本發明屬于獸藥制劑
技術領域：
，尤其涉及一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑及其制備方法。
背景技術：
：抗生素（antibiotics）是由微生物（包括細菌、真菌、放線菌屬）或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產物，能干擾其他生活細胞發育功能的化學物質。恩諾沙星屬于氟喹諾酮類抗生素，為廣譜抗生素，對革蘭氏陽性菌有效，又對革蘭氏陰性菌有效，還可以治療支原體引起的感染。傳統的恩諾沙星制劑主要以可溶性粉劑、溶液劑、混懸劑、片劑、注射劑為主。由于水溶性低，使其粉劑和溶液劑在動物口服給藥中的應用和療效受到很大限制，片劑中的輔料不僅影響藥物有效成分的溶出速率，造成藥物利用率降低；片劑多以口服為給藥方式，口服吸收較慢且不規則，藥效易受胃腸功能及胃腸內容物的影響或口服易被破壞而失效，而且某些藥物會對胃腸產生不良刺激作用?？股刈⑸鋭╇m然克服了口服片劑的缺點，但注射劑在臨床應用過程中頻繁注射，易引起動物應激反應，不利于動物的生長，且注射劑制備過程復雜、質量要求高、成本高。因此很有必要研制出制備工藝簡單、成本低廉、性狀穩定的恩諾沙星長效緩釋制劑。技術實現要素：本發明目的在于克服現有技術中存在的不足而提供的一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑及其制備方法。本發明的目的是這樣實現的：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5~10份、PLGA10~15份、聚乳酸10~15份、苯甲醇70~90份、EDTA-2Na0.05~0.1份、磷酸0.01~2份、苯扎溴銨0.01~3.0份、甘油甲縮醛0.3~0.5份。一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星6~9份、PLGA12~14份、聚乳酸12~14份、苯甲醇75~85份、EDTA-2Na0.07~0.09份、磷酸0.5~1.5份、苯扎溴銨1.0~2.0份、甘油甲縮醛0.35~0.45份。一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星8份、PLGA13份、聚乳酸13份、苯甲醇80份、EDTA-2Na0.08份、磷酸1.0份、苯扎溴銨1.5份、甘油甲縮醛0.4份。一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑的制備方法，其特征在于：具有以下步驟：步驟1）、取70%~80%所述份量的苯甲醇放入濃配罐中，加熱至30~60攝氏度，邊攪拌邊加入所述份量的聚乳酸和PLGA，加入聚乳酸和PLGA以后在30~60攝氏度的環境下保溫10~14小時，保溫的同時，進行攪拌，獲得混合液1；步驟2）、取10%~15%所述份量的苯甲醇放入潔凈的容器中，取所述份量的恩諾沙星加入到10%~15%份量的苯甲醇中，攪拌20~40分鐘，使苯甲醇完全溶解，獲得混合液2；步驟3）、將混合液2加入到步驟1）中獲得的混合液1）中，獲得混合液3，將混合液3定溫至35~65攝氏度，并在35~65攝氏度的狀態下攪拌1~3個小時，使混合液3混合均勻；步驟4）、將混合液3使用過濾器進行粗濾，粗濾后的混合液3放入稀配罐中，取剩余10%~15%份量的苯甲醇將步驟1）中的濃配罐、步驟2）中的容器和過濾器中殘留的混合液1、混合液2和混合液3沖入到稀配罐中，然后循環攪拌5~10分鐘；獲得藥液1；步驟5）、將藥液1放在震蕩器上震蕩1~5分鐘，然后將磷酸加入到藥液1中，加入的同時進行攪拌，將藥液1的pH值定在3.2~4.3；獲得藥液2；步驟6）、將所述份量的EDTA-2Na、苯扎溴銨、甘油甲縮醛加入到藥液2中，邊加入的同時進行攪拌，充分溶解后在室溫下放置20~30小時，然后使用微孔濾膜進行過濾，過濾后即可獲得所述的獸用恩諾沙星凝膠植入劑。所述的苯甲醇可以使用羥苯酯類、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎溴銨、苯扎氯銨、山梨酸鉀、苯甲酸鈉、山梨酸鉀、硫柳汞中的一種或多種進行替代。步驟2）中所述的容器為不銹鋼桶；步驟5）中所述的震蕩器為渦旋振蕩器。本發明是一種長效、簡單、安全的緩釋注射劑，聚合物進入機體形成固體或半固體藥物貯藏庫,藥物由于聚合物的溶解而慢慢的釋放出來，從達到的緩釋的目的。既可用于全身感染也可用于病變部位的局部給藥；延長釋藥周期保持穩定的血藥濃度；降低給藥次數及劑量和藥物不良反應從而減少對動物應激，控制耐藥菌株的迅速形成；工藝相對簡單等優點。附圖說明圖1為恩諾沙星標準曲線。圖2為不同載體對恩諾沙星體外釋放率的影響。圖3為不同載體對恩諾沙星累積釋放率的影響。具體實施方式實施例1：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星8克、PLGA13克、聚乳酸13克、苯甲醇80克、EDTA-2Na0.08克、磷酸1.0克、苯扎溴銨1.5克、甘油甲縮醛0.4克。一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑的制備方法，其特征在于：具有以下步驟：步驟1）、取70%所述份量的苯甲醇放入濃配罐中，加熱至37攝氏度，邊攪拌邊加入所述份量的聚乳酸和PLGA，加入聚乳酸和PLGA以后在37攝氏度的環境下保溫12小時，保溫的同時，進行攪拌，獲得混合液1；步驟2）、取15%所述份量的苯甲醇放入潔凈的容器中，取所述份量的恩諾沙星加入到15%份量的苯甲醇中，攪拌30分鐘，使苯甲醇完全溶解，獲得混合液2；步驟3）、將混合液2加入到步驟1）中獲得的混合液1）中，獲得混合液3，將混合液3定溫至50攝氏度，并在50攝氏度的狀態下攪拌2個小時，使混合液3混合均勻；步驟4）、將混合液3使用過濾器進行粗濾，粗濾后的混合液3放入稀配罐中，取剩余15%份量的苯甲醇將步驟1）中的濃配罐、步驟2）中的容器和過濾器中殘留的混合液1、混合液2和混合液3沖入到稀配罐中，然后循環攪拌8分鐘；獲得藥液1；步驟5）、將藥液1放在震蕩器上震蕩3分鐘，然后將磷酸加入到藥液1中，加入的同時進行攪拌，將藥液1的pH值定在3.5；獲得藥液2；步驟6）、將所述份量的EDTA-2Na、苯扎溴銨、甘油甲縮醛加入到藥液2中，邊加入的同時進行攪拌，充分溶解后在室溫下放置24小時，然后使用微孔濾膜進行過濾，先經0.45μm微孔濾膜過濾器粗濾，再經0.22μm微孔濾膜過濾后，即可獲得所述的獸用恩諾沙星凝膠植入劑。本發明顯著減少注射次數，減少動物注射應激，增強藥物使用的順從性。用藥次數的減少，保障了用藥時間，避免了耐藥菌株的迅速發展，繼而可以延長新獸藥的使用壽命。提高藥物血藥濃度，減少藥物總使用劑量；能夠長期處于有效血藥濃度，可提高藥效。血藥濃度曲線無明顯的波峰波谷，能減少藥物的毒副作用，降低動物使用上的風險?？蓪⑺幬飩鬟f到作用部位，消除和減少了副作用。實驗1：獸用恩諾沙星凝膠植入劑的質量穩定性。恩諾沙星標準曲線的制備精密稱取恩諾沙星標準品0.0104g，置于100mL容量瓶中，加流動相定容到100ml，配置成濃度為100μg/mL的儲存液，搖勻后，分別從中取出1、2、4、6、8、10mL置于100mL容量瓶中，加蒸餾水定容到100mL，搖勻后分別在高效液相色譜儀上測峰面積，每次進樣10μL，每一濃度測定3次，取峰面積平均值，繪制標準曲線；結果如圖1。處方的篩選恩諾沙星凝膠植入劑的制備與評價將聚乳酸和PLGA聚合物按需要配制成12%的水溶液，待聚合物溶解完全后加入恩諾沙星水溶性粉配制成10%恩諾沙星水凝膠，充分震蕩至溶解，置4℃冰箱保存。體外釋放度測定取恩諾沙星凝膠制劑2mL緩慢加入10mL釋放介質的玻璃離心管中，旋緊蓋子，將玻璃離心管放置到37℃的恒溫振蕩培養箱中，設置振蕩速度為30rpm。在凝膠形成之后，將5mL釋放介質（磷酸鹽緩沖溶液pH7.4加0.5%的吐溫80加5%的甲醇）緩慢注入到離心管內，在0.5、1、2、3、4、5、6、7d各取樣一次，每個樣品測定3次，液相色譜儀測定其體外釋放率及累積釋放率。外觀（性狀、澄清度測定）及通針性（粘度測定）將制備的原位凝膠植入劑放置于光照度為2000LX的日光燈下，目測觀察，溶液呈現澄明狀態，無異物。用1mL注射器吸取溶液，緩慢抽出，觀察凝膠的通針性。凝膠形成時間情況取恩諾沙星凝膠制劑2mL緩慢加入10mL釋放介質的玻璃離心管中，旋緊蓋子，將玻璃離心管放置到37℃的恒溫振蕩培養箱中，設置振蕩速度為30rpm。計時器計時凝膠形成時間。處方的篩選采用正交表進行正交試驗，見表1、2。根據結果篩選出最優處方。表1因素和水平水平A1溶劑B1濃度1苯甲醇12%2丙酮20%表2試驗正交分組試驗號AB111212321422結果見表3表3試驗正交結果試驗號外觀及通針性膠凝時間1良好43s2良好40s3不良54s4良好42s上述結果表明，制備恩諾沙星原位凝膠植入劑，選擇濃度為12%聚乳酸和PLGA兩個的混合液作為微載體最為合適。苯甲醇作為聚乳酸和PLGA的溶劑效果最好，因為丙酮的濃度越高，凝膠黏度越高，膠凝溫度越低，會給注射等造成困難，剌激性也相應會增加，雖然20%丙酮外觀及通針性良好，凝膠時間較短，但其需要較低的膠凝溫度，不適于臨床應用，且以丙酮為溶劑的藥物體外釋放量不均勻；如圖2和圖3所示。實驗2：獸用恩諾沙星凝膠植入劑的形成情況及生產。恩諾沙星凝膠植入劑的制備與方案設定將適量的純化水加入到配液灌內，稱量2000g聚乳酸和2000gPLGA加入到盛有純化水的配液灌中攪拌至溶解，然后在準確稱量恩諾沙星2000g加至已經溶解的聚乳酸和PLGA溶液中，再添加純化水至20L，攪拌至藥物充分溶解。待藥物充分混合與溶解，再將此溶液放置在4℃存放24h，取樣檢測。表4因素和水平水平混合時間溫度14h20℃28h25℃312h30℃表5試驗正交結果評價指標與結果：表6試驗正交結果試驗號混合情況釋放時間外觀及通針情況膠凝時間1良好釋放至7d良好39s2良好釋放至7d良好48s3良好釋放至7d良好52s4良好釋放至7d良好50s5良好釋放至6d良好58s6良好釋放至6d良好61s7良好釋放至94h不良62s8良好釋放至86h不良68s9良好釋放至82h不良68s試驗結果顯示4h-20℃、4h-25℃、8h-20℃（混合時間-溫度）均能達到要求?？紤]到混勻時間4h和8h對結果無明顯影響，更好的節約成本及增加生產產率將混勻時間定為4h較為理想。產品使用報告1：鶴壁天鴻養殖有限公司現存欄育肥豬1800頭，繁殖母豬550頭，于2016年6月17日發現有45日齡仔豬出現采食量明顯下降，精神不振，被毛粗亂，一肢或幾肢關節腫脹，疼痛，有跛行，甚至不能起立，增重停滯，病程約2~3周。死后剖檢，見關節周圍腫脹、充血，滑液渾濁，重者關節軟骨壞死，關節周圍組織有多發性化膿灶。診斷為關節炎型鏈球菌病，使用本發明關節處注射每頭2mL，給藥一次，第二天起，見患病仔豬能站立行走，正常采食，癥狀基本控制，第三天痊愈。用藥期間未發生死亡。通過上述使用情況證明本法，本發明對鏈球菌引發的仔豬關節炎有較好的療效，同時避免了多次給藥造成仔豬應激，降低工人勞動強度，在畜牧行業會有更廣闊的市場。產品使用報告2：焦作沁陽伊賽牛業有限公司現存欄肉牛6000余頭，其中犢牛2000余頭。2016年4月3日發現個別犢牛有輕微咳嗽、發熱癥狀，場內獸醫按病毒性感冒用地塞米松、黃芪多糖、柴胡注射液等進行治療，不見好轉，1個星期左右后發病牛增多，到4月10日左右，該場飼養的發病犢牛發病至百余頭，癥狀主要是病牛精神不好，食欲減退，經常發生短干咳嗽，流膿擤鼻涕，呼吸困難，部分病牛嚴重腹瀉，病牛體溫39.5℃以上，有的病牛臥地不起，表現極度呼吸困難，銻礦迅速衰竭，眼球下陷，發病治療到目前為止死亡7頭。剖檢病死牛的病理變化主要是胸腔內有淡黃色液體，整個肺呈結節狀，結節切開后可見黃色豆腐渣樣變化，少部分見有濃汁流出，肺表面有纖維性附著物。心包積水，心肺粘連，脾臟有出血點；肝臟變硬，瘤胃內有線蟲等。經我公司技術員診斷為牛支原體肺炎，而后改用本發明肌注每頭10mL，給藥一次，從用藥第三天開始癥狀逐漸減輕，病牛逐步康復，6天后再肌注給藥一次加強治療。證明本發明有很好的臨床使用療效。以下實施例中獸用恩諾沙星凝膠植入劑的制備方法與實施例1相同，不再贅述。實施例2：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星80克、PLGA130克、聚乳酸130克、苯甲醇800克、EDTA-2Na0.8克、磷酸10.0克、苯扎溴銨15克、甘油甲縮醛4克。實施例3：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星800克、PLGA1300克、聚乳酸1300克、苯甲醇8000克、EDTA-2Na8克、EDTA-2Na磷酸10克、苯扎溴銨150克、甘油甲縮醛40克。實施例4：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA10克、聚乳酸10克、苯甲醇70克、EDTA-2Na0.05克、磷酸0.01克、苯扎溴銨0.01克、甘油甲縮醛0.3克。實施例5：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA15克、聚乳酸15克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.1克磷酸1.5克、苯扎溴銨2.0克、甘油甲縮醛0.5克。實施例6：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星50克、PLGA100克、聚乳酸100克、苯甲醇700克、EDTA-2Na0.5克、磷酸0.1克、苯扎溴銨0.1克、甘油甲縮醛3克。實施例7：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA10克、聚乳酸10克、苯甲醇70克、EDTA-2Na0.05克、磷酸0.01克、苯扎溴銨0.01克、甘油甲縮醛0.3克。實施例8：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA15克、聚乳酸10克、苯甲醇70克、EDTA-2Na0.05克、磷酸0.01克、苯扎溴銨0.01克、甘油甲縮醛0.3克。實施例9：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA10克、聚乳酸15克、苯甲醇70克、EDTA-2Na0.05克、磷酸0.01克、苯扎溴銨0.01克、甘油甲縮醛0.3克。實施例10：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA10克、聚乳酸10克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.05克、磷酸0.01克、苯扎溴銨0.01克、甘油甲縮醛0.3克。實施例11：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA10克、聚乳酸10克、苯甲醇70克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2.0克、苯扎溴銨3.0克、甘油甲縮醛0.5克。實施例12：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA10克、聚乳酸10克、苯甲醇70克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2.0克、苯扎溴銨3.0克、甘油甲縮醛0.3克。實施例13：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星100克、PLGA150克、聚乳酸150克、苯甲醇900克、EDTA-2Na1克、磷酸20克、苯扎溴銨30克、甘油甲縮醛5克。實施例14：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA15克、聚乳酸15克、苯甲醇90克、磷酸2克、苯扎溴銨3克、甘油甲縮醛0.5克。實施例15：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA10克、聚乳酸15克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2克、苯扎溴銨3克、甘油甲縮醛0.5克。實施例16：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA15克、聚乳酸10克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2克、苯扎溴銨3克、甘油甲縮醛0.5克。實施例17：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA15克、聚乳酸15克、苯甲醇70克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2克、苯扎溴銨3克、甘油甲縮醛0.5克。實施例18：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA15克、聚乳酸15克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.05克、磷酸0.01克、苯扎溴銨3克、甘油甲縮醛0.5克。實施例19：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA15克、聚乳酸15克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2克、苯扎溴銨0.01克、甘油甲縮醛0.5克。實施例20：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星10克、PLGA15克、聚乳酸15克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2克、苯扎溴銨3克、甘油甲縮醛0.3克。實施例21：一種獸用恩諾沙星凝膠植入劑，其特征在于：包括以下重量份數的原料組成：恩諾沙星5克、PLGA10克、聚乳酸10克、苯甲醇90克、EDTA-2Na0.05克、磷酸2克、苯扎溴銨3克、甘油甲縮醛0.5克。當前第1頁1 2 3