一種Alda-1口服自微乳制劑及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種Alda-1口服自微乳制劑及其制備方法，由以下重量份的組分制成，0.1-2份的Alda-1、15-45份的油相、35-55份的表面活性劑、35-55份的助表面活性劑。制備方法為先將所述重量份的油相，表面活性劑和助表面活性劑攪拌，混合均勻，形成空白自微乳，再向上述空白自微乳中加入所述重量份的Alda-1后，攪拌，混合均勻，即得Alda-1口服自微乳制劑。本發明采用自微乳納米技術顯著提高了Alda-1的溶解度和口服生物利用度，且制備方法簡單，成本低。同時，避免了DMSO等有機溶劑的使用，便于進一步促進Alda-1向臨床應用轉化，增加其長期應用的安全性。
【專利說明】—種Alda-1 口服自微乳制劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種自微乳，特別涉及一種Alda-1 口服自微乳制劑及其制備方法。
【背景技術】
[0002]乙醒脫氫酶2 (aldehyde dehydrogenase2, ALDH2)是一種重要的具有細胞保護作用的酶，能夠將各種外源性和內源性醛類物質，如乙醛、4-壬烯醛(4-hydroxy-2-nonenal, 4-HNE)氧化為相應的酸,減少醒類物質導致的細胞損傷。研究發現在心臟缺血-再灌注過程中，ALDH2活性與心肌梗死面積高度負相關(r2 = 0.95)，提示ALDH2具有重要的心肌保護作用。另外，ALDH2對神經退行性病變、酒精性肝損傷、腫瘤等均具有保護作用。 [0003]然而，ALDH2基因存在一種重要的突變位點Glu504Lys，導致酶活性的顯著降低；體外研究發現，突變后酶活性僅為正常野生型的6%。ALDH2基因Glu504Lys突變主要存在于東亞黃種人中(突變攜帶者約30%-50%)，而在白種人中罕見。因此，提高ALDH2活性，尤其是突變攜帶者的ALDH2活性，具有重要的臨床意義。基于提高ALDH2活性的藥物研發具有重要的臨床應用前景。
[0004]斯坦福大學Mochly-Rosen教授通過高通量方法從60000多種化合物中篩選出一種小分子化合物質 Alda-1 (化學名:N_ (1，3-Benzodioxo 1-5-yImethyI) _2，6-dichlorobenzamide,分子式=C15H11C2NO3,結構式見圖1)，顯著提高ALDH2酶活性，為相關藥物研發提供新思路和方向。由于Alda-1在水中溶解性極差，因此，目前實驗研究中常使用二甲基亞砜(DMSO)等有機溶劑溶解Alda-1，通過靜脈途徑給藥。此種給藥系統存在缺點有:(I)有機溶劑DMSO等通常具有一定的毒性，長期應用存在安全隱患；(2)靜脈給藥操作復雜，不利于治療腫瘤、神經系統退行性病變等需長期用藥的慢性疾病。因此，Alda-1藥物自身的缺陷限制其進一步向臨床應用轉化，目前國內外尚未有自微乳制劑用于Alda-1的報道。

【發明內容】

[0005]本發明的目的是為克服上述現有技術的不足，提供一種Alda-1 口服自微乳制劑及其制備方法，本發明將Alda-1制成自微乳制劑以提高Alda-1在水中的溶解性，減少有機試劑的加入，提高其生物安全性，并且自微乳制劑實現Alda-1 口服途徑給藥，以期提高患者的順從性，有利于促進Alda-1向臨床應用轉化。
[0006]為實現上述目的，本發明采用下述技術方案:
[0007]一種Alda-1 口服自微乳制劑，由以下重量份的組分制成，0.1-2份的Alda-1、15-45份的油相、35-55份的表面活性劑、35-55份的助表面活性劑。
[0008]優選，上述Alda-1 口服自微乳制劑，由以下重量份的組分制成，1份的Alda-UlO份的油相、54份的表面活性劑、35份的助表面活性劑。
[0009]所述油相為蓖麻油、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯或丙二醇單辛酸酯(CapryO190)中的一種或一種以上的混合物。[0010]所述表面活性劑為聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)、吐溫80或乳化劑OP中的一種或一種以上的混合物。
[0011]所述助表面活性劑為二乙二醇單乙基醚(Transcutol HP)、甘油或聚乙二醇400中的一種或一種以上的混合物。
[0012]上述Alda-1 口服自微乳制劑的制備方法如下:1)將所述重量份的油相，表面活性劑和助表面活性劑攪拌，混合均勻，形成空白自微乳；2)向上述空白自微乳中加入所述重量份的Alda-1后，攪拌，混合均勻，即得Alda-1 口服自微乳制劑。
[0013]所述步驟I)中的攪拌為磁力攪拌2-8min (優選3min)。
[0014]所述步驟2)中的攪拌為磁力攪拌2-8min (優選3min)。
[0015]本發明的有益效果是，自微乳給藥系統(self-microemulsifying drug deliverysystem, SMEDDS)是由油、表面活性劑和助表面活性劑或少量水組成的均一透明溶液，可作為疏水性、難吸收或易水解藥物的載體。通過將藥物包裹在油滴中，口服后遇體液在胃腸蠕動下自發分散形成0/W型微乳。該系統可通過提高藥物的溶解度，降低表面張力，形成易通過胃、腸壁的水化層，增加對腸道上皮細胞的穿透性等優勢顯著提高藥物生物利用度。
[0016]Alda-1 在水中的溶解度比較低，因此將其制成自微乳制劑，由油相、表面活性劑和助表面活性劑組成，當三者以適當比例混合后，在水中能夠自微乳化形成0/W型微乳，進而增大Alda-1的溶解度。
[0017]本發明首次將Alda-1制備成液體制劑的形式用以實驗口服使用。
[0018]本發明采用自微乳納米技術可顯著提高Alda-1的溶解度和口服生物利用度，且制備方法簡單，成本低。同時，避免了 DMSO等有機溶劑的使用，便于進一步促進Alda-1向臨床應用轉化，增加其長期應用的安全性。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0019]圖1 是 C15H11C2NO3 的結構式；
[0020]圖2是Alda-1自微乳制劑的透射電鏡照片；
[0021]圖3是大鼠給予不同處理后肝臟ALDH2活性的比較；
[0022]圖4大鼠給予不同處理后心肌ALDH2活性的比較。
【具體實施方式】
[0023]下面結合實施例以及附圖對本發明進行進一步的說明。
[0024]實施例1
[0025]一種 Alda-1 口服自微乳制劑的制備，稱取 Cremophor EL0.555g, TranscutolHP0.345g, Capryol900.1g,在室溫下，磁力攪拌5min,形成空白自微乳，加入Alda-10.008g,磁力攪拌6min使之溶解,得到Alda-1自微乳制劑。
[0026]實施例2
[0027]一種Alda-1 口服自微乳制劑的制備,稱取Capryol900.175g,吐溫800.6g,聚乙二醇4000.225g,在室溫下,磁力攪拌3min,形成空白自微乳,加入Alda-10.008g,磁力攪拌IOmin使之溶解,得到Alda-1自微乳制劑。
[0028]實施例3[0029]一種Alda-1 口服自微乳制劑的制備，稱取蓖麻油0.15g，乳化劑ΟΡΟ.35g，甘油
0.35g,在室溫下,磁力攪拌8min空白自微乳,加入Alda-10.0OOlg,磁力攪拌2min使之溶解，得到Alda-1自微乳制劑。
[0030]實施例4
[0031]—種Alda-1 口服自微乳制劑的制備，稱取油酸乙酯0.45g,聚氧乙烯蓖麻油0.55g, 二乙二醇單乙基醚0.55g,在室溫下，磁力攪拌5min,形成空白自微乳，加入Alda-10.002g,磁力攪拌IOmin使之溶解,得到Alda-1自微乳制劑。
[0032]實施例5
[0033]—種Alda-1 口服自微乳制劑的制備，稱取肉豆蘧酸異丙酯0.1g,乳化劑0P0.54g, 0.35g聚乙二醇400，在室溫下，磁力攪拌6min,形成空白自微乳，加入Alda-10.0Olg,磁力攪拌6min使之溶解,得到Alda-1自微乳制劑。
[0034]1.Alda-1自微乳粒徑的實驗測定:
[0035]取實施例1所獲自微乳制劑0.5g，用水稀釋50倍，用貝克曼粒徑測定儀測自微乳的粒徑大小及其分布，結果發現粒徑在20-100nm范圍內。
[0036]2.Alda-1自微乳透射電鏡的觀察:
[0037]取實施例1所獲自微乳樣品0.5g，用水稀釋100倍，將稀釋后的自微乳滴加在銅網上，用質量分數為I %的磷鎢酸染色15s，干燥后，置于透射電鏡下觀察，如圖2所示，微乳在電鏡下呈圓球狀，無黏連，分散性良好。
[0038]3.Alda-1 口服自微乳顯著提高肝臟ALDH2活性
[0039]大鼠給予Alda-1 口服自微乳連續灌胃3天，給藥劑量16mg/kg/day，顯著提高肝臟組織ALDH2的活性(與Conl、Con2相比，均為P〈0.05) ;Alda_l 口服自微乳給藥組大鼠肝臟ALDH2活性提高的幅度與靜脈注射溶解于DMSO的Alda-1，給藥劑量8mg/kg/day相比，差異并無統計學意義。如圖3所示，Conl，大鼠靜脈注射DMS0，給藥劑量lml/Kg/day ;Con2，大鼠口服空白自微乳，給藥劑量2g/kg/day ;Alda_l，大鼠靜脈注射溶解于DMSO的Alda_l，給藥劑量8mg/kg/day ;ME-Alda_l,大鼠口服Alda-1自微乳制劑,給藥劑量16mg/kg/day。
[0040]4.Alda-1 口服自微乳顯著提高心臟ALDH2活性
[0041]如圖4所示,大鼠給予Alda-1 口服自微乳連續灌胃3天,給藥劑量16mg/kg/day,顯著提高心臟組織ALDH2的活性(與Conl、Con2相比，均為P〈0.05) ;Alda_l 口服自微乳給藥組大鼠心臟ALDH2活性提高的幅度與靜脈注射溶解于DMSO的Alda-1，給藥8mg/Kg/day相比，差異并無統計學意義。其中Conl，大鼠靜脈注射DMS0，給藥劑量lml/Kg/day ；Con2,大鼠口服空白自微乳，給藥劑量2g/kg/day ;Alda_l，大鼠靜脈注射溶解于DMSO的Alda-1，給藥劑量8mg/kg/day ;ME-Alda_l,大鼠口服Alda-1自微乳制劑,給藥劑量16mg/kg/day。
[0042] 上述雖然結合實施例對本發明的【具體實施方式】進行了描述，但并非對本發明保護范圍的限制，所屬領域技術人員應該明白，在本發明的技術方案的基礎上，本領域技術人員不需要付出創造性勞動即可做出的各種修改或變形仍在本發明的保護范圍以內。
【權利要求】
1.一種Alda-1 口服自微乳制劑，其特征在于，由以下重量份的組分制成，0.1-2份的Alda-1、15-45份的油相、35-55份的表面活性劑、35-55份的助表面活性劑，所述油相為蓖麻油、油酸乙酯、肉豆蘧酸異丙酯或丙二醇單辛酸酯中的一種或一種以上的混合物，所述表面活性劑為聚氧乙烯蓖麻油、吐溫80或乳化劑OP中的一種或一種以上的混合物，所述助表面活性劑為二乙二醇單乙基醚、甘油或聚乙二醇400中的一種或一種以上的混合物。
2.如權利要求1所述的Alda-1口服自微乳制劑，其特征在于，由以下重量份的組分制成，1份的Alda-UlO份的油相、54份的表面活性劑、35份的助表面活性劑。
3.如權利要求1或2任意所述的Alda-1口服自微乳制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:1)將所述重量份的油相，表面活性劑和助表面活性劑攪拌，混合均勻，形成空白自微乳；2)向上述空白自微乳中加入所述重量份的Alda-1后，攪拌，混合均勻，即得Alda-1 口服自微乳制劑。
4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟I)中的攪拌為磁力攪拌2-8min。
5.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中的攪拌為磁力攪拌2-8min。
6.如權利要求4或 5所述的制備方法,其特征在于，所述磁力攪拌3min。
【文檔編號】A61K9/107GK103976952SQ201410251301
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年6月6日 優先權日:2014年6月6日
【發明者】陳玉國, 王甲莉, 王海剛, 徐峰, 袁秋環, 劉寶山, 李明華 申請人:山東大學齊魯醫院