發明領域本發明涉及一種制備大環螯合劑dota的釓金屬絡合物制劑的方法，所述制劑還包含少過量的游離dota。該方法使用受控條件，使得過量的釓以氧化釓的沉淀存在，并過濾以除去過量，之后加入限定過量的dota螯合劑。還提供了制備基于gd-dota的mri造影劑的方法。發明背景鑭系金屬(特別是釓)的金屬絡合物作為在體內醫學成像領域中的mri造影劑具有重要意義。基于釓的金屬絡合物的mri造影劑已被詳盡地評述[見例如zhang等人,curr.med.chem.,12,751-778(2005)和aime等人,adv.inorg.chem.,57,173-237(2005)]。然而，游離釓離子確實在體內顯示出明顯的毒性。us5,876,695通過在釓金屬絡合物的制劑中包含添加劑解決了這個問題，所述添加劑是例如具有鈣的“弱金屬螯合物絡合物”。想法是過量的“弱金屬螯合物絡合物”將有效地絡合可偶然地釋出或存在的任何釓離子，因而改進了mri造影組合物的安全性。ep2513043b1公開了一種制備釓金屬絡合物的方法，其中先使釓與任選地用金屬配位基團官能化的陽離子交換樹脂絡合。固相結合的釓隨后與氨基羧酸螯合劑反應以釋出所需的釓絡合物。任何過量的釓保持與固相的結合。ep2242515b9公開了一種制備含有大環螯合物與鑭系元素的絡合物和0.002%和0.4%之間的mol/mol量的游離大環螯合物的液體藥物制劑的過程，所述過程包括以下連續的步驟：b)通過混合游離大環螯合物的溶液和游離鑭系元素的溶液，以通過大環螯合物獲得鑭系元素的絡合，制備含有大環螯合物與鑭系元素的絡合物，和不在賦形劑x[x',l]的形式下的游離大環螯合物的液體藥物組合物，其中l是大環螯合物且x和x'是金屬離子，特別是獨立地選自鈣、鈉、鋅和鎂，和游離鑭系元素，游離大環螯合物的量和游離鑭系元素的量使得并非所有鑭系元素被絡合；c)測量在步驟b)中獲得的藥物制劑中的游離鑭系元素的濃度clanl；游離大環螯合物的濃度cchl等于0；d)通過將一定量的游離大環螯合物加入到步驟b)中獲得的制劑中來調節cchl和clanl，所述游離大環螯合物的量有必要首先完成游離鑭系元素的絡合以獲得clanl=0，且其次獲得cchl=ctchl，其中ctchl是最終液體藥物制劑中的游離大環螯合物的目標濃度并在0.002%和0.4%mol/mol之間的范圍內選擇，其中最終液體藥物制劑中的游離大環螯合物的量對應于游離大環螯合物相對于最終液體藥物制劑中絡合的大環螯合物的量的比例。ep2242515b9教導了所述方法優選還包括測定最終液體藥物制劑中的游離大環螯合物的理論目標濃度ctchl的在先步驟a)。us2012/0082624a1公開了與ep2242515b9類似的過程，不同之處在于以粉末形式獲得藥物制劑。ep2242515b9和us2012/0082624a1二者都強調，對于工業規模的藥物制造過程，加入0.1mol%的游離大環螯合物難以單靠稱重達到所需的準確度。這歸因于包含的螯合劑的量的1000倍差異，加上螯合劑的吸濕特性。要求保護的發明，如上所述，是首先進行與過量的鑭系金屬離子的金屬絡合，然后再準確確定未絡合的、過量的鑭系元素的濃度。隨后該測定被用來精確計算多少額外的螯合劑必須加入以既使過量的鑭系元素絡合，又達到所需的0.1%摩爾過量的大環螯合物。ep2242515b9的參考實施例3包括實驗室規模的制備，其通過使dota(10g,25mmol)與化學計量量的氧化釓(gd2o3,12.5mmol)在80℃，在水(ph6-7)中反應來制備gd-dota。然后將ph調節至5，且殘余的游離釓通過與chelex樹脂一起攪拌2小時，接著過濾除去。ep2242515b9教導了gd-dota絡合物隨后從乙醇水溶液沉淀，得到80%分離產率的白色粉末。ep2242515b9未教導參考實施例3的方法如何可適合提供液體藥物組合物，其具有過量的在0.002%和0.4%mol/mol范圍內的大環螯合物，特別是在工業規模上。wo2014/114664提供一種制備gd-dota葡甲胺(釓特酸葡甲胺)的過程，其首先包括從輪環藤寧(cyclen)合成dota，接著經由重結晶和陽離子和陰離子交換層析二者的多步驟純化。然后使純化的dota與gd2o3反應，得到gd-dota絡合物，接著加入葡甲胺，得到所需產物。wo2014/161925教導，當以工業規模制備gd-dota和類似的絡合物時，在使用和修正相應所用的摩爾量之前，必須測定螯合劑的含水量。wo2014/161925指明，dota的含水量隨著相對濕度條件而變化。對制備結合過量的此類螯合劑的大環螯合物的鑭系金屬絡合物的制劑的備選方法仍有需求。所述方法應優選地適合于工業規模的藥物制造，且還適合于提供包含這樣的制劑的mri造影劑。本發明本發明提供了一種制備液體藥物制劑的方法，所述制劑包含釓dota絡合物，以及量在0.002和0.4mol/mol%范圍內的未絡合形式的dota。這樣的制劑在提供mri造影劑中是有用的。然后，本發明的方法避免了對現有技術的測量和調節步驟的需要，這對于簡化時間和工作量二者有用。本方法替代提供了一種方法，由此首先獲得gd-dota金屬絡合物，而不存在過量的釓離子。這通過控制反應條件來實現，使得任何過量的釓以不溶性gd2o3存在，其可以通過過濾除去。此外，gd-dota絡合物保持在水溶液中，因此不需要對絡合物的水分含量進行修正。由于該方法提供不具有游離釓離子的gd-dota金屬絡合物的中間體溶液，可容易地計算加入以得到具有限定過量的游離螯合劑的所需制劑的過量dota的量。本發明的方法還具有可以在工業規模上進行的優點。發明詳述在第一方面，本發明提供制備液體藥物制劑的方法，所述制劑包含金屬絡合物gd-dota的葡甲胺鹽，以及量在所述gd-dota絡合物的0.002-0.4mol/mol%范圍內的未絡合形式的dota，所述方法包括以下步驟：(i)以下任一反應：(a)1:1摩爾比的dota和葡甲胺的水溶液與過量的gd2o3反應，由此所有的dota反應以得到gd-dota；或(b)dota的水溶液與不足的gd2o3在ph2.0-6.0下反應，其中所有的釓反應以得到gd-dota，接著加入葡甲胺以將ph升高至6.5-8.0，然后加入過量的gd2o3；或(c)dota與過量的葡甲胺的水溶液在ph6.5-8.0下與過量的gd2o3反應，由此所有dota反應以得到gd-dota；由此(a)、(b)或(c)得到含有過量未溶解gd2o3的gd-dota第一溶液；(ii)過濾來自步驟(i)的第一溶液以除去過量的未溶解gd2o3，得到包含gd-dota的不含過量gd2o3的第二溶液；(iii)將0.002-0.4mol/mol%范圍內的未絡合形式的dota加入到來自步驟(ii)的所述第二溶液中，得到所述液體藥物制劑；其中未絡合形式的所述dota不含配位金屬離子。術語“dota”是大環螯合劑1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸的常規縮寫，且指dota本身或其鹽：dota。dota及其生物醫學成像中的金屬絡合物已經由stasiuk和long[chem.comm.，49，22732-2746(2013)]描述。短語“未絡合形式的dota”指“游離螯合劑”，即無任何配位的金屬離子。因此，未絡合形式的dota不具有任何配位的鑭系元素或其它金屬離子，因此完全可用于后續的金屬絡合。“未絡合形式的dota”可含有離子形式的金屬離子，例如當作為羧酸金屬供體基團的羧酸鹽存在時。術語“葡甲胺”具有其常規含義，且指n-甲基葡糖胺。術語“包含”或“含有”在整個本申請中具有其常規意義并意味著試劑或組合物必須具有所列的基本特征或組分，但其它物質可能另外存在。術語“包含”包括“基本由…組成”作為優選的子集，“基本由…組成”意指組合物具有所列組分，而不存在其它特征或組分。用于步驟(i)的絡合的合適溶劑是本領域已知的[醫學磁共振成像中造影劑的化學(thechemistryofcontrastagentsinmedicalmagneticresonanceimaging),第2版,a.merbach,l.helm&e.toth(eds),wiley(2013)]，并且合適地是水性的。釓通過大環螯合物(例如dota)的絡合是涉及稍微穩定的初始絡合物的多步驟過程，所述初始絡合物緩慢地成熟，得到最終的熱力學穩定的金屬絡合物。步驟(i)(a)中過量的釓或步驟(i)(b)中過量的dota通過知道釓dota絡合物的化學計量比為1:1絡合物來計算摩爾比獲得。還考慮了使用的釓和dota二者的化學純度百分比。氧化釓(gd2o3)不溶于水，但在酸性ph下會水解，在溶液中給出游離的釓離子。在中性ph下，這種水解已報道為不存在或非常緩慢[hemmer等人，adv.mat.sci.eng.，1-15(2012)doi：10.1155/2012/748098)。在步驟(i)(a)中，將過量的氧化釓加入到1:1摩爾比的dota和葡甲胺的混合物中。dota將消耗氧化釓并形成gd-dota，且通過使用正確的dota/葡甲胺比(100:95至100:100摩爾比dota/葡甲胺)，ph將在絡合結束時接近較高的ph(ph6-8)。由于較高的ph值，不溶性氧化釓的水解非常緩慢，這允許通過過濾隨后除去過量的氧化釓。在步驟(i)(b)中，在酸性ph下將不足化學計量量的gd2o3加入到dota中。在完全消耗氧化釓后，加入葡甲胺以將ph升高至6.5-8.0，接著加入過量的gd2o3(約1至5%)。這有助于所有dota的完全絡合，同時使過量gd2o3的水解最小化(由于中性ph下的緩慢動力學)。在這個過程中，利用低ph下的高絡合速率和在升高ph下的低水解率二者。在步驟(i)(c)中，使用過量的葡甲胺，導致更高的ph(約ph6.5-8)，導致氧化釓的水解程度甚至更低。由于dota的酸度，在步驟(iii)中隨后通過加入0.1mol/%的過量dota中和堿性gd-dota-葡甲胺溶液。步驟(ii)的過濾可以通過標準方法實現。步驟(iii)的加入優選地在不進行游離釓在第一或第二溶液中的濃度/量的在先過程中測定的情況下實施。這是因為這樣一個步驟對于本方法不是必要的-步驟(ii)的過濾得到具有已知(即有效零)濃度的游離釓的“第二溶液”。因此，基于步驟(i)中起始摩爾量的dota，基于假定在步驟(i)的絡合反應中100%轉化率，根據計算量的“未絡合形式的dota”進行步驟(iii)的加入。100%轉化率與本領域關于這樣反應的有效性已知的一致。dota可作為固體，或作為溶液且優選作為溶液加入。當制備dota的溶液以便進行步驟(i)時，那么最優選的方法是從該溶液除去合適的體積分數，然后加入氧化釓(例如從1000l反應體積或等量除去約1l)。然后方便地將該體積分數用于步驟(iii)的加入。這種方法不再需要補充多種溶液，和/或進行多次計算以修正純度或含水量。第一方面的方法適合以實驗室、中試設備或工業制造規模進行。該方法特別適合于千克規模生產，從1kg至800kg，優選100kg-650kg規模。優選實施方案.在第一方面的方法中，步驟(i)的選項(a)、(b)和(c)中過量的gd2o3在0.001至5范圍內，更優選為0.01至1，最優選為0.05至0.5mol/mol%，0.05至5mol/mol%。在該范圍(約0.001至0.01mol%)內的過量的釓金屬的最低水平可以通過以下實現：增量加入釓的等分試樣，直到觀察到存在游離釓離子的陽性試驗。這樣的“現場試驗”對存在/不存在問題給出是/否的回答，但未提供關于游離釓濃度的信息。現場試驗可使用偶氮胂染料進行，如本領域已知。或者，過量的釓可通過如本領域已知的二甲酚橙測定或偶氮胂iii測定來確定[分別在barge等人,contrastmed.mol.imaging,1,184-188(2006)和hvattum等人，j.pharm.biomed.anal.，13(7)，927-932(1995)]。二甲酚橙和偶氮胂iii是市售可得的。更高水平(>0.01mol%至最多5mol%)的過量的釓可通過單獨稱重獲得。在第一方面的方法中，步驟(iii)的未絡合形式的dota的量相對于gd-dota絡合物優選在0.025-0.25范圍內，更優選為0.08至0.12，最優選為0.09至0.11mol/mol%。未絡合形式的dota合適地不含釓金屬離子，且優選也不含配位的鈣、鋅和鎂離子。第一方面的方法的步驟(ii)優選進一步包括在過濾之后，通過以下步驟除去溶液中的任何過量的gd3+：(a)將過濾的溶液與固相結合的清除劑螯合劑接觸一次或多次，由此溶液中的任何過量的gd3+與所述清除劑螯合劑絡合；(b)從步驟(a)的過濾的溶液中分離固相。短語“固相結合的清除劑螯合劑”指共價綴合到不溶于用于鑭系元素絡合的溶劑的固相材料的螯合劑。綴合的螯合劑絡合溶液中的游離金屬離子，因此能夠從溶液除去或“清除”任何這樣的金屬離子。選擇不同于dota的清除劑螯合劑，因此適當地具有比dota更低的與釓金屬的形成常數，且適當地選擇使得它不能替代來自gd-dota金屬絡合物的釓。優選選擇清除劑螯合劑，使得捕獲溶液中的游離金屬離子的動力學是快速的。因此，優選線性(即非大環)清除劑螯合劑。在結合到固相時，清除劑螯合劑通過過濾在任選的洗滌情況下容易與其所接觸的溶液分離。合適的固相材料包括合成的聚合物和共聚物。步驟(a)的接觸可以通過兩種主要方法或其組合進行。第一個選項是將固相樹脂與“第一溶液”混合。或者，固相可以作為柱提供，且“第一溶液”通過柱洗脫。然后通過過濾溶液以除去釓結合的樹脂，或通過分別從柱洗脫中收集洗脫液來實現步驟(b)的分離。優選地，過濾的樹脂或固相柱可以用合適的溶劑洗滌以確保更完全地回收“第二溶液”。步驟(a)的接觸優選在ph4.0至6，更優選4.5至5.5下進行，約ph5是理想的。清除劑螯合劑優選包含亞氨基二乙酸(ida)、edta或dtpa，更優選亞氨基二乙酸。優選的固相結合的清除劑螯合劑是chelex?100，其是苯乙烯二乙烯基苯共聚物，具有綴合于其上的螯合劑ida。chelex?100可作為來自bio-radlaboratories和其他供應商的鈉鹽或銨鹽市售可得。商業供應商提供關于用于除去給定量的金屬的合適量樹脂的信息。在中性ph下，chelex作為陽離子交換樹脂起作用，因此對帶負電例如gd(dota)-的釓金屬絡合物沒有親和力。這具有以下優點：這種絡合物與固相的非特異性結合是最小的，因此對產率的影響最小。清除劑螯合劑優選作為所述清除劑螯合劑的葡甲胺鹽存在。這樣的材料可通過常規離子交換層析技術制備，以通過培養或用過量的葡甲胺溶液洗脫來改變反荷離子(例如chelex?-100的鈉或銨鹽)。然后，固相可以任選在使用前干燥。或者，葡甲胺鹽清除劑樹脂可通過加入質子化形式的樹脂(通過以與實施例1的程序類似的程序，用強酸洗滌例如市售的chelex獲得)原位生成。然后水合氫離子chelex樹脂在含有葡甲胺的絡合反應中原位形成對應的葡甲胺鹽形式。這樣的葡甲胺樹脂具有特定的優點，即當制備gd-dota葡甲胺鹽時，產物的鈉離子/鹽含量減少。因此，在市售的chelex?樹脂中的清除劑螯合物(ida)的反荷離子是鈉，因此對于捕獲的每一個釓離子，3個鈉離子被釋放進入反應混合物中。為避免鈉污染，可制備chelex?樹脂以便所有的鈉離子交換葡甲胺鹽離子。因此，當釓離子被清除劑樹脂捕獲時，釋出3個葡甲胺鹽離子。使用后，具有結合的金屬離子的清除劑螯合物樹脂可任選地再生，以通過用過量的葡甲胺或其它反荷離子處理隨后再使用。對于chelex，標準再生方法在由商業供應商提供的操作指示手冊中描述。完全除去釓將通過在樹脂的酸性水洗滌后的洗脫液的icp-aes或icp-ms，或通過上文提及的“現場試驗”確定。步驟(i)的釓絡合過程通常本質上是多步驟的。絡合發生在較寬的ph范圍內，但是多步驟過程的每個步驟都具有最佳的ph范圍。在步驟(i)的選項(a)、(b)(c)中使用包括ph的反應條件的控制。低ph(ph約2)是適于溶解所有gd2o3以在溶液中得到游離的釓離子。然而，在該低ph下，dota的羧酸根基團不能完全絡合所有的釓離子，因為羧酸根基團被部分質子化。在稍高的ph(約4至5)下，羧酸根陰離子的形成是有利的，這繼而有利于金屬絡合。形成的初始gd-dota絡合物實際上是雙質子化的，然后緩慢成熟以得到高熱力學(和動力學)穩定性的最終gd-dota絡合物[moreau等人，chem.eur.j.，10(20)，5218-32(2004)]。成熟過程通過較高的ph和加熱(通常在約ph5下加熱幾小時)而有利。步驟(iii)的加入優選在加入過量的dota之前首先中和至中性ph(約ph7-7.4)進行。該中和優選使用葡甲胺進行。dota可從一系列的供應商市售可得。dota也可通過desreux[inorg.chem.,19,1319-1324(1980)]或toth等人[inorg.chem.，33,4070-4076(1994)]的方法合成。大環螯合物合成的進一步細節由kotel等人給出[第3章第83-155頁，醫學磁共振成像中造影劑的化學(thechemistryofcontrastagentsinmedicalmagneticresonanceimaging),第2版,a.merbach,l.helm&e.toth(eds),wiley(2013)]。葡甲胺(n-甲基葡萄糖胺)可從一系列的供應商市售可得。優選地，使用藥用級材料。在第二方面，本發明提供一種制備mri造影劑的方法，其包括：(a)進行第一方面的方法，得到如在其中限定的液體藥物制劑；(b)任選地用生物相容的載體稀釋來自步驟(a)的液體藥物制劑；(c)將來自步驟(b)的制劑分配到藥學上可接受的容器或注射器中，得到分配的容器或注射器；(d)在無菌制造條件下進行步驟(a)-(c)，或進行來自步驟(c)的分配的容器或注射器的終端滅菌，得到呈適合于哺乳動物給予形式的在所述藥學上可接受的容器或注射器中的mri造影劑。第二方面的液體藥物制劑和步驟(a)的方法的優選實施方案如在第一方面(上文)中所述。術語“造影劑”具有其在體內醫學成像領域的常規意義，并指適合于哺乳動物給予形式的試劑，其有助于在關注的區域或器官提供比可通過單獨使受試者成像獲得的圖像更清楚的圖像。“mri造影劑”通常為一種順磁性或鐵磁性物質，適合于哺乳動物給予，其縮短在受試者體內成像所關注的區域中相關原子核的t1和/或t2弛豫時間(例如對于1hnmr的1h)。術語“受試者”意指哺乳動物體內，優選完整的哺乳動物體內，和更優選活的人類受試者。短語“適合于哺乳動物給予的形式”意指這樣的組合物，其是無菌的、無熱原的、缺乏產生毒性或不利作用的化合物，以及在可生物相容的ph(約ph4.0-10.5)下配制。這樣的組合物缺乏可能導致體內栓子的風險的顆粒，并被配制以便在與生物流體(例如血)接觸時不會發生沉淀。這樣的組合物也含有僅生物相容的賦形劑，且優選是等滲的。如同其它體內成像劑，造影劑設計成對要成像的哺乳動物受試者具有最小限度的藥理學作用。優選地，造影劑可以最小限度的侵入方式給予哺乳動物體內，即當在專業的醫療專門知識下進行時，對哺乳動物受試者沒有實質上的健康風險。這樣的最小限度的侵入給予優選地經靜脈內給予到所述受試者的外周靜脈中，而不需要局部或全身麻醉。術語“生物相容的載體”意指一種流體，特別是液體，以使組合物是生理學上可耐受的，即可給予哺乳動物體內，而無毒性或過度的不適。生物相容的載體適合為一種可注射的載體液體例如供注射用的無菌、無熱原的水；水溶液例如鹽水(其可有利地進行平衡，以使供注射用的最終產品是等滲的)；包含生物相容的緩沖劑(例如磷酸鹽緩沖劑)的水性緩沖溶液；一種或多種滲透壓調節物質(例如血漿陽離子與生物相容的反荷離子的鹽)、糖(例如葡萄糖或蔗糖)、糖醇(例如山梨糖醇或甘露醇)、二醇(例如甘油)，或其它非離子多元醇材料(例如聚乙二醇、丙二醇等)的水溶液。優選地，所述生物相容的載體是供注射用的無熱原的水(wfi)、等滲鹽水或磷酸鹽緩沖劑。短語“無菌制造”指在無菌制造，即無熱源條件下進行相關過程步驟，例如在潔凈室環境中。術語“滅菌”或“滅菌法”具有其常規意義，且指破壞微生物的過程，以獲得一種無菌、無熱源組合物。短語“終端滅菌”具有其常規意義，并指進行在gmp(良好制造規范)之前的步驟，但在整個過程中盡可能晚地執行滅菌步驟。組分和試劑可通過本領域已知的方法滅菌，包括：無菌過濾、使用例如γ-輻射的終端滅菌、高壓滅菌法、干熱或化學處理(例如用環氧乙烷)或其組合。術語“高壓滅菌法”具有其常規意義，并指使用過熱蒸汽滅菌的一種特定滅菌方法。高壓滅菌法和其它滅菌方法描述于在醫學和藥物產品中實現滅菌(achievingsterilityinmedicalandpharmaceuticalproducts),n.halls(crcpress,1994)。在第二方面的方法中，終端滅菌是優選的。一種優選的終端滅菌方法是高壓滅菌法。術語“分配的容器或注射器”指裝料的容器，即已將等分的組合物分配至其中的容器，即分配的小瓶。用于第二方面的方法的合適容器、小瓶和蓋以及注射器是藥用級的并廣泛市售可得。通過下面詳細描述的非限制性實施例說明本發明。實施例1提供葡甲胺清除劑螯合劑樹脂的制備。實施例2提供能夠分析這些組分的混合物中的gd-dota、游離dota和葡甲胺的hplc-cad方法。實施例3提供gd-dota絡合物的制備，根據本發明的方法除去過量的釓。縮寫dota：1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸；dtpa：二亞乙基三胺-五乙酸；edta：乙二胺-四乙酸；gmp：良好制造規范；hplc：高效液相色譜；hplc-cad：hplc電霧式檢測器；icp-aes：電感耦合等離子體原子發射光譜；icp-ms：電感耦合等離子體質譜；mecn：乙腈；min：分鐘；mri：磁共振成像；wfi：注射用水。實施例1：制備葡甲胺化chelex?樹脂(“meg-chelex”).將在燒結玻璃濾器上的chelex-100樹脂(sigma-aldrich；100g)用1mhcl(1l)按4份處理4h。然后用水洗滌樹脂直至洗脫液為ph6.5，且用樹脂平衡葡甲胺(10g)的水溶液(400ml)經1h的時間段。再次用水洗滌樹脂至ph8，在真空下過濾并干燥1分鐘，得到潮濕的樹脂，其以該形式(“meg-chelex”)使用。實施例2：hplc-cad方法：gddota-葡甲胺溶液中的dota測定.檢測器：esacorona，電霧式檢測器；柱：sequantzic-philic(5μm,150*4.6mm)。樣品制備：向20μl(約0.5m)反應混合物中加入zn(oac)2(10μl,10mg/ml)，然后加入水(270μl)，接著加入mecn(700μl)*。注入體積：20μl；移動相：100mm乙酸銨(a)、乙腈(b)。在樣品注入前，用初始組合物(15:85a:b)，以1ml/min的流速調節柱至少5分鐘。梯度：時間(min)流速(ml/min)%a%b曲線1.初始1.0015.085.02.50.001.0033.066.06其中曲線6指線性梯度。觀察到以下保留時間：保留時間(min)葡甲胺21.3gddota23.2zndota*28.1.*dota作為zndota絡合物間接分析。實施例3：gd-dota-葡甲胺溶液的制備，去除釓離子.將葡甲胺(0.749g，4.00mmol)、dota(1.615g，4.00mmol)、氧化釓(0.749g2.04mmol)和水(8.0g)在燒瓶中合并且在60℃下攪拌過夜。這得到溶液明顯混濁的混合物。將混合物用注射器過濾器(pallacrodisc25mm，0.45μpvdf膜)過濾，得到ph~9的澄清溶液。使用偶氮胂指示劑檢測沒有游離釓[hvattum等人，j.pharm.biomed.anal.，13(7)，927-932(1995)]。檢測限為<9.4μg/ml或<0.06mm。偶氮胂iii染料市售可得。當前第1頁12