專利名稱：：新穎乳桿菌及其組合物和在制備改善糖尿病及其并發癥藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及新穎乳桿菌及其組合物，以及該新穎乳桿菌和組合物在制備改善糖尿病相關癥狀及其并發癥藥物中的應用。
背景技術：
：糖尿病(DiabetesMellitus)是一種多病因性的代謝疾病，是由于胰島素分泌或作用產生缺陷而引起廣泛性代謝障礙，所引起的疾病。糖尿病是以持續性慢性高血糖為主要特征的疾病，且亦會造成體內蛋白質、脂肪、水、電解質等代謝失調。臨床上將糖尿病主要分成二類第一型膜島素依賴型糖尿病(Insulin-dependentdiabeticmellitus,IDDM),一般發作年齡為30歲以下者居多，因此過去曾稱為"青幼年發病型糖尿病"，事實上任何年齡皆可能發生。第一型糖尿病是一種自身免疫系統對胰臟蘭氏小島(IsletofLangerhans)的β細胞進行攻擊破壞的自體免疫疾病(AutoimmuneDisease)。原因與個人的基因遺傳、環境因素中的病毒感染、或毒性物質破壞胰臟的β細胞、及自體免疫形成抗β細胞的抗體、及細胞免疫作用攻擊β細胞有關。最后導致患者的胰臟無法正常分泌胰島素，而極易發生酮酸血癥，因此需注射胰島素來治療。第二型非膜島素依賴型糖尿病(non-insulindependentdiabeticmellitus,NIDDM)，大多發生于40歲以后，患者多為體型較肥胖者，過去稱為"成年型糖尿病"，但亦可能發生于年輕人，以家族型發病較為常見，此類型糖尿病在臺灣占糖尿病總人口數的95%以上。此類型糖尿病是由于胰島素分泌缺陷,及胰島素抗阻性(insulinresistance)所引起的；雖有部分患者胰島素的分泌減少，但大多數患者分泌胰島素的能力尚可，因此，大多靠飲食控制及口服降血糖藥物控制血糖，而不需立即注射胰島素治療。此外，患者大多會伴隨胰島素抗阻性(insulinresistance)的癥狀。胰島素抗阻性的形成主要是因胰臟蘭氏小島的β細胞過度地分泌胰島素(hyperinsulinamia)，造成骨骼肌、脂肪組織及肝臟等周邊組織對胰島素的敏感性(insulinsensitivity)降低。因而減低了組織對葡萄糖的利用率，而造成高血糖的現象。此類型病程進展緩慢，因此，早期并無典型糖尿病癥狀，不易察覺。但常伴隨糖尿病性大血管(如心肌梗塞、腦中風)、小血管(如腎臟、眼網膜及神經病變)等慢性并發癥。此外，在第二型糖尿病病患身上經常伴隨著脂質代謝異常的情況，如血漿中三酸甘油酯(triglyceride，TG)濃度上升、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)濃度下降以及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)濃度上升。這些癥狀會導致第二型糖尿病患者心血管疾病的風險。另，根據研究指出，嚴重糖尿病患者的肝臟血脂值清除能力會下降。當肝臟中三酸甘油脂以及低密度脂蛋白膽固醇不斷累積后，肝細胞便會發生病變形成非酒精性脂肪肝進而嚴重影響肝功能。目前用于治療糖尿病的方式，除可施予胰島素外，另分為非藥物治療與藥物治療兩種。在非藥物治療方面，主要是通過飲食調控和運動的方式來加以治療。而在藥物治療方面，主要目的是使不足的胰島素上升、調降進食后的高血糖和改善胰島素抗阻性等。目前用于治療糖尿病的藥物可分為(I)磺酰尿素類(Sulfonylurea):此類藥物主要作用機制為促進胰臟胰島素的分泌，特別是加強胰臟β細胞對葡萄糖刺激而釋放胰島素的作用；常用的磺酰尿素類降血糖藥物為佑爾康(glibenclamide,商品名:euglucon),克卩比噻(glipizide,商品名minidiab)及δ蜜克龍(gliclazide,商品名diamicron)。然而,此類藥物除了已發現的副作用，諸如皮疹、搔癢外，其施用對象亦有其局限，如有嚴重的肝、腎功能障礙者、孕婦及哺乳者、對磺酰尿素類藥物出現嚴重過敏者均不宜使用這類降血糖藥物。(2)α-葡萄糖苷酶(a-Glucosidase)抑制劑此類藥物主要作用機制為抑制胰臟ct-淀粉酶(a-amylase)及腸內α_葡萄糖苷酶(a-glucosidase)的活性,進而抑制碳水化合物在腸道的分解及吸收，此類藥物能有效的降低飯后血糖及胰島素濃度，但副作用為腹脹或偶而腹瀉、腹痛及嘔心。(3)噻唑燒二酮類(Thiazolidinedione)衍生物此類藥物主要作用為增加細胞核內過氧化小體增生活化受體_Y(peroxisomeproliferator-activatedreceptor(PPAR)-gamma)的活性，進而加強了胰島素的作用，使細胞內葡萄糖轉移蛋白GLUT2及GLUT4增加，將葡萄糖運送至細胞內利用。臨床上常使用曲格列酮(tiOglitazone，商品名rezulin)、羅格列酮(rosiglitazone,商品名avandia)、皮利酮(pioglitazone,商品名actos)等；不過，值得注意的是曲格列酮(troglitazone)曾引起致命的肝毒性，因此，在英國上市(1997年10月)后二個月就被禁止使用。此外，噻唑烷二酮類(Thiazolidinedione)衍生物也遭美國下令全面回收及禁用。(4)雙胍類(Biguanides):雙胍類藥物為胍(guanidine)的衍生物，目前,雙胍類降血糖藥物多以metformin為主。此類藥物本身不會刺激胰島素的分泌,其控制血糖作用機制為以下五點a.抑制食欲，因此優先使用于肥胖的第二型糖尿病人身上，使其進食減少、體重下降而改善胰島素的作用、b.延緩腸道吸收葡萄糖、c.促進葡萄糖在腸道的厭氧性分解作用，進而增加葡萄糖在腸道中的利用，但可能會產生過多的乳酸鹽(lactate)，易造成乳酸中毒、d.加強胰島素在肝臟的作用，因此抑制肝臟的葡萄糖新生作用，減少葡萄糖從肝臟釋出、e.促使貯藏于細胞內的葡萄糖轉移蛋白GLUT4到細胞表面來參與輸送工作，使細胞表面的葡萄糖轉移蛋白量顯著增加。此外，這類降血糖藥物的副作用，如初服可能有腸胃道的不適，如厭食，惡心、嘔吐或腹瀉等，少數人可能出現皮疹，且長期使用后均可能會有失活的現象發生。乳桿菌用途甚廣，除可用于制備發酵食品外，許多研究亦發現乳桿菌具有多種有益的功能，諸如1.分泌各種分解酵素，幫助食物分解，提高營養價值、2.分解乳糖，改善乳糖不耐癥、3.分泌維生素B群、4.維持腸道內正常微生物菌相，抑制有害菌作用、5.改善腹瀉或便秘、6.增強免疫系統功能、7.改善肝功能，減低肝的損傷、8.降低血膽固醇、9.具抗癌性及抗致突變性等功能。由于乳桿菌對于宿主有許多有益的功效，因此，乳桿菌對于改善慢性疾病的功能方面也越來越多研究被報導，而糖尿病也是其中之一。此外，用乳桿菌喂食大鼠可以延緩改善糖尿病的發生。現今一些文獻或專利中指出喂食糖尿病老鼠乳桿菌可有效的預防糖尿病以及降低血糖的濃度。但是目前已發表有關于乳酸菌改善糖尿病的文獻或專利內容中，也僅局限于控制血糖值、體重、血中脂值以及膽固醇濃度。對于其他糖尿病所可能引發的并發癥，如體內的發炎反應以及肝臟功能衰退，沒有更進一步的改善作用。
發明內容本發明發明人鑒于糖尿病是需要病患配合、且長期治療及控制的慢性疾病，且現今糖尿病藥物的多種副作用及使用限制。因此，本案申請人希望能利用本土性的乳桿菌菌株，開發出改善糖尿病癥狀的產品，可在日常生活中供一般使用者或糖尿病患者使用，除由于乳桿菌本身多種有益功能、無副作用外，更可供一般使用者或患者同時改善、控制、治療或預防聞血糖、聞膽固醇等糖尿病相關的癥狀及可能的并發癥。本發明的目的即在于提供一種用于改善糖尿病癥狀的組合物，包含有選自于一已知菌種羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89,及二株新穎菌種加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL_205、及羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263中的至少一種乳桿菌。本發明的次一目的在于提供新的乳桿菌，該新菌株分別經與已知相對所屬菌種的關系具有明顯差異，為二株新穎乳桿菌。本發明的另一目的在于提供一株已知乳桿菌，及二株新穎乳桿菌的新用途，這些分離株可供罹患糖尿病的對象使用，用以改善其糖尿病癥狀及其并發癥。本發明的再一目的在于提供一種用于改善糖尿病癥狀及其并發癥的組合物的應用，該類應用包含食品、飲品、健康食品、添加物、醫療組合物等日常生活易于使用的形式，以供一般服用者、或慢性病糖尿病患，可易于長期服用，以達日常保健、或病情控制之效。為實現上述目的，本發明采用了以下技術方案一種用于改善糖尿病癥狀及其并發癥的組合物，包含有效量的選自羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89、加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205或羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263中的至少一種乳桿菌,及藥學上可接受的載體。羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89,其保藏編號為CCTCCNOM207154;加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205;加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205的保藏編號為CCTCCNOM209262;及羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263的保藏編號為CCTCCNO:M209263。其中該加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205>及羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263經中國典型培養物保藏中心進行細菌學名鑒定,及基因圖譜分析后，確認為二株新穎的乳桿菌。將本發明所篩選到的新穎乳桿菌及已知的羅伊氏乳桿菌(LactobaciIIusreuteri)GMNL-89菌株，分別進行糖尿病動物模式分析，以評估該些乳桿菌分離株是否具有改善糖尿病癥狀及其并發癥的功效。結果顯示，本發明所提供的三株乳桿菌分離株，均可改善患有糖尿病對象體內的高血糖值、高血糖值變化量、高糖化血紅素比例、高總膽固醇濃度、高LDL/HDL比例、高IFN-Y量、高肝臟三酸甘油脂質濃度及高肝臟膽固醇濃度等糖尿病癥狀，進而改善糖尿病及其相關并發癥。本發明所篩選到的新穎乳桿菌及已知的羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89菌株，除了有血糖值、血中脂肪以及膽固醇的改善效果之外，對于血中糖化血色素、血液中發炎細胞激素以及肝臟中脂值和肝功能指標GOT、GPT均有更進一步的改善效果。現有臨床上治療糖尿病的藥物副作用均非常的大。相反的，乳桿菌則是安全無虞的益生菌(GenerallyRecognizedAsSafe,GRAS)。因此,利用乳桿菌開發成改善糖尿病的產品，是最自然健康的方法。本發明的羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89,其保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC，地址在武漢大學)，保藏日期為2007年11月19日，保藏編號為CCTCCNOM207154o本發明的加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL_205,其保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC，地址在武漢大學)，保藏日期為2009年11月13日，保藏編號為CCTCCNO:M209262;本發明的羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263，其保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC，地址在武漢大學)，保藏日期為2009年11月13日，保藏編號為CCTCCNOM209263o請參閱以下有關本發明較佳實施例的詳細說明及其附圖，將可進一步了解本發明的技術內容及其目的功效；有關該實施例的附圖為圖I為加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205在顯微鏡下的形態圖；圖2為加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205的基因圖譜；其中M代表分子標記(MolecularMarker),分別以箭頭指出各片段的分子量大小(bp)；圖3為羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263在顯微鏡下的形態圖；圖4為羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263及GMNL-89的基因圖譜；其中M代表分子標記(MolecularMarker),分別以箭頭指出各片段的分子量大小(bp)；圖5A為各組糖尿病大鼠每周體重紀錄結果；圖5B為各組糖尿病大鼠的脾臟重量測量結果；圖5C為各組糖尿病大鼠的肝臟重量測量結果；圖為各組糖尿病大鼠的腎臟重量測量結果；圖6A為各組糖尿病大鼠的每日血糖值紀錄結果；圖6B為各組糖尿病大鼠的血糖變化量分析結果，*表示數據與安慰劑組相比，具統計意義(P<0.05)；圖7A為各組糖尿病大鼠的糖化血紅素(HbAlc)測量結果；圖7B為各組糖尿病大鼠的總膽固醇濃度測量結果；圖7C為各組糖尿病大鼠的LDL/HDL比例測量分析結果，*表示數據與安慰劑組相比，具統計意義(P<0.05)；圖8為各組糖尿病大鼠血清中發炎相關細胞激素IFN-Y濃度測量結果，*表示數據與安慰劑組相比，具統計意義(P<0.05)；圖9A為各組糖尿病大鼠的肝臟三酸甘油脂(livertriglyceride)測量結果；圖9B為各組糖尿病大鼠的肝臟膽固醇(livercholesterol)測量結果，*表示數據與安慰劑組相比，具統計意義(P<0.05)。具體實施例方式本說明書中所述的所有技術性及科學術語，除非另外有所定義，皆為該所屬領域具有通常技藝者可共同了解的意義。本發明提供一種用于改善糖尿病癥狀的組合物，其包含有效量的至少一種選自于羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89、加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205或羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263的乳桿菌，及藥學上可接受的載體。其中該羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89為一種公開的菌種(該菌種的特征及寄存資料已公開于中華民國專利申請案"具有抗發炎活性的乳桿菌分離株及其用途"，其公開號為200944215)。本發明發明人通過糖尿病動物模式，發現其具有改善糖尿病癥狀的新用途或功能。其中該加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-205>及羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263為本發明發明人所新發現的新的乳桿菌,經比對后該二株菌分別與各自所屬物種中已公開的菌株不同，且經分析，該二分離株具有改善糖尿病癥狀及其并發癥的新用途或功能。前述三株乳桿菌，通過糖尿病動物模式分析，發現可有效改善、降低、控制、治療及預防患有糖尿病的對象體內的高血糖值、高血糖值變化量、高糖化血紅素比例、高總膽固醇濃度、高LDL/HDL比例、高IFN-Y量、高肝臟三酸甘油脂質濃度及高肝臟膽固醇濃度，進而改善其病情及其相關并發癥。其中該乳桿菌還包含其繼代培養的后代，或突變株，但仍與本發明所述的菌種特性、基因體(genomic)、或用途(用于改善糖尿病癥狀)相同。本發明所述組合物可包含，但不限于食品、飲品、健康食品、動物飲水添加物、動物飼料添加物、動物用及人類用醫療組合物、食品添加物、飲料添加物等適用本發明的應用形式。術語“改善”意思是，相較于未使用本發明的乳桿菌、或含其組合物者，使用本發明的乳桿菌、或含其組合物者，將可有效減緩、降低、控制、治療或預防糖尿病癥狀及其相關并發癥。術語“糖尿病癥狀”,包含但不限于罹患有糖尿病的患者體內呈現高血糖值、高血糖值變化量、高糖化血紅素比例、高總膽固醇濃度、高LDL/HDL比例、高IFN-Y量、高肝臟三酸甘油脂質濃度及高肝臟膽固醇濃度等糖尿病癥狀。術語“有效量”意思為可有效改善、治療、減弱或消除疾病(如糖尿病)的一個或多個癥狀的活性成分有效量，或可稱“治療有效量”或“改善有效量”。術語"藥學上可接受"意思為物質或組合物必須與調配物的其他成份相容，且對患者無害。術語“糖尿病相關并發癥”，包含但不限于糖尿病性神經病(包含但不限于膀胱無力、腹脹、便秘、瀉肚、陽萎、對冷熱感覺差)、腎疾病(包含但不限于絲球體性腎炎、腎小球硬化癥、腎病征候群、高血壓性腎硬化、腎疾病末期、尿毒癥)、發炎反應、心血管或膽固醇過高并發癥(包含但不限于腦中風、心肌梗塞、冠狀動脈栓塞、心絞痛、心衰竭、心律不穩、末梢血液循環不良、足部感染等)、眼疾(視網膜病變、白內障、青光眼、弱視(視力衰弱))、肝臟疾病(包含但不限于肝臟纖維化、脂肪肝、非酒精性脂肪肝、及肝硬化)。本發明的組合物可利用熟習此技術的人所詳知的技術，將上述的乳桿菌，與藥學上可接受的載劑(pharmaceuticallyacceptablevehicle)，制備成適用本發明組合物的劑型。其中該劑型包含但不限于溶液(solution)、乳劑(emulsion)、懸浮液(suspension)、粉末(powder)、錠劑(tablet)、丸劑(pill)、口含錠(lozenge)、片劑(troche)、口嚼膠(chewinggum)、膠囊(slurry)以及其他類似或適用本發明的劑型。其中該藥學上可接受的載劑可包含一種或多種選自于下列的試劑溶劑(solvent)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspendingagent)、分解劑(decomposer)、黏結劑(bindingagent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizingagent)、螯合劑(chelatingagent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gellingagent)、防腐劑(preservative)、潤滑劑(lubricant)、表面活性劑(surfactant)，及其他類似或適用本發明的載劑。上述組合物中，亦可視需要適宜地添加一種或多種以上制劑領域內通常使用的溶解補助劑、緩沖劑、保存劑、著色劑、香料、風味劑等。另一較佳實施例中，本發明所提供的前述組合物，可進一步添加可食性材料，以制備為一種食品產品或保健產品。其中該可食性材料包含，但不限于水(water)、流體乳品(fluidmilkproducts)、牛奶(milk)、濃縮牛奶(concentratedmilk);發酵乳品(fermentedmilk)，諸如優酪乳(yogurt)、酸乳(sourmilk)、冷凍優格(frozenyogurt)、乳桿菌發酵飲料(lacticacidbacteria-fermentedbeverages);奶粉(milkpowder);冰湛淋(icecream);乳酷(creamcheeses);干酷(drycheeses);顯奶(soybeanmilk);發酵豆奶(fermentedsoybeanmilk);蔬果汁(vegetabIe-fruitjuices);果汁(juices)；運動飲料(sportsdrinks);甜點(confectionery);果凍(jellys);糖果(candies);嬰兒食品(infantformulas);健康食品(healthfoods);動物飼料(animalfeeds);中草藥材(Chineseherbals);膳食補充品(dietarysupplements)等。此外，本發明所發現的新穎菌種，亦可與其他現有菌種一并被包含于組成物中。其中該組合物，可進一步包含至少一種選自于下列群組中的現有益生菌乳桿菌屬物種(lactobacillussp.)、鏈球菌屬物種(Streptococcussp.)、雙歧桿菌屬物種(Bifidobacteriumsp·)、酵母菌(yeasts)。其中該現有乳桿菌屬物種(lactobacillussp.)包含但不限于乳酸乳桿菌(lactobacilluslactis)、嗜酸乳桿菌(lactobacillusacidophilus)、瑞士乳桿菌(lactobacillushelveticus)、雙岐乳桿菌(lactobacillusbifidus)、乳酪乳桿菌(lactobacilluscasei)、副乳酷乳桿菌副乳酷亞種(Lactobacillusparacaseisubsp.paracasei)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)、加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)、羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)、發酵乳桿菌(Lactobacillusfermentum)、或其組合。其中該現有鏈球菌屬物種(Streptococcussp.)包含但不限于乳酸鏈球菌(Streptococcuslactis)、嗜熱鏈球菌(Streptococcusthermophilus)、乳酪鏈球菌(Streptococcuscremoris)、或其組合。其中該現有雙叉桿菌屬物種(Bifidobacteriumsp.)包含但不限于短型雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve)、乳酸雙歧桿菌(Bifidobacteriumlactis)、長型雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)、兩歧雙歧桿菌(Bifidobacteriumbifidum)、或其組合。其中該現有酵母菌(yeasts)包含但不限于啤酒酵母菌(Saccharomycescereviseae)、乳酒假絲酵母菌(Candidakefyr)、弗羅種酵母菌(Saccharomycesflorentinus)、或其組合。此外，本發明還提供一種用于改善糖尿病癥狀及其并發癥的方法，系將有效量的前述組合物供患有糖尿病的對象使用，用以改善及降低其體內的高血糖值、血糖值變化量、糖化血紅素比例、總膽固醇濃度、LDL/HDL比例、IFN-Y量、高肝臟三酸甘油脂質濃度、高肝臟膽固醇濃度以及肝功能指標G0T、GPT，進而改善糖尿病及相關并發癥。另，本發明亦提供前述乳桿菌用于制備改善糖尿病癥狀及其并發癥組合物的方法或用途。本發明所提供的組合物及其用于改善糖尿病癥狀及其并發癥的方法，其投藥路徑，可視需求適宜調整，并未特別限定，較佳者為經口投予適用劑型。本發明以下面的實施例予以示范闡明，但本發明不受下述實施例所限制。本發明所用的藥物、生物材料皆市售易于取得，下列僅為示例可取得的渠道。實施例I菌株挑選本發明發明人由醫院提供的健康成人的胃腸道檢體中，分離百余株分離株，以建立分離株菌種庫。從菌種庫中挑選可調節免疫系統分泌高濃度的IL-IO及IFN-Y的三株乳桿菌，挑選分析結果的前三名乳桿菌以進行糖尿病動物模式分析。該三株乳桿菌的寄存編號、寄存日期及菌株名稱，如表I所示；其中羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-89為公開的菌種，其菌株特征、寄存證明、存活試驗報告等證明文件正本及相關資訊，已包含于中華民國專利申請案(申請號97115882;公開號200944215)中；其中GMNL-205及GMNL-263為本發明新分離出的新乳桿菌。下以實施例2、3分述該二株乳桿菌的菌株特征、API鑒定系統分析、16SrDNA分析、基因圖譜分析。表I本發明的乳桿菌的寄存編號及寄存日期菌株名稱寄存編號寄存曰期羅伊氏乳桿菌GMNL-X9C'Cl'CC'NO:2007年丨I月199(LmIohmUIusreiUvrt)M207154加氏乳桿霤GMNL-2(WCCTCX'NO:2009年Il月13B(LmIahmHim^ms'eri)M209262羅伊氏乳桿菌GMNL-263(—'(NO:2009年Il月13S(Lat-Uihat,Himnmieri)M209263實施例2加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)GMNL-2052-1.加氏乳桿菌GMNL-205菌株的學名鑒定將分離株GMNL-205委托中國典型培養物保藏中心進行細菌學名鑒定，分述如下分離株GMNL-205背景資料分離源人體腸胃道培養基MRS培養溫度37°C病原性無請參閱圖I及表2所示，分析結果顯示分離株GMNL-205為革蘭氏陽性桿菌，不具觸酶、氧化酶及運動性，于好氧環境及厭氧環境下皆會生長。另，分離株GMNL-205的16SrDNA部分序列如SEQIDN0:1所示，根據16SrDNA分析，分離株GMNL-205與Lactobacillusgasseri、Lactobacillustaiwanensis及Lactobacillusjohnsonii較相似，相似度高達99%以上。再通過API鑒定系統分析(表2)，分離株GMNL-205最接近加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)。因此，綜合上述結果顯不，分離株GMNL-205為加氏乳桿菌(Lactobacillusgasseri)。表2分離株GMNL-205的API鑒定分析結果權利要求1.一種用于改善糖尿病癥狀及其并發癥的組合物，其特征在于，所述組合物包括有效量的羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263及藥學上可接受的載體,所述羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263的保藏編號為CCTCCNO:M209263。2.如權利要求I所述的組合物,其特征在于,所述糖尿病指標包含高血糖值、高血糖值變化量、高糖化血紅素比例、高總膽固醇濃度、高LDL/HDL比例、高IFN-Y量、高肝臟三酸甘油脂質濃度、高肝臟膽固醇濃度以及高GOT值、高GPT值。3.如權利要求I所述的組合物，其特征在于，還包括選自于下列益生菌中的至少一種乳桿菌屬物種(lactobacillussp.)、雙歧桿菌屬物種(Bifidobacteriumsp.)、鏈球菌屬物種(Streptococcussp.)和酵母菌(yeasts)。4.如權利要求I所述的組合物，其特征在于，還包含可食性材料，該可食性材料包括水、流體乳品、優酪乳、酸乳、冷凍優格、乳桿菌發酵飲料、奶粉、冰淇淋、乳酪、干酪、豆奶、果汁、運動飲料、甜點、果凍、糖果、嬰兒食品、健康食品、動物飼料、中草藥材或膳食補充品的一種或幾種。5.如權利要求4所述的組合物，其特征在于，所述液體乳品為牛奶。6.如權利要求4所述的組合物，其特征在于，所述液體乳品為濃縮牛奶。7.如權利要求4所述的組合物，其特征在于，所述豆奶為發酵豆奶。8.如權利要求4所述的組合物，其特征在于，所述果汁為蔬果汁。9.一種新的乳桿菌，其特征在于，所述乳桿菌為羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)GMNL-263，其保存于中國典型培養物保藏中心，保存編號為CCTCCNO:M209263。10.權利要求9所述的乳桿菌在制備改善糖尿病及其并發癥藥物中的應用。全文摘要本發明公開了新穎乳桿菌、及其組合物以及在改善糖尿病癥狀及其并發癥方面的用途，組合物包含有效量的選自于羅伊氏乳桿菌GMNL-89、加氏乳桿菌GMNL-205、及羅伊氏乳桿菌GMNL-263中的至少一種乳桿菌，及藥學上可接受的載體。其中加氏乳桿菌GMNL-205、及羅伊氏乳桿菌GMNL-263為新穎乳桿菌。本發明的組合物或新穎乳桿菌具有用于改善糖尿病癥狀及其并發癥的新穎用途。文檔編號A61K36/064GK102935092SQ201210404018公開日2013年2月20日申請日期2010年6月9日優先權日2010年6月9日發明者呂英震,謝豐欽申請人:景岳生物科技股份有限公司