專利名稱：一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法
技術領域：
本發明涉及紫杉黃酮的提取技術，具體涉及一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法。
背景技術：
紅豆杉葉中含有紫杉醇、紫杉黃酮和紅豆杉多糖等藥效成份，紫杉黃酮含有共同的母核C6-C3-C6結構，具有調節心臟血管系統作用、抗炎及抗免疫作用、抗微生物作用、對消化性潰瘍的作用和抗腫瘤作用等。授權號為ZL200910157034.0的中國發明專利公開了一種南方紅豆杉葉片的提取物及提取方法，提取方法包括葉片烘干、粉碎過篩、浸入乙醇溶齊IJ、攪拌下超聲提取、提取液減壓濃縮去醇、氯仿萃取脫脂、水相濃縮干燥步驟，得到紫杉黃酮的混合物，該紫杉黃酮的混合物紫杉黃酮的重量含量為65 70 %，該紫杉黃酮的混合物主要成份包括蘆丁 -3-0-槲皮素、蘆丁 -3-0-山奈酚、蘆丁 -3-0-楊梅酮、山奈酚-7-0-葡萄糖和葡萄糖-7-0-槲皮素等。該提取方法提取復雜，紫杉黃酮的純度較低，不超過70 %。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，該方法提取的紫杉黃酮純度較高，不低于75%。本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為:一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，其步驟如下:
1、將新鮮的南方紅豆杉葉片在50°c溫度下烘干24h，粉碎，過8號篩為粉料，裝入超臨界萃取釜中；
2、超臨界萃取釜中，在萃取溫度為20 40°C，CO2流體壓力為20 40MPa，夾帶劑乙醇流速0.10 0.40 ml/min下,萃取I 3 h,萃取得到萃取物；
3、在萃取物中添加甲醇吸收為吸收液，所述甲醇的添加量為上述粉料2g的萃取物中添加甲醇1ml，吸收液用AB-8樹脂層析，然后用質量百分濃度為80%的乙醇洗脫，得到第一洗脫液，第一洗脫液500Pa減壓濃縮60min，得到第一濃縮液，第一濃縮液用100目聚酰胺層析，再用質量百分濃度為20 % 60%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末。紫杉黃酮采用Al3+-蘆丁二元絡合物熒光光度法定量，其中激發光譜帶寬3nm，激發波長λ ex436nm，發射光譜帶寬5nm，λ em483nm，蘆丁標準溶液熒光強度對相應濃度作圖定量；該淡黃色粉末中紫杉黃酮重量含量為75 80 %。該淡黃色粉末中紫杉黃酮包括蘆丁-3-0-槲皮素、蘆丁-3-0-山奈酚、蘆丁 -3-0-楊梅素、葡萄糖-7-0-山奈酚、葡萄糖-7-0-槲皮素、楊梅素-3-0-蕓香糖、槲皮素-3-0-蕓香糖、山萘酚-7-0-葡萄糖、銀杏素、金松雙黃酮等成分。提取液中10種有效成分含量的測定采用高效液相色譜法分析，色譜柱為Varian，Microsorb- MV100C18，檢測波長360nm，流動相為甲醇/水=55 45，磷酸調pH=2.5 ;柱溫為25°C，流速為1.0 ml/min,進樣量為10 μ I， 標準物質外標法定量；10種有效成分含量總含量約95%。
與現有技術相比，本發明的優點在于一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，通過超臨界萃取釜萃取，甲醇吸收，AB-8樹脂層析后，再用100目聚酰胺層析，乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末，紫杉黃酮重量含量為75 80 %，紫杉黃酮的純度較高，且提取方法簡單，省略氯仿脫脂步驟，因此是一種紫杉黃酮的純度較高，方法簡單，實施方便的從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法。
具體實施例方式以下結合實施例對本發明作進一步詳細描述。實施例1
一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，先將新鮮的南方紅豆杉葉片經50°C溫度條件下烘干24h，粉碎，過8號篩為粉料，稱重50g，裝入超臨界萃取釜中；超臨界萃取釜中在萃取溫度為28°C，C(V流體壓力為25MPa，夾帶劑乙醇流速0.27 ml/min下，萃取1.5h，得到萃取物；萃取物中加25ml甲醇吸收為吸收液,吸收液用AB-8樹脂(市售)層析,AB-8樹脂為弱極性，表面積480 520 ( m2/g )，粒子半徑13 14nm，含水量64% ;層析后用質量百分濃度為80%的乙醇洗脫，得到第一洗脫液，第一洗脫液500Pa減壓濃縮60min，得到第一濃縮液，第一濃縮液用100目聚酰胺(市售)層析，用質量百分濃度為60%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末。該粉末采用Al3+-蘆丁二元絡合物熒光光度法定量，該粉末中紫杉黃酮重量含量為80 %。實施例2
與實施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為20°C，CO2流體壓力為20MPa，夾帶劑乙醇流速0.10 ml/min，萃取時間3h，聚酰胺層析后，用質量百分濃度為20%的乙醇洗脫，得到的粉末中紫杉黃酮重量含量為75 %。實施例3
與實施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為40°c，CO2流體壓力為40MPa，夾帶劑乙醇流速0.40 ml/min,萃取時間lh， 聚酰胺層析后，用質量百分濃度為40%的乙醇洗脫，得到的粉末中紫杉黃酮重量含量為78 %。
權利要求
1.一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，其特征在于步驟如下: 1)將新鮮的南方紅豆杉葉片在50°c溫度下烘干24h，粉碎，過8號篩為粉料，裝入超臨界萃取釜中； 2)超臨界萃取釜中，在萃取溫度為20 40°C，CO2流體壓力為20 40MPa，夾帶劑乙醇流速0.10 0.40 ml/min下,萃取I 3 h,萃取得到萃取物； 3)在萃取物中添加甲醇吸收為吸收液，所述甲醇的添加量為上述粉料2g的萃取物中添加甲醇1ml，吸收液用AB-8樹脂層析，然后用質量百分濃度為80%的乙醇洗脫，得到第一洗脫液，第一洗脫液500Pa減壓濃縮60min，得到第一濃縮液，第一濃縮液用100目聚酰胺層析，再用質量百分濃度為20 % 60%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥，得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末。`
全文摘要
本發明公開了一種從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法，通過超臨界萃取釜萃取，甲醇吸收，AB-8樹脂層析后，再100目聚酰胺層析，乙醇洗脫，洗脫液濃縮干燥得到含有紫杉黃酮的淡黃色粉末，紫杉黃酮重量含量為75～80%，紫杉黃酮的純度較高，且提取方法簡單，省略氯仿脫脂步驟，因此是一種紫杉黃酮的純度較高，方法簡單，實施方便的從南方紅豆杉葉中提取紫杉黃酮的方法。
文檔編號A61P31/00GK103099826SQ201210589638
公開日2013年5月15日 申請日期2012年12月31日 優先權日2012年12月31日
發明者王強, 謝雪娣 申請人:寧波泰康紅豆杉生物工程有限公司