本發明屬于醫藥領域，涉及一種具有活血祛瘀、調經止痛的中藥組合物，具體涉及一種新生化方有效部位、有效成分的組合物及其制備方法。
背景技術：
痛經為婦科最常見的癥狀之一，約有75％的婦女發生痛經。痛經分為原發性和繼發性兩大類，原發性痛經是指月經前及行經期間，下腹及腰部痙攣性疼痛，嚴重時伴有惡心、嘔吐、肢冷，尤其多見于未婚青年婦女。中醫藥治療婦科疾病有悠久的歷史，以辨證辨病結合，中醫藥愈加顯現其獨特的治療優勢，但目前治療痛經的復方藥物多存在配方藥味組成多、用藥量大、使用不便、成分復雜、有效部位不明確，復方中起療效的物質基礎不清楚，并存在一定的不良反應等問題，因此很有必要在中醫藥理論的指導下去粗存精、優選出一種藥物配比精簡、療效確切，副作用小、服用方便，用于活血祛瘀、調經止痛的藥物。
技術實現要素：
針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種新生化方有效部位、有效成分的組合物，該組合物藥物配比精簡、用藥量少、療效好、副作用更小、服用方便，并且具有活血祛瘀、調經止痛的作用；本發明的另一目的在于提供該組合物的制備方法。
本發明是通過以下技術方案實現的：
一種新生化方有效部位、有效成分組合物，由以下重量份配比的原料制備而成：
益母草總生物堿20-40份，紅花總黃酮10-20份，川芎嗪5-10份，阿魏酸10-20份，苦杏仁苷5-10份，甘草酸1-5份，當歸揮發油1-5份，干姜總酚10-20份，甘草苷1-5份。
有選的，所述原料重量份配比為益母草總生物堿25-35份，紅花總黃酮12-18份，川芎嗪6-8份，阿魏酸12-18份，苦杏仁苷6-8份，甘草酸2-4份，當歸揮發油2-4份，干姜總酚12-18份，甘草苷2-4份。
本發明的進一步改進方案為：
一種新生化方有效部位、有效成分組合物的制備方法，包含如下步驟：
步驟一，根據所述的重量份配比稱取各原料；
步驟二，取當歸揮發油采用β-環糊精包合，β-環糊精溶解于純化水中，加入用乙醇溶解的當歸揮發油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用5000-30 000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用100-800 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經噴霧干燥處理得藁本內酯噴干粉；
步驟三，將益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細粉，與藁本內酯噴干粉混勻后，和藥學上可接受的載體，如紅糖、藥用淀粉、蔗糖，制備成臨床上所能接受的劑型。
所述步驟二中當歸揮發油和β-環糊精的重量比為1:5-20。
所述臨床上所能接受的劑型為水煎劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、糖漿劑、栓劑、注射劑或微囊劑型。
本發明的更進一步改進方案為：
用所述的一種新生化方有效部位、有效成分組合物制成的水煎劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、糖漿劑、栓劑、注射劑或微囊劑。
所述各原料通過以下方法提取：益母草總生物堿通過益母草水提取，提取液調pH至3-4后采用陽離子交換樹脂富集制備得到；紅花總黃酮通過紅花水提取，提取液調pH至2-3后采用聚酰胺樹脂富集制備得到；川芎嗪是通過川芎水提取后調節溶液pH至2-3，乙醇醇沉，進而通過C18制備色譜富集得到；阿魏酸為通過川芎水提取后調節溶液pH至7-8，乙醇醇沉，進而通過C18制備色譜富集得到；苦杏仁苷為苦杏仁水提取，提取液調pH至2-3后采用聚酰胺樹脂富集制備得到；甘草酸和甘草苷的制備方法為通過甘草水提取后采用大孔樹脂富集，進而采用不同濃度乙醇洗脫、分段，獲得甘草酸和甘草苷；當歸揮發油通過當歸水蒸氣蒸餾制備得到；、干姜總酚的制備方法為干姜水提取，提取液調pH至2-3后采用聚酰胺樹脂富集制備得到。另外，上述各原料均可以從市場購得。
本發明在前期對古今治療痛經方劑進行篩選，在中醫藥理論的指導下，辨證施治，結合痛經的發病機理和發病癥狀，以活血化瘀為治療依據進行篩選處方，確定以益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚、甘草苷和當歸揮發油組成的中藥組合物。
本發明基于中醫辨證施治結合現代藥理學研究，益母草總生物具有抗炎、鎮痛和抗痛經效用，紅花總黃酮通過抗血小板聚集實現活血化瘀，川芎嗪抗血栓形成，阿魏酸可以抗血小板聚集和血栓、抗炎、增強免疫力，苦杏仁苷抗炎，甘草酸可以保肝抗病毒，干姜總酚可抑制血小板環氧合酶產生，抑制凝血酶原激酶產生、血小板聚集，甘草苷活血化瘀，改善血管微循環，當歸揮發油可以升高子宮NO水平，從而對原發性痛經有較好的效果。本發明在中醫藥辨證施治的指導下去粗存精，精簡配伍組方。根據藥理篩選結果表明，中藥組合物活活血祛瘀、調經止痛作用強，用藥量更少，不良反應更低。
本發明的有益效果為：
（1）本發明在前期對古今治療痛經方劑進行篩選，在中醫藥理論的指導下，辨證施治，結合痛經的發病機理和發病癥狀，以活血化瘀為治療依據進行藥物配比的篩選，去粗存精，精簡藥味，確定以益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷和當歸揮發油進行組合，并優化提取物的重量配比，實驗結果表明，本發明提供的中藥組合物具有很好的活血祛瘀、調經止痛功效，藥味精簡后在保證良好功效的同時，臨床用藥量更少。
（2）本發明提供的中藥組合物制備方法，有效避免了中藥湯劑煎煮過程中由于酸堿成分形成復合物導致有效部位、有效成分沉淀損失，在保障藥物療效的同時實現中藥資源合理利用。
具體實施方式
以下各實施例所用新生化方有效部位、有效成分均由市場購得。
實施例1：中藥組合物的制備
取益母草總生物堿300g，紅花總黃酮150g，川芎嗪60g，阿魏酸150g，苦杏仁苷60g，甘草酸30g，干姜總酚150g，甘草苷30g，當歸揮發油35 mL。取當歸揮發油采用β-環糊精包合，重量比1:10，β-環糊精溶解于純化水中，緩慢加入用乙醇溶解的當歸揮發油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用10 000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用100 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經噴霧干燥處理得藁本內酯噴干粉；益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細粉與藁本內酯噴干粉混勻，加入800g紅糖混合均勻，加水制成軟材，過20目篩制粒，干燥，制成顆粒，包裝，即得顆粒劑。
實施例2：中藥組合物的制備
取益母草總生物堿200g，紅花總黃酮100g，川芎嗪50g，阿魏酸100g，苦杏仁苷50g，甘草酸10g，干姜總酚100g，甘草苷10g，當歸揮發油10 mL。取當歸揮發油采用β-環糊精包合，重量比1:5，β-環糊精溶解于純化水中，緩慢加入用乙醇溶解的當歸揮發油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用20000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用300 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經噴霧干燥處理得藁本內酯噴干粉；益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細粉與藁本內酯噴干粉混勻，加入藥用淀粉1000g混合均勻，加水制成軟材，過20目篩制粒，干燥，制成顆粒裝入膠囊，每粒0.3g。
實施例3：中藥組合物的制備
取益母草總生物堿400g，紅花總黃酮200g，川芎嗪100g，阿魏酸200g，苦杏仁苷100g，甘草酸50g，干姜總酚200g，甘草苷50g，當歸揮發油50 mL。取當歸揮發油采用β-環糊精包合，重量比1:20，β-環糊精溶解于純化水中，緩慢加入用乙醇溶解的當歸揮發油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用10000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用100 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經噴霧干燥處理得藁本內酯噴干粉；益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細粉與藁本內酯噴干粉混勻，加入蔗糖600g，混合均勻，2000 mL水溶解，0.22 μm微孔濾膜過濾，包裝，即得糖漿劑。
實施例4
根據實施例1的方法將各原料混勻后，按照常規方法，制成水煎劑、片劑、栓劑、注射劑或微囊劑。
實施例5：對縮宮素所致的小鼠離體子宮收縮的影響
實驗方法：取未孕雌性小鼠，體重18～22g；實驗前連續3天腹腔注射苯甲酸雌二醇1mg·kg-1·d-1，以同步化子宮并增加子宮對縮宮素的敏感性。于第4日實驗時脫頸椎處死，剖腹取子宮，剝離附著于子宮壁上的結締組織和脂肪，置于Locke’s溶液中清洗，用細線分別扎住子宮頸端及兩側卵巢端，一端固定于浴槽底部，另一端連接在張力換能器上。置于20ml Locke’s液恒溫浴槽中，溫度為(37±0.1)℃，持續供氧，pH 7.3，通過調節螺母加1g的負荷(10mN)，平衡40min，待子宮收縮穩定，自發節律恢復后，開始進行實驗。
預先記錄5-10min正常收縮曲線，繼加入縮宮素注射劑10μL，終濃度為5μL/L，作用15min后再加入中藥組合物（實施例1、實施例2和實施例3制得）、四物湯為受試藥物，各受試藥物加入的初始濃度均為1g受試藥物/mL，浴槽中受試藥物的終濃度為10mg受試藥物/mL，觀察藥物對縮宮素引起子宮痙攣性收縮的抑制作用。
標本穩定后，記錄正常活動曲線作為對照。將各受試藥物加入營養管中，待反應達到峰值后，用新鮮營養液沖洗3-5次，穩定后可重復使用。
采用T檢驗方法統計給藥前及給藥后子宮的平均肌張力，計算抑制子宮收縮的百分率 (IR%)。：IR(%)＝(給藥前參數-給藥后參數)/給藥前參數×100，具體實驗結果如表1所示。
表1 各藥物對縮宮素所致的小鼠離體子宮收縮的影響(n=10)
由表1各藥物對縮宮素所致的小鼠離體子宮收縮的影響結果表明，本發明提供的中藥組合物具有比四物湯具有更好的抑制子宮收縮的作用，因此，實驗結果進一步表明本發明提供的中藥組合物，通過合理配比后，起到很好的協同增效作用，臨床上藥效強、用量少、安全、便于服用。
實施例6：對家兔體外血漿凝血酶時間 (TT) 影響的實驗研究
實驗方法：取新西蘭白兔，雄性，6只，禁食8h后，用戊巴比妥鈉麻醉，頸動脈取血，用3.8%枸櫞酸鈉(血與抗凝劑體積比為9:1)抗凝收集于塑料離心管中，以3000r·min-1離心10min，吸取上層溶液，制備成待測血漿，以蒸餾水作為空白對照，在測試杯每個道中加入10μL中藥組合物 (實施例1、實施例2和實施例3制得)、四物湯，再分別加待測血漿50μL，37℃預溫3min后，加入0.1mol·L-1 pH 7.4Tris-HCl緩沖液稀釋的15U·mL-1凝血酶溶液50μL。用LG-PABER-I型血小板聚集凝血因子分析儀測定各藥物組的體外凝血時間，并以[(給藥組凝血時間-對照組凝血時間)/對照組凝血時間]×100％計算各藥物組的凝血時間延長率。具體實驗結果如表2所示。
表2 各藥物對家兔體外血漿凝血酶時間的影響
注：*與空白對照組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01
通過表2實驗結果表明，和四物湯相比，本發明提供的中藥組合能夠更加顯著延長家兔體外血漿凝血酶時間，具有統計學意義，說明通過科學配比后，起到協同增效的作用，抗凝血作用增強，本發明提供的中藥組合物組成更精簡，用藥量更少，可以避免多味藥帶來的不良反應。