專利名稱：紫莖澤蘭提取物在制備殺滅蜱的藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及紫莖澤蘭提取物在制備殺滅吸血昆蟲(蜱)的藥物中的應用。
背景技術：
蜱(Tick)是危害多種脊椎動物的一類吸血昆蟲，全世界已知蜱類有3科18屬897種，在我國已報道蜱類達2科、10屬、119種。蜱的各活動期都需要吸食宿主動物的血液。經蜱叮咬，宿主的皮膚組織受到破損，留下微小的傷口，有時引起皮炎，發生糜爛，出現潰瘍或繼發感染全身病癥，嚴重時會引起宿主動物死亡。家畜如被蜱類寄生，不僅皮毛易受損傷，而且還會使畜產品質量下降，影響畜產品產量，甚至引起家畜死亡。蜱類還可傳播病毒、衣原體、立克次體、細菌、螺旋體和原蟲等病原體。目前，已經證實森林腦炎(Forest-SpringEncephalitis)、克里米亞-剛果出血熱(Crimean-Congo hemorrhagic fever)、北亞蝶媒斑疫傷寒(Noah-Asian tick-borne typhus)、Q 熱(Q-fever)、人粒細胞無形體病(Human granulocytic anaplasmosis, HGA)、萊姆病(Lyme disease)、蝶媒回歸熱(tick-bornerelapsing fever)和巴貝蟲病(Babesiosis)等與吸血昆蟲(蝶)的傳播有關。目前，對感染家養動物進行噴灑化學殺蟲藥劑或定期用化學殺蟲藥劑藥浴殺蜱，在林區使用煙霧劑滅蜱等是較為常見的防蜱措施。但是，長期的、大量使用化學殺蜱藥物會帶來的嚴重的藥物殘留、環境危害等問題(Currie，2004; Terada. , 2010 ;Nong.，2012)。因此，開發有效的、低毒、環境友好型的替代藥物便成為當務之急。相比較于一些高效的化學類殺蜱藥物，植物源殺蜱劑具有在環境中可自行降解等特點(Mulla and Su, 1999; Panella et al. , 2005)。因此,越來越多的研究致力于開發植物源殺蜱藥物。紫莖澤蘭(Eupatorium adenophorum)在分類上屬紫堯目、菊科(Auld andMartins, 1975),為多年生草本植物，主要分布在中美洲、墨西哥等的熱帶與溫和地帶(Sun et al., 2004)。由于其傳播速度快，已經成為分布世界各地的農作物、自然環境和森林等的主要有害雜草。目前，作為一種有害的外來入侵雜草，至少對30個國家造成了環境與生態的危害，并且已經成中國最重要外來入侵物種(Sang et al. , 2010),已經廣泛分布于重慶、四川、貴州、云南、西藏、廣西、河北以及臺灣等并造成當地的生態危害(Zheng etal. , 2009, Ma et al.，2012)。紫莖澤蘭作為一種外來有害植物，給共生的其它植物帶來了非常大的災難(Zhu and Sang, 2008)。雖然，研究人員發現馬誤食了紫莖澤蘭葉子后，可造成中毒(Sullivan，1979)，紫莖澤蘭的提取物也能給實驗老鼠造成肝毒性(Kaushal et al. , 2001; Singh. , et al.,2012)。然而，紫莖澤蘭作為最引人關注的外來有害植物，目前正在被人類進行深入研究，而如何利用這一資源龐大的有害外來植物，變廢為寶是研究的熱點。近年來，人們開始認識到紫莖澤蘭作為植物源性農藥發展的潛力，并試圖采用利用與防除相結合的方法對這有害雜草進行控制。研究發現，紫莖澤蘭提取物中含有治療足癬具有較強活性的成分(Romero-Cerecero, 2008 ),具有殺滅釘螺的活性成分(ZouFC，2009)，紫莖澤蘭提取物還對蚜蟲(Lipathis erysimi )的角皮和觸角具有破壞作用(Dey et al.，2005)。同時，紫莖澤蘭的丙酮提取液對白菜蚜蟲、甘藍蚜防治效果比較好(Xu. , 2009)ο紫莖澤蘭葉的提取物有殺滅伊氏錐蟲(Trypanosoma evansi)作用(Shabaet al. , 2012)。研究還發現紫莖澤蘭的提取物對雞球蟲卵囊有殺滅作用(Yang et al.,2012)。但是，目前還沒有紫莖澤蘭殺滅吸血昆蟲(蜱類)的報導。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種紫莖澤蘭提取物在制備殺滅吸血昆蟲(蜱)的藥物中的應用。本發明的技術方案如下紫莖澤蘭提取物在制備殺滅吸血昆蟲(蜱)的藥物中的應用，結果表明，紫莖澤蘭乙醇提取物濃度為I. 0-1. 5 g/ml，對長角血蜱的幼蜱和若蜱殺滅效果良好，與毒死蜱的殺滅效果相當。本研究結果預示紫莖澤蘭具有殺滅吸血昆蟲(蜱)的活性成分，可以作為植物 源性中草藥加以開發利用。
具體實施例方式以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。I.材料與方法I. I紫莖澤蘭以及提取物紫莖澤蘭2010年11月采自中國西南四川省西昌市。紫莖澤蘭提取物采用水煎煮(F.macchioni.，2004)、乙醇熱回流以及水蒸懼(Khodadad.，2009)三種方法提取。乙醇熱回流提取物用蒸餾水和丙三醇(I: I)配制成不同濃度的藥液，其余兩種提取物用蒸餾水溶解并配成不同濃度的藥液。I. 2試驗用血蜱吸飽血后的長角血蜱采集自流行區家畜的體表，采集后，24小時內放到預先裝有細砂石和一張濾紙片的小廣口瓶內，廣口瓶用單層紗布和膠圈封住口部，防止血蜱爬出，定期觀察，待血蜱產卵后，收集孵出的幼蜱，將部分幼蜱自然感染實驗家兔并收集吸飽血的幼蜱，待長成若蜱后，收集并保存供實驗用。I. 3試驗設計參照Ribeiro (2010)等的方法，結合實驗實施的實際稍加改變。I. 3. I幼蜱的殺滅試驗用丙三醇和蒸餾水將紫莖澤蘭乙醇提取物配成不同濃度的藥液，其它提取物用蒸餾水配制。把2ml不同濃度的藥液滴加到平皿中(IOcmX 2cm)，放置裁好的濾紙片，在吸濕了藥液的濾紙片上放置10只幼蜱，用小型噴霧器向供試幼蜱噴灑藥液三次后，置于相對濕度為75%，溫度為25°C的培養箱中培養，設置6個重復。定時檢查，用針刺激幼蜱，沒有反應或較長時間靜止的判定為死亡。定期記錄死亡情況。1.3.2若蜱的殺滅試驗精心挑選I只健康家兔，在其左耳和右耳中各感染約200只饑餓幼蜱，然后在其兩耳的外耳處套上用紗布自制的收集吸飽血的幼蜱的外耳套，收集吸飽血的幼蜱，每三個小時收集一次，直接到收集完。待飽血的幼蜱蛻皮后即發育為若蜱，若蜱的體外殺滅試驗與幼蜱的殺滅方法相同。幼蜱與若蜱的殺滅試驗均以毒死蜱以及丙三醇作為陽性以及陰性空白對照組。I. 4數據統計數據統計采用SAS軟件進行分析(SAS Institute, 2002)。主要統計分析用藥前后不同濃度的紫莖澤蘭提取物組、毒死蜱陽性對照組以及空白對照組的殺滅效果是否存在
差異等。2.結果與討論紫莖澤蘭不同提取方法的提取物對幼蜱與若蜱均有一定的殺滅效果，其中5小時 內較高濃度的乙醇提取物能100%殺滅幼蜱與若蜱。紫莖澤蘭乙醇提取物的不同濃度在不同時間內殺滅供試幼蜱與若蜱的效力差異比較大(表I、表2)。從結果可以看出，乙醇提取物最佳濃度為lg/ml到1.5g/ml之間。表I紫莖澤蘭乙醇提取物不同濃度殺滅幼蜱效果
權利要求
1.紫莖澤蘭提取物在制備殺滅蜱的藥物中的應用。
2.根據權利要求I所述的應用，其特征在于，紫莖澤蘭こ醇提取物濃度為I.0-1. 5 g/ml，對長角血蜱的幼蜱和若蜱殺滅效果良好，與毒 死蜱的殺滅效果相當。
全文摘要
本發明公開了紫莖澤蘭提取物在制備殺滅吸血昆蟲(蜱)的藥物中的應用，結果表明，紫莖澤蘭乙醇提取物濃度為1.0-1.5 g/ml，對長角血蜱的幼蜱和若蜱殺滅效果良好，與毒死蜱的殺滅效果相當。本研究結果預示紫莖澤蘭具有殺滅吸血昆蟲(蜱)的活性成分，可以作為植物源性中草藥加以開發利用。
文檔編號A61P33/14GK102861118SQ201210353228
公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月21日 優先權日2012年9月21日
發明者楊光友, 農向, 彭雪蓉, 古小彬 申請人:四川農業大學