本發明涉及醫用生物材料領域，具體涉及一種用于乳房缺失再造、乳房畸形矯正等病癥和隆乳術的乳房修補片及其制備和應用方法。

背景技術：

隨著社會不斷進步，女性追求美改善自身形象而進行乳房整形的手術越來越多，而隆胸手術、整形手術都會造成乳房損傷，涉及乳房修復與重建。乳房缺失及乳房畸形嚴重都可實施乳房再造術來重新塑造乳房，改善胸部外形。乳房切除術(切除乳腺)后，由于大量肌肉的缺失，自體皮膚無法達到有效的支持植入物的效果，植入物會發生下垂甚至露出等并發癥。

隆乳術是美容外科的常見手術，常規的隆乳方法都是將乳房假體置于胸大肌后間隙，縫合胸大肌?；颊叩娜榉慷际翘幱诟邚埩顟B下縫合的胸大肌后，手術后患者感覺胸部有壓迫感，乳房比較固定，纖維包膜攣縮的發生率較高(5％～8％)，近幾年來，由于組織工程學的研究和發展，免疫原去除真皮基質醫用材料的研究與應用得以廣泛開展，又因其抗拉伸力強，柔軟及對人體組織有較好的相容性。

目前已有多項臨床試驗將免疫原去除基質補片應用于Revisionary Aesthetic Breast Surgery(包膜攣縮，假體移位，多種原因造成的乳房下垂，乳房雙側不對稱，乳房固定術)中，以起到支持假體及乳房下垂，延伸胸大肌，平緩乳房不規則凹陷等作用，并可以同時減少包膜攣縮發生率，增強整形效果的作用。該使用方法已十分普遍，多篇綜述性文獻報道。目前美國乳房再造的手術約有50％會應用免疫原去除基質產品。

乳房重建過程中，填充乳房假體后，常導致假體移位、脫落、形成包囊攣縮等并發癥。為克服此問題，目前臨床上采用自體筋膜瓣或肌肉瓣進行加強，再植入乳房假體。國外也已有成熟免疫原去除真皮基質材料產品Alloderm乳房整形手術中。國內廣泛的材料為同種異體免疫原去除基質，但異種免疫原去除基質材料和合成材料也在逐步發展。異種免疫原去除基質材料主要有胎牛皮、豬皮、牛心包膜、豬腹膜等原料，合成材料目前有蠶絲補片、鈦涂層聚丙烯補片等。

異體免疫原去除基質生物相容性好，能促進受損軟組織修復，但是真皮基質、心包基質中含彈性蛋白比較高，無法完全降解，并在體內收縮變形導致手術失敗。有研究發現小腸的黏膜下層組織(SIS)彈性蛋白含量少，在體內不易變形，相對于真皮基質免疫原去除材料更適用于乳房重建。發明專利(CN103272278A)曾公開了一種以動物源性免疫原去除小腸黏膜下層組織制備植入性醫用生物材料的方法，介紹了通過動物組織材料的前置處理分離、初洗、病毒滅活、免疫原去除、氯化鈉處理、成型、包裝滅菌獲得具有不同的尺寸、厚度和力學強度的醫用產品。免疫原去除基質作為組織和器官移植的天然生物醫用材料，植入體內后可誘導患者自身細胞長入，為細胞重建受損組織提供模板，修復為血管化、功能化的組織或器官，并且免疫原去除基質會逐步降解，與重建組織再生過程基本同步，最終免疫原去除基質補片完全被宿主組織代替。但是應用于乳房重建的免疫原去除小腸粘膜下層基質材料報道較少。

技術實現要素：

本發明針對現有技術的上述不足，提供一種全新的、可誘導患者自身細胞長入，為細胞重建受損組織提供模板，修復為血管化、功能化的組織或器官，并且免疫原去除基質會逐步降解，與重建組織再生過程基本同步，最終免疫原去除基質補片完全被宿主組織代替的乳房修補片。

為了解決上述技術問題，本發明提供采用的技術方案為：一種乳房修補片，其特征在于：該乳房修補片包括凹凸紋路固定層和多孔層的可降解吸收的雙層結構(或可以描述為：該乳房修補片包括可降解吸收的凹凸紋路固定層和多孔層的雙層結構)，且該雙層結構均為采用動物的小腸粘膜下層組織材料為原料、經過去除免疫原性、保留完整的細胞外基質成分的材料。

本發明所述的動物為哺乳動物，優選豬或牛。

本發明所述去除免疫原性是指細胞殘留量小于10個，DNA殘留量小于10ng/mg，半乳糖苷酶(α-Gal)清除率為99％以上。

本發明所述保留完整的細胞外基質成分材料是指保留包含膠原蛋白、多糖物質、活性因子及生長因子成分。

本發明所述膠原蛋白為I型膠原蛋白及III型、IV型和VI型膠原蛋白的組合物。

本發明所述多糖物質為包含硫酸軟骨素和透明質酸的組合物。

本發明所述活性因子包含纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、整合素及其配體的組合。

本發明所述生長因子成分為堿性生長因子(bFGF)和血管內皮生長因子(VEGF)。

本發明保留膠原蛋白、多糖物質、活性因子及生長因子的成分，上述這些物質可以構成人體組織恢復時細胞生長的支架。

本發明所述乳房修補片為微觀多孔結構，整個修補片的孔隙率在60％以上，凹凸紋路固定層和多孔層都是補片的組成部分，也都具有上述孔隙。

本發明所述乳房修補片在體內降解(降解吸收)時間為1-3個月內。

本發明所述乳房修補片拉伸斷裂強度大于50N/cm，縫合保持力大于10N。

本發明還提供一種乳房修補片的制備方法，其特征在于：包括：組織前置處理、病毒滅活、免疫原去除、干燥、冷凍干燥、成型。

具體的，本發明上述乳房修補片的制備方法，所述步驟包括：(1)組織前置處理：取小腸粘膜下層組織材料(SIS)，清洗并將水濾干；(2)病毒滅活：采用過氧乙酸-乙醇溶液浸泡小腸粘膜下層組織材料；完成后在超聲波清洗機中清洗；(3)免疫原去除：采用含有胰蛋白酶和EDTA的PBS溶液，使用包含至少兩個頻率的超聲進行超聲振蕩處理；完成后在超聲波清洗機中處理，得到免疫原去除后的小腸粘膜下層基質材料；(4)干燥：將步驟(3)的免疫原去除的小腸粘膜下層基質材料固定于帶有凹凸紋路的模具上，并將模具和小腸粘膜下層基質材料在熱循環烘箱中進行干燥；(5)冷凍干燥：將步驟(3)的免疫原去除的小腸粘膜下層基質材料平鋪于真空冷凍干燥機中進行冷凍干燥；(6)成型：將步驟(4)所得的干燥小腸粘膜下層基質材料與步驟(5)所得凍干的小腸粘膜下層基質材料采用膠原蛋白膠粘接成型。

本發明步驟(2)的過氧乙酸-乙醇溶液，其中過氧乙酸的體積百分比濃度為0.1％-5％、乙醇的體積百分比濃度為5％-40％，過氧乙酸-乙醇溶液與小腸粘膜下層組織材料的體積比為(3-20)︰1，滅活時間2-4小時，滅活的溫度范圍為10-40℃。步驟(2)的清洗過程包括：采用pH6-8中的PBS溶液超聲處理，溶液與小腸粘膜下層組織材料體積比為20：1至40：1之間，每次10-30分鐘；清洗2-4次，檢測pH為6-8之間；采用降溫的注射用水清洗，溶液與小腸粘膜下層組織材料比例為20：1至40：1之間，檢測電導率為10μS/cm以下終止。清洗過程可在超聲波清洗機中進行；頻率優選40kHz，功率優選3000W以上。

本發明步驟(3)中的免疫源去除液為含有胰蛋白酶和EDTA的PBS溶液；所述免疫源去除液中胰蛋白酶質量百分比濃度為0.01-0.2％，EDTA的濃度為0.1-1mmol/L；進一步包括：免疫源去除液中胰蛋白酶的質量百分比濃度為0.02-0.05％，EDTA的濃度為0.4-0.8mmol/L，免疫源去除液pH值為7.0-8.0，優選為7.2-7.5；所述免疫源去除液與小腸粘膜下層組織材料體積比為(20-40)︰1；超聲振蕩處理，超聲至少包括兩個頻率，其中低頻率范圍為15-30KHz，高頻范圍為60-90KHz，其中低頻處理5-30min，高頻處理5-30min，溫度范圍為20-35℃。步驟(3)的清洗過程包括：采用pH6-8中的PBS溶液超聲處理，溶液與小腸粘膜下層組織材料體積比為20：1至40：1之間，每次10-30分鐘；清洗2-4次，檢測pH為6-8之間；采用降溫的注射用水清洗，注射用水與小腸粘膜下層組織材料比例為20：1至40：1之間，檢測清洗前后注射用水電導率差為1μS/cm以下終止。清洗過程可在超聲波清洗機中進行；頻率優選40kHz，功率優選3000W以上。

本發明步驟(4)所述干燥步驟為將由步驟(3)得到的基質材料置于干燥裝置中，干燥溫度25-40℃、時間為8-16小時，通過模具成型在固定層上形成凹凸紋路制備出凹凸紋路固定層。由步驟(3)得到的基質材料含有水分，為柔性的，可以貼合在具有凹凸紋路的模具上，經干燥形成相應的紋路。

本發明步驟(5)所述的冷凍干燥步驟為將由步驟(3)得到的基質材料通過冷凍干燥，預凍至-45℃，保溫1-2小時，然后調節溫度至-15℃，保溫5-7小時，再調節溫度至0℃，保溫2小時，最后調節溫度至25℃，保溫4小時，制備多孔層。

本發明步驟(6)所述成型步驟為將凹凸紋路固定層與多孔層粘連為一個組合物。

本發明上述的制備步驟還包括成型之后的打孔包裝步驟和滅菌解析步驟。

本發明進一步提供上述乳房修補片的應用，具體為：所述一種乳房修補片凹凸紋路固定層有利于修補片固定于受損組織或假體，多孔層有利于引導受損胸大肌、筋膜組織修復。

本發明上述的一種乳房修補片的應用，可用于但不限于乳房切除手術、外傷、萎縮導致的乳房缺失，乳房正畸，乳房整形，乳房假體隔離，豐胸。

本發明中注射用水的使用標準依照國家藥典中規定。

與現有技術相比，本發明具有以下顯著優點和有益效果：

(1)采用胰蛋白酶和EDTA，使細胞與細胞外基質之間的連接被破壞；采用低頻超聲對細胞進行破碎，同時使用高頻超聲作用于破碎的細胞及細胞外基質，進一步使細胞脫離細胞外基質，達到脫細胞目的。采用上述方式，對整個細胞脫離基質過程中的各個步驟進行強化，使細胞被從基質上完全脫離，到達最佳的免疫原去除效果。通過上述脫細胞方法制備的生物組織基質材料為多孔結構，該多孔結構能作為提供細胞生長的支架。

(2)成型工藝技術：模具法真空干燥，將定型與脫水過程同步化，形成凹凸紋路固定層，增加補片與組織的接觸面積；

(3)雙層復合技術：采用烘干與凍干相結合的方式，形成了具有固定層和多孔層的雙層復合結構；多孔層孔隙率大，有利于細胞的長入，能提高組織的修復速度，固定層具有凹凸不平整的表面結構，有助于用于固定組織、乳房假體；

(4)本發明的修補片用于但不限于乳房重建中的軟組織修復，乳房假體隔離，乳房整形，乳房正畸，具有可誘導患者自身細胞長入，為細胞重建受損組織提供模板，修復為血管化、功能化的組織或器官，并且免疫原去除基質會逐步降解，與重建組織再生過程基本同步，最終免疫原去除基質補片完全被宿主組織代替的優點。

附圖說明

圖1所示的是根據本發明實施例的乳房修補片SEM照片；

圖2所示的是根據本發明實施例的可用于豐胸的乳房修補片；

圖3所示的是根據本發明實施例的可用于乳房假體隔離乳房修補片；

圖4所示的是根據本發明實施例的可用于矯正畸形的乳房修補片；

圖5所示的是根據本發明實施例的可用于乳房的重建乳房修補片。

具體實施方式

以下結合實施例對本發明作進一步具體描述，但不局限于此。

本發明所述小腸粘膜下層組織材料取自哺乳動物，豬小腸粘膜下層基質材料或牛小腸粘膜下層基質材料均適用于本發明的實施例。

實施例1：

本實施例乳房修補片按如下述方法制備：

(1)組織前置處理：取小腸粘膜下層組織材料分割成規定尺寸，剔除淋巴組織，用自來水沖洗3次，再用純化水沖洗至表面無污漬，將沖洗后的小腸粘膜下層組織材料放置于濾網等濾水裝置上，靜置5分鐘以上，將水濾干。

(2)病毒滅活：采用過氧乙酸-乙醇溶液浸泡小腸粘膜下層組織材料，該過程可在不銹鋼桶中進行，過氧乙酸濃度(體積百分比)采用0.1％，乙醇濃度(體積百分比)采用5％，滅活時間2小時，溶液與小腸粘膜下層組織材料比例(體積比)為8：1，溫度范圍為20℃；完成后在超聲波清洗機中先用pH值為7的PBS溶液超聲處理多次，PBS溶液與小腸粘膜下層組織材料體積比為20:1，再用純化水清洗數次至檢測清洗后的純化水電導率為10μS/cm以下終止，純化水與小腸粘膜下層組織材料體積比為20:1；超聲頻率3000W。

(3)免疫原去除：采用包含濃度(質量百分比)為0.1％的胰蛋白酶溶液和濃度0.5mmol/L的EDTA的pH＝7的PBS溶液，超聲振蕩處理，超聲至少包括兩個頻率，其中低頻率范圍為23KHz，高頻范圍為76KHz，其中低頻處理15min，高頻處理8min，溫度范圍為20-35℃，溶液與小腸粘膜下層組織材料比例(體積比)為20：1，整個過程需要在超聲波清洗機中進行，超聲波功率至少在5000W以上；完成后在超聲波清洗機中采用pH7中的PBS溶液超聲處理，PBS溶液與小腸粘膜下層組織材料體積比為20：1，每次10-30分鐘；清洗2-4次；然后采用降溫的注射用水清洗，注射用水與小腸粘膜下層組織材料比例為20：1至40：1之間，檢測清洗前后注射用水電導率差為1μS/cm以下終止。超聲波的頻率優選40kHz，功率需要在3000W以上，得到小腸粘膜下層基質材料。

(4)干燥：該步驟在熱循環烘箱中進行，優選潔凈度為百級的烘箱。開啟烘箱風機，預熱至40℃，將步驟(3)的免疫原去除組織固定于帶有凹凸紋路的模具上，保持時間約16小時。

(5)冷凍干燥：將步驟(3)的免疫原去除組織平鋪于真空冷凍干燥機中，關閉凍干室的門，打開循環泵約1min，開啟壓縮機對凍干箱致冷，將產品預凍至-45℃，保溫約2小時，開啟真空泵，調節產品溫度約-15℃升華，約6小時后，調節產品溫度0℃，保溫2小時，調節產品溫度25℃，保溫4小時；

(6)成型：將步驟(4)與步驟(5)得到的基質材料采用膠原蛋白膠粘接成型。

本實施例中的制備方法還可以包括以下步驟：

(7)打孔包裝：烘干的產品取出后，在模具上切割成固定的形狀，再放入機械打孔機中，以間距0.9cm進行打孔，孔直徑1.5mm，采用雙層特衛強包裝袋包裝，該過程需要無菌轉運與操作。

(8)滅菌解析：產品采用環氧乙烷滅菌，滅菌條件：溫度40℃，保溫時間4小時，濕度70％，環氧乙烷濃度為500mg/L，滅菌時間6小時；解析過程：通風的解析室中，溫度控制在20℃之間，時間約14天。

如圖1所示，是本發明實施例的乳房修補片SEM照片，顯示本發明的修補片具有多孔結構，作為提供細胞生長的支架。如附圖2所示，即為一種可用于豐胸的乳房修補片的結構示意圖，表面分布的點狀可以認為是凹凸紋路的表面。

實施例2：

對實施例1中樣品進行性能檢測，檢測項目與結果如下：

1)DNA殘留：依據生物制劑殘留DNA檢測方法《中國藥典》2015年版第四部，采用熒光染色法檢測實施例1所提供的樣品DNA殘留量，結果：實施例1所提供的樣品的DNA殘留量小于3.64±0.96ng/mg。

2)半乳糖苷酶(α-Gal)清除率：取動物源性生物材料Gal陽性參考品，Gal抗原陰性參考品各2mg，加裂解液1ml，裂解30-90min，配制成20、10、5、2.5、1.25、0.625μg的Gal標準曲線樣品，測試免疫原去除前后的測試品各取50mg，加裂解液2ml，裂解30-90min；取裂解液與M86抗體反應后的上清液，加入96孔板，加二抗，加顯色劑，采用ELISA方法450nm檢測吸光度值，按標準曲線計算出樣品的Gal值，免疫原去除處理前材料的Gal值為17.79±1.89×10¹⁴/mg，實施例1中樣品的Gal值為0.13±0.01×10¹⁴/mg，半乳糖苷酶(α-Gal)清除率在99.27％以上。

3)病毒檢測：選擇偽狂犬病毒為指示病毒，采用實時定量PCR法檢測病毒的DNA拷貝數，檢測3批樣品。結果：病毒DNA拷貝數為0。

4)細菌內毒：按照GB/T 14233.2-2005《醫用輸液、輸血、注射器具檢驗方法第2部分：生物學試驗方法》進行檢測，共3批樣品，結果：細菌內毒小于20EU/包裝。

5)膠原蛋白亞型鑒別：采用免疫組化染色法檢測I、III、IV型和VI型膠原蛋白，3μm厚連續切片，二甲苯脫蠟，梯度乙醇脫水。將切片移入電飯煲水浴中(內含0.01mol/L，pH6.0的枸櫞酸三鈉緩沖液)，溫度保持在95-100℃，煮20min，進行抗原修復，取出后在室溫下自然冷卻。磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌，5min×3次。二步法免疫組化：分別滴加I、III、IV型和VI型膠原蛋白單克隆抗體一抗，濃度1：100，4℃冰箱過夜室溫下孵育60min，PBS洗滌3次。滴加Envision反應液，室溫下孵育30min。PBS洗滌3次。0.05％的3，3一二氨基聯苯胺+0.03％的H2O2顯色5-10min。流水洗，蘇木精襯染。遞增梯度乙醇脫水，二甲苯透明，常規樹脂封固。結果表明，顯微鏡下觀察四種染色標本皆可見棕黃染色，為陽性，表明樣品中可檢測到I、III、IV型和VI型膠原蛋白。

6)多糖物質含量檢測：取10個樣品，取樣，浸提，用Biocolor硫酸軟骨素檢測試劑盒測試硫酸軟骨素含量，樣品中硫酸軟骨素含量平均值為5236±185μg/g；用透明質酸檢測試劑盒測試透明質酸(HA)含量，結果顯示，樣品的透明質酸(HA)保留量平均值為296±23μg/g。

7)活性因子種類鑒別：將樣品浸泡PBS24h后，固定于4％多聚甲醛5-10min，用0.1mol/LPBS洗3次，每次5min，然后用玻璃細管轉至涂有多聚賴氨酸的玻片上,進行免疫組織化學染色。LN抗體、FN抗體和整合素效價均為1∶100，0.5％胰酶消化3-5min暴露抗原，0.1％Triton X100作用10min增加抗體的穿透性。免疫組織化學染色顯陽性，表面樣品中包含纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、整合素及其配體的等物質。

8)生長因子殘留量：對實施例1中樣品采用ELISA法檢測樣品中堿性生長因子(bFGF)和血管內皮生長因子(VEGF)含量，并對免疫原去除前動物組織作為對照。結果發現堿性生長因子(bFGF)免疫原去除前后含量分別為2155±189ng/L、828±90ng/L，保留生長因子35％以上；血管內皮生長因子(VEGF)含量免疫原去除前后含量分別為633±51ng/L、249±16ng/L，保留生長因子35％以上。

9)孔隙率：按照阿基米德原理，以乙醇作為浸提介質，計算樣品孔隙率為75.43±8.21％

10)縫合抗拉強度：按照實施例1制備樣品，用3-0非吸收縫合線在修補片一端邊緣2mm處，將縫合線與修補片的另一端固定在拉力儀上，以20mm/min的速度進行拉伸，直到縫合點被撕裂，記錄最大力值，結果顯示，最大值可達13N。

11)抗張強度：按照實施例1制備樣品，將樣品裁剪成2×5cm尺寸，在相對濕度為40％-60％，溫度為22℃±2℃的條件下放置2h后立即進行試驗。將試樣兩端固定在拉伸試驗機的夾頭上，以100mm/min的速度依次向外拉伸直到試樣斷裂，縱向試樣和橫向試樣分別進行試驗。最后的測定結果顯示縱向抗張強度可達32N，橫向抗張強度可達18N。

12)環氧乙烷殘留量：按GB/T14233.1-2008《醫用輸液、輸血、注射器具檢驗方法第1部分：化學分析法》中9的規定的方法試驗，結果：產品環氧乙烷殘留量不超過10μg/包裝。

13)重金屬檢查：鉛、鉻按GB/T 14233.1-2008中5.9.1《醫用輸液、輸血、注射器具檢驗方法第1部分：化學分析法》規定的方法試驗，汞、砷按GB/T 14233.1-2008中5.9.3《醫用輸液、輸血、注射器具檢驗方法第1部分：化學分析法》規定的方法試驗，產品檢驗液中鉛、鉻、汞、砷總重金屬含量少于1μg/g。

實施例3

對實施例1中樣品進行生物相容性實驗，檢測項目包括：熱原、細胞毒性、遲發型超敏反應、皮內反應、急性全身毒性、Ames試驗、小鼠淋巴瘤細胞突變試驗、染色體畸變、植入、亞慢性毒性。

1)熱原

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，72±2hr制備試驗液，浸提介質：生理鹽水。按GB/T 14233.2-2005規定的方法進行，產品無熱原反應。

2)細胞毒性

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，24±2hr制備試驗液，浸提介質：含血清的MEM培養基。取試驗液按照GB/T16886.5-2003中規定的試驗方法進行試驗，結果產品的細胞毒性反應不大于1級。

3)遲發型超敏反應

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，72±2hr制備試驗液，浸提介質：生理鹽水和棉籽油。按照GB/T 16886.10-2005第10部分:刺激與遲發型超敏反應試驗方法規定進行試驗，結果產品無遲發型超敏反應。

4)皮內反應

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，72±2hr制備試驗液，浸提介質：生理鹽水和棉籽油。按照GB/T 16886.10-2005第10部分:刺激與遲發型超敏反應試驗試驗方法規定進行試驗，結果：試驗樣品與溶劑對照平均記分之差小于1.0。

5)急性全身毒性

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，72±2hr制備試驗液，浸提介質：生理鹽水和棉籽油。取試驗液按照GB/T16886.11-2011規定的試驗方法進行試驗，結果：產品無急性全身毒性反應。

6)Ames試驗

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，72±2hr制備試驗液，浸提介質：生理鹽水和DMSO。按GB/T16886.3-2008規定的方法進行，結果：產品的Ames試驗為陰性。

7)小鼠淋巴瘤細胞突變試驗

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，72±2hr制備試驗液，浸提介質：生理鹽水和DMSO。按GB/T16886.3-2008規定的方法進行，結果：產品的小鼠淋巴瘤細胞突變試驗為陰性結果。

8)染色體畸變試驗

按質量比1：5浸提介質的比例，37±1℃，72±2hr制備試驗液，浸提介質：生理鹽水和DMSO，按GB/T16886.3-2008規定的方法進行，結果：產品的染色體畸變試驗為陰性。

9)植入

按GB/T16886.6-1997規定的方法進行，結果：肌肉植入1周：樣品周圍可見嗜中性粒細胞、淋巴細胞和巨噬細胞浸潤，應無囊腔形成；肌肉植入4周：樣品周圍可見少量巨噬細胞和淋巴細胞，膠原纖維和纖維母細胞增生，有纖維囊腔形成；肌肉植入12周：樣品周圍可見少量淋巴細胞、膠原纖維、纖維囊腔較致密規整。

10)亞慢性毒性

按GB/T 16886.11規定的方法進行，結果：無亞慢性毒性反應。

實施例4：

降解性能：每個10×10mm免疫原去除基質乳房修補片樣品，用1ml質量百分比為0.03％的蛋白酶K溶液浸泡，56℃水浴，每隔10min對樣品進行稱重，計算樣品剩余質量百分比。測試結果為表1所示：

表1樣品剩余質量百分比

實施例5：

動物實驗:

健康的實驗用新西蘭白兔12只，體重2～3kg，雌雄各半。正常飼養，術前背部常規備皮，麻醉成功后，消毒鋪巾，取下背部肌肉側切口約4cm，逐層分離各層組織。取本發明免疫原去除基質乳房修補片剪裁成2×3cm大小，將其置于背部肌肉間隙固定，修補缺損部位，固定補片，縫合切口。術后1個月、3個月、6個月解剖觀察背部修復情況，1個月傷口自行愈合，解剖時觀察修補片無明顯皺縮，無積液；解剖觀察背部肌肉基本無粘連。3個月免疫原去除基質材料局部未見感染癥狀，結構完整，層次清晰，背部肌肉與材料分離，無粘連。6個月免疫原去除基質材料完全降解，局部未見感染癥狀，結構完整缺，損組織修復完成。

如圖3所示，是根據本發明實施例制備的一種可用于乳房假體隔離乳房修補片的結構示意圖；如圖4所示，是根據本發明實施例制備的一種的可用于矯正畸形的乳房修補片的結構示意圖；如圖5所示，是根據本發明實施例制備的一種的可用于乳房的重建乳房修補片的結構示意圖。從附圖可知，本發明的方法可以制備不同微觀結構的修補片，根據細微的結構區別可以實現不同功能需求的應用，但均是由本發明的方法獲得，均落入本發明的保護反問。

綜上，本發明的免疫原去除基質乳房修補片：

(1)DNA殘留能夠達到10ng/mg以下，較同類產品低30-50ng/mg、半乳糖苷酶去除率較高，能夠達到99％；

(2)免疫原去除過程，通過控制產品的超聲功率，能夠在高功率的情況下，達到破碎細胞、DNA的效果，在低功率的情況下，將破碎的細胞內物質有效的清洗掉；

(3)力學強度更強，能夠承受更大的力學性能，能夠有效的控制降解時間，使植入體內后與人體組織重生過程相匹配；

(4)塑形較好，不分層；

(5)采用烘干與凍干相結合的方式，形成了一層固定層、一層多孔層的雙層復合結構；疏松層孔隙率大，有利于細胞的長入，能提高組織的修復速度，固定層用于固定組織、乳房假體。

本發明的上述實施例是對本發明的說明而不能用于限制本發明，與本發明的權利要求書相當的含義和范圍內的任何改變，都應認為是包括在權利要求書的范圍內。