一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成：茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18-22%、黃芩8-12%、白術(shù)8-12%、黨參8-12%、板藍(lán)根8-12%。經(jīng)臨床魚(yú)病防治試驗(yàn)及安全性評(píng)價(jià)顯示其對(duì)鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥安全有效。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥制劑，具體涉及一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化程度的提高，養(yǎng)殖水環(huán)境的逐漸惡化，病害問(wèn)題已經(jīng)越來(lái)越嚴(yán)重，特別是由細(xì)菌感染引起的傳染性疾病表現(xiàn)得尤為突出，其中細(xì)菌性敗血癥是目前發(fā)病率最高、造成損失最大的疾病。細(xì)菌性敗血癥俗稱暴發(fā)性出血病，是由溫和氣單胞菌等細(xì)菌感染引起。魚(yú)類(lèi)細(xì)菌性敗血癥是危害水產(chǎn)養(yǎng)殖的主要疾病之一，用中草藥防治魚(yú)病具有價(jià)廉、綠色、環(huán)保、無(wú)藥物殘留等優(yōu)點(diǎn)，符合無(wú)公害水產(chǎn)養(yǎng)殖的要求。目前用中草藥防治水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性敗血癥的研究大多是體外抑菌試驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)，只有陳學(xué)年等人做了中草藥生藥粉末藥餌防治鯽魚(yú)敗血病的試驗(yàn)。對(duì)于中草藥提取物添加制成藥餌對(duì)魚(yú)病的防治試驗(yàn)還未見(jiàn)報(bào)道。
[0003]所以進(jìn)行了中草藥復(fù)方提取液添加藥餌對(duì)鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的防治試驗(yàn)，為水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)提供防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑，已經(jīng)是一個(gè)值得研究的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供了一種利用多味中草藥防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥中草藥提取復(fù)方制劑。
[0005]本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的:
一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18-22%、黃芩8_12%、白術(shù)8_12%、黨參8_12%、板藍(lán)根8-12% ；
包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳20%、地錦草20%、大黃20%、黃芩10%、白術(shù)10%、黨參10%、板藍(lán)根10%。
[0006]積極有益效果:本發(fā)明公開(kāi)了一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑，該制劑由茵陳、地錦草、大黃、黃芩、白術(shù)、黨參、板藍(lán)根等七味中藥原料組成。經(jīng)臨床魚(yú)病防治試驗(yàn)及安全性評(píng)價(jià)顯示其對(duì)鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥安全有效。
[0007]說(shuō)明書(shū)附圖
圖1為血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定結(jié)果圖；
圖2為血清谷草轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定結(jié)果圖；
圖3為血清膽固醇測(cè)定結(jié)果圖；
圖4為血清甘油三酯測(cè)定結(jié)果圖；
圖5為血清總蛋白測(cè)定結(jié)果圖；
圖6為血清白蛋白測(cè)定結(jié)果圖；
圖7為血清球蛋白測(cè)定 結(jié)果圖；
圖8為血清白球比測(cè)定結(jié)果圖；圖9為血清肌酐測(cè)定結(jié)果圖；
圖10為血清尿素氮測(cè)定結(jié)果圖；
圖11為血清尿酸測(cè)定結(jié)果圖；
圖12為血清膽紅素測(cè)定結(jié)果圖；
圖13為血清肌酸磷酸激酶測(cè)定結(jié)果圖；
圖14為血液紅細(xì)胞變化規(guī)律示意圖；
圖15為血液白細(xì)胞變化規(guī)律示意圖；
圖16為血液血紅蛋白變化規(guī)律示意圖；
圖17為白細(xì)胞中的淋巴細(xì)胞變化規(guī)律示意圖；
圖18為對(duì)照組血液中的粒細(xì)胞比例示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0008]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明:
一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18-22%、黃芩8_12%、白術(shù)8_12%、黨參8_12%、板藍(lán)根8-12% ； 包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳20%、地錦草20%、大黃20%、黃芩10%、白術(shù)10%、黨參10%、板藍(lán)根10%。
[0009]復(fù)方中藥制劑防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的機(jī)理是:1.抗炎。復(fù)方提取液的總黃酮有效成分能夠通過(guò)抑制可誘導(dǎo)的一氧化氮合酶，減少毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放一氧化氮，調(diào)節(jié)花生四烯酸(AA)的代謝，抑制前列腺素E2 (PGE2)和白三烯(LTC4)的合成，其中以黃芩素和黃芩甙作用最強(qiáng)，而且存在量效關(guān)系。炎癥組織中前列腺素E2 (PGE2)和白三烯(LTC4)等炎性介質(zhì)成分減少后，毛細(xì)血管通透性下降，白細(xì)胞游出減少，蛋白滲出亦隨之減少，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)減輕，組織腫脹程度下降。2.殺菌解毒。復(fù)方中的黃酮類(lèi)、蒽醌類(lèi)和有機(jī)酸類(lèi)等有效成分具有強(qiáng)烈的抑菌作用，對(duì)消除細(xì)菌毒素對(duì)組織的損傷具有很好的效果。細(xì)菌內(nèi)毒素可以引起發(fā)熱、可誘發(fā)氧衍生自由基引起脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，造成亞細(xì)胞及組織損害，造成器官損傷代謝失調(diào)，可引起血微循環(huán)障礙導(dǎo)致彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)現(xiàn)象等。黃芩具有清熱解毒作用，通過(guò)降低腦脊液環(huán)磷酸腺苷(cAMP)含量而拮抗細(xì)菌內(nèi)毒素致熱活性，鄧則明證實(shí)黃芩的抗自由基作用是通過(guò)提高線粒體、溶酶體等內(nèi)源性超氧化物歧化酶、琥珀酸脫氫酶等酶的活性而加速清除的，地錦草所含的黃酮類(lèi)有效成分也具有清除和抑制羥基自由基的作用，黃芩和地錦草還具有止血、改善血管微循環(huán)，直接破壞內(nèi)毒素的作用。
[0010]實(shí)驗(yàn)如下:
1.材料和方法
1.1試驗(yàn)材料
1.1.1試驗(yàn)魚(yú)健康鯽魚(yú)，規(guī)格一致，尾重35±lg。
[0011]1.1.2試驗(yàn)用菌液試驗(yàn)用致病菌為溫和氣單胞菌5b^ria),菌種由本校微生物實(shí)驗(yàn)室提供。
[0012]1.1.3藥餌用乙醇回流提取法提取中草藥復(fù)方的總有效成分，按照0%、0.5%、2%、生藥2%的添加量制作成藥餌。[0013]1.1.4養(yǎng)殖池普通玻璃缸，ImX0.4mX0.6m,保證24小時(shí)充氧，水溫13_15°C，每天換水1/3。
[0014]試驗(yàn)方法
1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，選取細(xì)菌濃度梯度(0.5億/毫升和I億/毫升)和藥餌濃度(0、0.5%、2%及生藥2%)兩個(gè)因素及不同的水平，并且設(shè)空白對(duì)照組。具體分組見(jiàn)表1。試驗(yàn)前鯽魚(yú)先暫養(yǎng)2周，接著投喂藥餌I周，然后注射不同濃度的溫和氣單胞菌病原菌進(jìn)行人工感染。試驗(yàn)養(yǎng)殖條件按照常規(guī)方法進(jìn)行。
[0015]1.2.2藥餌防治率記錄發(fā)病后每天記錄各試驗(yàn)組死魚(yú)尾數(shù)，連續(xù)記錄一周。死亡率結(jié)果采用方差分析和t檢驗(yàn)。
[0016]1.2.3血液生化指標(biāo)測(cè)定注射后第4天，第15天取注射細(xì)菌濃度0.5億/毫升，藥餌濃度0%、0.5%、2%、生藥、對(duì)照5組試驗(yàn)魚(yú)，每組取6-9條魚(yú)采血(3-4ml)，加入抗凝劑，注意不要溶血，用日本產(chǎn)7020血液自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血液生化指標(biāo)。各組養(yǎng)殖條件及取血盡量保持一致。
[0017]1.2.4血液生理指標(biāo)測(cè)定按照常規(guī)方法在注射后第4天，第9天，第15天，第21天，第27天對(duì)5組每組取魚(yú)采血進(jìn)行紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)，白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)，血紅蛋白測(cè)定。
[0018]1.2.5中草藥的急性毒性試驗(yàn)先經(jīng)過(guò)預(yù)備試驗(yàn)，每尾鯽魚(yú)胸腔注射0.1ml復(fù)方中草藥液，找出使鯽魚(yú)全部存活的最大濃度(Dm)和全部死亡的最小濃度(Dn)，再在這兩個(gè)濃度之間按照等對(duì)數(shù)間距設(shè)兩個(gè)濃度，試驗(yàn)設(shè)一次重復(fù)。
[0019].結(jié)果 2.1不同細(xì)菌濃度和藥餌添加量時(shí)各組的死亡率
經(jīng)過(guò)t檢驗(yàn)，在0.5億/毫升及在I億/毫升菌液濃度下，藥餌組2%和生藥組與O %藥餌組之間差異顯著，藥餌0.5%與0%藥餌組差異不顯著，藥餌2%和生藥組之間不顯著。
[0020]表1不同藥餌濃度和不同細(xì)菌濃度時(shí)的死亡情況
【權(quán)利要求】
1.一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑，其特征在于，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳18-22%、地錦草18-22%、大黃18_22%、黃芩8_12%、白術(shù)8_12%、黨參8-12%、板藍(lán)根8-12%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的 一種防治鯽魚(yú)細(xì)菌性敗血癥的中藥復(fù)方制劑，其特征在于，包括下列中藥原料按重量百分比配比制成:茵陳20%、地錦草20%、大黃20%、黃芩10%、白術(shù)10%、黨參10%、板藍(lán)根10%。
【文檔編號(hào)】A61P31/04GK103585288SQ201310528009
【公開(kāi)日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2013年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月31日
【發(fā)明者】田海軍, 倫峰, 林偉, 彭新亮, 吳紅梅 申請(qǐng)人:信陽(yáng)農(nóng)業(yè)高等專(zhuān)科學(xué)校, 田海軍