專利名稱：疏水修飾的聚乙烯亞胺及其作為蛋白質載體的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種疏水修飾的聚乙烯亞胺及其作為蛋白質載體的用途。
背景技術：
治療性疫苗旨在打破機體的免疫耐受，提高機體的免疫應答。其作用機理是通過改善和增強對疫苗靶抗原的攝入、表達、處理、呈遞和激活免疫應答，從根本上重新喚起機體對靶抗原的免疫應答能力。它能在已患病個體誘導特異性免疫應答，清除病原體或異常細胞，使疾病得以治愈。作為一種新興的以治療為目的的疫苗，有廣闊的發展前景，尤其是在腫瘤治療方面。但目前以蛋白質抗原為基礎的腫瘤疫苗的療效有限，其中一個重要原因是其誘導產生的免疫反應為體液免疫即以抗體反應為主的免疫反應,而能夠對腫瘤細胞起到殺傷作用的免疫反應是抗原特異性激活的細胞毒性T淋巴細胞免疫反應。因此，控制抗原在抗原提呈細胞(APCs)內部的處理過程和使其通過MHC-1途徑進行抗原提呈是激活細胞毒性T淋巴細胞的關鍵，從而達到抗腫瘤效果。提高抗原交叉提呈反應效率對于提高治療性抗原效用是非常重要的。聚乙烯亞胺(polyethy lenimine, PEI)是最常用的陽離子多聚物非病毒基因載體，PEI可把質粒DNA縮合(condense)成數百納米大小的顆粒,通過靜電作用吸附到細胞表面上，使其被細胞內吞。PEI在內吞體中保護DNA，減少其被酶降解。而且，PEI有質子海綿效應，導致內吞體破裂，使DNA進入胞漿，并促進DNA進入細胞核。 利用抗原蛋白在一定條件下帶負電的特點，陳劍等人設計了一種基于PEI25K的新型抗原載體輸送系統，帶負電的蛋白質和帶正電的PEI25K以靜電作用結合形成納米粒(參見文獻 Jian Chen et al.1nt. J. Nanomedicine. 2011,6, 77-84)。研究表明，以 PEI 為基礎制備的納米粒子可以有效提高抗原交叉提呈反應，具有成為治療性腫瘤疫苗的納米載體系統的潛力。但PEI25K的細胞毒性大，限制了其進一步發展的空間。小分子量的PEI毒性明顯低于PEI25K，但其作為基因載體，細胞轉染作用較弱，應用較少(參見文獻Bajay A. et al. Bioconjugate Chem. 2007，18，1537-1546.)。作為蛋白抗原載體，同樣由于分子量小，結合蛋白能力弱，無法形成納米粒。將小分子PEI進行疏水化修飾能夠增強其與蛋白相互作用，同時維持低毒性。
發明內容
本發明的目的在于克服上述現有技術存在的不足，提供一種疏水修飾的聚乙烯亞胺及其作為蛋白質載體的用途。由于PEI的細胞毒性與其相對分子質量呈正相關，故本發明合成的聚乙烯亞胺均采用相對分子量較小的PEI作為材料，同時在小分子量PEI上鍵合了兩條碳鏈，使得PEI的親脂性增強，更有利于載體系統穿過細胞膜進入細胞。該疏水修飾的聚乙烯亞胺在提高抗原交叉提呈效果的同時，顯著降低了細胞毒性，有助于提高免疫治療效果。本發明的目的是通過以下的技術方案來實現的第一方面，本發明涉及一種疏水修飾的聚乙烯亞胺，其結構通式如式(I )所示
權利要求
1.一種疏水修飾的聚乙烯亞胺，其特征在于，其結構通式如式(I )所示
2.如權利要求1所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺，其特征在于，所述η為7 15中的任一自然數。
3.—種如權利要求1所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺的合成方法，其特征在于，包括如下步驟 Α、將聚乙烯亞胺
4.如權利要求3所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺的合成方法，其特征在于，所述聚乙烯
5.如權利要求3所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺的合成方法，其特征在于，所述有機溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、四氫呋喃、甲醇、乙醇、丙醇或乙腈。
6.一種如權利要求1所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺作為蛋白質載體的用途，其特征在于，所述疏水修飾的聚乙烯亞胺與蛋白質復合形成穩定的納米粒子。
7.如權利要求6所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺作為蛋白質載體的用途，其特征是，所述疏水修飾的聚乙烯亞胺結構式中的η為11。
8.如權利要求6所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺作為蛋白質載體的用途，其特征是，所述蛋白質為帶負電的蛋白質。
9.如權利要求6所述的疏水修飾的聚乙烯亞胺作為蛋白質載體的用途，其特征是，所述蛋白質為腫瘤抗原或病毒抗原。
全文摘要
本發明公開了一種疏水修飾的聚乙烯亞胺及其作為蛋白質載體的用途。該疏水修飾的聚乙烯亞胺的結構通式如下式所示其中，n為5～20中的任一自然數，X為Cl、Br或I。該疏水修飾的聚乙烯亞胺可與蛋白質復合形成穩定的納米粒子，因此可作為蛋白質載體。與現有技術相比，本發明制備的疏水修飾的聚乙烯亞胺具有較強的蛋白質結合力，可以攜帶抗原蛋白被抗原提呈細胞識別并引起免疫反應；同時，該疏水修飾的聚乙烯亞胺在提高抗原交叉提呈效果的同時，顯著降低了細胞毒性，有助于提高免疫治療效果，是一種優良的治療性腫瘤疫苗的納米載體系統。
文檔編號A61K39/12GK103059295SQ20121036506
公開日2013年4月24日 申請日期2012年9月26日 優先權日2012年9月26日
發明者陳劍, 王輝, 徐宇虹, 盛瑞隆, 曹阿民 申請人:上海交通大學, 中國科學院上海有機化學研究所