專利名稱：一種含他汀類藥物和多不飽和脂肪酸的藥物組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種包含他汀類以及多不飽和脂肪酸類物質(zhì)的用于治療乙型肝炎病毒感染的組合物，及其在制備治療乙型肝炎病毒感染所致的肝炎、肝癌、肝硬化等疾病的藥物中的應用，屬于醫(yī)藥領域。
背景技術(shù)：
目前，乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)是指引起人類急、慢性肝炎的DNA病毒，也稱丹氏顆粒(Dane,屬嗜肝DNA病毒科(hepadnaviridae),基因組長約3. 2kb,為部分雙鏈環(huán)狀DNA。我國的乙肝病毒感染率約60°/Γ70% ;乙肝表面抗原攜帶率約占總?cè)丝诘?
7.18%，以此計算，全國約有9300萬人攜帶乙肝病毒，其中乙肝患者大約有3000萬。HBV是致肝癌的重要因子，約80% 90%的肝癌都有HBV背景。研究發(fā)現(xiàn)，有20年HBV感染史者，約有59TlO%的發(fā)生癌變，癌變的原因是HBV的X基因整合到肝細胞基因上，發(fā)生了突變，導致肝癌。肝癌/肝細胞癌(hepatic cellular cancer, HCC)是目前世界上最普遍的癌癥之一，每年的發(fā)病率超過50萬，而且在許多國家這一發(fā)病率還正處于上升的趨勢。據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全球約20億人曾感染過HBV，其中3. 5億人為慢性HBV感染者，每年約有52萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝癌，據(jù)統(tǒng)計，全球53%的HCC病例都與HBV相關，乙肝表面抗原(HBsAg)攜帶者患肝癌的風險比非感染者高200倍。盡管HBV在宿主細胞內(nèi)復制與裝配過程逐步被闡明，但是對HBV與宿主細胞蛋白質(zhì)的相互作用機制、HBV侵染宿主細胞的受體、HBV出芽機制等問題的認識仍然非常有限，現(xiàn)行HBV抗病毒治療效果不盡理想，迫切需要尋找抗HBV的新藥靶點。病毒通過不同的方式進入宿主細胞，包括注射式侵入、細胞內(nèi)吞、膜融合等。研究發(fā)現(xiàn)HBV是經(jīng)細胞內(nèi)吞的形式進入細胞，這種方式既可避免免疫監(jiān)測，同時也是一種節(jié)省能量的方式。HBV經(jīng)內(nèi)吞方式進入細胞屬于依賴膽固醇的病毒入胞途徑又叫依賴脂筏的入胞途徑；同時，研究發(fā)現(xiàn)HBV病毒是在脂筏中組裝并完成出芽。因此，肝細胞膜中脂質(zhì)水平在HBV生命周期及感染所致疾病的發(fā)生發(fā)展等多個階段發(fā)揮關鍵作用。他汀類藥物競爭性地抑制肝細胞內(nèi)三羥三甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)還原酶的活性，降低內(nèi)源性膽固醇的生物合成，使正常和升高的低密度脂蛋白(LDL-C)水平降低。低密度脂蛋白(LDL)由極低密度脂蛋白(VLDL)生成，主要通過與LDL受體結(jié)合代謝。他汀類降低LDL作用機制在于降低VLDL和VLDL殘基膽固醇濃度和LDL受體的誘導作用，從而導致LDL-C的產(chǎn)生減少和/或分解代謝增加，是體循環(huán)中的LDL、VLDL和VLDL殘基的清除增加，因此能顯著降低血清膽固醇，中度降低甘油三酯，并且升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)。現(xiàn)已廣泛應用于治療高膽固醇血癥。多不飽和脂肪酸(PUFA)包括二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)、花生四烯酸(AA)、亞油酸、α-亞麻酸、Y-亞麻酸。目前研究其作用主要包括①對細胞膜的影響脂肪酸是磷脂的組成成分，細胞內(nèi)脂肪酸庫可以影響細胞膜磷脂中脂肪酸的飽和度和細胞膜的流動性；②抑制DNA合成多不飽和脂肪酸可以通過抑制DNA合成而直接發(fā)揮抗腫瘤作用脂質(zhì)的過氧化不飽和脂肪酸能抑制細胞脂質(zhì)過氧化的水平調(diào)節(jié)機體免疫功能，多不飽和脂肪酸能增強NK細胞活性和T細胞功能及巨噬細胞的吞噬功能。PUFA具有降血脂、調(diào)節(jié)血壓、抑制血小板聚集、抗凝、調(diào)節(jié)前列腺素代謝、降低白三烯抗炎等作用，在防治冠心病、延緩動脈粥狀硬化方面，有特殊的臨床意義和實用價值。本發(fā)明人通過長期的研 究，意外地發(fā)現(xiàn)，當他汀類藥物，當與多不飽和脂肪酸類物質(zhì)聯(lián)合使用時，通過調(diào)節(jié)細胞膜中脂質(zhì)含量而發(fā)揮抗HBV病毒作用，其相對于僅僅包括他汀類藥物的組合物相比，該組合物的抗病毒效力協(xié)同地增大，以防止和治療乙型肝炎病毒的感染，并對于進一步治療HBV感染所致的肝炎、肝硬化、肝癌等相關疾病具有顯著作用和重要意義。本發(fā)明人已經(jīng)驚人地發(fā)現(xiàn)，通過任何給藥途徑，以規(guī)定劑量給予患者與多不飽和脂肪酸類藥物聯(lián)合的他汀類藥物或其藥用鹽，將賦予對乙型肝炎病毒的攻擊作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種包含他汀類藥物和多不飽和脂肪酸的組合物，用于乙型肝炎病毒感染所致的原發(fā)性肝癌、急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化疾病的治療。本發(fā)明所述的他汀類降血脂藥是指羥甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，包括阿伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、瑞舒伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀，或其藥學上可接受的鹽。本發(fā)明所述的他汀類的藥學上可接受的鹽，優(yōu)選鈣鹽、鈉鹽等。本發(fā)明所述的多不飽和脂肪酸是指含有兩個或兩個以上雙鍵且碳鏈長度為If 22個碳原子的直鏈脂肪酸，及其酯類衍生物。本發(fā)明所述的多不飽和脂肪酸是指二十碳五烯酸(ΕΡΑ)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)、花生四烯酸(AA)中的一種或幾種。本發(fā)明所述的多不飽和脂肪酸是指富含多不飽和脂肪酸的深海魚油、海藻油、亞麻籽油、橄欖油、芥花籽油、玉米油、花生油中的一種或幾種。作為優(yōu)選的實施方案之一，本發(fā)明提供了一種治療乙型肝炎病毒感染的藥物組合物，主要包含治療有效量的他汀類藥物和治療有效量的多不飽和脂肪酸類藥物。作為優(yōu)選的實施方案之一，本發(fā)明提供了一種治療乙型肝炎病毒感染的藥物組合物，基于組合物重量計，包含廣200重量份的他汀類藥物和1(Γ1000重量份的多不飽和脂肪酸類藥物；優(yōu)選包含廣80重量份的他汀類藥物和2(Γ500重量份的多不飽和脂肪酸類藥物。他汀類藥物以及多不飽和脂肪酸類藥物優(yōu)選以“治療有效量”給藥至個體，這個量足以對個體表現(xiàn)出抗病毒效果。實際的給藥量、給藥速度和時程(time-course)將取決于待治療的特性和嚴重性。治療的處方例如劑量的決定等，最終屬于一般醫(yī)生和其它醫(yī)生的職責和判斷范圍內(nèi)，通常要考慮到待治療的病狀、個體患者的情況、輸送的部位、給藥方法以及醫(yī)生已知的其他因素。
給藥途徑可以包括非腸道地給藥(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈，例如通過點滴);一些其它適合的給藥途徑包括(但不限于)口服、腸道、鼻內(nèi)、局部或者通過植入的方式給藥。用于口服給藥的藥物組合物可以是片劑、膠囊、顆粒劑等固體制劑形式或液體制劑形式。片劑可以包括固體載體如凝膠或輔藥。液體藥物組合物通常包括液體載體如水、動物油或植物油、礦物油或合成油等?？梢园ㄉ睇}水溶液、葡萄糖或其他糖溶液或二元醇如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇。他汀類藥物/多不飽和脂肪酸類藥物的組合物也可通過微球體、脂質(zhì)體、其他微粒輸送系統(tǒng)或置于某些組織(包括血液)中的持續(xù)釋放制劑給藥。作為優(yōu)選的實施方案之一，本發(fā)明組合物的劑型，例如片劑、顆粒劑、膠囊劑、液體制劑等，可以適當使用藥學上可接受的添加劑或載體，根據(jù)中國藥典等記載的常規(guī)方法進行制備。例如，片劑的場合，可以使用微晶纖維素、乳糖等作為賦形劑，使用羥丙基纖維素等作為粘合劑，使用硬脂酸鎂、滑石粉等作為潤滑劑。 顆粒劑和膠囊劑的場合，可以使用精制蔗糖、乳糖等作為賦形劑，使用玉米淀粉、微分硅膠、硅酸鈣等作為吸附劑，使用淀粉漿、羥丙基纖維素等作為粘合劑。液體制劑的場合，可以使用dl-蘋果酸等作為矯味劑，使用蜂蜜、D-山梨醇等作為甜味劑，使用乙醇等作為潛溶劑，使用乙二胺四乙酸鈉等作為穩(wěn)定劑，使用硬脂酸聚氧乙烯硬化蓖麻油60、聚山梨醇酯80等作為增溶劑。上述各種劑型中，根據(jù)需要，也可以添加，α-生育酚、葉黃素、胡蘿卜素，玉米黃質(zhì)、丁基羥基茴香醚、二丁基羥基甲苯、沒食子酸丙酯、特丁基對苯二酚等作為抗氧化劑，交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等作為崩解劑，焦糖、三氧化二鐵等作為著色劑，檸檬酸、枸櫞酸等作為PH調(diào)節(jié)劑，尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、對羥基苯甲酸乙酯、苯甲酸鈉等作為防腐劑。本發(fā)明的藥物組合物通過調(diào)節(jié)細胞膜中脂質(zhì)含量而發(fā)揮抗HBV病毒作用，其中相對于僅僅包括他汀類藥物的組合物相比，該組合物的抗病毒效力協(xié)同地增大，以防止和治療乙型肝炎病毒的感染，并對于進一步治療HBV感染所致的肝炎、肝癌等疾病具有顯著作用和重要意義。本發(fā)明的另一個目的之一，提供一種制備治療乙型肝炎病毒感染所致的相關疾病的藥物中的應用。本發(fā)明所述的所述相關疾病包括乙型肝炎、肝癌、肝硬化等。乙型肝炎病毒(HBV)是引起人類急、慢性肝炎的DNA病毒。慢性乙型肝炎發(fā)展的整個過程，可以描述為以下幾個階段第一階段無癥狀表面抗原陽性攜帶狀態(tài)；第二階段慢性輕度肝炎；第三階段慢性中度和重度肝炎；第四階段慢性重型肝炎；第五階段肝硬化；第六階段肝癌。乙肝表面抗原(HBsAg)攜帶者患肝癌的風險比非感染者高200倍。
除非另有定義，本文中使用的所有技術(shù)和科學術(shù)語具有本發(fā)明所屬技術(shù)領域的技術(shù)人員所通常理解的含義。


以下，結(jié)合附圖來詳細說明本發(fā)明的實施方案，其中
圖I他汀類對HBV感染的肝癌細胞增殖的抑制作用.
圖2多不飽和脂肪酸類對HBV感染的肝癌細胞增殖的抑制作用.
圖3他汀類與多不飽和脂肪酸類聯(lián)用對HBV感染的肝癌細胞增殖的抑制作用比較(*與對照組比較，##與單獨用藥組比較).
圖4藥物對HBV表面抗原表達的影響；
圖5藥物對HBV病毒分泌的抑制作用f與對照組比較，##與單獨用藥組比較).
圖6藥物對HBV感染所致急性肝炎模型小鼠HBV病毒分泌的抑制作用.
圖7光鏡下各組肝臟病理變化(HE X 400).
具體實施例方式以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，但絕不是對本發(fā)明范圍的限制。下面參照實施例進一步詳細闡述本發(fā)明，但是本領域技術(shù)人員應當理解，本發(fā)明并不限于這些實施例以及使用的制備方法。而且，本領域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的描述可以對本發(fā)明進行等同替換、組合、改良或修飾，但這些都將包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
實施例I軟膠囊劑
(1)藥液組成(1000粒)
阿伐他汀鈣IOg ;海藻油400 g ;亞麻籽油200g ;蜂蠟12g ; α -生育酚Ig
(2)囊材組成(1000粒)
明膠300g;甘油160g ;純凈水360g ;二氧化鈦2g ;色素I. 5g ;尼泊金甲酯I. 5g
(3)制法將蜂蠟加入亞麻籽油中，加熱至溶解，再將阿伐他汀鈣、海藻油、α-生育酚加入，用膠體磨均質(zhì)，即得藥液；另將明膠、甘油、純凈水混勻，再加入二氧化鈦、色素和尼泊金乙酯，加熱溶解并混合均勻，即得膠皮溶液。采用滴制法將藥液和膠皮溶液在軟膠囊生產(chǎn)線上制成軟膠囊。
實施例2顆粒劑
(1)成分(1000包)
辛伐他汀IOg ;二十二碳六烯酸120g ;微晶纖維素20g ;交聯(lián)羧甲基纖維素鈉5g ;精制鹿糖500g ;微粉娃膠280g ;聚維酮I. 5g
(2)制法
將二十二碳六烯酸與經(jīng)干燥后的微粉硅膠拌合均勻，置混合器內(nèi)與辛伐他汀、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、精制蔗糖混合均勻?；旌衔镉镁劬S酮乙醇溶液制粒，4(T50°C干燥。過14目篩整粒，然后過40目篩除去粉末。制成的顆粒裝于不透水的袋中，每袋含辛伐他汀IOmg, 二十二碳六烯酸120mg。
實施例3膠囊劑
(I)成分(1000粒)
洛伐他汀20g ; α -亞麻酸IOOg ;淀粉IOOg ;微粉硅膠200g ；10%淀粉漿適量(2)制法
將α -亞麻酸與經(jīng)干燥的微粉硅膠拌合均勻，置混合器內(nèi)與洛伐他汀、淀粉混合均勻，加10%淀粉漿適量制成軟材，過14目篩制粒，將濕粒于4(T50°C干燥至水分在3%以下。將制成的顆粒裝入硬質(zhì)明膠膠囊中即得。
實施例4 口服乳劑
(1)成分
氟伐他汀鈉2g ;深海魚油IOOml ;豆磷脂12 g ；F68 6g ; α -生育酚O. 5g;苯甲酸鈉O. 2g ;蒸餾水適量
(2)制法
將氟伐他汀鈉、豆磷脂、F68、苯甲酸鈉和蒸餾水加入高速組織搗碎機內(nèi)，攪拌使其分散均勻。緩慢加入α -生育酚與深海魚油的混合物，以10000轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌3分鐘，使其成為初乳液。向初乳液中加水至1000ml，再轉(zhuǎn)入到高壓乳勻機內(nèi)，勻化3次，灌封，滅菌，包裝，即得。
實施例5藥物對HBV感染的肝癌細胞增殖的抑制作用(MTT法)
細胞系及培養(yǎng)條件轉(zhuǎn)染乙型肝炎病毒全基因組DNA的人肝癌細胞株H印G2. 2. 15，10%FBS的用高糖DMEM完全培養(yǎng)基，在37°C，5% C02，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對數(shù)生長期狀態(tài)良好的細胞，用O. 25%的胰蛋白酶消化，制成細胞懸液，計數(shù)約為5 X 104個/ml，按每孔5000個細胞取細胞懸液接種于96孔板，100 μ I/孔，置于孵箱內(nèi)培養(yǎng)，用于實驗。實驗方法
(I)取對數(shù)生長期的細胞，實驗分為以下組別對照組，辛伐他汀組，瑞舒伐他汀組，阿伐他汀組。鋪板后24小時，按不同組別的處理要求，分別加入不同藥物，藥物終濃度分別為
0、4、8、16、32、64 μΜ。培養(yǎng)48小時后，MTT方法檢測490 nm波長測各孔光吸收值(0D值)，計算各濃度復孔OD值平均數(shù)，按下式計算細胞抑制率
細胞抑制率(％)=(對照組OD值一藥物組OD值)/對照組OD值X 100%
每次實驗設3個復孔，實驗重復3次，通過回歸計算(SPSS16. O)求出抑制率為50%時藥物濃度(IC50)。受試化合物對HBV感染的肝癌細胞生長抑制活性以IC50表示。(2)取對數(shù)生長期的細胞，實驗分為以下組別對照組，a-亞麻酸(ALA)，二十碳五烯酸(EPA)組，二十二碳六烯酸(DHA)組。鋪板后24小時，按不同組別的處理要求，分別加入不同藥物，藥物終濃度分別為0、5、10、20、40、80 Pg/ml。培養(yǎng)48小時后用MTT方法檢測490 nm波長測各孔光吸收值(0D值)，計算各濃度復孔OD值平均數(shù)，計算細胞抑制率。同上計算不飽和脂肪酸對體外腫瘤細胞生長抑制的IC50。(3)根據(jù)以上實驗結(jié)果，選擇對細胞無抑制作用的辛伐他汀(8 μΜ)和DHA (5 μδ/ml)濃度，進行下一步實驗。取對數(shù)生長期的細胞，實驗分為以下組別對照組，辛伐他汀組單用，DHA單用組，辛伐他汀+DHA組聯(lián)用組。鋪板后24小時，按不同組別的處理要求，分別加入不同藥物，培養(yǎng)48小時后，MTT方法檢測490 nm波長測各孔光吸收值(0D值)，計算各濃度復孔OD值平均數(shù)，計算細胞抑制率，作組間差異性比較。
實驗結(jié)果由附圖f 3可見，他汀類藥物及不飽和脂肪酸對乙型肝炎病毒感染的人肝癌細胞株ifepG2. 2. 15細胞生長均具有濃度依賴性的抑制作用，其中辛伐他汀、瑞舒伐他汀及阿伐他汀的IC50分別為32 μΜ、28 μΜ及48μΜ，不飽和脂肪酸ALA、EPA及DHA的IC50分別為4(^g/ml、2(^g/ml及25Pg/ml。辛伐他汀(8μΜ)與DHA(5Pg/ml)兩者聯(lián)用明顯增強了對細胞的抑制作用，與兩者單獨使用相比，具有顯著性差異，證明了兩者協(xié)同作用。
實施例6藥物對體外HBV感染肝癌細胞的HBV表面抗原表達的影響細胞系及培養(yǎng)條件轉(zhuǎn)染乙型肝炎病毒全基因組DNA的人肝癌細胞株H印G2. 2. 15，10%FBS的用高糖DMEM完全培養(yǎng)基，在37°C的5% C02飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對數(shù)生長期細胞接種于培養(yǎng)板，用于實驗。實驗分組及處理實驗分為空白對照組、他汀單用組(4μΜ瑞舒伐他汀他汀或阿伐 他汀)，EPA單用組(O. 5 Pg/ml )，他汀及EPA聯(lián)用組(瑞舒伐他汀或阿伐他汀+EPA)。鋪板后24小時，按不同組別的處理要求，分別加入不同藥物。每組設三個復孔，另設不加藥物的細胞為對照孔。實驗方法藥物處理24小時后、換液，加入含換液前相同藥物濃度的新鮮培養(yǎng)基，對照孔換不含藥的新鮮培養(yǎng)基。分別于換液后1、2、4、8、12及24小時，收集培養(yǎng)細胞的上清液，用乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)檢測。用酶標儀檢測各孔在波長450 nm 的 OD 值。實驗結(jié)果由附圖4結(jié)果可知，4 μΜ瑞舒伐他汀或阿伐他汀在作用25 48小時期間，對HBV的表面抗原表達均具有抑制作用。他汀類藥物與多不飽和脂肪酸EPA (0.5 μδ/ml)的聯(lián)用能顯著增強其抑制病毒抗原表達的作用，且具有統(tǒng)計學差異，證明了兩者協(xié)同作用。
實施例7藥物對HBV感染細胞的病毒分泌的影響。細胞系及培養(yǎng)條件轉(zhuǎn)染乙型肝炎病毒全基因組DNA的人肝癌細胞株H印G2. 2. 15，10%FBS的用高糖DMEM完全培養(yǎng)基，在37°C，5% C02，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對數(shù)生長期細胞接種于培養(yǎng)板，用于實驗。實驗分組及處理實驗分為空白對照組、他汀單用組(4 μΜ辛伐他汀或阿伐他汀)，DHA單用組(I Pg/ml)，他汀及DHA聯(lián)用組(辛伐他汀或阿伐他汀+ DHA)及。鋪板后24小時，按不同組別的處理要求，分別加入不同藥物。每組設三個復孔，另設不加藥物的細胞為對照孔。實驗方法藥物處理24小時后換液，對照孔換不含藥的新鮮培養(yǎng)基。分別于換液后I、2、4、8、14及24小時收集培養(yǎng)細胞的上清液。采用熒光定量PCR的方法檢測細胞上清液中HBV-DNA含量。實驗結(jié)果由附圖5結(jié)果可知，他汀類藥物(辛伐他汀、阿伐他汀)在作用f 24小時期間，對HBV病毒的核酸水平具有抑制作用。4 μΜ他汀類藥物與I Pg/ml多不飽和脂肪酸DHA聯(lián)用能顯著增強其抑制病毒抗原的作用，且具有統(tǒng)計學差異。
實施例8藥物對HBV感染所致急性肝炎模型小鼠的HBV病毒分泌的影響實驗動物SPF級雄性BALB/C小鼠，6周齡，體重為18 20 g，禁食過夜后稱體重、編號。實驗分組及處理動物分為陰性對照組、DHA組(O. 2 mg/kg)、辛伐他汀(7 mg/kg)、他汀及多不飽和脂肪酸聯(lián)用組(7 mg/kg辛伐他汀+0.2 mg/kg DHA)。臨用前將辛伐他汀用生理鹽水配制成混懸液，DHA用O. 3%吐溫80配制成混懸液。于造模后I小時開始灌胃給藥，每日一次，連續(xù)給藥四天。實驗方法
(O按照以下方法建立HBV感染所致小鼠急性肝炎模型。計算每只小鼠注射溶液的總量(小鼠體重X 8%)。取pT-MCS-HBV I. 3質(zhì)粒(10 μ g)，生理鹽水定容至注射體積；經(jīng)尾靜脈快速高壓注射將質(zhì)粒導入BALB/c小鼠。造模后72小時，眼球取血、常規(guī)分離血 清，-20°C儲存?zhèn)溆?；頸椎脫白處死小鼠、收集肝臟。常規(guī)石蠟包埋、切片，行HE染色，光鏡下400倍觀察肝組織病變情況，Image Pro-plus 5. O軟件采圖。(2 )采用熒光定量PCR的方法檢測血清HBV-DNA核酸水平。實驗結(jié)果
(1)由附圖6結(jié)果可知，7mg/kg辛伐他汀對HBV感染所致急性肝炎模型小鼠的HBV病毒分泌有非常明顯抑制作用；辛伐他汀與多不飽和脂肪酸DHA的聯(lián)用能顯著增強二者對HBV病毒分泌的抑制作用，且具有統(tǒng)計學差異。**P與對照組比較，##與單獨用藥組比較。
(2)小鼠急性肝炎模型組小鼠精神差，活動少，毛色黯淡，厭食，肝臟大體觀明顯淤血腫脹，顏色暗紅。由附圖7肝臟病理組織學檢查結(jié)果可知，生理鹽水對照組(A)小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝索排列整齊，中央靜脈未見充血，匯管區(qū)無擴大；模型組(B)可見肝細胞索破壞，肝竇稍增寬，內(nèi)有大量瘀血，肝細胞彌漫性腫脹，核固縮、溶解甚至消失，點、灶狀及片狀壞死多見。匯管區(qū)及中央靜脈肝竇內(nèi)可見中性粒細胞和淋巴細胞浸潤。(C)辛伐他汀單獨治療組及(D)辛伐他汀與不飽和脂肪酸聯(lián)用組都不同程度的改善了肝臟的病理變化，但聯(lián)用組治療效果明顯優(yōu)于辛伐他汀單獨使用組。(E)為不飽和脂肪酸DHA單獨使用組，病理改善效果不明顯。
應該理解，以上列舉實施例等，是為進一步詳細說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受這些實施例的限定，在不背離權(quán)利要求定義的本發(fā)明實質(zhì)或范圍的情況下可以有很多改進和變換方式。
權(quán)利要求
1.一種用于治療與乙型肝炎病毒感染相關疾病的藥物組合物，其特征在于包含治療有效量的他汀類藥物和多不飽和脂肪酸的組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其特征在于所述的他汀類藥物是指羥甲基戊二酰輔酶A (HMG-CoA)還原酶抑制劑，及其藥學上可接受的鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物，其特征在于所述的多不飽和脂肪酸為含有兩個或兩個以上雙鍵且碳鏈長度為18 22個碳原子的直鏈脂肪酸，及其酯類衍生物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于所述的多不飽和脂肪酸包括二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)、花生四烯酸(AA)中的一種或幾種；或包括富含多不飽和脂肪酸的深海魚油、海藻油、亞麻籽油、橄欖油、芥花籽油、玉米油、花生油中的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其特征在于其可加入藥劑學可接受的賦形劑制成藥學上可接受的各種藥物制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物制劑，其特征在于包括固體制劑或液體制劑或緩控釋制劑。
7.根據(jù)利要求I所述的組合物在制備治療乙型肝炎病毒感染所致的相關疾病的藥物中的應用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應用，其特征在于所述相關疾病包括乙型肝炎、肝癌、肝硬化坐寸ο
全文摘要
本發(fā)明提供一種治療乙型肝炎病毒感染組合物，包含治療有效量的他汀類藥物以及多不飽和脂肪酸類物質(zhì)。本發(fā)明的組合物可加入藥劑學允許的賦形劑制成藥學上可接受的各種藥物制劑。本發(fā)明組合物經(jīng)研究證實，能夠顯著降低乙肝病毒的分泌量及核酸水平，其效果比各組分單用效果更好，具有協(xié)同作用，能有效用于肝炎、肝癌、肝硬化等疾病的治療。
文檔編號A61K36/32GK102824636SQ201210290028
公開日2012年12月19日 申請日期2012年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月15日
發(fā)明者杜俊蓉, 曠喜, 陳雛 申請人:四川大學