本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蟾蜍草中有效成分的提取方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
蟾蜍草是一種直立草本，高15～19cm，多分枝。是一種野生的、比較稀少的中草藥。它可以有效預(yù)防和治療感冒、慢性腸炎等疾病，對治療咳嗽及支氣管炎有顯著的效果。蟾蜍草與二棲爬行動物蟾蜍分泌物蟾酥及含有此類物質(zhì)的蟾皮、蟾衣、干蟾在一些疾病的防治方面，有著異曲同工之妙。
蟾蜍草中的有效成分主要是高車前甙，高車前甙目前主要應(yīng)用于治療人的支氣管炎，其毒性較小。但是目前針對蟾蜍草中有效成分的提取方法研究較少，急需一種簡單易行且可以獲得較高含量高車前甙的提取方法。
母豬在懷孕時，經(jīng)常會出現(xiàn)低燒、食欲不振等癥狀，此時若對其用普通藥物治療，很容易對其肚內(nèi)的胎兒造成傷害，嚴重時可造成流產(chǎn)死胎現(xiàn)象的發(fā)生。因此急需一種科學的用藥方法，來解決妊娠母豬低燒的癥狀。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種蟾蜍草中有效成分的提取方法及其在治療母豬低燒方面的應(yīng)用。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的。
一種蟾蜍草中有效成分的提取方法，提取包括以下步驟：
（1）烘干研碎：取生長成熟的蟾蜍草全株，放入烘干機中烘干，烘干溫度設(shè)定為50-60℃，烘干時間為30-40min，將烘干后的蟾蜍草粉碎至80-100目；
（2）粗提：將粉碎后的蟾蜍草放入容器中，并向其中加入10-15倍質(zhì)量重的蒸餾水，將蒸餾水加熱到35-37℃，然后向其中加入混合酶制劑，攪拌30-50min后過濾得濾渣，再將濾渣放入15-20倍質(zhì)量重的蒸餾水中，并向其中加入體積分數(shù)為15%的硫酸溶液，調(diào)節(jié)溶液的pH至2.8-3.0，然后將溶液加熱至100℃，浸提3-4小時后冷卻降溫，浸提的過程中，持續(xù)用超聲處理，然后將得到的混合物過濾，得到的濾液放入3-5℃的環(huán)境里降溫，降溫處理2-3小時后，再次進行過濾，得到的高車前甙粗品；采用混合酶制劑處理粉碎后的蟾蜍草，可以將蟾蜍草根莖中的脂質(zhì)和纖維素分解為小分子的物質(zhì)，減少這些大分子物質(zhì)對蟾蜍草中有效成分的吸附作用，從而在浸提時，能將蟾蜍草中的有效成分快速徹底的提取出來；用濃硫酸將溶液的pH調(diào)節(jié)至2.8-3.0，并用超聲處理，有利于高車前甙從蟾蜍草中析出，提高產(chǎn)品的收率；
（3）精煉：將步驟（2）所得的粗品溶解95%的乙醇溶液中，向溶液中加入濃度為20-25%的氨水，調(diào)節(jié)溶液的pH至8.0-8.5，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，1.0-1.5小時后，將得到的晶體物質(zhì)再次溶解在100℃的蒸餾水中，然后將溶液放入1-3℃的環(huán)境下降溫，重結(jié)晶得到高車前甙精品；此時將溶液的pH調(diào)節(jié)至弱堿性，能增加高車前甙在濃縮時的穩(wěn)定性，防止在濃縮時隨著乙醇溶液一起散發(fā)出去，其中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀購于上海鵬鳴生物科技發(fā)展有限公司，規(guī)格為50L；
將從蟾蜍草中提取出來的高車前甙作為唯一有效成分制成片劑，其中每粒片劑所含高車前甙2-3g，在妊娠母豬出現(xiàn)低燒時使用，使用方法如下：在妊娠母豬出現(xiàn)低燒后，將1-2粒片劑放入母豬飼料中，每天早晚各給藥一次，連續(xù)給藥兩天；高車前甙能有效的治療妊娠母豬的低燒癥狀，并且對母豬肚內(nèi)的胎兒不造成傷害，一般用藥兩天，母豬低燒即可退去。
上述步驟（2）中所述的混合酶制劑由以下重量份的組分組成：纖維素酶10-15份、脂肪酶8-10份。
有益效果：本發(fā)明提供的一種蟾蜍草中有效成分的提取方法及其應(yīng)用，提取的工藝簡單，用料環(huán)保，高車前甙的收率和純度高；將高車前甙制成片劑，用于治療妊娠母豬的低燒，不會對母豬體內(nèi)的胎兒造成任何影響，而且藥效快，能使低燒母豬快速退燒。
具體實施方法
實施例1
一種蟾蜍草中有效成分的提取方法，提取包括以下步驟：
（1）烘干研碎：取生長成熟的蟾蜍草全株，放入烘干機中烘干，烘干溫度設(shè)定為50℃，烘干時間為30min，將烘干后的蟾蜍草粉碎至80目；
（2）粗提：將粉碎后的蟾蜍草放入容器中，并向其中加入10倍質(zhì)量重的蒸餾水，將蒸餾水加熱到35℃，然后向其中加入混合酶制劑，攪拌30min后過濾得濾渣，再將濾渣放入15倍質(zhì)量重的蒸餾水中，并向其中加入體積分數(shù)為15%的硫酸溶液，調(diào)節(jié)溶液的pH至2.8，然后將溶液加熱至100℃，浸提3小時后冷卻降溫，浸提的過程中，持續(xù)用超聲處理，然后將得到的混合物過濾，得到的濾液放入3℃的環(huán)境里降溫，降溫處理2小時后，再次進行過濾，得到的高車前甙粗品；
（3）精煉：將步驟（2）所得的粗品溶解95%的乙醇溶液中，向溶液中加入濃度為20%的氨水，調(diào)節(jié)溶液的pH至8.0，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，1.0小時后，將得到的晶體物質(zhì)再次溶解在100℃的蒸餾水中，然后將溶液放入1℃的環(huán)境下降溫，重結(jié)晶得到高車前甙精品。
將從蟾蜍草中提取出來的高車前甙作為唯一有效成分制成片劑，其中每粒片劑所含高車前甙2-3g，在妊娠母豬出現(xiàn)低燒時使用，使用方法如下：在妊娠母豬出現(xiàn)低燒后，將1粒片劑放入母豬飼料中，每天早晚各給藥一次，連續(xù)給藥兩天。
步驟（2）中所述的混合酶制劑由以下重量份的組分組成：纖維素酶10份、脂肪酶8份。
本實施例中，高車前甙的收率為87.4%，純度為99.3%。
實施例2
一種蟾蜍草中有效成分的提取方法，提取包括以下步驟：
（1）烘干研碎：取生長成熟的蟾蜍草全株，放入烘干機中烘干，烘干溫度設(shè)定為55℃，烘干時間為35min，將烘干后的蟾蜍草粉碎至90目；
（2）粗提：將粉碎后的蟾蜍草放入容器中，并向其中加入13倍質(zhì)量重的蒸餾水，將蒸餾水加熱到36℃，然后向其中加入混合酶制劑，攪拌40min后過濾得濾渣，再將濾渣放入17倍質(zhì)量重的蒸餾水中，并向其中加入體積分數(shù)為15%的硫酸溶液，調(diào)節(jié)溶液的pH至2.8-3.0，然后將溶液加熱至100℃，浸提3.5小時后冷卻降溫，浸提的過程中，持續(xù)用超聲處理，然后將得到的混合物過濾，得到的濾液放入4℃的環(huán)境里降溫，降溫處理2.5小時后，再次進行過濾，得到的高車前甙粗品；
（3）精煉：將步驟（2）所得的粗品溶解95%的乙醇溶液中，向溶液中加入濃度為22%的氨水，調(diào)節(jié)溶液的pH至8.4，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，1.3小時后，將得到的晶體物質(zhì)再次溶解在100℃的蒸餾水中，然后將溶液放入2℃的環(huán)境下降溫，重結(jié)晶得到高車前甙精品。
將從蟾蜍草中提取出來的高車前甙作為唯一有效成分制成片劑，其中每粒片劑所含高車前甙2.5g，在妊娠母豬出現(xiàn)低燒時使用，使用方法如下：在妊娠母豬出現(xiàn)低燒后，將1粒片劑放入母豬飼料中，每天早晚各給藥一次，連續(xù)給藥兩天。
步驟（2）中所述的混合酶制劑由以下重量份的組分組成：纖維素酶13份、脂肪酶9份。
本實施例中，高車前甙的收率為88.1%，純度為99.4%。
實施例3
一種蟾蜍草中有效成分的提取方法，提取包括以下步驟：
（1）烘干研碎：取生長成熟的蟾蜍草全株，放入烘干機中烘干，烘干溫度設(shè)定為60℃，烘干時間為40min，將烘干后的蟾蜍草粉碎至100目；
（2）粗提：將粉碎后的蟾蜍草放入容器中，并向其中加入15倍質(zhì)量重的蒸餾水，將蒸餾水加熱到37℃，然后向其中加入混合酶制劑，攪拌50min后過濾得濾渣，再將濾渣放入20倍質(zhì)量重的蒸餾水中，并向其中加入體積分數(shù)為15%的硫酸溶液，調(diào)節(jié)溶液的pH至3.0，然后將溶液加熱至100℃，浸提4小時后冷卻降溫，浸提的過程中，持續(xù)用超聲處理，然后將得到的混合物過濾，得到的濾液放入5℃的環(huán)境里降溫，降溫處理3小時后，再次進行過濾，得到的高車前甙粗品；
（3）精煉：將步驟（2）所得的粗品溶解95%的乙醇溶液中，向溶液中加入濃度為25%的氨水，調(diào)節(jié)溶液的pH至8.5，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，1.5小時后，將得到的晶體物質(zhì)再次溶解在100℃的蒸餾水中，然后將溶液放入3℃的環(huán)境下降溫，重結(jié)晶得到高車前甙精品。
將從蟾蜍草中提取出來的高車前甙作為唯一有效成分制成片劑，其中每粒片劑所含高車前甙3g，在妊娠母豬出現(xiàn)低燒時使用，使用方法如下：在妊娠母豬出現(xiàn)低燒后，將2粒片劑放入母豬飼料中，每天早晚各給藥一次，連續(xù)給藥兩天。
步驟（2）中所述的混合酶制劑由以下重量份的組分組成：纖維素酶15份、脂肪酶10份。
本實施例中，高車前甙的收率為88.1%，純度為99.6%。
試驗：
采用實施例1的方式，在安徽省肥西縣養(yǎng)殖場對妊娠母豬進行試驗，發(fā)現(xiàn)對低燒的妊娠母豬，本產(chǎn)品治療療效顯著，妊娠母豬在用藥后第二天即可完全退燒，并對母豬的肚內(nèi)的胎兒不產(chǎn)生任何影響，并且不影響母豬的生育能力。