酸乙酯(20:1到1: 5)或石油醚比丙酮(50:1到3:1)梯度洗脫。
4.如權利要求書I所述的方法，其特征在于:經上述方法制備得到的提取物粗品可通過以下方法采用以下A、B、C、D四種方法中任意一種進行分離純化精制: A通過硅膠柱層析純化，選用石油醚和乙酸乙酯(15: I)或石油醚和丙酮(20:1)洗脫，純化所得產品含20%總黃酮和15%總三萜及0.03%的化合物2 ； B亦可進一步采用石油醚和丙酮或石油醚和乙酸乙酯以及正丁醇和水溶劑體系重結晶純化，得到的產品為棕黃色無定形粉末，其含有25%總黃酮和18%總三萜及0.03%的化合物I ; C亦可用聚酰胺柱層析分離純化，水和乙醇(I: 5-1: I)洗脫得到的產品為含有20%總黃酮的棕黃色無定形粉末； D葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱層析分離純化,水和乙醇(I: 5-1: I)洗脫得到的產品為含有28%總甙的淡黃色無定形 粉末。
5.如權利要求書I所述的方法，其特征在于:提取分離物中黃酮類化合物、三萜類化合物及其甙類均為降血脂有效成分，其中代表性單體化合物分別是矢車菊素及白樺脂醇。
6.如權利要求書I所述的方法，其特征在于:制備得到提取分離物具有降血脂用，可降低甘油三脂、總膽固醇、和低密度脂蛋白，對高/低密度脂蛋白比值也有明顯的增加作用。
7.如權利要求書I所述的方法，其特征在于:提取分離物中脂溶性成分對總膽固醇有明顯的降低作用，水溶性成分除具有相同作用外，尚可顯著降低甘油三酯和低密度脂蛋白(LDL)，并增加高/低密度脂蛋白比值。
【文檔編號】A61K36/28GK103536637SQ201210237555
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2012年7月10日 優先權日:2012年7月10日
【發明者】符波, 唐卿, 曹秋娥, 符泳 申請人:符波, 唐卿, 上海普潤斯生物科技有限公司