一種青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法
【專利摘要】本發明公開一種青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法。所述制備方法是將青蒿素衍生物的乙醇或丙酮溶液分散于透明質酸鈉水溶液中，使其形成均勻穩定的乳液，其中所述青蒿素衍生物的乙醇或丙酮溶液占所述透明質酸鈉水溶液的體積比為10％-50％；將所述乳液加入到微針模具中并進行干燥，之后加入背襯溶液，背襯溶液干燥后即制成皮內給藥微針，所述皮內給藥微針可以形成微針陣列。所述制備方法使青蒿素衍生物能夠制成皮內給藥微針制劑，該制劑可減少青蒿素衍生物的給藥次數，實現微創給藥。
【專利說明】一種青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及體表給藥制劑及其制備方法。更具體地，一種青蒿素衍生物的皮內給 藥微針制劑的制備方法。

【背景技術】
[0002] 青蒿素是青蒿屬植物中含有的一種天然成份，屬于含有過氧基團的倍半萜內酯類 藥物。具有高效、速效、低毒的抗瘧、抗孕、抗纖維化、抗血吸蟲的藥理作用。易溶于丙酮、醋 酸乙酯、氯仿、苯和醋酸，溶于乙醇、甲醇和石油醚，難溶于油和水。由于青蒿素的藥理價值， 現已經開發了多種半合成的青蒿素衍生物，如蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯、雙氫青蒿素等。青 蒿素衍生物不但具有良好的抗瘧活性，同時具有抵抗癌癥、紅斑狼瘡、白血病、感冒、滌蟲 病、弓形蟲病、黑熱病等方面藥理作用。由于青蒿素衍生物水溶性差，所以目前青蒿素衍生 物藥物只有口服片劑和注射油劑兩種劑型。青蒿素衍生物半衰期短，單次給藥劑量高，需要 頻繁給藥，藥物血藥濃度的穩定性差，口服片劑和注射油劑不能改善上述用藥缺陷。因此開 發可以減少給藥次數，實現無痛給藥，并且給藥時血藥濃度穩定的劑型具有廣闊的應用前 旦 -5^ 〇
[0003] 皮內微針制劑及可溶解微針制劑，是指由水溶性材料或生物可溶性物質為基質制 作而成，僅在微針的針體內含有藥物的微針貼片。當微針刺入皮膚后，針體會迅速或者緩慢 溶解，同時將針體中的藥物釋放入皮膚實現經皮給藥。由于微針制劑能夠延長藥物的半衰 期，減少給藥次數，實現微創給藥，因而微針作為高效的經皮給藥制藥技術正受到廣泛的研 究。現在常用的水溶性高分子材料主要有：羧甲纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、蠶絲蛋白、硫酸軟 骨素、透明質酸鈉以及多糖等材料。由于水溶性高分子材料易溶于水，難溶于有機溶劑，因 此以水溶性高分子材料為基質的微針制劑的研究，僅局限于水溶性的藥物。青蒿素衍生物 難溶于水但易溶于有機溶劑，難與水溶性高分子材料混溶，因此目前還沒有將青蒿素衍生 物制成微針制劑的報道。


【發明內容】

[0004] 本發明的目的在于制備一種青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑，通過皮膚給藥， 降低給藥過程中青蒿素衍生物血藥濃度的波動，減少給藥次數，實現微創給藥。
[0005] 具體的技術方案如下：
[0006] 1)青蒿素衍生物溶于乙醇或丙酮中，制成青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物 丙酮溶液；
[0007] 2)制備透明質酸鈉水溶液；
[0008] 3)將所述青蒿素衍生物溶液與所述透明質酸鈉水溶液混合，形成乳液，其中所 述青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物丙酮溶液占透明質酸鈉水溶液體積百分比為 10-50% ；
[0009] 4)將所述乳液加入到微針模具中；用施加壓力或抽真空的方法使所述乳液加入 到微針模具微孔中；
[0010] 5)干燥；
[0011] 6)加入背襯溶液；
[0012] 7)干燥。
[0013] 優選地，所述青蒿素衍生物包括蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯或雙氫青蒿素。
[0014] 優選地，青蒿素衍生物乙醇溶液的濃度小于40mg/ml，青蒿素衍生物丙酮溶液小于 60mg/ml〇
[0015] 優選地，所述透明質酸鈉的分子量為3000-100000Da，更優選地，所述透明質酸鈉 的分子量為5000-20000Da。
[0016] 優選地，所述透明質酸鈉水溶液的濃度為5-40wt%。
[0017] 優選地，用施加壓力或抽真空的方法使所述乳液加入模具微孔中，從而避免所述 微針內氣泡的產生，制得的高品質的微針。其中若采用施加壓力的方法，所施加的壓力為 0. 2-0. 6MPa ;若采用抽真空的方法，真空度要達到0. 05-0. IMPa。
[0018] 優選地，所述皮內給藥微針制劑的微針長度為0. 5-1. Omm ;所述微針形成微針陣 列，位于所述背襯之上，所述微針密度為36-169針/平方厘米。
[0019] 所述背襯溶液為選自聚乙烯吡咯烷酮溶液、透明質酸鈉水溶液、 Gantrez? AN-139溶液、硫酸軟骨素溶液和羧甲基纖維素鈉溶液的一種或多種,優選透明 質酸鈉水溶液。
[0020] 優選地，聚乙烯吡咯烷酮溶液的濃度為2〇-5〇wt% ;優選地，透明質酸鈉水溶液濃 度為20-50被％;優選地，〇311的2?八1丨39溶液濃度為10-30被％;優選地，硫酸軟骨素 溶液濃度為2〇-5〇wt% ;優選地，羧甲基纖維素鈉溶液濃度為5-lOwt%。
[0021] 優選地，所述背襯的厚度為0. 2-lmm。
[0022] 所述微針的干燥在濕度為20-40%、溫度為15_25°C的條件下進行，所述干燥主要 目的是讓微針內的水分、乙醇或丙酮揮發，乳液在微針模具內固化成型，所述微針干燥時間 為20-40分鐘。
[0023] 所述背襯溶液的干燥在濕度為20-40%、溫度為15_25°C的條件下進行，所述背襯 溶液的干燥主要目的是讓所述背襯溶液內的水分揮發，所述背襯溶液在模具內固化成型， 所述背襯溶液的干燥時間為2-5小時。
[0024] 本制備方法除了用于青蒿素衍生物的制備外，還可用于制備其它不溶于水但溶于 極性有機溶劑的藥物的給藥微針制劑，如依托孕烯、甘草次酸。
[0025] 本發明的有益效果如下：
[0026] 本發明使不溶于水，但是溶解于極性有機溶劑的如青蒿素衍生物能夠制成皮內可 溶解的給藥微針制劑，施用時相對青蒿素衍生物的其他劑型的血藥濃度平穩，減少給藥次 數，實現微創給藥。所述微針制劑的制備方法工藝簡單，條件溫和，不需大型儀器，易于推 廣。
[0027] 除特殊說明外，溶液的濃度為質量百分比濃度。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0028] 下面結合附圖對本發明的【具體實施方式】作進一步詳細的說明。
[0029] 圖la :示出載藥微針的皮內制劑貼片的主視圖。
[0030] 圖Ib :示出載藥微針皮內制劑的側視圖的放大圖。
[0031] 圖2 :示出加入微量鈣黃綠素的蒿甲醚皮內微針制劑施用于豬耳皮膚時，鈣黃綠 素從微針內向豬耳皮膚釋放。
[0032] 圖3a示出蒿甲醚肌肉注射劑連續三天給藥的藥時曲線，其中ARM為蒿甲醚用實心 正方形表不。
[0033] 圖3b示出皮內給藥微針制劑連續三天給藥的藥時曲線，其中ARM為蒿甲醚用實心 正方形表不。

【具體實施方式】
[0034] 為了更清楚地說明本發明，下面結合優選實施例和附圖對本發明做進一步的說 明。附圖中相似的部件以相同的附圖標記進行表示。本領域技術人員應當理解，下面所具 體描述的內容是說明性的而非限制性的，不應以此限制本發明的保護范圍。
[0035] 實施例1 :皮內給藥微針制劑的制備：
[0036] 1)將蒿甲醚溶于乙醇溶液中，配置濃度為20mg/ml的蒿甲醚乙醇溶液；
[0037] 2)配置分子量為3000Da、濃度為40%的透明質酸鈉水溶液；
[0038] 3)將I. Oml的蒿甲醚乙醇溶液分散于I. Oml透明質酸鈉水溶液中，形成均勻的乳 液；
[0039] 4)將60 ill乳液加入到微針模具中，施加壓力至0. 2-0. 6MPa，將微針模具在濕度 為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥30分鐘；其中每平方厘米內給藥微針制劑含有 169個微針，微針長度為0. 65mm ;
[0040] 5)向微針模具加入背襯溶液，所述背襯溶液為濃度為50%的透明質酸鈉水溶液， 在濕度為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥5小時，從而制得皮內給藥微針制劑1。
[0041] 實施例2 :皮內給藥微針制劑的制備：
[0042] 1)將蒿甲醚溶于乙醇溶液中，配置濃度為20mg/ml的蒿甲醚乙醇溶液；
[0043] 2)配置分子量lOOOOODa、濃度為5%的透明質酸鈉水溶液；
[0044] 3)將0. 2ml的蒿甲醚乙醇溶液分散于I. 8ml透明質酸鈉水溶液中，形成均勻的乳 液；
[0045] 4)將600 ill乳液加入到微針模具中，抽真空真至真空度為0. 05-0. IMPa，將微針 模具在濕度為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥30分鐘；其中每平方厘米內給藥微針 制劑含有169個微針，微針長度為0. 65mm ;
[0046] 5)向微針模具加入背襯溶液，所述背襯溶液為濃度為50%的透明質酸鈉水溶液， 在濕度為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥5小時，從而制得皮內給藥微針制劑2。
[0047] 實施例3 :皮內給藥微針制劑的制備：
[0048] 1)將蒿甲醚溶于乙醇溶液中，配置濃度為20mg/ml的蒿甲醚乙醇溶液；
[0049] 2)配置分子量5000Da、濃度為20%的透明質酸鈉水溶液；
[0050] 3)將Iml的蒿甲醚乙醇溶液分散于Iml透明質酸鈉水溶液中，形成均勻的乳液；
[0051] 4)將60 ill乳液加入到微針模具中，施加壓力壓至0. 2-0. 6MPa，將微針模具在濕 度為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥30分鐘；其中每平方厘米內給藥微針制劑含有 169個微針，微針長度為0. 65mm ;
[0052] 5)向微針模具加入背襯溶液，所述背襯溶液為濃度為50%的透明質酸鈉水溶液， 在濕度為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥5小時，從而制得皮內給藥微針制劑3。
[0053] 實施例4 :皮內給藥微針制劑的制備：
[0054] 1)配置濃度為20mg/ml的雙氫青蒿素丙酮溶液；
[0055] 2)配置分子量5000Da、濃度為20%的透明質酸鈉水溶液；
[0056] 3)將Iml的雙氫青蒿素丙酮溶液分散于Iml透明質酸鈉水溶液中，形成均勻的乳 液；
[0057] 4)將60 ill乳液加入到微針模具中，施加壓力壓至0? 2-0. 6MPa，將微針模具在濕 度為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥30分鐘；其中每平方厘米內給藥微針制劑含有 169個微針，微針長度為0. 65mm ;
[0058] 5)向微針模具加入背襯溶液，所述背襯溶液為濃度為50%的透明質酸鈉水溶液， 在濕度為20-40%、溫度為15-25°C的條件下干燥5小時，從而制得皮內給藥微針制劑4。
[0059] 實施例5 :皮內給藥微針制劑的制備：
[0060] 1)將鈣黃綠素和蒿甲醚溶于乙醇中，制成其中鈣黃綠素-蒿甲醚乙醇溶液，其中 鈣黃綠素的濃度為0. 5mg/ml，蒿甲醚的濃度為20mg/ml ;
[0061] 2)將分子量5000Da的透明質酸鈉溶于水中，濃度為20% ;
[0062] 3)將LOml的鈣黃綠素-蒿甲醚乙醇溶液分散于LOml透明質酸鈉水溶液中，形 成均勻的乳液；
[0063] 4)將60 ill乳液加入到微針模具中，抽真空真至真空度為0. 05-0. IMPa，將微針模 具在15-25°C，干燥30分鐘；其中每平方厘米內給藥微針制劑含有169個微針，微針長度為 0. 65mm ；
[0064] 5)向微針模具加入背襯溶液，干燥5h，從而制得皮內給藥微針制劑5。
[0065] 實施例6 :微針內鈣黃綠素在皮膚內的吸收
[0066] 1)將皮內給藥微針制劑5施用于豬耳朵皮膚之上，作用時間1小時，移除該皮內給 藥微針制劑的背襯；
[0067] 2)用激光共聚焦顯微鏡從皮膚表面向深處掃描直至檢測不到熒光物質，結果見圖 2〇
[0068] 觀察結果顯示，能夠在深度為200-260 iim的豬耳皮膚內觀察到鈣黃綠素，證明皮 內給藥微針制劑內的藥物可釋放到皮膚內。此外，200-260 ii m的作用深度，未觸及神經末梢 和血管，因此屬于微創無痛的給藥方式。
[0069] 實施例7 :蒿甲醚血藥濃度-時間曲線
[0070] 1)將上述皮內給藥微針制劑3施用于15只大鼠上，大鼠分成三組，施用劑量為 3mg/kg,連續三天給藥,三組大鼠屬于微針給藥組；
[0071] 2)同時對5只大鼠施用相同劑量的蒿甲醚注射液，連續三天給藥，該組為注射給 藥組；
[0072] 3)微針給藥組于給藥前后 0? 25、0. 5、1、2、4、6、8、12、24、24. 25、24. 50、25、26、28、 30、32、36、48、48. 25、48. 5、49、50、52、54、56、60、72、84、96、108h 割尾采血，第一組在第一天 內時間點采血，第二組在第二天時間點內采血，第三組在第三天以后的時間點采血，置于預 先加好肝素的離心管中，3000rpm離心lOmin，取上層血漿，-80°C冰凍保存；注射組于給藥 前后 0? 25、0. 5、1、2、4、6、8、12、24、24. 25、24. 50、25、26、28、30、32、36、48、48. 25、48.5、49、 50、52、54、56、60、72、80h 采血。
[0073] 4)通過液質聯用方法檢測血液中的蒿甲醚的血液濃度。
[0074] 血藥濃度的測定方法：
[0075] 色譜條件：
[0076] Hypersil (100x2. 1mm，3 ii m)，流動相甲醇（A)-IOmM 醋酸銨（B)，梯度洗脫 Omin, 80% A-20% B ；Imin, 80% A-20% B ；1. 5min,95% A-5% B ；2. 0min,95% A-5% B ；2. 5min, 80% A-20% B ;5min, 80% A-20% B ;進樣量 L ;流速 0? 4mL ? min-1。
[0077] 質譜條件離子源電噴霧離子源；離子極性：正離子模式；掃描方式：t_MS2 ;檢測 離子對質荷比（母離子一子離子）：ARM為316. 2115 - 163. 1115,青蒿素（內標）ART為 300. 1803 - 209. 1531 ;碰撞能量NCE分別為30eV和IOeV ;離子源溫度263 °C，噴霧電壓 3. OkV，鞘氣 50psi ;輔助氣 13psi ;
[0078] 藥代動力學的處理方法：
[0079] 利用origins軟件擬合兩種給藥方式的藥代動力學曲線，并用梯形積分法計算藥 時曲線下方面積得到AUC。
[0080] 統計方法：
[0081] 數據采用平均值土標準差表示，以SPSS17. 0統計分析軟件進行統計處理，不同給 藥方式采用單因素方差分析，P〈〇. 05為差異有統計學意義。
[0082] 試驗結果見圖3a、3b及表1
[0083] 表1蒿甲醚經微針或注射給藥后測得的藥代動力學參數
[0084]

【權利要求】
1. 一種青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在于， 包括如下步驟： 1) 青蒿素衍生物溶于乙醇或丙酮中，制成青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物的丙 酮溶液； 2) 制備透明質酸鈉水溶液； 3) 將所述青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物的丙酮溶液與所述透明質酸鈉水溶 液混合形成乳液，其中所述青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物丙酮溶液占透明質酸鈉 水溶液體積百分比為10-50% ; 4) 將所述乳液加入到微針模具中； 5) 干燥； 6) 加入背襯溶液； 7) 干燥。
2. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：所述青蒿素乙醇溶液的濃度小于40mg/ml。
3. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：所述青蒿素丙酮溶液的濃度小于60mg/ml。
4. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：透明質酸鈉水溶液的濃度為5-40wt%。
5. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：所述透明質酸鈉的分子量為3000-100000Da。
6. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：所述透明質酸鈉的分子量為5000-20000Da。
7. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：所述青蒿素衍生物包括蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯或雙氫青蒿素。
8. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：所述背襯溶液選自2〇-5〇Wt%的聚乙烯吡咯烷酮溶液、2〇-5〇 Wt%的透明質酸鈉水溶 液、10-30wt %的Gantrez? AN-139溶液、20-50wt %的硫酸軟骨素溶液和5-10wt %的羧甲 基纖維素鈉溶液的一種或多種。
9. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：所述背襯溶液為20-50wt%的透明質酸鈉水溶液。
10. 根據權利要求1所述的青蒿素衍生物的皮內給藥微針制劑的制備方法，其特征在 于：利用施加壓力或抽真空的方法使步驟3)乳液加入到微針模具微孔中；其中所述施加壓 力為0· 2-0. 6MPa ;所述抽真空達到的真空度為0· 05-0. IMPa。
【文檔編號】A61K31/366GK104382884SQ201410588983
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年10月28日 優先權日:2014年10月28日
【發明者】高云華, 李春, 徐百 申請人:中國科學院理化技術研究所