低溫冷凍干燥法行生物支架材料基質再填充的制作方法
【專利摘要】【技術領域】：醫學，組織工程學；
【發明內容】
：針對組織工程血管的研制的，設計了“脫細胞脫基質血管支架經低溫冷凍干燥后基質再填充”方法。異種血管在經脫細胞及脫基質處理后，構建的低免疫原性的血管壁，我們將其稱為“血管壁支架”，在經冷凍干燥處理后，應用低免疫原性類基質成分對該血管壁支架進行基質再填充。經低溫冷凍干燥后基質再填充的組織工程血管具備低免疫原性、抗血栓性、良好的組織親和性及管壁彈性、血管吻合后不易出血等優點。這些優異的性能恰恰符合了心臟血管外科對于人工血管性能的要求。該基質重建方法為構建組織工程血管提供了新的構建思路及啟發。
【專利說明】低溫冷凍干燥法行生物支架材料基質再填充
[0001]【技術領域】醫學，組織工程學。
[0002]【背景技術】正常血管壁由內膜、中膜、外膜構成，其間中膜的膠原纖維及彈力纖維構成了血管壁的支架成分。在構建組織工程血管的研究中，人們發現同種異體或異種血管中免疫原性最強的是細胞及基質成分，因此在去除血管壁的細胞及基質成分后如何保持管壁的生物力學強度成為了當前的研究熱題。為解決此類問題，我們設想對脫細胞脫基質管壁支架進行冷凍干燥處理，該方法在去除支架水分的同時還可增加支架的孔隙率，再經低免疫原性的類基質成分(如明膠、殼聚糖、小腸粘膜下基質等)對該血管支架進行基質再填充。實驗證實經基質重建的脫細胞管壁既可降低免疫原性，又可恢復脫細胞管壁的生物力學強度。
[0003]
【發明內容】
血管經脫細胞、脫基質處理后構建成血管壁支架，經冷凍干燥處理后，在去掉其水分同時增加了支架的孔隙率，通過應用類基質成分對該血管支架進行基質再填充。該基質重建方法為構建組織工程血管提供了新的構建思路及啟發。
[0004]【專利附圖】

【附圖說明】圖1:脫細胞脫基質血管壁冷凍干燥示意圖；
[0005]【具體實施方式】異種血管在經脫細胞及脫基質處理后，構建的低免疫原性的血管壁，我們將其稱為“血管壁支架”，在經冷凍干燥處理后，應用類基質成分對該血管壁支架進行基質再填充(見圖1)。構建方法:應用酶+去垢劑的方法去除血管的細胞及基質成分，經充分漂洗后構建純凈的血管壁支架，在無菌條件下利用程控降溫儀，以2V ^irT1的降溫速率對標本進行預凍，將標本預凍到-70°C，程控降溫結束后將標本放入凍干機中進行干燥12小時，干燥后將標本放入已配好的類基質溶液中進行復水+基質再填充處理48小時。基質重建后，標本置于碳化二亞胺交聯溶液中進行交聯處理。基質重建后組織工程血管的優點:因其取材自生物材料，且已最大限度去除了異種的免疫原性，因而其具備低免疫原性、良好的組織親和性、抗血栓性，且具備良好的管壁彈性。基質重建后組織工程血管的應用:當前臨床中應用的聚四氟乙烯人造血管，因其為化學材料構建的血管，管壁薄、彈性差、易形成血栓，與自身血管吻合后易滲血，從而導致外科止血困難，該類組織工程血管因其良好的組織相容性可有望替代聚四氟乙烯人造血管，做為心胸血管外科領域中血管置換手術的的植入材料。
【權利要求】
1.該項申請的脫細胞脫基質血管支架經低溫冷凍干燥后基質再填充專利，該項技術是制備組織工程血管的必要保證，該理論在應用過程中技術難度要求不高，可實現性強，但應用價值大，故特要求以下專利權:.1.脫細胞脫基質血管支架制作方法。.2.脫細胞脫基質血管支架的低溫冷凍干燥方法。.3.脫細胞脫基質血管支架的基質再填充方法。.4.該類組織工程血管的制作及應用，包括:該類血管的試制、檢測、動物試(實)驗及臨床試(實)驗等。
【文檔編號】A61L31/04GK104436316SQ201310440140
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2013年9月25日 優先權日:2013年9月25日
【發明者】李溫斌, 許秀芳, 龔達, 任學軍, 徐志偉, 萬居易, 周子凡, 裴金鳳 申請人:李溫斌