本發明屬于化妝品天然防腐技術領域，具體涉及一種具有強效、廣譜抑菌活性的天然防腐組合物的制備及復配。
背景技術：
化妝品在生產、儲藏以及使用過程中很容易受微生物的污染而變質，而且隨著化妝品功能性多樣化的增加，營養物質的添加會使微生物極易在產品中生長繁殖，而添加防腐劑會抑制這些微生物的滋生，防止產品的腐敗變質，減少因產品變質給皮膚帶來的危害，在此層面防腐劑是化妝品中必不可少的成分。
但隨著近年來人們對防腐劑安全性的認識和對于合成型防腐劑的“談虎色變”，經過長期研究發現，化學合成的防腐劑是化妝品配方中導致人體皮膚刺激、過敏、發炎以及潛在安全風險的重要因素之一。除此之外，此類防腐劑的使用還會對人體造成累積性的慢性危害，例如：形成不健全的角質層、加速皮膚老化等。因此，尋求一種天然的綠色防腐劑成為了化妝品生產中的一種趨勢。
天然抑菌提取物主要以植物多酚、黃酮、皂苷、生物堿、有機酸等物質來達到抑菌的效果。但單一的植物提取物往往存在抑菌效果較差、抑菌譜窄等不足，因此，通過將具有不同抑菌活性的植物提取物進行適當的復配，得到抑菌效果好，并且廣譜的天然防腐體系，是目前化妝品天然防腐的可行方案之一。
技術實現要素：
本發明的目的是為了替代或降低化學防腐劑的用量，并克服單一植物抑菌提取物抑菌活性差的缺陷，提供一種含有若干種植物提取物的防腐組合物，通過充分發揮組合物之間的協同增效作用，大大提高防腐組合物的抑菌效果和抑菌譜。而且天然來源，對人體更溫和、安全、無刺激。
為了實現上述發明目的，本發明所采用的技術方案是：一種用于化妝品的強效廣譜天然防腐組合物，其特征在于由2～8種抗細菌和真菌的植物提取物復配組成，每種提取物的重量百分比為10～80％。
作為本發明所述的天然防腐組合物的一種優選方案，其中：所述組合物由抑制細菌的植物提取物：透骨草、紫蘇、厚樸、毛竹、荷葉、桑葉、紫花地丁、蒲公英、鐵皮石斛、牛蒡子、金銀花和魚腥草中的一種或幾種組成。
作為本發明所述的天然防腐組合物的一種優選方案，其中：所述組合物由抑制真菌的植物提取物：肉桂、石菖蒲、決明子、苦參、大黃、紅花、銀杏葉和青蒿中的一種或幾種組成。
作為本發明所述的天然防腐組合物的一種優選方案，其中：天然防腐組合物中不同植物提取物對細菌和真菌的作用部位不同，可分別作用于細胞壁、細胞膜、核酸以及酶蛋白部位，并通過協同作用，提高組合物的抑菌能力。
作為本發明所述的天然防腐組合物的一種優選方案，其中：天然防腐組合物的制備方法為將各原料粉碎后分別用水、乙醇、丙酮和石油醚浸提，然后按不同比例復配，即得到廣譜、強效的天然防腐組合物。
作為本發明所述的天然防腐組合物的一種優選方案，其中：植物浸提時間為1～4h，浸提溫度為40～80℃，料液比為10～40倍。
作為本發明所述的天然防腐組合物的一種優選方案，其中：天然防腐組合物具有抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌以及黑曲霉菌的作用。
本發明的天然防腐組合物，能安全、有效的應用于面膜、膏霜、乳液、香波、洗面奶、沐浴乳等化妝品體系。
本發明的有益效果：
(1)提供化妝品用的天然防腐組合物，用以替代化學防腐劑或降低化學防腐劑的用量，避免化學防腐劑對人體安全的潛在風險；(2)該組合物能抑制革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌以及霉菌，具有較寬的抑菌譜，且充分體現組合物協同增效的作用，具有比單一提取物更高效的抑菌效果；(3)另外，植物提取物還具有抗炎、抗氧化、抗紫外線、抗衰老以及美白等護膚功效，這是化學合成防腐劑所不能相比的。
具體實施方式
以下通過具體實施例來對本發明作進一步的說明，但這些實施例只是為了說明，不是對本發明的限制。
實施例1 天然防腐組合物
實施例2 天然防腐組合物抑菌效果評價
1.樣品溶液的制備
分別稱取等量的厚樸提取物、毛竹葉提取物、透骨草提取物以及肉桂提取物，用乙醇水溶液配成200mg/mL的樣品溶液，按照實施例1中的配比進行組合，備用。
2.菌懸液的配制
1)試驗菌株：金黃色葡萄球菌(ATCC6538)、大腸桿菌(ATCC11229)、白色假絲酵母(ATCC10231)、黑曲霉菌(ATCC16404)。
2)培養基：
牛肉膏蛋白胨培養基(細菌用)：牛肉浸膏3g，胰蛋白胨10g，氯化鈉5g，加水至1000mL，調節pH7.2～7.4，高壓濕熱滅菌(103.4kPa，121℃，20min)，備用。配制固體培養基時加入20g瓊脂。
麥芽汁培養基(酵母菌用)：將發酵啤酒的原料(未加酒花)，稀釋至10柏林，高壓濕熱滅，備用。配制固體培養基時加入20g瓊脂。
馬鈴薯培養基(霉菌用)：將去皮馬鈴薯200g切成小塊，加水煮沸20min，用三層紗布過濾，加入20g葡萄糖，將濾液補足1000mL，高壓濕熱滅菌，備用。配制固體培養基時加入20g瓊脂。
3)活化菌種并配制菌懸液：用接種環挑取一環菌株(細菌和酵母菌)于滅菌的液體培養基中，霉菌用接種環挑取孢子在斜面培養基上劃線接種，傳代培養2～3代活化菌種。將活化好的菌懸液(孢子懸液)調節至1×108CFU/mL，通過對數稀釋法稀釋至所需濃度。
3.紙片法測定抑菌效果
根據試驗菌所需營養物質配制相應的固體培養基，當培養基溫度在45～50℃時取20mL于直徑為90mm的培養皿中，待培養基冷卻凝固后置于37℃的培養箱中干燥20～25min。吸取1×106CFU/mL的菌懸液(孢子懸液)100μL接種于培養皿中，涂布均勻。待培養基表面水分完全吸收后，用無菌鑷子取直徑6mm的濾紙片貼于培養基表面，再從紙片中心緩慢滴加10μL 200mg/mL的植物提取液。在接種后15min內完成以上操作，每皿2～3張紙片(以抑菌圈明顯，且無重疊為準)，重復3皿。將培養皿倒置于生化培養箱中，細菌在37℃下孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃下孵育48h，用游標卡尺十字交叉法量取抑菌圈直徑。
以上工作均在超凈臺上完成。
4.試驗結果
抑菌實驗結果見表1。
表1
由表1可知，厚樸提取物、毛竹葉提取物具有較廣譜的抑菌活性，但抑菌能力較弱；透骨草提取物對細菌的抑制效果較好，而對真菌的抑制作用較差；肉桂提取物對細菌的抑制效果較差，對酵母菌和霉菌的抑制效果突出。天然防腐組合物具有更為廣譜的抑菌活性，且抑菌效果增加。
實施例3 天然防腐組合物的最小抑菌濃度(MIC)以及最小殺菌濃度(MBC)的測定
1.最小抑菌濃度(MIC)
最小抑菌濃度的測定采用常量肉湯稀釋法。將植物提取物用二甲亞砜(DMSO)溶解成1000mg/mL作為原液，再連續倍比稀釋至一系列濃度。取若干滅菌試管，每支試管加入1.8mL液體培養基，0.1mL1×107CFU/mL的菌懸液(孢子懸液)以及0.1mL植物提取液。細菌在37℃的恒溫水浴震蕩器(200r/min)中孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃的水浴搖床中孵育48h，然后觀察每支試管中是否有菌生長，以抑制菌體生長的最低濃度作為MIC。每個樣品重復3次。
2.最小殺菌濃度(MBC)
最小殺菌濃度定義為99.9％的菌體被抗菌物質殺死時的最低濃度。取等于和低于MIC處理的菌液100μL于含有固體培養基的培養皿表面，涂布均勻。將培養皿置于生化培養箱中，細菌在37℃下孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃下孵育48h，小于0.01％的菌落生長時抑菌物質的濃度為MBC。
3.MIC和MBC結果
MIC的結果見表2，MBC的結果見表3。
表2
注：---表示未能在實驗濃度范圍內檢測到最小抑菌濃度
表3
注：---表示未能在實驗濃度范圍內檢測到最小殺菌濃度
由表2和表3可知，單一植物提取物相比，天然防腐組合物具有高效、廣譜的抑菌活性。單一植物提取物的MBC均大于或等于各自的MIC值，說明單一植物提取物在最小抑菌濃度下殺菌效率較差，而天然防腐組合物的MBC與MIC值相等，這也從側面說明在天然防腐組合物的最小抑菌濃度下具有很好的殺菌效果，在實際應用中可以適當降低添加量的情況下滿足防腐要求。
以上對本發明的具體實施例進行了詳細描述，僅為本發明的優選實施例而已，并不限制本發明。對于本領域技術人員而言，本發明可以有各種更改和變化。因此，在不脫離本發明精神和范圍下所作的變化、修改以及改進，均應包含在本發明的保護范圍之內。