本發(fā)明屬于藥品領(lǐng)域，涉及一種治療手足口病的中藥組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：手足口病是一種兒童傳染病，又名發(fā)疹性水皰性口腔炎,多發(fā)生于5歲以下兒童。手足口病是由腸道病毒引起的傳染病，引發(fā)手足口病的腸道病毒多達(dá)20多種，其中以腸道病毒71型(EV71)和柯薩奇病毒最為常見。兩種病毒為小RNA病毒科腸道病毒屬成員，近年來在中國大陸暴發(fā)流行危害日益嚴(yán)重，居丙類傳染病之首，感染引起手、足、口、臀部皰疹，少數(shù)可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染如無菌性腦膜炎、腦干腦炎、脊髓灰質(zhì)樣麻痹等、心肌炎和呼吸系統(tǒng)疾病神經(jīng)源性肺水腫、甚至死亡，致殘率和致死率很高。目前，對(duì)于手足口病的治療，尚無特異、高效的抗病毒藥物。西醫(yī)主要采用抗病毒藥物加對(duì)癥治療，主要利巴偉林、阿昔洛韋、更昔洛韋等抗病毒藥物來治療，具有一定的療效，同時(shí)加強(qiáng)護(hù)理以及密切觀察病情變化，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并發(fā)癥。中醫(yī)認(rèn)為，手足口病屬于“溫病”范疇，溫?zé)嵝岸緤A濕侵入口鼻肌膚，內(nèi)轉(zhuǎn)入心脾兩臟，再自內(nèi)向外透發(fā)。脾開竅于口而主四肢，心開竅于舌而主血脈，故疹發(fā)于口舌與手足之肌膚。治療上以清熱利濕、解毒透疹為法。本發(fā)明針對(duì)手足口病的發(fā)病原因，研究出一種治療兒小手足口病的中藥組合物，目前，尚未見相關(guān)報(bào)道。(1)鐵線草，為鐵線蕨科植物扇葉鐵線蕨AdiantumflabellulatumL.的干燥全草。收載于《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1990年版：【性味】微苦、辛，涼。【功能與主治】清熱解毒，利濕，消腫。用于泌尿系結(jié)石，肝炎，痢疾，感冒發(fā)熱，泄瀉，砂淋。(2)金銀花，為忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花。收載于中國藥典2015年版：【性味與歸經(jīng)】甘，寒。歸肺、心、胃經(jīng)。【功能與主治】清熱解毒，疏散風(fēng)熱。用于癰腫療瘡，喉痹，丹毒，熱毒血痢，風(fēng)熱感冒，溫病發(fā)熱。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種治療小兒手足口病療效好、見效快的中藥組合物及其制備方法。本發(fā)明治療手足口病的中藥組合物在中醫(yī)傳統(tǒng)理論的基礎(chǔ)上，結(jié)合民間用藥經(jīng)驗(yàn)，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)理論配制而成。具有組方嚴(yán)謹(jǐn)，藥少力專，對(duì)手足口病有良好的療效，能有效改善患者的臨床癥狀，縮短病程，提高患者的生活質(zhì)量。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：一種治療手足口病的中藥組合物，由以下重量份的中藥組分組成：鐵線草10-50份、金銀花5-30份。以上所述的治療手足口病的中藥組合物，優(yōu)選由以下重量份的中藥組分組成：鐵線草20-40份、金銀花5-20份，最佳優(yōu)選由以下重量份的中藥組分組成：鐵線草25份、金銀花10份。以上所述治療手足口病的中藥組合物，可制備成藥品上允許的任意劑型，如：顆粒劑、片劑、口服液或糖漿劑等，優(yōu)選制成口服液。以上所述治療手足口病的中藥組合物制成口服液的制備方法，包括以下步驟：(1)分別取鐵線草、金銀花，凈選，干燥；(2)按重量份稱取：鐵線草10-50份、金銀花5-30份；(3)將稱量好的中藥加6-10倍量水，加熱回流提取2-3次，每次1-3小時(shí)，濾過，合并濾液；(4)將所得濾液濃縮至相對(duì)密度為在60℃時(shí)為1.20～1.25的清膏，加入3-5倍量80％乙醇，攪勻，靜置24～48小時(shí)，濾取上清液；(5)將上清液濃縮至適量，加入防腐劑、矯味劑，煮沸，攪勻，濾過，滅菌，即得。所述防腐劑可為苯甲酸、苯甲酸鈉、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、山梨酸、山梨酸鉀等中的一種或兩種以上的組合，優(yōu)選為苯甲酸鈉。所述矯味劑為蔗糖、單糖漿、山梨醇、甘露醇、甜菊苷、天冬甜精等中的一種或兩種以上的組合優(yōu)選為甜菊苷。以上所述治療手足口病的中藥組合物，在制備治療手足口病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明中鐵線草具有清熱解毒，利濕，消腫之功；金銀花具有清熱解毒，疏散風(fēng)熱功效；二者合用，達(dá)到清熱解毒、散濕化瘀之功，用其治療小兒手足口病療效好，見效快，愈后效果好。本發(fā)明的有益效果是：1.原料藥均取自中藥品種，藥味簡單易得，安全無毒副作用。2.組方嚴(yán)謹(jǐn)，藥少力專，具有清熱解毒、散濕化瘀等功效，能有效抑制手足口病病毒，能有效改善患者的臨床癥狀，縮短病程，提高患者的生活質(zhì)量，對(duì)小兒手足口病有良好的療效，總有效率達(dá)100％。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍和應(yīng)用范圍：一、治療手足口病的中藥組合物口服液的制備實(shí)施例1一種治療手足口病的中藥組合物制備成口服液的方法，包括以下步驟：(1)分別取鐵線草、金銀花，凈選，干燥；(2)按重量份稱取：鐵線草20kg、金銀花15kg；(3)將稱量好的中藥加7倍量水，加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液；(4)將所得濾液濃縮至相對(duì)密度1.22(60℃)的清膏，加入4倍量80％乙醇，攪勻，靜置24～48小時(shí)，濾取上清液；(5)將上清液濃縮至適量，加入苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、蔗糖，煮沸，攪勻，濾過，滅菌，即得。實(shí)施例2一種治療手足口病的中藥組合物制備成口服液的方法，包括以下步驟：(1)分別取鐵線草、金銀花，凈選，干燥；(2)按重量份稱取：鐵線草50kg、金銀花30kg；(3)將稱量好的中藥加10倍量水，加熱回流提取2次，每次3小時(shí)，濾過，合并濾液；(4)將所得濾液濃縮至相對(duì)密度1.25(60℃)的清膏，加入5倍量80％乙醇，攪勻，靜置24～48小時(shí)，濾取上清液；(5)將上清液濃縮至適量，加入對(duì)羥基苯甲酸乙酯、山梨酸、天冬甜精，煮沸，攪勻，濾過，滅菌，即得。實(shí)施例3一種治療手足口病的中藥組合物制備成口服液的方法，包括以下步驟：(1)分別取鐵線草、金銀花，凈選，干燥；(2)按重量份稱取：鐵線草25kg、金銀花10kg；(3)將稱量好的中藥加8倍量水，加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液；(4)將所得濾液濃縮至相對(duì)密度1.23(60℃)的清膏，加入4倍量80％乙醇，攪勻，靜置24～48小時(shí)，濾取上清液；(5)將上清液濃縮至適量，加入苯甲酸鈉、甜菊苷，煮沸，攪勻，濾過，滅菌，即得。實(shí)施例4一種治療手足口病的中藥組合物制備成口服液的方法，包括以下步驟：(1)分別取鐵線草、金銀花，凈選，干燥；(2)按重量份稱取：鐵線草40kg、金銀花20kg；(3)將稱量好的中藥加9倍量水，加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液；(4)將所得濾液濃縮至相對(duì)密度1.24(60℃)的清膏，加入4倍量80％乙醇，攪勻，靜置24～48小時(shí)，濾取上清液；(5)將上清液濃縮至適量，加入對(duì)羥基苯甲酸乙酯、單糖漿、山梨醇，煮沸，攪勻，濾過，滅菌，即得。實(shí)施例5一種治療手足口病的中藥組合物制備成口服液的方法，包括以下步驟：(1)分別取鐵線草、金銀花，凈選，干燥；(2)按重量份稱取：鐵線草10kg、金銀花5kg；(3)將稱量好的中藥加6倍量水，加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液；(4)將所得濾液濃縮至相對(duì)密度1.20(60℃)的清膏，加入3倍量80％乙醇，攪勻，靜置24～48小時(shí)，濾取上清液；(5)將上清液濃縮至適量，加入山梨酸鉀、單糖漿、甘露醇，煮沸，攪勻，濾過，滅菌，即得。二、體外抗病毒試驗(yàn)采用體外實(shí)驗(yàn)CPE(細(xì)胞病變)法對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行體外抗病毒試驗(yàn)。1、材料宿主細(xì)胞：猴胚胎腎細(xì)胞(MA104細(xì)胞)，購自中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)所細(xì)胞中心；病毒：腸道病毒EV71株，柯薩奇病毒B3株、B4株、B5株，均購自美國典型菌種保藏中心(ATCC)；細(xì)胞培養(yǎng)液：DEME培養(yǎng)液(美國Gibco公司)加10％胎牛血清(美國HyClone公司)；細(xì)胞維持液：RPMI-1640細(xì)胞維持液(美國GibcoTM公司)；樣品：上述實(shí)施例1-5，同時(shí)以市售利巴韋林顆粒做對(duì)照；2、供試品溶液的制備取實(shí)施例1-5樣品，分別用0.22μm的微孔濾膜濾過，存于西林瓶中，放于-40℃冰箱備用；取利巴偉林顆粒，制備成溶液后，用0.22μm的微孔濾膜濾過，存于西林瓶中，放于-40℃冰箱備用。3.體外抗病毒試驗(yàn)3.1病毒毒力測定MA104細(xì)胞接種于96孔板，100μl/，含細(xì)胞2×104個(gè)/孔，37℃培養(yǎng)24h，細(xì)胞長成單層，加入10倍稀釋9個(gè)濃度的病毒液，每濃度4孔，100μl/孔，37℃，50％CO2溫箱培養(yǎng)，每天用顯微鏡觀察細(xì)胞病變情況(CPE)。細(xì)胞病變(CPE)判斷標(biāo)準(zhǔn)：無CPE,記錄為(-)；0～25％CPE，記錄為(+)；25％～50％CPE，記錄為(++)；50％～75％CPE，記錄為(+++)；75～100％CPE，記錄為(++++)。第7～8天判定結(jié)果，用Reed-Muench法計(jì)算病毒半數(shù)感染劑量(TCID50)。3.2對(duì)MA104細(xì)胞的毒性試驗(yàn)取各供試品溶液用培養(yǎng)液做1∶2～1∶256倍比稀釋后，加到已長成單層的MA104細(xì)胞培養(yǎng)板中，100μL/孔，每個(gè)稀釋度藥液做4個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照。將培養(yǎng)板置37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每日倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞病變情況(CPE)，確定細(xì)胞不出現(xiàn)明顯病變的最低稀釋倍數(shù)(最大無毒濃度)，按Reed-Muench法計(jì)算50％細(xì)胞毒性濃度(TC50)和最大無毒濃度(TC0)。3.2對(duì)MA104細(xì)胞的體外抗病毒試驗(yàn)取已長成單層細(xì)胞的培養(yǎng)板，倒掉培養(yǎng)液，用細(xì)胞維持液沖洗細(xì)胞面3遍后，分別加入100TCID50的各腸道病毒液，每種毒株50μL/孔，置37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中吸附1h后，再加入相應(yīng)稀釋度的實(shí)施例1-5樣品100μL/孔，同時(shí)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照和病毒對(duì)照，并以利巴韋林為陽性對(duì)照。置37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每日倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞病變情況，當(dāng)病毒對(duì)照組細(xì)胞病變?yōu)?+++時(shí)記錄試驗(yàn)結(jié)果。按Reed-Muench計(jì)算50％抑制濃度(IC50)和治療指數(shù)(TI)。TI＝TC50/IC504結(jié)果4.1病毒毒力測定結(jié)果各腸道病毒在MA104細(xì)胞的TCID50測定結(jié)果見表1。表1各病毒TCID50測定結(jié)果表病毒株TCID50EV7110-3.18CoxB310-4.52CoxB410-7.19CoxB510-6.124.2對(duì)MA104細(xì)胞的毒性試驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明實(shí)施例及利巴韋林對(duì)A104細(xì)胞的TC0和TC50測定結(jié)果見表2。表2對(duì)A104細(xì)胞的TC0和TC50測定結(jié)果表組別TC0(mg/mL)TC50(mg/mL)實(shí)施例17.169.78實(shí)施例25.428.05實(shí)施例36.188.82實(shí)施例45.658.26實(shí)施例56.459.06利巴韋林11.6216.484.3對(duì)MA104細(xì)胞的體外抗病毒試驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明實(shí)施例1-5以及利巴韋林在體外對(duì)腸道病毒EV71株、CoxB3株、CoxB4株、CoxB5株致MA104細(xì)胞病變的抑制作用結(jié)果見表3。表3體外抗病毒試驗(yàn)結(jié)果表結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例1-5與利巴韋林在體外對(duì)腸道病毒EV71株、CoxB3株、CoxB4株、CoxB5株致A104細(xì)胞病變均具有明顯的抑制作用，本發(fā)明實(shí)施例1-5對(duì)各腸道病毒的抑制作用比利巴韋林強(qiáng)，說明本發(fā)明能有效的抑制手足口病病毒。三、臨床應(yīng)用1、診斷標(biāo)準(zhǔn)以《中醫(yī)藥治療手足口病臨床技術(shù)指南(2012年版)》為診斷標(biāo)準(zhǔn)，診斷為手足口病患者。臨床表現(xiàn)為：口腔粘膜出現(xiàn)分散狀皰疹，米粒大小，疼痛明顯；手掌、腳掌或臀部出現(xiàn)米粒大小皰疹，皰疹周圍有炎性紅暈，皰內(nèi)液體較少；有些患兒先以發(fā)熱起病，一般為38℃左右，有些患兒伴隨有惡心、嘔吐等反應(yīng)。2、療效標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》，北京：中國醫(yī)藥科技出版社，作者：鄭筱萸；制定療效標(biāo)準(zhǔn)。臨床痊愈：全身癥狀消失，皮疹愈合，實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)生化指標(biāo)恢復(fù)正常；顯效：全身癥狀好轉(zhuǎn)，皮疹未完全愈合，實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)生化指標(biāo)好轉(zhuǎn)；有效：全身癥狀好轉(zhuǎn)，皮疹未完全愈合，實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)生化指標(biāo)基本無變化；無效：全身癥狀無好轉(zhuǎn)或加重，實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)生化指標(biāo)明顯異常。3、給藥方法(1)樣品組：服用實(shí)施例1-5的產(chǎn)品，每次10ml，每天3次，連續(xù)服用6天；(2)對(duì)照組：按說明書服用利巴韋林口服液，每次5ml，每天3次，連續(xù)服用6天，加強(qiáng)對(duì)癥治療，做好口腔護(hù)理，合并感染者給予頭孢類藥物進(jìn)行抗菌治療。4、應(yīng)用結(jié)果本發(fā)明治療手足口病的中藥組合物，曾用于治療和觀察72例患兒，同時(shí)以市售某公司生產(chǎn)的利巴韋林口服液做對(duì)照。將上述制備好的5種實(shí)施例樣品以及對(duì)照樣品，分別用于手足口病患兒(男40例，女32例，平均年齡2.5歲)。結(jié)果詳見表4。表4臨床應(yīng)用效果表組別痊愈(％)顯效(％)有效(％)無效(％)總有效率(％)實(shí)施例133.341.725.00100實(shí)施例250.033.316.70100實(shí)施例341.733.325.00100實(shí)施例450.025.025.00100實(shí)施例533.325.025.00100對(duì)照組25.033.325.016.783.3結(jié)果表明：采用本發(fā)明中藥組合物，對(duì)手足口病的治療總有效率達(dá)到100％，大于利巴韋林對(duì)照組，說明本發(fā)明中藥組合物對(duì)手足口病有良好的療效，能有效改善患者的臨床癥狀，縮短病程，提高患者的生活質(zhì)量。以下為幾個(gè)典型病例：病例1：患兒付××，女，1歲，入院時(shí)體溫38.2℃，手、足、臀部有皰疹，伴有皰疹性咽峽炎，疼痛明顯，精神差，嗜睡，伴隨惡心、嘔吐。服用本發(fā)明實(shí)施例3，3天后患兒體溫恢復(fù)正常，疼痛減輕，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，惡心、嘔吐消失，手、足、臀部的皰疹出現(xiàn)干癟的跡象，再服用3天后，癥狀完全消失，痊愈。病例2：患兒謝××，男，5歲，入院時(shí)體溫38.1℃，手、足、臀部有皰疹，口腔粘膜可見分散狀皰疹，吞咽食物疼痛感明顯，精神狀態(tài)差、嗜睡、易驚、頭痛，伴隨惡心、嘔吐。服用本發(fā)明實(shí)施例2，4天后患兒體溫恢復(fù)正常，吞咽食品疼痛感減輕，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，頭痛現(xiàn)象消失，惡心、嘔吐消失，手、足、臀部的皰疹部分消退，無新發(fā)皮疹，再服用2天后，癥狀完全消失，患兒康復(fù)。病例3：患兒王××，男，1歲，入院時(shí)體溫38.3℃，手、足、臀部有皰疹，口腔可見粘膜皰疹，精神狀態(tài)差、嗜睡、睡眠時(shí)偶有肢體抖動(dòng)，伴隨嘔吐。服用本發(fā)明實(shí)施例1，4天后患兒體溫恢復(fù)正常，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，嘔吐現(xiàn)象消失，手、足、臀部的皰疹出現(xiàn)干癟的跡象，再服用2天后，癥狀全部消失，痊愈。病例4：患兒黃××，女，2歲，手、足、臀部有皰疹，口腔可見粘膜皰疹，吞咽食物有疼痛感，精神狀態(tài)差、嗜睡、伴隨惡心、嘔吐。服用本發(fā)明實(shí)施例5，3天后患兒精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，嘔吐現(xiàn)象消失，手、足、臀部的皰疹出現(xiàn)干癟的跡象，再服用3天后，癥狀全部消失，痊愈。病例5：患兒林××，男，3歲，入院時(shí)體溫38.2℃，手、足、臀部有皰疹，口腔粘膜可見分散狀皰疹，吞咽食物有疼痛感，精神狀態(tài)差、嗜睡、肢體偶有抖動(dòng)、頭痛，伴隨惡心、嘔吐。服用本發(fā)明實(shí)施例4，4天后患兒體溫恢復(fù)正常，吞咽食品疼痛感減輕，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，頭痛現(xiàn)象消失，惡心、嘔吐消失，手、足、臀部的皰疹部分消退，無新發(fā)皮疹，再服用2天后，癥狀完全消失，患兒康復(fù)。當(dāng)前第1頁1 2 3