一種新型多孔纖維蛋白支架的制作方法
【專利摘要】發(fā)明名稱 :一種新型多孔纖維蛋白支架。【技術(shù)領(lǐng)域】 : 醫(yī)學(xué) 組織工程學(xué)。【專利附圖】
【附圖說(shuō)明】 圖1:脫細(xì)胞脫基質(zhì)肺動(dòng)脈多孔纖維蛋白支架示意圖。
【發(fā)明內(nèi)容】
正常肺動(dòng)脈管壁和瓣膜的中層是由細(xì)胞、基質(zhì)、纖維三部分組成。纖維是維持肺動(dòng)脈管壁和瓣膜生物力學(xué)特性的主要因素,細(xì)胞存在于纖維空隙中,其周圍借基質(zhì)成份與纖維形成連接。經(jīng)過(guò)對(duì)豬肺動(dòng)脈組織結(jié)構(gòu)的深入研究,結(jié)果證實(shí)導(dǎo)致去細(xì)胞豬肺動(dòng)脈直接植入體內(nèi)產(chǎn)生排異反應(yīng)、鈣化、血栓形成和力學(xué)性能不滿意的原因如下:1.傳統(tǒng)去細(xì)胞方法僅能去除細(xì)胞成份,遺留的基質(zhì)成份仍存在一定的免疫原性,可誘發(fā)免疫排異反應(yīng)的發(fā)生,進(jìn)一步引起組織鈣化、衰敗。2.異種纖維仍存在免疫原性,植入人體內(nèi)后可能仍會(huì)誘發(fā)免疫排異反應(yīng)。為有效解決上述問(wèn)題,我們?cè)谌ゼ?xì)胞基礎(chǔ)上再行去基質(zhì)處理,形成純凈的多孔的肺動(dòng)脈纖維蛋白支架。
【專利說(shuō)明】一種新型多孔纖維蛋白支架
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
醫(yī)學(xué)組織工程學(xué)
[0002]
【背景技術(shù)】
在心血管領(lǐng)域,人工心臟瓣膜、心臟血管的以及主(肺)動(dòng)脈帶瓣管道是治療多種心臟病(如完心病、風(fēng)濕性心臟病,肺動(dòng)脈閉鎖重大成等)的必需材料之一,而目前臨床所用的臨床效果均不理想。理想的醫(yī)用材料應(yīng)該能夠隨身體發(fā)育而生長(zhǎng)、耐久性能好、抗血栓形成、不易鈣化和衰敗,并且型號(hào)多樣,便于臨床應(yīng)用。組織工程學(xué)的發(fā)展為研制理想的醫(yī)用材料帶來(lái)了希望。經(jīng)典組織工程材料研制,均需應(yīng)用高分子可降解材料或組織源性支架材料在體外構(gòu)建出血管或瓣膜的支架,之后種植受體內(nèi)皮細(xì)胞或者干細(xì)胞形成“自體”血管或瓣膜即組織工程血管或瓣膜。
[0003]正常肺動(dòng)脈管壁和瓣膜的中層是由細(xì)胞、基質(zhì)、纖維三部分組成。纖維是維持肺動(dòng)脈管壁和瓣膜生物力學(xué)特性的主要因素,細(xì)胞存在于纖維空隙中,其周圍借基質(zhì)成份與纖維形成連接。基質(zhì)在這里指細(xì)胞和纖維以外的結(jié)構(gòu),主要由蛋白多糖和糖蛋白組成。經(jīng)過(guò)對(duì)豬肺動(dòng)脈組織結(jié)構(gòu)的深入研究,結(jié)果證實(shí)導(dǎo)致去細(xì)胞豬肺動(dòng)脈直接植入體內(nèi)產(chǎn)生排異反應(yīng)、鈣化、血栓形成和力學(xué)性能不滿意的原因如下:1.傳統(tǒng)去細(xì)胞方法僅能去除細(xì)胞成份,遺留的基質(zhì)成份仍存在一定的免疫原性,可誘發(fā)免疫排異反應(yīng)的發(fā)生,進(jìn)一步引起組織鈣化、衰敗。2.異種纖維仍存在免疫原性,植入人體內(nèi)后可能仍會(huì)誘發(fā)免疫排異反應(yīng)。為有效解決上述問(wèn)題,我們?cè)谌ゼ?xì)胞基礎(chǔ)上再行去基質(zhì)處理,形成純凈的多孔的肺動(dòng)脈纖維蛋白支架。
[0004]
【發(fā)明內(nèi)容】
新型多孔纖維蛋白支架,可以作為組織工程支架的理想材料。
[0005]
【專利附圖】
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【附圖說(shuō)明】
圖1:一種新型多孔纖維蛋白支架結(jié)構(gòu)示意圖(脫細(xì)胞脫基質(zhì)肺動(dòng)脈多孔纖維蛋白支架示意圖)
[0006]【具體實(shí)施方式】采用胰蛋白酶+Triton+透明質(zhì)酸酶消化去細(xì)胞方法,在徹底去除組織中細(xì)胞的同時(shí)也能夠最大程度地去除組織中的基質(zhì)成份,僅保留肺動(dòng)脈壁內(nèi)的膠原纖維、彈力纖維,維持肺動(dòng)脈支架的完整性,得到“純凈”的多孔隙的肺動(dòng)脈纖維支架。
[0007]基本步驟:無(wú)菌條件下,將新鮮肺動(dòng)脈浸泡于濃度為0.5%的胰蛋白酶中,37°C消化48h,取出充分漂洗后,置入2%的tritonX-100中,37°C水浴搖床上持續(xù)振蕩洗滌48h,取出充分漂洗后,置入透明酯酸酶溶液中,常溫下持續(xù)振蕩24h。之后將標(biāo)本4°C Hank’s溶液洗滌IhX 3次,得到“純凈”的肺動(dòng)脈纖維支架材料。
【權(quán)利要求】
1. 該項(xiàng)申請(qǐng)的新型多孔纖維蛋白支架,是將異種動(dòng)物(豬)肺動(dòng)脈組織通過(guò)脫細(xì)胞脫基質(zhì)方法得到,制作方法制作方法簡(jiǎn)單,但是該新型多孔纖維蛋白支架可以作為理想的組織工程支架,應(yīng)用價(jià)值較大,故要求以下專利權(quán):.1.其他各種動(dòng)物動(dòng)脈組織脫細(xì)胞脫基質(zhì)得到不同口徑和長(zhǎng)度的多孔纖維蛋白支架。.2.各種脫細(xì)胞脫基質(zhì)的方法,包括應(yīng)用各種濃度胰酶、透明質(zhì)酸酶、RNA本科及其他脫細(xì)胞脫基質(zhì)試劑等。
【文檔編號(hào)】A61L27/56GK104436300SQ201310440138
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2013年9月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月25日
【發(fā)明者】李溫斌, 許秀芳, 郭海平, 馬金輝, 王圣, 史海峰, 徐志偉, 龔達(dá) 申請(qǐng)人:李溫斌