本發明涉及他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物、制劑及其應用。
背景技術：
：由血小板聚集形成的血管內血栓或栓塞導致心血管疾病。心血管疾病主要包括冠心病、高血壓、中風和外周血管病，它具有發病率高，死亡威脅大的特點。雖然目前治療心血管疾病的方法越來越多，但是藥物治療仍然是基礎治療、最為重要和首選的方法之一。治療心血管疾病的藥物，按照藥物作用機制主要分為利尿劑、β受體阻滯劑、鈣通道阻滯劑、血管緊張素轉換酶抑制劑(acei)類、血管緊張素受體拮抗劑(arb)類、α-阻滯劑、強心藥及洋地黃類、調血脂藥物、抗心律失常類、心肌營養藥等。蚓激酶是從多代雜交的紅赤子愛勝蚓體內提取出來的一組蛋白水解酶，1992年獲sfda批準用于缺血性腦血管疾病的預防和治療，是目前臨床預防和治療缺血性腦血管病的常用藥，其作用機理是通過直接和間接的途徑激活體內的纖溶系統，從而降低血漿中過高的纖維蛋白原水平，同時對血小板的聚集具有很好的抑制作用，進而能夠抑制血栓的形成，具有化血油、溶栓、抗凝、活化細胞、修復血管等多種功效。技術實現要素：本發明的目的是提供他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物、制劑及其應用，該藥物組合物可抑制血小板的聚集。本發明提供的他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物，它由他汀類藥物或其藥學上可接受的鹽和蚓激酶組成。上述的他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物中，所述他汀類藥物或其藥學上可接受的鹽與所述蚓激酶的比例為(1～30)mg：(60～180)萬u，其中，所述他汀類藥物藥學上可接受的鹽的質量以他汀類藥物的質量計。上述的他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物中，所述他汀類藥物或其藥學上可接受的鹽與所述蚓激酶的比例具體可為(1～20)mg：(60～180)萬u、(1～2)mg：(60～180)萬u、(1～2.5)mg：(60～180)萬u、(1～5)mg：(60～180)萬u、(1～10)mg：(60～180)萬u、2mg：(60～180)萬u、(2～2.5)mg：(60～180)萬u、(2～5)mg：(60～180)萬u、(2～10)mg：(60～180)萬u、(2～20)mg：(60～180)萬u、(2.5～5)mg：60萬u、(2.5～10)mg：60萬u、(2.5～20)mg：(60～180)萬u、(5～10)mg：60萬u、(5～20)mg：(60～180)萬u、(10～20)mg：(60～180)萬u、1mg：60萬u、2mg：60萬u、2mg：180萬u、2.5mg：60萬u、5mg：60萬u、10mg：60萬u或20mg：180萬u。上述的他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物中，所述他汀類藥物可為匹伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、瑞舒伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀和普伐他汀中的任一種；具體地，所述他汀類藥物為匹伐他汀時，匹伐他汀與蚓激酶的藥物組合物中，匹伐他汀與蚓激酶的比例可為(1～2)mg：(60～180)萬u、(1～2)mg：60萬u、2mg：(60～180)萬u、1mg：60萬u、2mg：60萬u或2mg：180萬u；所述他汀類藥物為辛伐他汀時，辛伐他汀與蚓激酶的藥物組合物中，辛伐他汀與蚓激酶的比例可為(2.5～20)mg：(60～180)萬u、(2.5～5)mg：60萬u、(2.5～10)mg：60萬u、(5～10)mg：60萬u、(5～20)mg：(60～180)萬u、(10～20)mg：(60～180)萬u、2.5mg：60萬u、5mg：60萬u、10mg：60萬u或20mg：180萬u。上述的他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物中，所述他汀類藥物藥學上可接受的鹽可為鈉鹽、鈣鹽、鋅鹽和鉀鹽中的一種或幾種。上述的他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物在下述1)和/或2)中的應用，也在本發明的保護范圍內：1)在制備抑制血小板聚集的藥物中的應用；2)在制備治療心血管疾病的藥物中的應用。本發明在上述藥物組合物的基礎上，進一步提供了他汀類藥物與蚓激酶的復方制劑，其有效成分為上述他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物。上述的他汀類藥物與蚓激酶的復方制劑中，所述藥物組合物的質量百分含量可為6％～50％，具體可為10％～15％、13.2％、10.5％、12.9％或10.7％。上述的他汀類藥物與蚓激酶的復方制劑中，所述蚓激酶的比活力不小于1.2萬u/mg，具體可為2萬u/mg。上述的他汀類藥物與蚓激酶的復方制劑中，所述蚓激酶以蚓激酶腸溶制劑的形式存在，具體可采用腸溶材料包衣后制得，所述蚓激酶與所述腸溶包衣材料的質量比可為1：(0.02～2)，具體可為1：0.5；所述腸溶包衣材料可為苯二甲酸醋酸纖維素(cap)、羥丙基甲基纖維素酞酸酯(hpmcp)、聚乙烯醇醋酸苯二價酸酯(pvap)和聚丙烯酸樹脂(acrylicresin)中的任一種。上述的他汀類藥物與蚓激酶的復方制劑中，所述復方制劑包括蚓激酶腸溶制劑和他汀類藥物制劑，所述蚓激酶腸溶制劑由蚓激酶、其藥學上可接受的輔料和腸溶包衣材料制成，所述他汀類藥物制劑由他汀類藥物或其藥學上可接受的鹽與其藥學上可接受的輔料制成；所述復方制劑的劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑或微丸劑；所述膠囊劑的內容物為蚓激酶腸溶制劑和他汀類藥物的混合物，所述蚓激酶腸溶制劑或所述他汀類藥物制劑為顆粒、混粉或微丸；所述膠囊劑的外殼為胃溶性空心膠囊；所述片劑由所述蚓激酶腸溶制劑和所述他汀類藥物制劑壓片后得到，所述蚓激酶腸溶制劑或所述他汀類藥物制劑為顆粒、混粉或微丸；所述顆粒劑由所述蚓激酶腸溶制劑和所述他汀類藥物制劑混合得到，所述蚓激酶腸溶制劑或所述他汀類藥物制劑為顆粒；所述微丸劑由所述蚓激酶腸溶制劑和所述他汀類藥物制劑混合得到，所述蚓激酶腸溶制劑或所述他汀類藥物制劑為微丸。上述的他汀類藥物與蚓激酶的復方制劑中，所述蚓激酶腸溶制劑為顆粒、混粉或微丸時，它由蚓激酶和相應的輔料制成顆粒、混粉或微丸后，用腸溶薄膜包衣材料包衣得到；所述他汀類藥物制劑為顆粒、混粉或微丸時，它由他汀類藥物和相應的輔料制得。本發明具有如下有益效果：本發明他汀類藥物與蚓激酶的藥物組合物，與單劑他汀類藥物或單劑蚓激酶相比，可提高對血小板的聚集的抑制率，為治療心血管疾病的新型藥物組合物，本發明在此基礎上還將該藥物組合物制成了各種劑型的制劑以方便服用。附圖說明圖1為實施例1中不同配比的匹伐他汀鈣與蚓激酶的藥物組合物對血小板的凝集率(*表示與正常組相比p≤0.05；**表示與正常組相比p≤0.01；△表示與蚓激酶單劑組比較p≤0.05；△△表示與蚓激酶單劑組比較p≤0.01；#表示與匹伐他汀單劑組比較p≤0.05；##表示與匹伐他汀單劑組比較p≤0.01；復方組分別于對應的單劑量組作比較)。圖2為實施例2中不同配比的辛伐他汀與蚓激酶的藥物組合物對血小板的凝集率(*表示與正常組相比p≤0.05；**表示與正常組相比p≤0.01；△表示與蚓激酶單劑組比較p≤0.05；△△表示與蚓激酶單劑組比較p≤0.01；#表示與辛伐他汀單劑組比較p≤0.05；##表示與辛伐他汀單劑組比較p≤0.01；復方組分別于對應的單劑量組作比較)。圖3為實施例4中匹伐他汀鈣與蚓激酶復方制劑在水介質中匹伐他汀鈣的釋放曲線。圖4為實施例5中辛伐他汀與蚓激酶復方制劑在ph4.5磷酸緩沖鹽+正丙醇(v/v＝2：1)溶液中辛伐他汀的釋放曲線。具體實施方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。腸溶包衣材料聚丙烯酸樹脂購自卡樂康，商品名為雅克宜。實施例1、匹伐他汀鈣與蚓激酶的藥物組合物按照下表1中的不同質量比混合匹伐他汀鈣與蚓激酶，制備得到不同配比的藥物組合物。表1、匹伐他汀鈣與蚓激酶的藥物組合物序號匹伐他汀(質量)蚓激酶(質量)11mg30mg(60萬u)22mg30mg(60萬u)32mg90mg(180萬u)注：表1中匹伐他汀為匹伐他汀鈣以匹伐他汀計1或2mg。實施例2、辛伐他汀與蚓激酶的藥物組合物表2、辛伐他汀與蚓激酶的藥物組合物序號辛伐他汀(質量)蚓激酶(質量)12.5mg30mg(60萬u)25mg30mg(60萬u)310mg30mg(60萬u)420mg90mg(180萬u)實施例3、應用實驗(1)匹伐他汀與蚓激酶的藥物組合物對血小板聚集的抑制實驗材料：實施例1中不同配比的藥物組合物及單劑，臨用前均用0.5％羧甲基纖維素鈉溶解二磷酸腺苷二鈉(adenosinediphosphate,adp)。實驗動物及分組：sd大鼠，雄性，體重(240±200)g，清潔級。實驗大鼠隨機分為8組，分別為1)正常組、2)蚓激酶30mg(60萬u)組、3)蚓激酶90mg(180萬u)組、4)匹伐他汀1mg組、5)匹伐他汀2mg組、6)匹伐他汀1mg+蚓激酶30mg(60萬u)復方組、7)匹伐他汀2mg+蚓激酶30mg(60萬u)復方組、8)匹伐他汀2mg+蚓激酶90mg(180萬u)復方組。各給藥組每天灌胃1次，連續給藥1周，正常組大鼠給予等體積溶媒。統計學處理：采用spss11.0統計軟件進行分析，實驗數據以x±s表示。組間差異比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用dunnett’c檢驗。實驗方法：sd大鼠80只隨機分為8組，實驗前12h禁食不禁水。各給藥組末次給藥2h后，腹主動脈取血，枸櫞酸鈉溶液(3.8％)與血液按照1：9混合，800r/min離心10min，獲得富含血小板血漿；3000r/min離心10min制備貧血小板血漿。調整富血小板血漿中血小板濃度為(600～700)×109個/l，按照比濁法，應用血小板聚集儀，貧血小板血漿調零后，在攪拌情況下，加入血小板誘導劑adp，測定血小板最大聚集率。實驗結果如圖1所示，其中，1正常組、2蚓激酶30mg、3蚓激酶90mg、4匹伐他汀1mg、5匹伐他汀2mg、6復方(匹伐他汀1mg+蚓激酶30mg)、7復方(匹伐他汀2mg+蚓激酶30mg)、8復方(匹伐他汀2mg+蚓激酶90mg)。由圖1可以看出，實施例1中三種配比的匹伐他汀和蚓激酶復方后制得的復方制劑，與單劑相比，可明顯降低對血小板的聚集率。(2)辛伐他汀與蚓激酶的藥物組合物對血小板聚集的抑制實驗材料：實施例2中不同配比的藥物組合物及單劑，臨用前均用0.5％羧甲基纖維素鈉溶解二磷酸腺苷二鈉(adenosinediphosphate,adp)。實驗動物及分組：sd大鼠，雄性，體重(240±200)g，清潔級。實驗大鼠隨機分為11組，分別為1)正常組、2)蚓激酶30mg(60萬u)組、3)蚓激酶90mg(180萬u)、4)辛伐他汀2.5mg+蚓激酶30mg(60萬u)組、5)辛伐他汀5mg+蚓激酶30mg(60萬u)組、6)辛伐他汀10mg+蚓激酶30mg(60萬u)組、7)辛伐他汀20mg+蚓激酶90mg(180萬u)組、8)辛伐他汀2.5mg組、9)辛伐他汀5mg組、10)辛伐他汀10mg組、11)辛伐他汀20mg組。實驗方法：sd大鼠110只隨機分為11組，實驗前12h禁食不禁水。各給藥組末次給藥2h后，腹主動脈取血，枸櫞酸鈉溶液(3.8％)與血液按照1：9混合，800r/min離心10min，獲得富含血小板血漿；3000r/min離心10min制備貧血小板血漿。調整富血小板血漿中血小板濃度為(600～700)×109個/l，按照比濁法，應用血小板聚集儀，貧血小板血漿調零后，在攪拌情況下，加入血小板誘導劑adp，測定血小板最大聚集率。實驗結果如圖2所示，其中，1正常組、2蚓激酶30mg(60萬u)組、3蚓激酶90mg(180萬u)、4辛伐他汀2.5mg+蚓激酶30mg(60萬u)組、5辛伐他汀5mg+蚓激酶30mg(60萬u)組、6辛伐他汀10mg+蚓激酶30mg(60萬u)組、7辛伐他汀20mg+蚓激酶90mg(180萬u)組、8辛伐他汀2.5mg組、9辛伐他汀5mg組、10辛伐他汀10mg組、11辛伐他汀20mg組。由圖2可以看出，實施例2中三種配比的辛伐他汀和蚓激酶復方后制得的復方制劑，與單劑相比，可明顯降低對血小板的最大聚集率。實施例4、匹伐他汀與蚓激酶復方制劑一、膠囊劑型表3、匹伐他汀鈣與蚓激酶復方制劑(膠囊劑)的配方注：表3中匹伐他汀為匹伐他汀鈣，以匹伐他汀的質量計。按照上表中的處方制備蚓激酶和匹伐他汀鈣復方制劑，劑型為膠囊，具體步驟如下：(1)將a組分中的蚓激酶與相應的輔料制成顆粒；(2)將上述顆粒用腸溶薄膜包衣材料進行包衣，制成蚓激酶腸溶顆粒；(3)將b組分中的匹伐他汀鈣與相應的輔料混合制成混粉；(4)將兩組分裝入空心膠囊中，即得劑型為膠囊型的蚓激酶和匹伐他汀鈣復方制劑。本實施例中，將蚓激酶制成腸溶顆粒或微丸，采用膜控腸溶，囊殼為胃溶膠囊，匹伐他汀鈣在胃中釋放吸收，蚓激酶在腸中釋放吸收。二、片劑表4、匹伐他汀鈣與蚓激酶復方制劑(片劑)的配方注：表4中匹伐他汀為匹伐他汀鈣，以匹伐他汀的質量計。按照上表中的處方制備蚓激酶和匹伐他汀鈣復方制劑，劑型為片劑，具體步驟如下：(1)將a組分中的蚓激酶與相應的輔料制成微丸；(2)將上述微丸用腸溶薄膜包衣材料進行包衣，制成蚓激酶腸溶微丸；(3)將b組分中的匹伐他汀鈣與相應的輔料混合制成顆粒；(4)將兩組分混合并加入相應崩解劑和潤滑劑混合均勻，壓片，即得劑型為片劑的蚓激酶和匹伐他汀鈣復方制劑。本實施例中，片劑為不包衣或包胃溶型薄膜衣在胃中崩解成匹伐他汀鈣顆粒和蚓激酶腸溶顆?；蛭⑼瑁シニ♀}在胃中釋放吸收，蚓激酶腸溶顆粒或微丸在腸道釋放吸收。三、質量評價以5、10、20、30、45分鐘為取樣點，匹伐他汀鈣與蚓激酶復方制劑在水介質中匹伐他汀鈣的釋放結果如表5所示，釋放曲線如圖3所示，并與市售匹伐他汀鈣片()進行比較，可以看出本發明匹伐他汀鈣與蚓激酶復方制劑中的匹伐他汀鈣與市售匹伐他汀鈣片的溶出結果基本一致。表5、本發明匹伐他汀鈣與蚓激酶復方制劑和市售匹伐他汀鈣片的體外溶出結果實施例5、辛伐他汀與蚓激酶復方制劑一、膠囊劑型表6、辛伐他汀與蚓激酶復方制劑(膠囊劑)的配方按照上表中的處方制備蚓激酶和辛伐他汀復方制劑，劑型為膠囊，具體步驟如下：(1)將a組分中的蚓激酶與相應的輔料制成顆粒；(2)將上述顆粒用腸溶薄膜包衣材料進行包衣，制成蚓激酶腸溶顆粒；(3)將b組分中的辛伐他汀與相應的輔料混合制成混粉；(4)將兩組分裝入空心膠囊中，即得劑型為膠囊型的蚓激酶和辛伐他汀復方制劑。本實施例中，將蚓激酶制成腸溶顆?；蛭⑼瑁捎媚た啬c溶，囊殼為胃溶膠囊，辛伐他汀在胃中釋放吸收，蚓激酶在腸中釋放吸收。二、片劑表7、辛伐他汀與蚓激酶復方制劑(片劑)的配方按照上表中的處方制備蚓激酶和辛伐他汀復方制劑，劑型為片劑，具體步驟如下：(1)將a組分中的蚓激酶與相應的輔料制成微丸；(2)將上述微丸用腸溶薄膜包衣材料進行包衣，制成蚓激酶腸溶微丸；(3)將b組分中的辛伐他汀與相應的輔料混合制成顆粒；(4)將兩組分混合并加入相應崩解劑和潤滑劑混合均勻，壓片，即得劑型為片劑的蚓激酶和辛伐他汀復方制劑。本實施例中，片劑為不包衣或包胃溶型薄膜衣在胃中崩解成辛伐他汀顆粒和蚓激酶腸溶顆粒或微丸，辛伐他汀在胃中釋放吸收，蚓激酶腸溶顆?；蛭⑼柙谀c道釋放吸收。三、質量評價以5、10、20、30、45分鐘為取樣點，辛伐他汀與蚓激酶復方制劑在ph4.5磷酸緩沖鹽+正丙醇(v/v＝2：1)溶液中辛伐他汀的釋放結果如表8所示，釋放曲線如圖4所示，并與市售辛伐他汀片進行比較，可以看出本發明辛伐他汀與蚓激酶復方制劑中的辛伐他汀與市售辛伐他汀片的溶出結果基本一致。表8、本發明辛伐他汀與蚓激酶復方制劑和市售辛伐他汀片的體外溶出結果當前第1頁12