本發明涉及一種紫蘇葉注射液的制備方法。
背景技術：
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄類動物疾病。口蹄疫是影響畜牧業發展的最重要的動物傳染病，在世界動物衛生組織列為A類傳染病中的頭號傳染病，在我國，該病也列為一類動物疫病。口蹄疫的爆發會給當地畜牧業造成嚴重的損失。2001年英國爆發口蹄疫瘦隋，撲殺700萬頭牲畜，造成85億英鎊的損失，同時，該疫情還波及法國、荷蘭、愛爾蘭等國，這些國家共撲殺多達36萬頭牲畜。在發展中國家，注射口蹄疫疫苗是預防口蹄疫最有效的措施之一。但由于口蹄疫病毒是RNA病毒，病毒的基因和病毒的抗原特性改變很快，因此，這顯著增加了研制高效的口蹄疫疫苗的難度。雖然發達國家采用動物撲殺可以有效預防El蹄疫，但一旦爆發口蹄疫，大量沒有免疫的動物面臨更大的感染風險口。因此，口蹄疫的防控依然是畜牧業中動物疫控研究最重要的研究課題之一。采用有效的衛生措施也是預防口蹄疫的技術措施之一。口蹄疫病毒是一種對酸高度敏感的病毒。這是因為口蹄疫病毒在酸性條件下脫下蛋白衣殼進行繁殖；如果它還沒有侵染進入動物細胞，提前脫下蛋白衣殼將會影響病毒的繁殖而導致病毒的死亡。中草藥紅茶菌是一種利用紅茶菌發酵茶葉、羅漢果、甘草、野菊花等中草藥提取液的新型紅茶茵菌液。由于它保留了紅茶菌的產酸特性，因此中草藥紅茶菌制劑可以體外有效殺滅口蹄疫病毒。茶葉、羅漢果、甘草、野菊花是一些具有藥食兩用的中草藥植物，這些植物的提取液普遍具有提高動物免疫力、拮抗病原細菌、病毒等方面的作用。
技術實現要素：
本發明提出一種紫蘇葉注射液的制備方法。
一種紫蘇葉注射液的制備方法，包括以下步驟：
（1）取紫蘇葉放入烘箱中35℃烘干，用中草藥粉碎機進行初步粉碎，最后過40目篩得到粗粉；
(2)精確稱取紫蘇葉粗粉400g置于圓底燒瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下熱水浸提4次，每次1h，每次之間用紗布進行粗濾，合并提取液，旋轉蒸干多余水分，即得紫蘇葉浸膏；
(3)在制備的紫蘇葉浸膏中加入60％的乙醇溶液，靜置24h；
（4）待沉淀穩定析出后用濾紙過濾，利用水提醇沉原理除去部分雜質，并用旋轉蒸發儀回收溶液中的乙醇；
（5）用18％的鹽酸調節pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯層溶液無色為止；
（6）合并萃取液，旋轉蒸干乙酸乙酯，即得紫蘇葉迷迭香酸萃取物；
（7）在制備好的紫蘇葉迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化鈉注射液360ml溶解浸膏，并同時加入亞硫酸氫鈉0.1％、苯酚0.25％分別作為抗氧化劑和抑菌劑，在0．45微米的微孔濾膜抽濾，用鹽酸調節pH值至6．0；
（8）以注射用水定容至l000ml，充分振蕩混勻，無菌分裝，在121℃環境下濕熱滅菌30min，后即得，封蠟避光保存。
優選地，所述步驟步驟（5）中PH值調節為2.5。
本發明所述方法制備的紫蘇葉注射液，安全性好，刺激好，本發明所述方法降低了能耗，節省了成本，可實用性強，可工業化生產。
具體實施方式
實施例1。
一種紫蘇葉注射液的制備方法，包括以下步驟：
（1）取紫蘇葉放入烘箱中35℃烘干，用中草藥粉碎機進行初步粉碎，最后過40目篩得到粗粉；
(2)精確稱取紫蘇葉粗粉400g置于圓底燒瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下熱水浸提4次，每次1h，每次之間用紗布進行粗濾，合并提取液，旋轉蒸干多余水分，即得紫蘇葉浸膏；
(3)在制備的紫蘇葉浸膏中加入60％的乙醇溶液，靜置24h；
（4）待沉淀穩定析出后用濾紙過濾，利用水提醇沉原理除去部分雜質，并用旋轉蒸發儀回收溶液中的乙醇；
（5）用18％的鹽酸調節pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯層溶液無色為止；
（6）合并萃取液，旋轉蒸干乙酸乙酯，即得紫蘇葉迷迭香酸萃取物；
（7）在制備好的紫蘇葉迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化鈉注射液360ml溶解浸膏，并同時加入亞硫酸氫鈉0.1％、苯酚0.25％分別作為抗氧化劑和抑菌劑，在0．45微米的微孔濾膜抽濾，用鹽酸調節pH值至6．0；
（8）以注射用水定容至l000ml，充分振蕩混勻，無菌分裝，在121℃環境下濕熱滅菌30min，后即得，封蠟避光保存。
實施例2。
一種紫蘇葉注射液的制備方法，包括以下步驟：
（1）取紫蘇葉放入烘箱中35℃烘干，用中草藥粉碎機進行初步粉碎，最后過40目篩得到粗粉；
(2)精確稱取紫蘇葉粗粉400g置于圓底燒瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下熱水浸提4次，每次1h，每次之間用紗布進行粗濾，合并提取液，旋轉蒸干多余水分，即得紫蘇葉浸膏；
(3)在制備的紫蘇葉浸膏中加入60％的乙醇溶液，靜置24h；
（4）待沉淀穩定析出后用濾紙過濾，利用水提醇沉原理除去部分雜質，并用旋轉蒸發儀回收溶液中的乙醇；
（5）用18％的鹽酸調節pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯層溶液無色為止；
（6）合并萃取液，旋轉蒸干乙酸乙酯，即得紫蘇葉迷迭香酸萃取物；
（7）在制備好的紫蘇葉迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化鈉注射液360ml溶解浸膏，并同時加入亞硫酸氫鈉0.1％、苯酚0.25％分別作為抗氧化劑和抑菌劑，在0．45微米的微孔濾膜抽濾，用鹽酸調節pH值至6.0；
（8）以注射用水定容至l000ml，充分振蕩混勻，無菌分裝，在121℃環境下濕熱滅菌30min，后即得，封蠟避光保存。
本實施例所述步驟步驟（5）中PH值調節為2.5。