本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療聾啞或耳聾的中藥組合物。
背景技術(shù)：
：耳聾分為感應(yīng)神經(jīng)性耳聾和傳導(dǎo)性耳聾，傳導(dǎo)性耳聾是可以治愈的，而感音神經(jīng)性耳聾的治療是世界臨床難治的多發(fā)病。既往研究表明，哺乳動(dòng)物毛細(xì)胞就是聽覺細(xì)胞，感音神經(jīng)性耳聾是聽神經(jīng)和耳蝸毛細(xì)胞退變和破壞消失造成的。西醫(yī)認(rèn)為感音神經(jīng)性耳聾至今不能根治的原因在于內(nèi)耳感覺上皮細(xì)胞損傷后不能再生，耳蝸的毛細(xì)胞破壞后無法修復(fù)。雖然目前的藥物治療對(duì)于改善聽功能有一定效果，但十分有限，有些藥物還有較大的毒副作用。目前大多數(shù)人耳聾或者聾啞患者采用佩戴助聽器及電子耳蝸植入的方式來實(shí)現(xiàn)聽力重建，經(jīng)過幾年時(shí)間的語言訓(xùn)練，取得一定效果，但是，不能根治，摘掉助聽器，耳聾患者的聽力還是不能恢復(fù)。并且植入耳蝸也存在兩個(gè)問題，一是植入人工電子耳蝸破壞原有身體組織，使患者永久失去藥物治療的機(jī)會(huì)，二是人工電子耳蝸價(jià)格昂貴(價(jià)格約在10-30萬元之間)，加上康復(fù)訓(xùn)練費(fèi)用，一般殘疾人家庭難以承受。近年來，中藥治療耳聾的研究也取得了很大發(fā)展。中國專利CN1876152A公開了一種治療神經(jīng)性耳聾的藥物及其制備工藝，由淫羊霍、制何首烏、熟地黃、黃精、龜甲、磁石、川芎、郁金、炙黃芪和僵蠶組成。按中藥原料性質(zhì)不同分別進(jìn)行煎煮三次，濾液、混合、乙醇提取，再將濾液混合，濃縮干燥，制成膠囊。本發(fā)明對(duì)于腎虛耳聾及感音神經(jīng)性耳聾具有一定作用，但是治療效果欠佳。中國專利CN1173371A于1998年02月18日公開了一種治療耳聾的中藥，由葛根、丹參、柴胡、石菖蒲、熟地、金銀花、野菊花等19味中藥配制而成，功能通竅開閉，活血通絡(luò)，滋腎聰耳，主治突發(fā)性耳聾、神經(jīng)性耳聾、老年性耳聾、藥物中毒性耳聾，經(jīng)臨床848例驗(yàn)證，痊愈率為38.2-67.2％，但有效治愈率低。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對(duì)耳聾或者聾啞進(jìn)行了深入的研究，中醫(yī)理論認(rèn)為:耳是聽覺器官，腎開竅于耳，是指耳的聽覺功能，依據(jù)于腎中精氣充養(yǎng)、腎中精氣充盈、髓海得新，則聽覺靈敏。因此，脾腎兩虛，精氣不足是聾啞患者耳聾的主要原因。但目前尚無治療耳聾或者聾啞的特效藥。基于上述存在的問題，特提出本發(fā)明。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療聾啞或耳聾的中藥組合物。本發(fā)明的中藥組合物屬于純中藥制劑，使用方便，價(jià)格低廉，并且本發(fā)明的中藥組合物不僅能夠降低耳蝸毛細(xì)胞的損失，而且對(duì)受損的耳蝸毛細(xì)胞有一定的修復(fù)再生作用，能夠有效地恢復(fù)聾啞病人的聽力，具有顯著的治療效果。為解決上述問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：本發(fā)明的中藥組合物包括下列重量份的原料：黃芪40-80份、當(dāng)歸5-15份、川芎3-9份、赤芍10-20份、桃仁3-9份、紅花3-9份、肉桂3-8份、蘇木5-15份、水蛭3-9份、王不留10-30份、磁石10-30份。優(yōu)選地本發(fā)明的中藥組合物包括下列重量份的原料：黃芪60份、當(dāng)歸10份、川芎6份、赤芍15份、桃仁6份、紅花6份、肉桂5份、蘇木10份、水蛭6份、王不留20份、磁石20份。進(jìn)一步，所述中藥組合物的劑型為片劑、顆粒劑、膠囊劑、湯劑、滴耳劑。進(jìn)一步，所述中藥組合物可以采用口服或者滴耳方式給藥。本發(fā)明還提供了上述中藥組合物在制備治療耳聾或聾啞藥物中的應(yīng)用。制備方法：(1)清洗:將已經(jīng)粉碎或切片的黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花、肉桂、蘇木、王不留于40℃的低氘水中浸泡12h，超聲處理20min，超聲功率280w；將已經(jīng)粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超聲處理20min，超聲功率280w；(2)炒制：中火對(duì)黃芪，當(dāng)歸，桃仁，蘇木這幾味藥材進(jìn)行炒制；(3)水煎:將步驟(2)和步驟(1)中的藥材，按照先加入根莖類藥物，后加入葉片類藥物的順序加入120℃的低氘水中，恒溫恒壓下封閉回流20-25min；回流完畢后，收集煎液，并于相同溫度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：將煎液中加入乙醇，使得乙醇濃度為30-40％，提取10-12h；(5)過濾濃縮:：將步驟(4)中的提取液過濾，得藥液，藥液蒸餾濃縮，即得成品。優(yōu)選的，步驟(3)中封閉回流時(shí)間為20min。優(yōu)選的，步驟(4)中乙醇濃度為30％。本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明選用具有補(bǔ)腎益精、健脾強(qiáng)身、宣通耳竅的多種中藥成分制成的中藥組合物，君臣藥配伍，能夠?qū)p傷和死亡的感音母細(xì)胞和傳導(dǎo)神經(jīng)的再生修復(fù)，進(jìn)而達(dá)到聽力提高和恢復(fù)，根除病灶，完全恢復(fù)聽力功能，經(jīng)過特殊語言訓(xùn)練，使聾啞患者具有和掌握聽、說的語言能力，達(dá)到徹底治愈的目的，而且不再復(fù)發(fā)，用于治療聾啞有顯著效果。附圖說明圖1是本發(fā)明中慶大霉素致聾后中藥治療90天豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞正常存活的百分?jǐn)?shù)與致聾后對(duì)照組比較；圖2是本發(fā)明中慶大霉素致聾后對(duì)照組90天后豚鼠耳蝸毛細(xì)胞增殖與修復(fù)的掃描電鏡觀察(20KV×1000)；圖3是本發(fā)明中慶大霉素致聾后對(duì)照組90天后豚鼠耳蝸毛細(xì)胞增殖與修復(fù)的掃描電鏡觀察(20KV×3000)；圖4是本發(fā)明中慶大霉素致聾后中藥治療90天豚鼠后耳蝸毛細(xì)胞增殖與修復(fù)的掃描電鏡觀察(20KV×1000)；圖5是本發(fā)明中慶大霉素致聾后中藥治療90天后豚鼠耳蝸毛細(xì)胞增殖與修復(fù)的掃描電鏡觀察(20KV×3500)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1處方：黃芪60份、當(dāng)歸10份、川芎6份、赤芍15份、桃仁6份、紅花6份、肉桂5份、蘇木10份、水蛭6份、王不留20份、磁石20份。制備方法：(1)清洗:將1000ml去離水照常規(guī)方法制備氘豐度為20×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，攪拌均勻后，進(jìn)行增氧處理，至水中氧含量為15ul/L時(shí)，停止增氧；將已經(jīng)粉碎或切片的黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花、肉桂、蘇木、王不留于40℃的低氘水中浸泡12h，超聲處理20min，超聲功率280w；將已經(jīng)粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超聲處理20min，超聲功率280w；(2)炒制：中火對(duì)黃芪，當(dāng)歸，桃仁，蘇木這幾味藥材進(jìn)行炒制；(3)水煎:將步驟(2)和步驟(1)中的藥材，按照先加入根莖類藥物，后加入葉片類藥物的順序加入120℃的低氘水中，恒溫恒壓下封閉回流20min；回流完畢后，收集煎液，并于相同溫度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：將煎液中加入乙醇，使得乙醇濃度為30％，提取12h；(5)過濾濃縮:將步驟(4)中的提取液過濾，得藥液，藥液蒸餾濃縮，直到藥液密度達(dá)到1.1g/ml，除菌后用無菌軟包、玻璃瓶或塑料瓶包裝成藥，裝量為100ml。實(shí)施例2處方：黃芪40份、當(dāng)歸5份、川芎3份、赤芍10份、桃仁3份、紅花3份、肉桂3份、蘇木5份、水蛭3份、王不留10份、磁石10份。制備方法：(1)清洗:將1000ml去離水照常規(guī)方法制備氘豐度為50×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，攪拌均勻后，進(jìn)行增氧處理，至水中氧含量為15ul/L時(shí)，停止增氧；將已經(jīng)粉碎或切片的黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花、肉桂、蘇木、王不留于40℃的低氘水中浸泡12h，超聲處理20min，超聲功率280w；將已經(jīng)粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超聲處理20min，超聲功率280w；(2)炒制：中火對(duì)黃芪，當(dāng)歸，桃仁，蘇木這幾味藥材進(jìn)行炒制；(3)水煎:將步驟(2)和步驟(1)中的藥材，按照先加入根莖類藥物，后加入葉片類藥物的順序加入120℃的低氘水中，恒溫恒壓下封閉回流20min；回流完畢后，收集煎液，并于相同溫度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：將煎液中加入乙醇，使得乙醇濃度為30％，提取12h；(5)過濾濃縮:將步驟(4)中的提取液過濾，得藥液，藥液蒸餾濃縮成浸膏，添加適量輔料，制成顆粒劑。實(shí)施例3處方：黃芪80份、當(dāng)歸15份、川芎9份、赤芍20份、桃仁9份、紅花9份、肉桂8份、蘇木15份、水蛭9份、王不留30份、磁石30份。制備方法：(1)清洗:將1000ml去離水照常規(guī)方法制備氘豐度為60×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，攪拌均勻后，進(jìn)行增氧處理，至水中氧含量為15ul/L時(shí)，停止增氧；將已經(jīng)粉碎或切片的黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花、肉桂、蘇木、王不留于40℃的低氘水中浸泡10h，超聲處理20min，超聲功率280w；將已經(jīng)粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超聲處理20min，超聲功率280w；(2)炒制：中火對(duì)黃芪，當(dāng)歸，桃仁，蘇木這幾味藥材進(jìn)行炒制；(3)水煎:將步驟(2)和步驟(1)中的藥材，按照先加入根莖類藥物，后加入葉片類藥物的順序加入120℃的低氘水中，恒溫恒壓下封閉回流25min；回流完畢后，收集煎液，并于相同溫度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：將煎液中加入乙醇，使得乙醇濃度為35％，提取10h；(5)過濾濃縮:將步驟(4)中的提取液過濾，得藥液，藥液蒸餾濃縮成浸膏，添加適量輔料，制粒，填入空膠囊，制成膠囊劑。實(shí)施例4處方：黃芪80份、當(dāng)歸20份、川芎9份、赤芍30份、桃仁9份、紅花9份、肉桂8份、蘇木20份、水蛭9份、王不留30份、磁石30份。制備方法：(1)清洗:將1000ml去離水照常規(guī)方法制備氘豐度為80×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，攪拌均勻后，進(jìn)行增氧處理，至水中氧含量為15ul/L時(shí)，停止增氧；將已經(jīng)粉碎或切片的黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花、肉桂、蘇木、王不留于40℃的低氘水中浸泡11h，超聲處理20min，超聲功率280w；將已經(jīng)粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超聲處理20min，超聲功率280w；(2)炒制：中火對(duì)黃芪，當(dāng)歸，桃仁，蘇木這幾味藥材進(jìn)行炒制；(3)水煎:將步驟(2)和步驟(1)中的藥材，按照先加入根莖類藥物，后加入葉片類藥物的順序加入120℃的低氘水中，恒溫恒壓下封閉回流20min；回流完畢后，收集煎液，并于相同溫度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：將煎液中加入乙醇，使得乙醇濃度為30％，提取12h；(5)過濾濃縮:將步驟(4)中的提取液過濾，得藥液，藥液蒸餾濃縮成浸膏，添加適量輔料，壓制成片劑。實(shí)施例5處方：黃芪50份、當(dāng)歸8份、川芎5份、赤芍12份、桃仁5份、紅花5份、肉桂6份、蘇木12份、水蛭5份、王不留24份、磁石24份。制備方法：(1)清洗：將1000ml去離水照常規(guī)方法制備氘豐度為100×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，攪拌均勻后，進(jìn)行增氧處理，至水中氧含量為15ul/L時(shí)，停止增氧；將已經(jīng)粉碎或切片的黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花、肉桂、蘇木、王不留于40℃的低氘水中浸泡9h，超聲處理20min，超聲功率280w；將已經(jīng)粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超聲處理20min，超聲功率280w；(2)炒制：中火對(duì)黃芪，當(dāng)歸，桃仁，蘇木這幾味藥材進(jìn)行炒制；(3)水煎:將步驟(2)和步驟(1)中的藥材，按照先加入根莖類藥物，后加入葉片類藥物的順序加入120℃的低氘水中，恒溫恒壓下封閉回流25min；回流完畢后，收集煎液，并于相同溫度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：將煎液中加入乙醇，使得乙醇濃度為40％，提取12h；(5)過濾濃縮:將步驟(4)中的提取液過濾，得藥液，藥液蒸餾濃縮，經(jīng)脫色制成滴耳劑。對(duì)比例1處方：黃芪50份、當(dāng)歸8份、川芎5份、赤芍12份、桃仁5份、紅花5份、肉桂6份、蘇木12份、水蛭5份、王不留24份、磁石24份制備方法：將上述處方中的藥材加水(未添加低氘水以及微量元素)煎煮二次，每次煎煮20min；合并煎液；乙醇提取：將煎液中加入乙醇，使得乙醇濃度為30％，乙醇回流提取10h；過濾濃縮：將提取液進(jìn)行過濾，得濾液，所得藥液蒸餾濃縮，直到藥液密度達(dá)到1.1g/ml，除菌后用無菌軟包、玻璃瓶或塑料瓶包裝成藥，裝量為100ml。對(duì)比例2按照中國專利CN1876152A的方法制備治療耳聾制劑淫羊霍307g制何首烏230g熟地黃230g黃精230g龜甲460g磁石123g川穹230g郁金230g炙黃芪307g僵蠶153g制備方法：在上述10味原料中，取淫羊霍、制何首烏、川穹、郁金4味，加口水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，第三次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.15(70-75OC)，待冷至室溫，加乙醇至含醇量達(dá)60％，攪勻，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至相對(duì)密度為1.25(70-75OC)，備用；取熟地黃、黃精、炙黃茂3味，加水提取3次，第一次加10倍量水，煎煮1小時(shí)，第二次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，第三次加8倍量水，煎煮1小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮至生藥:藥液＝1:5(W/W)，加入ZTC1+l天然澄清劑，沉淀12小時(shí)，濾過，濾液備用：取龜甲、僵蠶、磁石，混合在一起，加水提取3次，第一次加6倍量水，煎煮l小時(shí)，第二次加4倍量水，煎煮l小時(shí)，第二次加4倍量水，煎煮1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液備用。將上述3項(xiàng)濾液合并，濃縮并干燥，加入5％微粉硅膠及糊精適量，混勻，裝入1000粒膠囊，即得。對(duì)比例3按照中國專利CN1173371A的方法制備治療耳聾制劑：分別稱取葛根60克、丹參40克、柴胡30克、石菖蒲30克、熟地30克、金銀花30克、野菊花30克、路路通20克、赤芍20克、郁金20克、川芎20克、香附20克、骨碎補(bǔ)20克、山萸肉20克、山藥20克、丹皮20克、茯苓20克、連翹20克及澤瀉10克。將以上藥物除熟地、山萸肉外，均粉碎研磨成細(xì)粉，加入8-10倍水量進(jìn)行煎煮2次，每次1小時(shí)，然后過濾，將濾液合并濃縮至1:1后烘干，加入上述藥物細(xì)粉混合均勻，滅菌后按療程及一次服用量裝入膠囊即得中成藥。實(shí)驗(yàn)例1(1)致聾模型的構(gòu)建1)GM致聾模型選用健康豚鼠100只，耳廓反射正常，體重250-300g，雌雄各半。分為正常對(duì)照組(10只)、慶大霉素致聾組(GM組80只)、慶大霉素拮抗組(10只)。三組動(dòng)物用戊巴比妥鈉80mg/kg麻醉，進(jìn)行腦干誘發(fā)電位(ABR)和畸變耳聲發(fā)射(DPOAE)檢測(cè)。測(cè)定后的GM組和慶大霉素拮抗組按80mg.kg-1.d-1肌肉注射慶大霉素，連續(xù)注射22-30天。測(cè)定動(dòng)物的ABR值和DPOAE值，再將GM組分為再將GM組分為GM致聾對(duì)照組、GM致聾中藥治療組(本發(fā)明實(shí)施例1-5中藥治療組)以及對(duì)比例組1、對(duì)比例組2、對(duì)比例組3。正常對(duì)照組給予同樣劑量及療程的生理鹽水。(2)豚鼠致聾治療方法根據(jù)《中藥藥理研究方法學(xué)》中的方法，按成人量(mg/kg)換算成動(dòng)物劑量的倍數(shù)簡(jiǎn)表，換算成豚鼠為4.5倍劑量服用上述中藥組合物。其中，GM致聾中藥治療組從致聾模型建立之后每天服用上述實(shí)施例1-5的中藥組合物，對(duì)比例組1、對(duì)比例組2、對(duì)比例組3從致聾模型建立之后每天分別服用相應(yīng)對(duì)比例中的制劑，GM致聾對(duì)照組和正常對(duì)照組給予同樣劑量及療程的生理鹽水。慶大霉素拮抗組從開始注射慶大霉素開始，每天邊注射慶大霉素邊服用上述實(shí)施例1的中藥組合物10ml。(3)聽功能測(cè)定方法采用聽覺誘發(fā)電位-耳聲發(fā)射儀測(cè)定豚鼠的ABR及DPOAE。ABR的測(cè)定：將上述動(dòng)物麻醉后，用針電極插入顱頂作為記錄電極，同側(cè)為參考電極，對(duì)側(cè)接地。測(cè)量治療90天的ABR的反應(yīng)閾。DPOAE的測(cè)定：將大小合適的探頭塞入外耳道，使外耳道密封，當(dāng)刺激信號(hào)平穩(wěn)后進(jìn)行測(cè)試，重復(fù)2次。測(cè)量中藥治療90天不同刺激強(qiáng)度時(shí)DPOAE的幅值，以反應(yīng)幅值高出本底噪聲3dB時(shí)的最小刺激強(qiáng)度作為DPOAE有無的指標(biāo)，確定檢出率。上述測(cè)試均疊加100次。具體結(jié)果見表1-表4。表1不同組小鼠治療90天DPOAE各頻率幅值(dBSPL,x±s)表2不同組小鼠治療90天的ARB反應(yīng)閾(dBSPL,x±s)注：**與實(shí)驗(yàn)前比較，P<0.05.表3慶大霉素拮抗組中藥治療10天、20天、30天DPOAE各頻率幅值(dBSPL,x±s)表4慶大霉素拮抗組中藥治療10天、20天、30天ARB反應(yīng)閾(dBSPL,x±s)組別分類ABR反應(yīng)閾實(shí)驗(yàn)前20.15±4.77本發(fā)明中藥治療10天18.87±5.25本發(fā)明中藥治療20天19.01±5.36本發(fā)明中藥治療30天19.11±3.98由表1可以看出，實(shí)驗(yàn)前所有動(dòng)物DPOAE幅值正常(5.0-32dBSPL)，GM致聾后，在中高頻率區(qū)(1005-8000Hz),DPOAE幅值明顯降低(P<0.05)。本發(fā)明中藥治療90天后DPOAE幅值明顯上升，尤其在GM損害嚴(yán)重的中高頻區(qū)(1005-8000Hz)，與GM致聾后相比，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而對(duì)比例1-3中DPOAE雖然有一定恢復(fù)，但是與GM致聾對(duì)照組相比，并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。說明中藥治療90天使GM致聾豚鼠耳蝸的DPOAE幅值基本恢復(fù)正常。由表2可以看出，實(shí)驗(yàn)前各組的ABR平均閾值為21dBSPL左右，GM致聾后ABR閾值上升到平均為50dBSPL左右，本發(fā)明中藥組合物治療90天后，治療組總體ABR的平均閾值由50dBSPL左右下降到22dBSPL左右，較GM致聾后相比，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。而對(duì)比例1-3中ABR雖然有一定恢復(fù)，但是與GM致聾對(duì)照組相比，并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。由此說明，采用本發(fā)明制備的中藥制劑90天，能夠使GM致聾豚鼠耳蝸的ABR幅值基本恢復(fù)正常。由表3-表4可以看出，每天給予慶大霉素后，同時(shí)服用本發(fā)明制備的中藥制劑，能夠降低慶大霉素致聾的概率，有效的保護(hù)耳蝸免受損害。(4)耳蝸鋪片及毛細(xì)胞數(shù)的觀察測(cè)定ABR，DPOAE完后，在麻醉狀態(tài)下，快速斷頭，迅速取出右側(cè)聽泡，分離出耳蝸，在解剖顯微鏡下，用纖細(xì)鋼針在耳蝸尖頂鉆一小孔，將前庭膜挑破，再挑破圓窗膜和卵圓窗膜，并在耳蝸底回骨隆起處鉆一小孔，吸取0.5％的硝酸銀溶液從蝸尖的小孔和兩窗及底回的小孔反復(fù)灌入用雙蒸水洗滌數(shù)次，再灌入10％的福爾馬林固定液。標(biāo)本在日光下曝光2-4小時(shí)后，在解剖顯微鏡下分離鋪片。將耳蝸置于純凈蒸餾水中，用細(xì)鋼針先挑破耳蝸骨壁，用密合良好的纖細(xì)鑷子去除血管紋和前庭膜，并平行于Corti器輕取蓋膜及遮蓋基底膜的組織，用線狀刀逐回切斷基底膜，逐回將基底膜按次序放置在載玻片的甘油中，辨識(shí)正反面無誤后，加蓋蓋玻片，供光鏡觀察和進(jìn)行毛細(xì)胞計(jì)數(shù)。具體結(jié)果見圖1。由圖1可以看出，致聾后中藥治療組治療90天后，可見耳蝸基底回約50％以上的外毛細(xì)胞正常存活，約占耳蝸觀察數(shù)的66.67％。而致聾后對(duì)照組耳蝸基底回平均僅20％左右的外毛細(xì)胞存活，大多數(shù)耳蝸基底回內(nèi)外毛細(xì)胞完全缺失。說明治療組有毛細(xì)胞修復(fù)和再生。(5)掃描電鏡觀察將取材的左側(cè)耳蝸樣品用緩沖液把組織表面洗凈，在解剖顯微鏡下，用纖細(xì)鋼針在耳蝸頂部打一小孔，一定要挑破耳蝸管前庭膜，再挑破圓窗膜和卵圓窗膜，并去除鐙骨及足板，用細(xì)滴管將2.5％戊二醛固定液從蝸尖小孔和圓窗卵圓窗反復(fù)滴灌3-5次，明顯看到液體從兩窗流出。將樣品浸泡在固定液中，置于4冰℃箱中4h。置于0.1mmol/LLPB緩沖液中，在解剖顯微鏡下在耳蝸各回骨壁鉆孔，使耳蝸各回與固定液相通，再浸泡于固定液中4h用0.1mmol/LLPB漂洗3次后，用1％OSO4后固定2h。用0.1mmol/LLPB漂洗20-30min。用乙醇梯度脫水，乙醇的濃度依次為30％-50％-70％-90％-100％(2次)，乙醇與乙酸異戊酯1:1的混合液10-20h；純乙酸異戊酯10-20h。臨界點(diǎn)干燥后，即可取出樣品。將樣品置于解剖顯微鏡下，去除覆蓋于觀察部位的骨質(zhì)和膜性結(jié)構(gòu)，清潔樣品后，將樣品用雙面膠帶固定于樣品臺(tái)上，離子濺射鍍膜，于掃描電鏡觀察。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖2-圖5。由圖4及圖5可以看出，致聾后中藥治療組90天后，在豚鼠的耳蝸頂回可以看到成熟的再生毛細(xì)胞，其最大特點(diǎn)是靜纖毛束完整，具有小束樣的纖毛束，其周圍生長著許多微絨毛這是正在發(fā)育成熟的再生毛細(xì)胞。由圖2及圖3可以看出，致聾后對(duì)照組90天耳蝸表面的微絨毛較少，未見到新生的纖毛樣凸起，且毛細(xì)胞再生少。實(shí)施例7臨床治療效果：(1)病人的選擇：選擇經(jīng)醫(yī)院確診為先天性聾啞57人，后天性聾啞137病人，共194人，男101例，女93例。聽力損失程度在110db以內(nèi)(視為有殘余聽力)的142例，聽力損失程度在115db以上(視為無殘余聽力)的52例。(2)療效判定標(biāo)準(zhǔn)：無效：在原聽力基礎(chǔ)上經(jīng)過系統(tǒng)治療3-6個(gè)月，聽力提高不到15db為無效；有效：在原聽力基礎(chǔ)上經(jīng)過系統(tǒng)治療3-6個(gè)月，聽力提高20db為有效；顯效：在原聽力基礎(chǔ)上經(jīng)過系統(tǒng)治療3-6個(gè)月，聽力提高30db-40db，能簡(jiǎn)單面對(duì)面對(duì)話，但語言欠清晰為顯效；痊愈：在原聽力基礎(chǔ)上經(jīng)過系統(tǒng)治療3-6個(gè)月，聽力提高41db以內(nèi)，通過語言訓(xùn)練能進(jìn)行正常語言對(duì)話為痊愈。(3)治療方法及效果本組主要治療方法為中藥治療與語言康復(fù)訓(xùn)練結(jié)合，對(duì)上述病人服用中藥組合，并通過局部按摩、語言培訓(xùn)等方法治療3-6個(gè)月，根據(jù)療效判定標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)治療效果。統(tǒng)計(jì)治療效果見表5。表5治療效果由上表可以看出，采用本發(fā)明制備的中藥制劑治療194例聾啞病人3-6個(gè)月，根據(jù)療效判定標(biāo)準(zhǔn)，194例中有效184例，無效例為10例，總有效率達(dá)到94.84％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P<0.01，差異有顯著性。在中藥治療的基礎(chǔ)上，聽力恢復(fù)的基礎(chǔ)上，進(jìn)行語言訓(xùn)練，使患者的聽力和言語能力提高。當(dāng)前第1頁1 2 3